猪转移因子增强猪细小病毒灭活疫苗猪体细胞免疫活性的研究

为探讨猪转移因子增强猪细小病毒灭活疫苗对猪体免疫效果,从健康猪的新鲜脾脏中提取转移因子,分别与自制猪细小病毒灭活油苗和猪细小病毒商品灭活苗联合免疫仔猪,并设猪转移因子和生理盐水对照组。免疫后分别用间接ELISA方法和流式细胞技术检测仔猪抗体水平变化和仔猪外周血T淋巴细胞亚群动态变化。结果显示,免疫后猪转移因子联合灭活疫苗组能有效提高抗体水平,且免疫后猪转移因子联合PPV灭活疫苗组的CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+T淋巴细胞比值均高于相应的PPV灭活疫苗组。表明猪转移因子主要增强PPV油乳剂灭活疫苗的细胞免疫应答。     

高效佐剂对猪细小病毒和圆环病毒二联灭活疫苗的免疫增强效果

为评价高效佐剂VA5对猪细小病毒和猪圆环病毒二联灭活疫苗的免疫增强效果,将VA5与猪细小病毒、猪圆环病毒疫苗混合免疫BALB/c小鼠和豚鼠。结果显示,VA5佐剂能明显提高猪细小病毒血凝抑制抗体效价和血清病毒中和抗体效价,亦能提高猪圆环病毒ELISA抗体和中和抗体效价,并可降低二种抗原的使用量。VA5佐剂显著提高小鼠和豚鼠免疫后的淋巴细胞刺激指数。攻毒后,VA5佐剂处理组动物脾脏PCV2/PPV病毒载量明显低于不含高效佐剂的免疫组。VA5佐剂能提高猪细小病毒、猪圆环病毒疫苗在小鼠/豚鼠中的抗体效价,提高细胞免疫力,降低攻毒后的排毒。     

猪细小病毒灭活疫苗NJ株毒种分离及鉴定

为防控猪细小病毒病,进行了猪细小病毒灭活疫苗毒种研究。将南京某猪场初产母猪流产胎儿的脾、肺等组织病料处理后接种ST细胞培养,获得了1株猪细小病毒强毒,将分离毒株适当稀释接种ST细胞,经3轮蚀斑纯化获得1株纯净的猪细小病毒NJ株(PPV-NJ株),作为疫苗毒株。将NJ株接种ST细胞培养连续传15代,每代次病毒效价均不低于1 ml 107.25TCID50、血凝素效价不低于29。选择第5代病毒液,灭活后与矿物油佐剂混合乳化制成灭活疫苗,以不同剂量分别免疫豚鼠和后备母猪,用血凝抑制试验(HI)和ELISA检测抗体效价。分别用剂量0.125 ml、0.250 ml和0.500 ml疫苗免疫豚鼠28 d后,各免疫组HI抗体效价均高于28,0.5 ml组HI抗体效价高达211,ELISA抗体均显示阳性(OD630≥0.32),分别用剂量0.5 ml、1.0 ml和2.0 ml疫苗免疫后备母猪后,HI检测结果显示,3个剂量组免疫后1周HI抗体效价高于26,3周后达峰值,至免疫后4个月略有下降,2.00 ml剂量组HI效价最高(211.75)。ELISA检测结果显示,各剂量组在免疫后1周均转阳(OD630≥0.32),免疫后4～18周均维持较高水平。HI抗体效价和ELISA抗体水平与免疫剂量均呈正相关性。结果显示,利用NJ株病毒制备的灭活疫苗具有抗体产生快、效价高等特点,显示出良好的疫苗开发前景。     

猪细小病毒病灭活疫苗灭活工艺研究

为了研究猪细小病毒灭活苗的灭活条件,对猪细小病毒原液用灭活剂二乙烯亚胺(BEI)进行了灭活试验,研究30 ℃条件下不同灭活时间及不同浓度的BEI对猪细小病毒原液的灭活效果.结果 表明:以BEI终浓度为0.02％,30℃作用72 h可将病毒液灭活完全.     

猪细小病毒研究近况

猪细小病毒（Ｐｏｒｃｉｎｅ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ，ＰＰＶ）是一自主型细小病毒（Ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ），它是引起畸胎的主要因素之一。通常，头胎怀孕母猪感染了ＰＰＶ之后，可引起繁殖障碍，主要症状为流产、不孕、产死胎、木乃伊胎等，给养猪业带来巨大经济损失。近３０年来的研究工作揭示了ＰＰＶ的各种特性，特别是８０年代以来，分子生物学和基因工程技术的运用，使我们能够从分子水平和基因水平去     

猪细小病毒病灭活疫苗稳定性研究报告

为了研究猪细小病毒病灭活疫苗(L株,悬浮培养)的稳定性(保存期),将3批猪细小病毒病灭活疫苗实验室制品(批号为201401、201402和201403)于2～8℃保存3、6、9、12、18、24个月后分别进行性状、无菌性和效力等检验.结果 显示:3批实验室制品在2～8℃保存24个月,性状、无菌性和效力等检验结果均符合标...     

猪细小病毒N株免疫期测定

用PPV—N株制备成弱毒疫苗,在配种前1个月接种PPV HI抗体阴性的后备母猪,接种2周后检测PPV HI抗体均达到1：256以上。当怀孕到40d时用PPV强毒攻击,攻毒后40d剖杀的2头怀孕母猪其胎儿正常健活,胎儿心血未检测到PPV HI抗体,胎儿脏器未分离到病毒;自然分娩的2头母猪,其仔猪健活,未吃初乳仔猪PPV HI抗体阴性,仔猪脏器未分离到病毒;而强毒攻击的对照猪均出现不同程度的死胎,并从未吃初乳仔猪检测到PPV HI抗体和从死胎儿肺回收到病毒。按上述方法连续观察到第3胎（免疫后15个月）,证明免疫母猪怀孕到第3胎仍能抵抗PPV强毒攻击,说明PPV—N株对母猪的免疫期达1年以上。     

猪细小病毒病灭活疫苗纯化浓缩技术研究

为了研究采用中空纤维柱对猪细小病毒液进行浓缩是否可行,同时研究浓缩纯化后的疫苗安全性是否受到影响,采用0.45μm的中空纤维柱去除细胞碎片,然后用100 ku中空纤维浓缩纯化系统对猪细小病毒原液进行20倍浓缩纯化洗滤及重悬(最终相当于2倍浓缩),用病毒原液和2倍浓缩液分别配制疫苗,对两种疫苗的安全检验、效力检验进行比较...     

猪细小病毒病毒样颗粒的制备及其免疫评价

为了研制猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗,结合大肠杆菌密码子偏好性,经密码子优化,合成猪细小病毒VP2蛋白编码区序列,并将其插入原核表达载体pET28a中,随后转化BL21(DE3)感受态细胞,再转入伴侣蛋白质粒pTf16构建共表达载体,优化诱导表达条件,进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果表明,在L-阿拉伯糖质量浓度为2 mg/mL、IPTG浓度为0.1 mmol/L、温度为30℃、诱导12 h时重组蛋白VP2可溶性表达量最高,经硫酸铵沉淀和Ni-NTA亲和层析纯化获得纯度约90%的VP2蛋白,体外装配可形成直径约20 nm的具有血凝活性的VLPs。用制备的VLPs免疫昆明鼠并对其进行免疫评价,结果表明,制备的VLPs能有效刺激机体产生高滴度抗体,ELISA效价高达1∶25600。可见,制备的VLPs能刺激机体产生特异性抗体。     

猪乙型脑炎病毒3种灭活疫苗的制备及免疫效果比较

以GZ0409-31株乙脑强毒株作为抗原与白油佐剂、蜂胶佐剂、603纳米佐剂制备灭活疫苗,并对疫苗做了无菌检验和安全检验,灭活疫苗接种小鼠后均未出现不良反应,安全性良好.将制备的乙脑灭活疫苗免疫小鼠,并且与市售乙脑弱毒活苗作对比.结果显示,白油佐剂灭活苗组和603纳米佐剂灭活苗组在第90d抗体效价还维持在较高的水平,同...     

水溶性酵母葡聚糖对猪细小病毒灭活疫苗免疫效果的影响

为研究水溶性酵母葡聚糖作为免疫佐剂对猪细小病毒(PPV)灭活疫苗免疫效果的影响,将水溶性酵母葡聚糖与PPV灭活疫苗联合免疫小鼠,采用ELISA方法检测免疫后不同时间小鼠血清中的抗体水平及IL-4、IL-6、IFN-γ的分泌水平,应用流式细胞仪检测免疫小鼠CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+T淋巴细胞百分比值的动态变化。结果显示,与疫苗单独免疫组相比,酵母葡聚糖对抗体水平无明显影响,CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+细胞数量增加,且均能不同程度诱导IL-4、IL-6、IFN-γ分泌。表明,水溶性酵母葡聚糖联合PPV灭活疫苗能够有效增强机体的免疫功能,水溶性酵母葡聚糖可以作为PPV的免疫佐剂。     

猪O型口蹄疫灭活疫苗免疫效果评估

为了考察市售高效灭活疫苗与政府采购疫苗免疫效果之间差异分别选取了两家疫苗公司生产的政府采购疫苗和高效灭活疫苗,分别在4个猪场展开免疫效果评估。4个猪场按照相同的免疫程序进行免疫,分别采集免疫前、加强免疫后30 d、加强免疫后60 d的血清,用O型口蹄疫抗体液相阻断ELISA试剂盒进行抗体检测。结果表明,加强免疫后30 d,抗体平均效价依次为1∶196.9、1∶251.9、1∶256.0、1∶243.8。高效灭活苗与政府采购疫苗在同样的免疫程序和免疫剂量下,同一时间点其抗体水平效价差异不显著;但免疫副反应方面,高效灭活疫苗比政府采购疫苗低,且差异极显著。     

不同厂家猪O型口蹄疫灭活疫苗免疫效果研究

为准确掌握汉中市规模猪场使用量最大的两种O型口蹄疫灭活疫苗(M和N)在实际生产中的免疫效果,在两个规模猪场各选择4窝体质健康、体重接近的仔猪,随机分成4组,每组10头,分别接种两个不同厂家猪O型口蹄疫灭活疫苗。采用IHA方法检测免疫前后抗体效价。结果显示:N苗免疫效果稍好于M苗,但两种疫苗用标准剂量免疫,免疫效果都不佳,必须要在首免后30 d进行二免,才能保证免疫抗体合格率达到70%以上的标准。N苗免疫后抗体上升快,而M苗免疫后抗体上升慢,但持续时间长。N苗加大剂量免疫后,其免疫效果与标准剂量相比无明显差异。M苗加大剂量免疫后,其免疫效果明显优于标准剂量,能满足预防猪口蹄疫疫病的需要。结论:广大养殖户可以根据实际情况,科学合理选择使用口蹄疫疫苗。     

猪伪狂犬病病毒灭活疫苗工艺研究

伪狂犬病又称Aujeszky氏病,是由猪疱疹病毒Ⅰ型所引起的以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为主症的一种急性传染病。据报道,全世界已有50多个国家和地区爆发过该病,对养猪业的发展构成了严重威胁。本病尚无有效治疗药物,疫苗免疫接种是预防和控制猪伪狂犬病的根本措施。     

猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫效果比较试验

为了探索最佳的猪口蹄疫O型疫苗免疫程序和免疫质量,更好地防控重大动物疫病,我们对国家采购的猪口蹄疫疫苗进行免疫程序和免疫效果的评估。本实验采用液相阻断ELISA(Lp B-ELISA)的方法对猪口蹄疫O型疫苗免疫抗体水平进行检测。     

猪细小病毒氢氧化铝苗

猪细小病毒是造成母猪流产、死胎、不孕等生殖失败的主要原因。该苗为我国防治本病,促进养猪业发展开辟了新的有效途径。应用该苗的猪场均控制了本病的流行,以广东省干商畜牧场的统计,年增收12.5万元。如在全国推广使用,将会挽回每年因猪细小病毒造成的经济损失约18亿元。而且安全性好,耐热,稳定,免疫力强,免疫程序简便,剂量少,保护率达94.5％。适用于全国各地的养殖业。     

猪细小病毒分子生物学研究进展

猪细小病毒（PPV）被认为是猪繁殖障碍性疾病的主要病原之一,其缩写为SMEDI（死胎、木乃伊、胚胎死亡和不孕）。该文对该病毒的生物学、病毒结构、致病力以及由该病毒引起的改变进行了综述。     

猪细小病毒生物学研究进展

猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是猪繁殖障碍最常见和最重要的病原之一。一直以来,人们认为PPV的遗传变异性很低,通过接种疫苗可以很好地控制该病毒的传播。然而,该病毒的多样性比预期的要大得多,并且一些新出现的强毒株不能被经典PPV疫苗株的抗血清有效中和,导致免疫失败。通过总结PPV研究的最新成果,全面更新对PPV生物学的理解,揭示在选择压力下,PPV新毒株出现的潜在风险及其对养猪业的危害,旨在为制定PPV的有效防控策略提供参考。     

猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗保存期试验

猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗现行规定在2～8℃贮存期为7个月.为了探究该疫苗能否在2～8℃贮存1年仍符合〈中华人民共和国兽用生物制品质量标准〉中猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗质量标准（以下简称质量标准）,本试验将3批猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗在2～8℃贮存至8、10、12、14个月,然后按质量标准抽样做物理性状检验、无菌检验、安全检验和效力检验.结果表明,猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗在2～8℃保存1年后,各项检测均符合质量标准.     

猪细小病毒N株耐热性研究

观察不同温度对猪细小病毒N株血凝活性的影响.结果表明,猪细小病毒N株在37℃条件下十分稳定,作用28d血凝滴度变化不大,只下降1～3个滴度;在60℃恒温水浴下的血凝滴度变化缓慢,血凝滴度在前7d-直稳定;随着温度的升高,病毒血凝的稳定性迅速降低,短时间内即可失去血凝活性,在75℃1h、80℃10min、85℃5min,检测不出病毒血凝活性.由此证明,猪细小病毒N株在37、60℃时血凝活性十分稳定,对热有很强的抵抗力,为将该弱毒株开发成方便运输、保存和使用的疫苗提供了依据.