微量红细胞凝集抑制试验常见问题探析

微量红细胞凝集抑制(HI)试验作为一项抗体监测技术已在各大中型禽场和兽医门诊实验室工作中广泛应用。HI试验可检测新城疫、禽流感、减蛋下降综合征等HI抗体,依据抗体的监测结果,制定相关疫苗的最佳免疫程序,验证疫苗的免疫效果,进行疫病的辅助诊断,达到及早预报疫情的目的。但是如果试验操作技术不规范就会造成监测结果不准确。现就HI试验过程中出现的常见问题进行探析。     

鸡新城疫微量血凝抑制试验的研究

<正> 鸡新城设(ND)仍是危害养鸡事业发展的一种烈性传染病.血凝抑制(HI)试验是监测ND免疫状态的一种简便、快速的血清学方法.我国农业部颁发的《动物检设操作规程》中,ND红细胞凝集抑制试验操作规程(1979年)即试管法是检测NDHI抗体的法定方法.1973年,Beard氏等报道了微量法,1978年,Matbrugh等对微量法中抗原浓度、红细胞浓度、血清和抗原的作用时间等条件对试验结果的影响进行了探讨.我国许多专家学者对血清微量法、全血平极微量法、全血微量法及改良全血微量法开展了深入细致的研究,取得了一些进展.试管法因其操作繁杂,已很少为人们应用,而血清微量法尚需     

鸡新城疫红细胞凝集抑制试验不同操作方法的比较

<正> 鸡新城疫康复鸡、隐性感染鸡和免疫后的鸡血清中都含有抗鸡新城疫病毒的抗体,有抑制鸡新城疫病毒凝集红细胞的特异作用,因此可以应用红细胞凝集抑制试验(简称HI)来诊断鸡是否患过鸡新城疫病和进行鸡群免疫状态的监测。目前HI试验有几种不同的做法,为了解这几种做法的HI效价是否存在明显差异,特对这几种方法进行比较。     

养鸡场如何做好禽流感监测工作

禽流感监测最为常用的是微量红细胞凝集抑制试验(HI检测),其优点是所用仪器设备简单,操作简便、快速等,在基层兽医实验室及养禽场普遍应用。但常因不能正确熟练地掌握这一技术或试验条件不具备,而影响监测结果,从而错失免疫良机,造成疫情发生,而遭受严重损失。笔者现就禽流感监     

鸡红细胞凝集抑制试验影响因素的分析

红细胞凝集试验(HA)和红细胞凝集抑制试验(HI)是兽医界相关实验室最为常用的实验之一。由于其具有便于操作、快捷、成本较低的特点,是畜禽疫病诊断及免疫状态监测特别是禽流感、新城疫等重大动物疫病免疫监测最重要的方法之一。各省、市、县等各级畜牧兽     

用鸭红细胞悬液消除非特异性凝集因子对鸭禽流感HI试验的影响

禽流感自1878年在意大利首次发生以来,该病不断蔓延。近年来,在许多国家和地区出现暴发和流行,成为严重危害养禽业健康发展的一种主要家禽传染病。加强禽流感的监测是预防和控制禽流感的重要措施。目前,基层单位大都采用微量红细胞血凝抑制试验(简称HI试验)来检测家禽禽流感血清抗体。但在检测过程中,笔者发现依照国标的要求采用鸡红细胞悬液来检测水禽禽流感血清抗体时,常常存在非特异性凝集现象。本试验用鸭红细胞悬液替代鸡红细胞悬液来检测水禽禽流感血清HI抗体,探讨是否能消除非特异性凝集因子对鸭禽流感HI试验的影响,现报道如下。1…     

2015年宁国市重大动物疫病强制免疫疫苗临床使用效果评价与分析

为评估宁国市2015年重大动物疫病强制免疫疫苗临床使用效果,在宁国市百惠牧业、吴家大院、华园家庭农场按说明书进行免疫试验,采集免疫畜禽血清,对家禽和家畜血清分别采用微量红细胞凝集抑制试验(HI)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行抗体检测,结果表明重组禽流感灭活疫苗、高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗免疫效果良好;猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫效果不明显。     

改良全血微量法检测鸡新城疫抗体的研究

用鸡红细胞凝集抑制试验(HI)的B程序试管法(下称试管法),检测鸡新城疫免疫抗体水平是一种常规方法。但因其繁琐复杂,工作量大,人们自然希望寻求一种简便有效的方法。1973年Beard等报道了微量法,随后我国亦有血清微量法、全血微量平板法及全血微量法等报道。这些方法的优点是用血量少,对鸡(尤其是雏鸡)的健康发     

水禽新城疫血凝抑制试验存在的问题

新城疫病毒能够与鸡红细胞发生凝集现象,这种红细胞凝集现象可被特异性免疫血清所抑制,即红细胞凝集抑制试验(HI)。由于血凝反应可被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,出现凝集抑制现象。该方法具有以下优点:①敏感性强,可以检测到微量的抗体,结果也较为准确,是较敏感的血清学反应之一;②特异性强,病毒凝集红细胞只能被特异的抗体所抑制;③检测速度快,1次HI试验只需2 h左右,即可判定结果;④HI试验对环境要求不高,操作简单,1次还可检测大量的样品。因此血凝抑制试验用于水禽血清,可以检测血清中的抗…     

微量血凝和血凝抑制试验拓展研究

微量血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验是利用一些病毒具有凝集某些动物红细胞的特性建立起来的一种微量、快速、准确、易操作的检测方法,建立的目的主要是用于非免疫动物的诊断和免疫动物的抗体水平的评价。目前,人们在应用该方法时,应用的载体缓冲液通常是pH值为7.2、0.01 mol/L PBS液,     

非免疫鸡血清中鸡新城疫病毒抗体的测定

对重庆市荣昌县6个乡镇的41个散养养鸡户,按常规方法采取并分离未经鸡新城疫疫苗免疫的1264份成年鸡血清,采用微量法进行红细胞凝集（HA）试验和红细胞凝集抑制（HI）试验检测鸡新城疫病毒抗体的滴度。其结果表明：鸡新城疫阳性率为8．73％,可疑率为4．76％,阴性率为86．51％,从而证明该地区新城疫病毒感染较严重。     

病毒血凝抑制试验的应用及影响因素

多种病毒在其囊膜表面具有血凝素,能够凝集多种动物或人的红细胞,如正粘病毒科、副粘病毒科、披膜病毒科、细小病毒科及腺病毒科等的病毒。因此可以用病毒的红细胞凝集试验(简称病毒的血凝试验,HA)来检测相应的病毒。这种凝集红细胞的能力又可被特异性抗体所抑制,基于这种现象所进行的试验称之为病毒的红细胞凝集抑制试验(简称为病毒的血凝抑制试验,HI)。当前HA、HI已成为鉴定病毒和诊断病毒性疾病的重要方法之一。1病毒血凝抑制试验的优点1.1敏感性高HI可以检测微量的抗体和抗原,并且结果较为准确,是较敏感的血清学反应之一。1.2特异性…     

遵义市鸡新城疫免疫程序制定及效果观察

近几年,遵义市规模性养鸡户(场)迅速崛起,但是,有的养鸡户常由于鸡群免疫失败爆发鸡新城疫(ND)而造成严重的损失。为了寻找免疫失败的原因,我们从鸡群饲养管理、免疫程序、免疫技术、疫苗及其使用方法等方面进行调查,并选用了养鸡户(场)较多采用的7日龄首免、40日龄加强免疫、150～180日龄补免一次的免疫程序,对某鸡群做了鸡新城疫免疫试验。用微量红细胞凝集抑制(HI)检测方法,对免疫全过程的抗体水平进行了监测,目的在于对遵义市较多采用的鸡ND免疫程序及效果作出评价,指导养鸡户采取正确的防制方法。1ND免疫及HI抗体水平的检测从民主…     

重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1型,Re-1株)抗体产生规律试验报告

通过红细胞凝集抑制试验（HI试验）,对蛋用雏鸡使用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1型,Re-1株）和某种禽流感重组二联活疫苗的不同免疫程序的免疫效果进行监测,掌握禽流感HI抗体产生及消长规律,制定适合的种鸡和商品蛋鸡预防高致病性禽流感的免疫程序和免疫规范。     

祛除禽流感HI试验中鹅血清非特异反应现象的研究

目前禽流感抗体水平监测采用GBT18936-2003的方法,此方法中要求采用1%鸡红细胞来进行血凝和血凝抑制试验,以测定禽流感的抗体水平,此方法较适用于免疫鸡相应抗体水平的测定[1-3],用于鹅抗体检测时常出现非特异凝集现象,试验结果很难判定。鉴于此,在利用血凝抑制试验进行血清抗体检测之前,有必要对血清中非特异性血凝抑制因子与非特异性凝集因子(非病毒性凝集因子)加以祛除。本试验对免疫后的鹅血清HI抗体检测方法进行探讨,寻求适合鹅血清HI抗体检测的方法。     

血凝抑制试验影响因素分析

某些病毒(如禽流感病毒和新城疫病毒)能够与禽类的红细胞发生凝集,这种红细胞凝集现象可以被特异性免疫血清所抑制,即红细胞凝集抑制试验(HI).该方法是根据病毒的血凝蛋白具有识别并吸附于红细胞表面受体的生物学特性而建立起来的.由于血凝反应可被特异性抗体所抑制,抗体和病毒结合后,血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,所以血凝抑制试验可用于:发现与鉴定病毒;诊断病毒性疾病;监测机体血清抗体水平;为免疫程序制定提供准确基础数据,防止重复免疫、免疫失败和免疫空档的发生.该方法是一种在基层临床实践中极易推广的检验、检疫手段与诊断方法.目前在血凝抑制试验方面存在一些不规范操作问题,从而影响试验结果的准确性,导致不正确结果的出现.     

浅谈禽流感微量红细胞凝集抑制试验

禽流感微量红细胞凝集抑制试验(HI检测),因为其微量、快速、可靠,能够处理大量样品,并能在短时间内报告禽类血样的禽流感抗体滴度水平,因此成为出入境检验检疫部门基层实验室常用的方法。禽流感HI检测结果准确与否,对于出入境检验检疫部门及时掌握禽群的禽流感抗体水平,提高对辖区内注册活禽养殖场的禽流感疫病的监控,保证供港澳活禽顺利出口至关重要。笔者长期从事禽流感HI检测,积累了一些经验,与大家进行交流探讨:1不同效价工作抗原的影响由于禽流感微量红细胞凝集抑制试验的结果判定是以完全抑制4个HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI…     

鸡新城疫血球凝集抑制价β—微量法与试管法符合率的比较试验

应用鸡新城疫血球凝集抑制价(HI值)的传统试管法和β—微量法进行测定鸡群的新城疫弱毒苗免疫和雏鸡母源抗体水平,多处报道β—微量法较试管法有操作简易、快速、准确的优点,但两种方法的符合率未见报道。为促进β—微量法的推广应用,我们对这两种方法的符合率进行了对比试验,现将试验结果报告如下。     

水禽禽流感HI抗体检测方法的探讨

2003年国家质量监督检验检疫总局出台了<高致病性禽流感诊断技术>(GB/T18936-2003)[1],标准中要求采用鸡红细胞作为血凝与血凝抑制试验的指示细胞监测禽流感抗体,这对于免疫鸡血清中的相应抗体水平监测比较合理[2-4],但对鸭、鹅及其他免疫禽类进行HI抗体水平监测时,常出现非特异性凝集现象[2-3],对检测结果的判定影响较大.有鉴于此,本试验拟对禽流感疫苗免疫后的水禽血清HI抗体检测方法进行探讨,研究适合免疫水禽禽流感HI抗体检测的方法.     

血凝和血凝抑制试验的影响因素

血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)由于能同时进行大量样本分析,试验过程易于操作以及结果快速、准确等特点而成为目前我国各地疫病诊断、流行病学调查、免疫程序制定及免疫效果监测等的主要手段之一,与酶联免疫吸附试验(ELISA)具有同样重要的作用.血凝和血凝抑制试验涉及红细胞凝集及抗原抗体的特异性反应,操作过程常受多种因素影响,容易造成偏差,需加以注意.