促性腺激素对牛超数排卵的研究进展

使用促性腺激素对牛进行超数排卵处理时产生的不同效果,是超数排卵(简称超排)反应出现个体差异性的主要原因之一。文章就牛胚胎移植研究和生产应用中使用不同的促性腺激素及其使用方法的研究进行综述,以提供简化有效的使用激素超排的方法,为牛的超排和胚胎移植提供有价值的参考。     

牛超数排卵方法

超数排卵(superovulation)简称超排,指在母畜发情周期中的适当时间为其注射促性腺激素．使其卵巢上有比自然状态下更多的卵泡发育并排卵的技术。用激素处理动物进行超数排卵是进行胚胎移植、转基因、克隆等研究的基础之一,通过超数排卵可以获得大量整齐、优质的卵子或受精卵。尽管目前超排的方法已被广泛应用．但超排产生的胚胎有15％～20％(或更高的比率)不能用于移植。     

卵泡发育的激素调节研究进展

卵泡的发育经历了早期的发育、有腔卵泡的生长、优势卵泡的选择以及卵泡成熟排卵等过程。在一个发情周期中，数以万计的原始卵泡发育到排卵阶段时排卵数仅占原始卵泡总数的0.1%-0.2%，绝大数与产仔率有着极大的正相关，要提高产仔率就要防止卵泡闭锁，增加排卵数。而激素调节伴随着卵泡发育的始终，其中垂体促性腺激素和甾体激素可促进卵母细胞的生长、卵母细胞的增殖和卵泡腔的形成，在卵泡发育的过程中起着至关重要的作用。本文主要就促性腺激素、甾体激素和抑制素在卵泡发育中调节作一综述。     

促性腺激素对小鼠胚胎卵巢卵泡体外发育的类固醇激素分泌的作用

利用小鼠胚胎卵巢无血清培养体系研究了FSH,hCG对小鼠胚胎卵巢卵泡发育的作用。结果发现，（1）FSH处理组胚胎卵巢卵泡体外生长发育要优于ITS对照组；体外培养15d后，FSH处理组胚胎卵巢睾酮分泌量显著增加;在整个培养过程中，FSH诱导胚胎卵巢分泌少量雌二醇。（2）hCG对胚胎卵巢卵泡发育的作用是双相的。在培养早期，hCG处理组进入生长相的小卵泡显著多于ITS对照组，相应地此时雌二醇水平较高；随着卵巢培养的继续，雌二醇水平显著降低，hCG处理组总卵泡数开始急剧下降，大量小卵泡团缩退化；到培养结束时，处理组卵巢内小卵泡已所剩无几，但残存的生长卵泡卵母细胞平均直径仍显著大于ITS对照组。此时伴随睾酮分泌量的增加，雌二醇的分泌量重新增加。（3）FSH＋hCG处理组卵泡发育类似hCG处理组，体外培养15d后，FSH＋hCG促进鼻酮分泌，而雌二醇的分泌的分泌有促进作用，雌二醇可能是促性腺激素发挥促卵泡体外发育和存活作用所必需的；hCG可促进卵泡提前生长发育，担后期加速胚胎卵囊小卵泡库的耗竭。     

促卵泡素对体外培养牛卵泡类固醇合成相关基因表达的影响

本研究旨在探究促卵泡素（follicle stimulating hormone,FSH）处理对体外培养的牛有腔卵泡颗粒细胞和膜细胞类固醇激素合成相关基因表达的影响。采集牛卵巢表面直径9~11 mm的有腔卵泡,用含不同浓度FSH的DMEM/F12体外培养牛有腔卵泡24 h。提取卵泡颗粒细胞、膜细胞RNA并反转录成cDNA,利用实时荧光定量PCR检测卵泡颗粒细胞、膜细胞中类固醇激素合成酶基因（CYP11A1、3β-HSD、CYP17A1、CYP19A1、17β-HSD）和促性腺激素受体基因（FSHR、LHR）的表达水平。结果显示,FSH处理上调了颗粒细胞中CYP11A1、3β-HSD和CYP19A1基因表达,其中,25 ng/mL FSH处理极显著上调了CYP11A1基因表达（P<0.01）,10 ng/mL FSH处理显著上调了3β-HSD基因表达（P<0.05）,50 ng/mL FSH处理显著上调了CYP19A1基因表达（P<0.05）;50 ng/mL FSH处理显著或极显著上调了膜细胞中CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1基因表达（P<0.05;P<0.01）,但在10和25 ng/mL FSH处理组中CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1基因表达显著或极显著下调（P<0.05;P<0.01）。对FSHR、LHR基因研究结果显示,不同浓度FSH处理对颗粒细胞中FSHR、LHR基因的表达均无显著影响（P>0.05）,只有25和50 ng/mL FSH处理显著或极显著上调了膜细胞中LHR基因表达水平（P<0.05;P<0.01）,且不同处理组之间膜细胞中CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1基因的表达变化与LHR基因表达变化趋势较一致。结果表明,FSH处理可提高牛有腔卵泡颗粒细胞中CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1基因的表达,膜细胞中CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1基因对LH的刺激更敏感,FSH可能通过影响LHR基因的表达来调节膜细胞中类固醇合成酶基因的表达。     

羊卵泡发育动态变化及超数排卵方法的改进

近年来 ,随着超声波扫描技术在牛、羊繁殖学中的应用 ,获得了许多关于卵巢卵泡发育的动态模式的知识 ,它对同期发情和超数排卵技术具有指导意义。1　卵巢卵泡生长发育过程的一般特征　　在正常发情周期中 ,卵子的排出大概经历下列过程 :征集或募集 (recruitment) ,选择 (selection) ,优势化 (dominance) ,周转 (turnover)或排卵 (ovulation) [1 ,2 ] 。但许多家畜卵巢卵泡生长发育不止局限于排卵前的几天 ,而是这些事件在初情期前、黄体期、妊娠期、产后乏情期以及季节性乏情时期等各个时期都有发生 ,因此将卵泡呈周期性的“征集—选择—优…     

西门塔尔牛超数排卵研究

分别用国产的促卵泡素(FSH-P)、加拿大生产的促卵泡素(Folltropin-v)和PMSG对西门塔尔牛进行超排处理。结果表明:用Folltropin-v超排处理所获得的可用胚数(8.71±2.62)枚多于其他2组,且差异显著(P<0.05)。对Folltropin-v注射次数的比较研究结果表明,每天注射2次Folltropin-v(总剂量400mg)和每天注射1次(总剂量350mg和300mg)可以获得同样的超排效果。     

超排前有腔卵泡数对青年和牛体内胚胎生产效率的影响

为提高和牛体内胚胎生产效率,优化供体牛筛选标准,本实验选取68头青年黑毛和牛为供体,超排处理前使用B超检查两侧卵巢上直径为3～5 mm的有腔卵泡数,以卵泡总数10和20为临界值将其分为3组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组有腔卵泡数分别为<10、10～19、≥20个,以CIDR+FSH+PG法进行超排处理后人工授精,比较不同组间胚胎生产效率。结果表明:Ⅲ组黄体数(15.44)、回收胚胎数(13.13)及可用胚胎数(9.56)均显著高于其他2组(P<0.05),Ⅱ组黄体数、回收胚胎数及可用胚胎数显著高于Ⅰ组(P<0.05),即随着供体牛超排前有腔卵泡数增多,回收胚胎数及可用胚胎数随之增多;Ⅲ组胚胎可用率显著低于Ⅰ组,退化率显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05)。综上,有腔卵泡数对和牛胚胎生产效率有影响,可以作为供体牛筛选标准之一。     

不同FSH对和牛超数排卵效果的影响

[目的]以16~18月龄青年日本和牛为供体,研究不同FSH和剂量对青年日本和牛超排效果的影响。[方法]超排采用CIDR+FSH+PG方法进行。[结果]进口FSH和国产FSH超排和牛后头均获胚胎数、头均获可用胚胎数、头均退化胚胎数和头均未受精卵数差异均不显著(P0.05);3种不同剂量的国产FSH处理日本和牛,头均获胚胎数、头均获可用胚胎数、头均退化胚胎数和头均未受精卵数差异均不显著(P0.05)。[结论]进口FSH和国产FSH超排青年和牛效果相当,同时适当降低国产FSH注射总剂量不影响青年和牛供体超排效果。     

高寒地区欧拉羊超数排卵效果初探

为了研究不同剂量促卵泡素(FSH)对欧拉羊超数排卵效果的影响,本试验设计不同剂量的促卵泡素(FSH)对75只欧拉羊进行超数排卵试验。结果表明,加拿大产FSH的剂量为256 mg时只均黄体数、只均回收卵数、卵子回收率、只均有效胚数及有效胚率分别为7.87个、6.40个、81%、4.87枚和76%,与216 mg、276 mg剂量组相比总体效果最佳;随着重复超数排卵次数增加,胚胎受精率降低,获得的有效卵数、有效胚数、有效胚率也有所下降,子宫粘连率升高。     

牛有腔卵泡卵母细胞体外成熟的研究

试验从屠宰场收集了 4 8头青年黄牛、34头青年水牛的卵巢共 16 4个 ,共回收可用卵母细胞 86 4枚。水牛平均每个卵巢可回收 3.2 2枚可用卵母细胞 ,相当于黄牛 (6 .72枚 )的一半。试验结果表明 :水牛卵巢生长卵泡少 ,卵母细胞产量少、质量差 ;3种采集黄牛卵泡卵母细胞的方法 ,用抽吸加切割法平均从每个卵巢回收的可用卵数 (7.71枚 )都极显著高于抽吸法 (6 .19枚 )和切割法 (6 .4 4枚 ) (P <0 .0 1) ,但是该法手续繁杂 ,适于一次且只能收集少量卵巢时使用 ;在黄牛和水牛卵母细胞成熟培养液中用 0 .3%PVP代替 10 %FBS ,牛卵母细胞的体外成熟率无显著差异 (P >0 .0 5 )。     

羊超数排卵影响因素的分析

超数排卵(简称超排)是以各种外源性促性腺激素诱发动物卵巢的多个卵泡发育并排出多个具有受精能力卵的过程。超排是胚胎移植最重要的技术环节,对于提高优良母畜的繁殖能力和品种改良具有重要意义,同时也为动物克隆和转基因动物生产等提供卵子和胚胎来源。目前,尽管超数排卵的方法已广泛应用,但超排的胚胎回收率和可用胚胎数还不稳定,影响了胚胎移植的进一步推广和应用。本文通过对超排影响的动物品种、个体差异、激素、超排处理方案、采胚方法、重复超排、年龄、营养状况、季节等诸多因素的分析,旨在为提高动物的超排效率提供借鉴。1影响超…     

羊超数排卵的方法及其效果比较

目前,羊超排上常用的激素有F S H(促卵泡素)制剂、P M S G/P M S G A P M S G、人绒毛膜促性腺激素(H C G)以及人绝经期促性腺激素(H M G)等。可是超排反应由于内外因素错综交织而构成了复杂的过程,增加了认识其内在规律的难度。但经过几十年的研究和总结,人们已基本掌握了各种家畜虽欠完善但已基本稳定的超排方法。1超数排卵的不同方法1.1F S H及其组合方法F S H减量法,于第1天下午10:30放置阴道海绵栓,注射雌二醇2毫克预处理7天,并于第8天上午8:00开始超排处理。每天上午肌注用生理盐水溶解的FSH,连续4天,剂量分别为150,100,…     

牛腔前卵泡在体外无血清培养中发育为有腔卵泡

用无血清培养系统研究了牛腔前卵泡的体外培养。直径为100－200μm的牛腔前卵泡在添加L－谷氨酰胺、BSA、睾酮、转铁蛋白和硒的McCoy′s 5a培养液中培养，卵泡保持正常的形态结构并持续生长，培养10d左右形成贸泡腔，成腔率约50％。培养液中添加胰岛素对卵泡直径的增长和卵泡腔的形成有明显的促进作用，但添加FSH对腔前卵泡的生长未表现促进作用。     

秦川牛超数排卵效果的研究

本研究共超排秦川牛31头次，有效超排20头次，有效率为64.5％。头均获胚总数6.45枚，可用胚4.20枚。激素用量为300 mg/头时，头均获胚总数和头均可用胚数显著高于260和340 mg组（P<0.05）。冬春季的头均获胚总数（8.56）和头均可用胚数（6.00）显著高于夏秋季（4.73、2.73）（P<0.05）。对供体牛连续超排处理3次，间隔70 d，对超排效果无显著影响。     

澳洲和牛超数排卵与体内胚胎生产的影响因素研究

旨在研究不同发育阶段(青年和经产牛)、同期方法、促卵泡素(follicle-stimulating hormone,FSH)剂量、超排次数等因素对澳洲和牛供体超数排卵(简称超排)和体内胚胎生产效率的影响.本试验共选用38头青年和牛(16?20月龄)和42头经产和牛(胎次=1)进行超排处理,分别统计每头供体牛回收的总胚胎...     

国产促卵泡素(FSH)对供体牛超排效果的分析

通过对6头荷斯坦青年母牛用国产FSH 4d逐日递减注射法进行超排处理,非手术采卵.共收集桑椹胚(M)、紧缩桑椹胚(CM)、囊胚(BL)、扩张囊胚(EXB)各胚龄的胚胎49枚,可用胚38枚,其中A级M 1枚、CM 23枚、BL 1枚、EXB 9枚;B级M 1枚、BL 3枚、可用率达77.5%,平均可用胚6.3枚/头.这说明,在严格把握技术环节的情况下,国产FSH超排效果显著.     

国产促卵泡素效果确切

奶牛是单胎动物，超数排卵是有效进行奶牛胚胎移植所必需的技术环节。也是胚胎移植中最难控制的一个环节，有时一头供体牛可提供20枚甚至更多的受精卵，但很多时候会得不到1枚可移植的胚胎，一般来说，平均每个供体牛可提供5～6个可用胚胎。