蚕沙堆肥中添加有效微生物群对家蚕病原菌的灭活效果

以有效微生物群为生物发酵剂添加到蚕沙中进行堆肥发酵,调查蚕沙中家蚕病原灭活效果和蚕沙腐烂程度.结果表明：有效微生物群可促使蚕沙堆肥快速升温,对蚕沙中家蚕病原有较好的灭活效果,升温效果以添加0.1％EM原露溶液和0.1％VT-1000微生物发酵剂溶液架空并覆盖稻草为最佳,对家蚕核型多角体病、质型多角体病、白僵病的病原灭活率均达100％;堆肥时蚕沙中添加0.1％有效微生物群剂,第2天温度迅速升高,第3天温度达到顶峰,发酵高温期≥50℃的超过15d,≥60℃的12d,≥70℃的8d（最高温达82℃）.添加有效微生物、架空表面覆盖稻草比不添加有效微生物、不架空表面不覆盖稻草,发酵高温期（≥60℃）温度高1.9～10.2℃（平均为6.6℃）;而在不架空厌氧状态下添加有效微生物发酵剂堆肥中水分充足,在短时间内（14 d）蚕沙腐烂程度较好.     

小规模蚕沙好氧堆肥中试及蚕沙肥效调查

为解决蚕区蚕沙无害化就地处理难题,建立了蚕沙就地处理小规模集中堆肥处理的中试试验,开展小规模集中堆肥工艺、腐熟度指标及蚕沙堆肥肥效调查,拟为蚕区小规模的蚕沙无害化和肥料化利用提供参考.     

废弃蘑菇基料用作蚕沙好氧堆肥调理剂的试验

为探讨以养蚕生产大宗副产物蚕沙制造养分丰富的有机肥料技术,直接采用含有约10%桑枝和5%桑叶的蚕沙为主要原料,以废弃蘑菇基料作为调理剂进行好氧堆肥,研究蘑菇基料的不同添加比例对蚕沙好氧堆肥腐熟条件中的温度、pH、含水率等因素以及堆肥中养分的影响。用90%蚕沙+10%蘑菇基料(处理1)、75%蚕沙+25%蘑菇基料(处理2)、100%蚕沙(对照)制造堆肥,均可在6 h达到最高温度(分别为64.4、66.0、68.3℃),但处理1组的高温持续时间较短,处理2组和对照组的高温持续时间在5 d以上,达到无害化卫生标准规定。处理1组和对照组堆肥中的含水率较高,处理2组可降低堆肥中的含水率及pH。从堆肥中的养分来看,各处理均可增加堆肥中的磷、钾含量,但处理1组和对照组均存在氮素损失(分别下降0.62%、5.84%)的问题,而处理2组由于降低了堆肥的pH,因此比初始状态增加4.19%的氮素含量。综合以上试验结果认为,在蚕沙堆肥过程中添加25%的废弃蘑菇基料有利于改善堆肥的反应条件,提高堆肥的氮素养分含量。     

35℃高温对家蚕BmN细胞生长发育的影响

利用 3 5℃高温对家蚕 Bm N细胞进行不同时间、时期的处理 ,结果表明 3 5℃高温对家蚕Bm N细胞生长发育影响最为敏感的时期是继代后 0～ 2 4h与细胞倍增时期 (约为继代后的 48～ 72 h)。3 5℃高温处理均明显抑制了家蚕 Bm N细胞的正常生长发育。始终处于 3 5℃高温处理下的家蚕 Bm N细胞表现出停止生长、死亡 ,进而部分破碎。     

催青温度对家蚕抗核型多角体病毒 (BmNPV)影响的研究

以夏sch、秋sch为材料在不同温度下进行催青处理,分别在2、4、5龄起蚕期添食不同浓度梯度的家蚕核型多角体病毒(BmNPV),采用统计分析软件SPSS(Statistical Package for Social Sciences)10.0对所得结果进行了分析,获得了不同催青温度处理的伴性赤蚁蚕对BmNPV的抗性差异.实验中,34℃催青处理的伴性赤蚁(sch)蚕对BmNPV有最强的抵抗力.     

广西地区家蚕品种资源对BmNPV抵抗性的初步调查

以广西地区现有的84个家蚕品种品系为材料,于2龄起蚕经口接种BmNPV,调查不同品种品系对BmN-PV经口感染的抵抗性。结果表明:不同蚕品种间对BmNPV经口感染的抵抗性存在显著差异,供试品种中7532(B)的发病率最低,为21.46%;Z6、中黄4、9497等品种的发病率高达100%;发病率55%以下的品种中绝大多数为日系品种;同一品种不同品系间的抵抗性也有一定的差异。研究结果可为进一步选育抗性品种提供依据。     

广西不同蚕区家蚕核型多角体病毒对家蚕致病力的研究

测定从广西不同蚕区收集到的家蚕核型多角体病毒（BmNPV）对家蚕的致病力。结果：在采集广西10个蚕区的病毒样品中,表现出不同蚕区的BmNPV致病力存在一定差异,致病力最强的是从宜州采集的BmNPV,其LD50为6．91×10^5个多角体／mL,最弱的是从象州采集的BmNPV,其LD50为5．44×10^5个多角体／mL,病毒致病力呈现一定的趋势,即广西南部BmNPV的致病力普遍高于广西北部BmNPV。广西不同蚕区家蚕核型多角体病毒致病力存在差异性,防治家蚕血液型脓病需因地制宜。     

不同微生物菌剂对牛粪好氧堆肥效果的影响

本研究通过分析不同微生物菌剂对牛粪好氧堆肥效果的影响,旨在筛选出适宜牛粪好氧堆肥的微生物菌剂,促进有机物质转化、养分释放,改善堆肥环境质量。通过添加4种不同微生物菌剂对牛粪进行好氧堆肥,并对堆肥温度、含水率、p H、电导率（EC）、碳氮比（C/N）、发芽指数（GI）等指标进行分析。结果表明,添加微生物菌剂均可不同程度加速堆肥升温,加快堆体水分的蒸发,促进有机氮、无机氮的相互转化,提高堆肥种子发芽指数,降低碳氮比,其中以添加地衣芽胞杆菌、里氏木霉、热带假丝酵母、嗜热侧孢霉的试验组效果更佳。     

化学诱变的BmNPV对家蚕细胞和虫体感染性的初步研究

前文报道化学诱变剂对家蚕核型多角体病毒 (BmNPV)多角体形态有明显的诱变作用 ,诱变的BmNPV基因组对某些限制性内切酶的酶切电泳谱发生变化。本文研究进一步表明 :诱变BmNPV感染家蚕Bm N细胞的病变特征与对照相比没有明显不同 ,但形成不定形超大多角体的空斑时间延迟2～ 3d;诱变BmNPV感染家蚕幼虫后 ,病蚕体内各组织病变损害的感染程度 (易感性 )与对照基本相同。研究结果提示 ,诱变的BmNPV对家蚕培养细胞、虫体组织的感染性无显著变化     

畜禽粪污在好氧堆肥发酵中的问题及对策

随着我国畜禽养殖业的快速发展,畜禽粪污的环境污染问题也越来越突出,为有效解决畜禽生态环境污染的问题,我国推行了众多的畜禽粪污处理和资源化利用的措施。其中好氧堆肥发酵技术是当前畜禽粪污处理和资源化利用较为广泛的有效途径。通过好氧堆肥发酵技术,不仅可以有效解决畜禽粪污的污染问题,还可以实现畜禽粪便的资源化再利用,为种植农业提供有机肥料,增加养殖户的再循环经济效益。本文主要介绍了畜禽粪污好氧堆肥发酵的原理、影响因素、好氧堆肥发酵中的常见问题和处理对策等几方面,以期为工作人员提供参考。     

克孢灵对家蚕微孢子虫灭活作用的研究

用不同浓度克孢灵处理家蚕微孢子虫悬液后人工饲料接种、饲育和载体处理后桑叶接种、饲育,进一步考察了其对家蚕微孢子虫的灭活效果。结果显示15mg/L的浓度作用30min,或者25mg/L作用5min,对载体试验的游离微孢子虫可以达到完全灭活的目的。该研究结果,为大田生产、尤其蚕种生产部门利用该药防治微粒子病,并把该药正式开发为专门针对N.b孢子的桑叶消毒剂提供了可靠的依据。     

家蚕现行品种对氟化物、核型多角体病毒病抵抗性的研究

对若干家蚕现行新品种进行抗氟性能和抗核型多角体病毒（ＶＰＶ）病鉴定，结果是：不同品种对氟化物和ＶＰＶ病抵抗力有差异，抗氟能力较强的有丰一、８７２、５４Ａ、丰一×５４Ａ、华峰×雪松、８７１×８７２：抗ＮＰＶ病较强的是３１８、４１６、秋３、３１７×３１８、４１５×４１６、８７１×８７２；抗氟性和抗ＮＰＶ病能力没有完全一致性，但３１７×３１８、８７１×８７２综合抗性较强。杂交种的抗氟和抗ＮＰＶ病明显强于纯系。     

云南蚕区部分家蚕品种资源对BmNPV抵抗性的初步调查

家蚕核型多角体病毒(BmNPV)是云南蚕区对家蚕危害最严重的病毒病病原。为了筛选对BmNPV具有较强抵抗能力的家蚕品种资源作为抗病育种素材,以云南省保存的18个家蚕品种(品系)为材料,于3龄起蚕经口接种BmNPV,调查不同品种(品系)对BmNPV的抵抗性。不同家蚕品种对BmNPV的抵抗能力存在显著差异,供试品种中云8B的抵抗能力最强,发病率仅为28.9%,而红云B的发病率却高达100%,品种间发病率最大相差71.1个百分点;发病率55%以下的品种多数为日系品种,但品种间发病率最高(红云B)和最低(云8B)的均为日系品种。一些对BmNPV抵抗能力较强的品种全茧量较高,但品种对BmNPV的抵抗能力与全茧量没有严格的相关关系。     

dsRNA对家蚕核型多角体病毒复制增殖的抑制效果

以家蚕核型多角体病毒(BmNPV)复制必需的极早期基因ie-1和细胞释放型病毒CRV入侵关键基因gp64为靶序列,分别人工设计并体外转录出dsRNA I1(438 bp)和dsRNA G1(337 bp),用家蚕培养细胞BmN研究目标dsRNA对BmNPV复制、增殖的抑制效果。结果表明:dsRNA I1能有效地抑制BmNPV在BmN细胞中的增殖,最大抑制效果使培养液中的病毒滴度(TC ID50)比对照降低了104.30倍;dsRNA G1能显著地抑制新形成的病毒粒子的细胞侵染能力,最高可使培养液中的病毒滴度降低103.17倍。     

环境诱变剂诱变的家蚕核型多角体病毒继代实验及诱变病毒基因组的酶切分析

前文报道环境诱变剂丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）、９ 氨基吖啶（９ ＡＡ）和甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）对家蚕核型多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）多角体形态有明显的诱变作用。本文进一步报道形态变异的ＢｍＮＰＶ多角体在继代实验中的仍保持相对稳定的比率［（２１３±４２８）％～（３００±４８５）％］,说明诱变的异常多角体能较稳定地遗传到次代,ＭＭＣ及９ ＡＡ诱变的ＢｍＮＰＶ ＤＮＡ,经ＥｃｏＲⅠ、ＢａｍＨⅠ和ＢｇｌⅡ酶切的电泳图谱与野生型对照株相比较,出现某些ＤＮＡ泳带的增加或丢失。显示诱变的ＢｍＮＰＶ基因组可能发生了多处高频率的碱基热点序列的改变     

畜禽粪污在好氧堆肥发酵中的问题及对策

堆肥发酵是目前养殖企业处理畜禽粪污的有效方式之一,该方法操作简单,投入少,可根据养殖场粪污产生的数量而选择适宜的处理规模。本文就在发酵处理程中所产生的问题进行探讨,以期为养殖场提供借鉴。     

利用转基因RNA干涉提高家蚕对BmNPV的抗性初探

基于探讨利用转基因RNA干涉技术使家蚕获得对核型多角体病毒抗性的目的,将家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的DNA聚合酶基因、蛋白激酶(PK1)基因以及bro-d和orf1629基因的部分编码片段,分别以其反向重复的形式与家蚕Actin3启动子连接,构建了基于piggyBac转座子载体的转基因表达载体,通过显微注射于家蚕卵,获得了36~107个G1蛾区,得到了20~23头转基因阳性家蚕。经Southern杂交及RT-PCR分析表明,BmNPV的4个反向重复片段都已经导入家蚕基因组中,并且可以进行转录。攻毒实验结果表明,BmNPV的DNA聚合酶基因和PK1基因反向重复片段对病毒的增殖有抑制作用,从而使家蚕对BmNPV具有一定抗性;而BmNPV的bro-d和orf1629基因反向重复片段对病毒的增殖没有抑制作用。针对特定病毒的转基因RNAi技术有望使家蚕获得对该病毒的抗性。     

氯溴异氰尿酸及其复配药液对家蚕主要病原体的消毒效果试验

氯溴异氰尿酸是一种高效、广谱的内吸性杀菌剂。将氯溴异氰尿酸与磷酸三钠或碳酸钠复配成不同浓度药液,对家蚕主要病原体进行消毒试验。0.125 g/L氯溴异氰尿酸药液对白僵菌、黄曲霉菌可达到100%的消毒效果,但对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)、家蚕质型多角体病毒(BmCPV)无消毒效果;在0.125 g/L氯溴异氰尿酸药液中添加10.0 g/L磷酸三钠或碳酸钠后,对BmNPV、BmCPV可达到100%的消毒效果。将磷酸三钠或碳酸钠添加到1.0 g/L氯溴异氰尿酸溶液中,对BmNPV、BmCPV具有100%消毒效果的最低添加浓度分别为1.0、0.5 g/L和2.0、1.0 g/L。氯溴异氰尿酸药液稳定,添加磷酸三钠或碳酸钠后的复配药液稳定性差,但添加磷酸三钠的稳定性优于添加碳酸钠的稳定性。综上初步认为,氯溴异氰尿酸与磷酸三钠混合的消毒药液可以应用于家蚕真菌病、病毒病主要病原的消毒,且药液宜现配现用。     

苏芸金杆菌与核型多角体病毒对家蚕的联合致病作用

初步研究了苏芸金杆菌(Bacillusthuringiensis,B.t)和家蚕核型多角体病毒(Bombyxmorinuclearpolyhedrosisvirus,BmNPV)对家蚕的联合致病作用。结果表明,BmNPV可增强B.t的毒力,增效作用显著;3.6×104、1.2×105mL-1B.t可增强BmNPV的毒力;与单独感染相比,B.t与BmNPV联合感染可缩短LT500.1～2.1d,加速家蚕死亡。     

家蚕核型多角体病毒(BmNPV)T3株对家蚕的亚致死作用测试

病毒对宿主昆虫的亚致死作用是指感染病毒后未死亡的昆虫,其生长发育、生殖等生命活动能力发生了明显变化。为了探明生产上发生家蚕血液型脓病时是否存在病原物家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)对家蚕的亚致死作用,以家蚕品种菁松×皓月的蚁蚕为材料,测试以低于致死中浓度(LC_(50))的Bm NPV-T3多角体悬液添食处理对存活家蚕的亚致死作用。测定Bm NPV-T3对蚁蚕的LC_(50)值为1.41×10~5m L~(-1)。以浓度为10~5~10~3m L~(-1)的Bm NPV-T3多角体悬液给蚁蚕添食后,存活幼虫的体质量显著降低;10~5m L~(-1)多角体悬液添毒试验组存活幼虫的发育历期明显延长,而对蛹期发育历期的影响不显著;10~5m L~(-1)和10~4m L~(-1)多角体悬液添毒试验组的存活幼虫发育至成虫,其产卵量显著低于对照组;10~5m L~(-1)多角体悬液添毒试验组存活幼虫的蛹体质量、全茧量、茧层量、茧层率均受到一定影响,其中对雌蚕的茧层量影响显著。依据上述试验结果初步认为,以低于致死中浓度的Bm NPV悬液给蚁蚕添毒后,对蚕体的生长发育和产茧、产卵性状都具有一定的影响,Bm NPV对家蚕存在亚致死作用。