家禽胰岛素样生长因子-I基因与生产性能相关研究进展

胰岛素样生长因子-I是胰岛素样生长因子家族的成员,是生长激素发挥促生长作用的主要介导因子.本文介绍了家禽的IGF-I结构,阐述了当前IGF-I在组织中的表达水平、基因多态性与家禽经济性状相关的研究现状.     

胰岛素样生长因子及其受体mRNAs在绵羊生殖系统中的表达和分布

为检测胰岛素样生长因子（IGFs）及其受体（IGFR）mRNAs在绵羊发情周期早期卵巢、子宫和输卵管中的表达,探讨绵羊胚胎早期发育过程中其发育环境——生殖道中生长因子的表达、分泌及其作用,取绵羊发情周期早期卵巢、子宫和输卵管,经固定、切片、免疫染色,观察IGFs mRNAs的表达和分布情况。同时用RT-PCR技术研究了各组织中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR、IGF-ⅡR mRNAs的表达情况。结果表明,IGFs mRNAs在绵羊发情周期早期的卵巢、子宫和输卵管中都有表达,4种因子表达模式相似：在卵巢中,IGFs主要定位于卵泡颗粒细胞,间质细胞亦有少量表达。在输卵管中,上皮细胞免疫染色呈阳性;在子宫中,腺细胞及上皮细胞的阳性信号强于固有层。RT-PCR检测表明IGFs mRNAs在3种组织中均有表达。     

微量元素铜对软骨细胞胰岛素样生长因子mRNA基因表达的影响

分离培养仔猪关节软骨细胞，从中提取总RNA，采用RT-PCR法扩增出关节软骨细胞中胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF—Ⅰ)的cDNA，与pMD18-T载体相连，转化JM109大肠埃希氏菌，提取质粒，经鉴定，所扩增的片段为目的片段。在此基础上培养仔猪关节软骨细胞，并在培养液中添加不同水平的铜，分别在第0、12、24、48h收集软骨细胞，提取总RNA，采用RT—PCR法扩增出IGF—Ⅰ的cDNA，以β-actin为内参，用凝胶分析系统对扩增出的cDNA进行扫描分析，计算IGF—Ⅰ mRNA基因表达的相对水平。结果，在细胞培养液中添加不同水平的铜能促进软骨细胞中IGF—Ⅰ mRNA基因表达，其中以铜浓度31．2μmol／L的效果最好。表明铜对软骨细胞的增殖作用是通过促进IGF—Ⅰ mRNA的表达来实现的。     

围产期绵羊血浆胰岛素样生长因子-1水平的动态变化及胆酸负荷对其的影响

:6只成年考力代妊娠母羊 ,经 2周适应饲养后随机分为两组。在安装颈静脉血管瘘后 ,一组通过颈静脉瘘管灌注胆酸 ( 2mg/kg) ,另一组同步灌注等量的生理盐水。间隔 1 4天灌注 1次 ,直至分娩。在灌注前和灌注后每天定时采取血样 ,测定血浆IGF -1水平 ,研究绵羊围产期血浆IGF -1的动态变化及胆酸负荷对其的影响。结果表明 ,围产期母羊血浆IGF -1正常水平在 572 .1 0± 2 0 7.1 5ng/ml～ 787.1 2±4 2 .33ng/ml之间 ,没有明显的动态变化规律。但分娩后的IGF -1平均水平显著低于分娩前平均值 ,分别是 639.54± 56.37ng/ml和 70 5.2 1± 52 .2 4ng/ml(P <0 .0 5)。胆酸灌注组母羊妊娠后期血浆IGF -1水平平均为 62 5.2 8± 85.56ng/ml,比对照母羊低 (P <0 .0 5)。本研究提示妊娠后期绵羊母体血浆高水平的IGF -1可能与胎儿生长发育有关 ;胆酸负荷可能影响了妊娠母体的肝功能或胎盘的调节作用     

类胰岛素生长因子-I对鱼类氮代谢的影响

类胰岛素生长因子-I对鱼类的氮代谢起着重要的调控作用。类胰岛素生长因子-I可以通过影响蛋白质合成时转录模板DNA含量、转录效率和翻译水平而实现对鱼体蛋白质的调控。影响类胰岛素生长因子-I对鱼类氮代谢的调控因素包括水温、鱼的品种、不同的生长阶段、鱼体内的激素含量以及饵料的营养水平等。本文综述了鱼类类胰岛素生长因子-I的结构及其影响鱼类氮代谢不同作用方式等面的研究进展,并对类胰岛素生长因子-I以后在鱼类上可能的研究方向做了初步探讨。     

胰岛素、胰高血糖素对体外单层培养的肝细胞胰岛素样生长因子-ImRNA丰度的影响

以持家基因β肌动蛋白（pactin）作为内参照,通过竞争PCR法检测不同浓度的胰岛素和胰高血糖素对犊牛肝细胞中胰岛素样生长因子-ImRNA丰度的影响。结果表明,胰岛素和胰高血糖素都能直接调控胰岛素样生长因子-ImRNA的表达,胰岛素促进胰岛素样生长因子-ImRNA的表达,而胰高血糖素抑制胰岛素样生长因子-ImRNA的表达,存在量变关系。     

胰岛素样生长因子结合蛋白的研究进展

胰岛素样生长因子（IGFs）在动物机体中有着明显重要的生理功能，这些功能是由IGFs受体以及一部分胰岛素受体介导的。血浆和其它生物液中只有极少一部分IGFs以游离态形式存在，绝大部分IGFs与一类具有高亲合力的特异性蛋白（IGFBPs）结合。这些IGFBPs将游离态的IGFs稳定在一个平衡水平，并且由于IGFBPs对IGFs的亲合力大于IGFs受体对IGFs的亲合力，IGFBPs可作为一种运输载体将IGFs定位于靶组织细胞并通过对IGFs与其受体的相互作用进行调控而改变IGFs的生物学活性。本文就IGFBPs结构、功能以及IGFBPs基因表达调控等方面对IGFBPs近年来的研究进展进行了综述，并展望了IGFBPs研究的前景以及对未来工作的建议。     

胰岛素样生长因子结合蛋白的研究进展

胰岛素样生长因子（ＩＧＦｓ）在动物机体中有着明显重要的生理功能,这些功能是由ＩＧＦｓ受体以及一部分胰岛素离态形式存在,绝大部分ＩＧＦｓ与一类具有高亲合力的特异性蛋白（ＩＧＦＢＰｓ）结合。这些ＩＧＦＢＰｓ将游离态的ＩＧＦｓ稳定在一个平衡水平,并且由于ＩＧＦＢＰｓ对ＩＧＦｓ的亲合力大于ＩＧＦｓ受体对ＩＧＦｓ的亲和力,ＩＧＦＢＰｓ可作为一种运输载体将ＩＧＦｓ定位于靶组织细胞并通过对ＩＧＦｓ与其受体的相互     

猪胰岛素样生长因子-I基因部分序列的扩增

胰岛素样生长因子-I（insulin-likegrowthfactorI,IGF-I）,因其结构与胰岛素类似而得名,是生长激素产生生理作用过程中必须的一种活性蛋白多肽物质。它是人体内肝细胞、肾细胞、脾细胞等十几种细胞自分泌和旁分泌的产物。本实验采用PCR技术对猪肝脏中的IGF-I进行扩增,并测定了其部分序列,共424bp,并与其它物种IGF-I基因进行同源序列比较得出：猪肝脏扩增出IGF-I与其他物种IGF-I基因具有很高的同源性。本研究为进一步研究IGF-I在猪肝脏中的作用提供理论基础。     

新疆也木勒白羊肌肉生长抑制素基因在不同生长时期的表达研究

试验采用实时荧光定量PCR技术测定也木勒白羊肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因在不同生长时期(0～6月龄)的表达量,采用2^－ΔΔCt分析不同生长阶段表达量的差异,旨在掌握也木勒白羊不同生长时期MSTN基因的表达规律,为也木勒白羊肌肉生长性状的选育提供遗传学资料.结果发现,MSTN基因在3月龄也木勒白羊肌肉中的表达量显著低于其他月龄(P<0.05),其余各月龄差异不显著(P>0.05);MSTN在脂肪中的表达量0月龄相对较低,随月龄增长,表达量升高,在5月龄达到最高,后随月龄增长表达量降低.MSTN基因在肌肉和脂肪中的表达量随着月龄增长有一定的规律可循,其表达规律可为也木勒白羊肉用性能的选育提供一定的科学依据.     

半胱胺和大豆黄酮对东北细毛羊部分组织IGF-I mRNA表达量的影响

为了探讨半胱胺和大豆黄酮对东北细毛羊肝脏、肌肉和皮肤组织中IGF-I mRNA表达量的影响,选取体重27～28 kg,5～6月龄健康的东北细毛羊育成羊21只,随机分成7组,每组3个重复,每个重复1只,采用实时荧光定量PCR法检测肝脏、肌肉和皮肤组织中IGF-I mRNA相对表达量.结果表明:(1)半胱胺和大豆黄酮均能显著提高东北细毛羊的生长性能(P<0.05),其中以7.5 mg/kg BW半胱胺组和7.5 mg/kg BW半胱胺+3 mg/kg BW大豆黄酮组效果较佳;(2)半胱胺和大豆黄酮对东北细毛羊肝脏和肌肉中IGF-I mRNA表达量有显著的提高作用(P<0.05),但各试验组之间差异不显著(P>0.05);(3)对皮肤中表达量的影响:对照组与添加3和6 mg/kg BW大豆黄酮组和7.5 mg/kg BW半胱胺+3 mg/kg BW大豆黄酮组之间差异显著(P<0.05),与添加7.5和15 mg/kg BW半胱胺组和15 mg/kg BW半胱胺+6 mg/kg BW大豆黄酬组之间差异不显著(P>0.05).由结果可知,半胱胺和大豆黄酮均能提高肝脏和肌肉中IGF-I mRNA的表达量,但协同应用并没有促使IGF-I mRNA表达量在肝脏、肌肉和皮肤组织中的明显提高,综合分析以添加3 mg/kg BW大豆黄唰效果最佳.     

不同水平赖氨酸对肉牛瘤胃营养物质代谢规律的影响

采用 10月龄鲁西黄牛×利木赞杂交公牛 3只 ,装有瘤胃、十二指肠和回肠瘘管 ,根据基础日粮 待测氨基酸的方法 ,按 6× 3不完全拉丁方设计 ,从瘤胃投饲 6种水平的包被赖氨酸 ,分别为 0、6、9、12、15和 18g/d。试验结果表明 :各组瘤胃液pH值和氨氮的差异不大 ,6个水平组的试验牛的pH值和氨氮在 2 4小时内的变化规律一致。投饲 15g/d的动物油包被赖氨酸 ,日增重、可消化氮、沉积氮、沉积氮 /可消化氮显著高于其他四组 ,分别为 3 61 5 2g/d± 12 2g/d、84 40g/d± 3 3 3g/d、19 0 8g/d± 3 61g/d和 2 0 73 %±3 66%。瘤胃投饲 15g/d的赖氨酸 ,ADF和NDF在瘤胃的含量最低 ,表明牛ADF和NDF在瘤胃的降解率提高 ,但DM含量最大     

BMPR-IB基因在绵羊不同组织的表达差异性研究

BMPR-IB基因为绵羊产羔数的主效基因,研究绵羊BMPR-IB基因组织表达差异性具有一定的生物学意义。研究以发情期绵羊为实验材料,采用半定量RT-PCR方法。结果表明:BMPR-IB基因在绵羊11种组织中的表达量存在差异,由高到低依次为卵巢、耳、脊髓、垂体、骨骼、子宫、下丘脑、肾脏、骨骼肌和输卵管,在肝脏中无表达,提示BMPR-IB基因在绵羊卵巢组织中高表达量与绵羊高繁殖力密切相关。     

日粮中不同水平单宁对绵羊瘤胃发酵的影响

旨在探讨日粮中来源于柠条的缩合单宁对绵羊瘤胃发酵参数的影响。选择体重为40 kg左右的健康杜蒙绵羊羯羊15只,按体重相近的原则随机分为3组：对照组（n=5）,饲粮中不含单宁;试验Ⅰ组（n=5）和试验Ⅱ组（n=5）,饲粮中分别含2%和4%单宁。分别于试验期晨饲前（0 h）和晨饲后3、6、9 h采集各组绵羊瘤胃液,测定和比较各组绵羊瘤胃内环境指标,包括pH值、氨氮（NH₃-N）浓度、菌体蛋白（BCP）浓度。结果表明,饲喂含有2%（试验Ⅰ组）和4%（试验Ⅱ组）单宁的日粮对杜蒙绵羊的瘤胃pH值无显著影响（P>0.05）;饲喂含有2%（试验Ⅰ组）和4%（试验Ⅱ组）单宁的日粮3 h和6 h后,绵羊瘤胃NH₃-N浓度显著（P<0.05）降低;饲喂含有2%（试验Ⅰ组）和4%（试验Ⅱ组）单宁的日粮6 h和9 h后,绵羊瘤胃BCP浓度显著（P<0.05）提高。日粮中添加2%和4%来源于柠条的单宁,对绵羊瘤胃pH值无影响,可降低瘤胃NH₃-N浓度,提高瘤胃BCP浓度。     

Effects of Diets with Different Energy and Protein Levels on mRNA Expression of Glucose Transporters in Tan Sheep

This experiment was conducted to study the effects of the diets with different energy and protein levels on mRNA expression of glucose transporters in the small intestine and muscle of Tan sheep. A total of 112 healthy Tan sheep (half male and half female) with similar initial live weight were randomly divided into four groups with four replicates per group and seven sheep per replicate. According to the Feeding Standard of Meat-producing Sheep and Goats (NY/T 816—2004),each group was fed diet with different levels of energy and protein respectively:0.84×standard level (group Ⅰ),0.96×standard level (group Ⅱ),1.08×standard level (group Ⅲ) and 1.20×standard level (group Ⅳ). The test period were divided into two stages by body weight of sheep (29-35 and 36-40 kg). At the end of each stage,one sheep was slaughtered at each replicate,and small intestine and muscle samples were collected to study mRNA relative expression of SGLT1,GLUT4 and GLUT5 genes by Real-time PCR. The results indicated that:SGLT1 gene mRNA expression levels of group Ⅲ was significantly higher than other groups in small intestine at the end of 29-35 kg stage (P< 0.05);At the end of 36-40 kg stage,the SGLT1 gene mRNA expression levels had no significant difference among the four groups (P> 0.05).In muscle,the SGLT1 gene mRNA expression level increased with the rise of energy and protein levels at both stages ,and that of group Ⅳ were the highest.In small intestine,at the end of 29-35 kg stage,the GLUT4 gene mRNA expression levels had no significant difference among the four groups (P> 0.05);At the end of 36-40 kg stage,the GLUT4 gene mRNA expression level increased with the rise of energy and protein levels,and that of group Ⅳ were significantly higher than the other groups (P< 0.05).In muscle,the GLUT4 gene mRNA expression level were the highest in group Ⅳ at both stages,and significantly higher than group Ⅰ (P< 0.05). The GLUT5 gene mRNA expression did not show any regularity at both stages. In conclusion,diets with different levels of energy and protein could significantly affect the mRNA expression of SGLT1 and GLUT4 genes,and affect absorption of glucose in sheep.     

日粮能量及蛋白质水平对滩羊糖类转运载体mRNA表达的影响

试验旨在研究日粮能量及蛋白质水平对滩羊小肠和肌肉组织中主要糖类转运载体mRNA表达的影响。选取112只健康、体重相近的滩羊（公、母各半）,随机分为4组,每组4个重复,每个重复7只羊。参考肉羊饲养标准（NY/T 816-2004）,分别饲喂不同能量及蛋白质水平日粮,即0.84×标准水平（Ⅰ组）、0.96×标准水平（Ⅱ组）、1.08×标准水平（Ⅲ组）和1.20×标准水平（Ⅳ组）。试验分两个阶段（29~35和36~40 kg）,于每个阶段末,每个重复屠宰1只试验羊,取其小肠和肌肉组织样,运用实时荧光定量PCR技术,研究SGLT1、GLUT4、GLUT5基因mRNA的表达量变化。结果显示,在29~35 kg阶段末,Ⅲ组小肠中SGLT1基因mRNA的表达量最高,显著高于其他组（P< 0.05）,在36~40 kg阶段末各组间无显著差异（P> 0.05）,各组肌肉中SGLT1基因mRNA的表达量在两个阶段都随着能量及蛋白质水平的提高而增加,Ⅳ组均最高;在29~35 kg阶段末,各组间小肠中GLUT4基因mRNA表达量无显著差异（P> 0.05）,而在36~40 kg阶段末,GLUT4基因mRNA的表达量随着能量及蛋白质水平的提高而增加,Ⅳ组显著高于其他组（P< 0.05）,在肌肉中,Ⅳ组GLUT4基因mRNA在两个阶段末表达量均最高,均显著高于Ⅰ组（P< 0.05）;在两个试验阶段,GLUT5基因mRNA的表达量无规律性。综上所述,日粮能量及蛋白质水平会影响滩羊小肠和肌肉中SGLT1、GLUT4基因mRNA的表达量,从而影响机体对葡萄糖的消化吸收。     

ITGB2基因在苏博美利奴羊不同细度皮肤组织中的DNA甲基化及mRNA表达水平分析

本研究旨在分析ITGB2基因在苏博美利奴羊不同细度皮肤组织中的DNA甲基化和mRNA表达水平。以苏博美利奴羊周岁母羊为试验动物,以不同细度的皮肤组织样为试验样本,对ITGB2基因（GenBank登录号：NC_040252.1）启动子区CpG岛进行预测并设计BSP引物,并对ITGB2基因（GenBank登录号：NM_001009485.1）、GAPDH基因（GenBank登录号：NM_001190390.1）mRNA序列设计引物,采用重亚硫酸盐测序法（BSP法）进行扩增纯化后将其连接pMD19-T载体,转化JM109细胞过夜培养,形成单菌落,筛选阳性克隆菌进行测序,对所获序列进行分析,分析ITGB2基因启动子区CpG岛在周岁母羊皮肤组织的甲基化模式,并运用实时荧光定量PCR检测ITGB2基因在苏博美利奴羊不同细度皮肤组织中的mRNA表达水平。结果显示,极细组苏博美利奴羊CpG岛甲基化率（94.29%）高于极粗组苏博美利奴羊的CpG岛甲基化率（87.62%）,其中,极细组苏博美利奴羊CpG2、CpG3、CpG4、CpG7甲基化率（100%、100%、100%和80.00%）均高于极粗组（86.67%、93.33%、80.00%和73.33%）;ITGB2基因在苏博美利奴羊极粗皮肤组织中的表达量极显著高于极细皮肤组织的表达量（P < 0.01）,且ITGB2基因的DNA甲基化水平与mRNA表达量呈明显负相关。研究表明,DNA甲基化对皮肤生长发育有一定作用,可作为一个候选的表观遗传标记用于苏博美利奴羊。     

Different Months of MSTN Gene mRNA Expression Levels and their Correlation with Growth Traits in Five Xinjiang Local Sheep

To explore the different varieties of five Xinjiang local sheep myostatin (MSTN) expression levels and their correlation with growth traits (body weight,body height,body length,heart girth and cannon circumference).The MSTN mRNA expression level in different month(Birth,1 months,2 months,3 months,4 months,5 months) of muscle and fat in Altay sheep,Turpan Black sheep,Emil White sheep,Kazakh sheep,Bashbay sheep by quantitative Real-time PCR method,using SPSS 19.0 software to analyze the correlation with growth traits.The MSTN mRNA expression levels in muscle:The MSTN gene mRNA expression levels of Altay sheep,Kazakh sheep and Bashbay sheep at birth were lower than other months;The MSTN gene mRNA expression level of Emil White sheep in 3 months was significantly lower than other months (P<0.05);The MSTN gene mRNA expression levels of Altay sheep,Turpan Black sheep were the highest in 4 months;The MSTN gene mRNA expression level of Kazakh sheep was the lowest at birth,and was the highest in 5 months.The MSTN gene mRNA expression levels in fat:The MSTN gene mRNA expression level of Emil White sheep at birth was significantly lower than other months (P<0.05); The MSTN gene mRNA expression levels of Altay sheep,Emil White sheep and Bashbay sheep were the highest in 5 months,the MSTN gene mRNA expression level of Bashbay sheep in 5 months was significantly higher than other months (P<0.05);The MSTN gene mRNA expression level of Kazakh sheep was the highest in 2 month,it was significantly higher than 5 months (P<0.05).Correlation analysis revealed that the MSTN gene mRNA expression levels were mostly negatively correlated with growth traits.The MSTN gene mRNA expression levels in muscle and fat of Altay sheep were all negatively correlated with growth traits;The MSTN gene mRNA expression levels in muscle of Turpan Black sheep were negative correlated with body length and body height,others were positively;The MSTN gene mRNA expression levels in muscle of Emil White sheep were positive correlated with heart girth and cannon circumference;The MSTN gene mRNA expression levels in fat were positive correlated with body length,others were negatively correlation;The MSTN gene mRNA expression levels in muscle and fat of Kazakh sheep were positive correlated with body length,others were negatively correlation;The MSTN gene mRNA expression levels in muscle of Bashbay sheep were positive correlated with body length and cannon circumference,others were negatively correlation.The MSTN gene mRNA expression level was discrepancy in different month of different varieties,and was no fixed expression pattern;The MSTN gene mRNA expression levels were positively correlated with the part of the body size.The MSTN gene mRNA expression levels might have a direct relationship with the growth traits and bone growth.     

新疆5个品种羊不同月龄MSTN基因mRNA表达水平及其与生长性状相关性分析

为了探讨不同品种绵羊肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)表达水平及其与生长性状(体重、体高、体长、胸围和管围)的关联性,试验采用实时荧光定量 PCR方法比较阿勒泰羊、吐鲁番黑羊、也木勒白羊、哈萨克羊、巴什拜羊不同月龄(初生及1、2、3、4、5月龄)肌肉和脂肪MSTN mRNA的表达水平,运用SPSS 19.0软件分析与其生长性状的相关性.在肌肉中:初生时,阿勒泰羊、哈萨克羊、巴什拜羊MSTN基因mRNA表达水平均明显低于其他各月龄;也木勒白羊3月龄MSTN基因mRNA水平均显著低于其他各月龄(P<0.05);阿勒泰羊、吐鲁番黑羊MSTN基因mRNA在4月龄表达水平最高;哈萨克羊MSTN基因mRNA初生时表达水平最低,5月龄表达水平最高.在脂肪中:也木勒白羊MSTN基因mRNA表达水平初生时显著低于其他各月龄(P<0.05);阿勒泰羊、也木勒白羊、巴什拜羊MSTN基因mRNA 5月龄表达水平最高,巴什拜羊MSTN基因mRNA 5月龄显著高于其他各月龄(P<0.05);哈萨克羊MSTN基因mRNA 2月龄表达水平最高,显著高于5月龄(P<0.05).相关性分析结果发现,MSTN基因mRNA表达水平与生长性状多呈负相关关系.阿勒泰羊在肌肉和脂肪中MSTN基因mRNA表达水平与其生长性状均呈负相关关系;吐鲁番黑羊MSTN基因mRNA在肌肉中的表达水平与体高、体长呈负相关,其余均呈正相关;也木勒白羊MSTN基因mRNA在肌肉中的表达水平与胸围、管围呈正相关,在脂肪中表达水平与体长呈正相关,其余均呈负相关;哈萨克羊在肌肉和脂肪中除与体长呈正相关外,其余均呈负相关;巴什拜羊在肌肉中MSTN基因mRNA表达水平与体长、管围呈正相关,其余均呈负相关.MSTN基因mRNA在不同月龄不同品种间的表达水平存在差异性,无固定表达模式;且与生长性状多呈负相关关系,与部分体尺性状呈正相关关系.MSTN基因mRNA表达水平可能与生长性状和骨骼生长有直接关系.