H-FABP基因型对二花脸猪相关性状影响的初步分析

利用21窝不同日龄的二花脸猪共97头,根据日龄分布,分成1组(日龄阶段)—49天,2组—58～60天,3组—61～70天,4组—71～80天,5组—81～90天,6组—228天六个日龄组;采用索氏脂肪抽提法和石蜡组织切片图像分析法对其背最长肌及半腱肌的肌肉组织学特性进行了测定。根据心脏脂肪酸结合蛋白(HeartFatty Acid Binding Protein,H FABP)基因的PCR RFLP多态性,对其与二花脸猪相关性状初生重、20日龄体重、断奶重及肌肉组织学特性的关系进行了分析。所有二花脸猪均表现为AADD型。邓肯氏(Dancans)差异显著性检验结果表明:(1)二花脸猪H FABP基因HH与Hh、hh基因型间20日龄体重差异显著(P<0 05),但对初生重及断奶重无显著影响;三性状值均表现为HH>Hh>hh。(2)在不同的基因型间,没有一个日龄组内的肌肉组织学性状值表现为差异显著,从侯选基因角度分析H FABP基因对肌肉粗脂肪含量的影响,发现趋向于HH>Hh>hh。     

CRP配套系B系猪H-FABP基因PCR-RFLP的研究

本文利用PCR-RFLP技术对CRP配套系B系猪的心脏脂肪酸结合蛋白（H-FABP）基因5＇-端上游区和第二内含子内的遗传变异进行了研究.结果表明：B系猪H-FABP基因的5＇上游区存在HinfⅠ-RFLP多态,第二内含子区只存在HaeⅢ-RFLP多态,而MspⅠ-RFLP呈现单一的AA型.     

9个猪种H—FABP基因5′—上游区和第二内含子的遗传变异

以8个中国地方猪种和引进品种大白猪共409头猪为实验动物，利用PCR－RFLP技术研究了H－FABP基因的5′-上游区和第二内含子内的遗传变异。结果在9个品种的5′－上游区中都验证了一个Hinf I-RFLP，变异的酶切位点在1322位，等位基因H，在皖南花猪，二花脸猪，金华猪，小梅山猪，滇南小耳猪，香猪，荣昌猪，北京黑猪和大白猪中的频率分别为0.36,0.34,0.60,0.66,0.80,0.73,0.76,0.70和0.90。大白猪和滇南小耳猪的Hinf I-RFLP的基因型分布相似，二者分别与其它7个猪种之间存在着极显著的差异；皖南花猪和二花脸猪相近，二者与另外7个品种之间的差异也达到极显著水平。在第二内含子中，验证了一个Hae Ⅲ-RFLP，该多态性只出现在皖南花猪和大白猪中，等位基因D的频率分别为0.99和0.61。另外，发现一个新的多态Hinf I*酶切位点，测序结果表明，该多态位点的产生是由于1970位碱基C突变为T造成的。该多态位点只在皖南花猪和大白猪中出现，等位基因B的频率在两品种中分别为0.86和0.58。在所有测定的猪种中，都没有发现Msp I-RFLP。     

应用PCR-RFLP及PCR-SSCP技术检测猪RN基因的研究

RN(Rendement Napole)基因是影响猪肉肉质性状的一个主效基因，已被定位在猪的15号染色体上(15q25)，该基因在猪肉品质上存在严重的负面效应。应用限制性片段长度多态性(RFLP)和单链构象多态性(SSCP)分析技术快速检测猪RN基因，根据RN向200Q突变的原理设计引物，PCR扩增后得到一段长约577bp的片段，两种方法得到相同的结果。     

嘉兴主要外来猪种RN基因频率探析

本试验通过PCR—RFLP技术对嘉兴地区主要外来猪种长白猪23头，杜洛克猪21头，大约克猪19头进行RN基因检测，结果表明：三个品种基因型均为rn／rn，未出现RN／rn和RN／RN型基因。检测结果为嘉兴地区主要外来猪种资源合理开发利用提供了理论依据。     

猪H-FABP基因多态性及其与肌内脂肪含量的相关研究

旨在研究猪H-FABP基因的遗传多态性及其与肌内脂肪含量的遗传效应。利用PCR-RFLP(HinfⅠ、MspⅠ、HaeⅢ、Hinf*Ⅰ4种限制性内切酶)分子标记技术检测了中国地方猪种雅南猪、大河猪,培育品种大河乌猪以及杜洛克与长白和约克三元杂交商业群体共148头猪心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因5′-上游区和第二内含子的遗传变异,并利用固定效应模型分析了H-FABP基因在杜洛克与长白和约克三元杂交商业群体中对肌内脂肪含量的遗传效应。结果表明:(1)在HinfⅠ和MspⅠ位点上,所有4个猪群都存在多态;在HaeⅢ位点上,除雅南猪只出现单态外,其余3个猪群都出现多态;在Hinf*Ⅰ位点上,除杜洛克与长白和约克三元杂交商业群体出现多态外,其余3个猪群只表现单态。(2)4个位点对肌内脂肪含量的影响差异显著,各基因型肌内脂肪含量最小二乘均值关系即HhHH,bbBbBB,AaAA,DDDddd。结合H-FABP基因的生理功能和已有的研究结果来看,可在特定的群体中将其作为影响猪肌内脂肪含量的候选基因。     

PCR-RFLP方法检测猪的氟烷基因

猪的应激综合征(porcine stress syndrome,PSS)指猪在外界应激条件刺激下产生的肌肉强直收缩,并伴随体温急剧升高,心跳加快,皮肤发绀等一系列恶性高温综合症状,一些个体在应激过程中往往突然死亡或宰后出现PSE肉(pale,soft,exudative;苍白、柔软、渗出).     

贵州地方猪NRAMP1基因多态性研究

NRAMP1（天然抗性相关的巨噬蛋白）基因是与人、鼠的一些病原寄生物,如分枝杆菌中的结核杆菌、沙门氏伤寒菌等的易感性和抗性有关的重要候选基因。可抵抗多种胞内病原微生物。本研究利用PCR—RFLP技术,分析了160头猪NRAMP1基因第6内含子的NdeⅠ酶切位点的多态性,结果发现宗地花猪、糯谷猪、贵州剑白香猪3个品种中基因频率和基因型频率分布趋于一致。其等位基因B明显高于等位基因A的频率。     

猪心脏脂肪酸结合蛋白（H-FABP）及其基因研究进展

肌内脂肪（intramuscular fat,IMF）被认为与肉质及口感呈正相关,因为它影响肉质的嫩度、风味和多汁性,特别是肉的多汁性。当肌束和肌纤维间沉积一定脂肪时,肉的断面大理石状评分较高,不仅鲜嫩．而且柔软多汁,是理想的鲜食肉品。Patricai等人对丹麦商品猪肉质研究发现：肉的风味和多汁性随IMF含量的增加而持续改善,增高IMF将会产生肉质嫩度和多汁性的相应改进。众多的研究结果认为2．5％～3％的IMF含量是新鲜猪肉产品的一个理想标准。近20年来,IMF含量受到许多猪育种专家的广泛关注,各国学者就IMF形成的细胞学、组织化学及影响IMF的基因等方面作了深人研究。因此,寻找影响IMF含量的数量性状位点（QTL）主效基因成为人们广泛关注的焦点。国外育种专家研究发现,猪心脏脂肪酸结合蛋白（heart fatty acidbinding protein,H-FABP）基因是IMF的候选基因。因此,研究H-FABP基因对猪肉质品质的改善具有重要的实际意义。     

5个不同猪种PGC1基因PCR-RFLP多态性研究

通过PCR—RFLP方法,检测外来品种大约克猪和江苏省地方品种梅山猪．二花脸猪．姜曲海猪以及培育品种苏钟猪共144头,结果表明PGC1基因序列经Aul I酶切后存在AA、AT和TT 3种基因型,其中大约克猪中AA基因型占优势,A等位基因频率为0．7,而江苏省地方品种猪中,TT占绝对优势,T等位基因频率平均为0．99,其中梅山猪和二花脸猪均为TT型。PGC1基因的PCR—RFLP基因型分布x2检验结果表明,大约克猪与苏钟猪．梅山猪、二花脸猪、姜曲海猪差异极显著;苏钟猪与梅山猪、二花脸猪、姜曲海猪差异极显著;梅山猪、二花脸猪,姜曲海猪三者之间无显著性差异。     

松辽黑猪H-FABP基因位点多态性研究

为检测松辽黑猪H-FABP基因位点多态性，应用PCR-RFLP技术(HinfI、HaeIII和MspI 3种限制性内切酶)检测了62头松辽黑猪5’-上游区和第二内含子的遗传变异情况。结果发现松辽黑猪在MspI多态位点上表现为单一的AA型；而在HinfI多态位点上表现为多态性，等位基因H的基因频率为0.7177，在HaeIII位点上也表现出多态性，等位基因d的基因频率为0.6210。研究结果表明松辽黑猪H-FABP基因5’-上游区和第二内含子存在多态性。     

9个猪种H-FABP基因5''-上游区和第二内含子的遗传变异

以 8个中国地方猪种和引进品种大白猪共 40 9头猪为实验动物 ,利用PCR RFLP技术研究了H FABP基因的 5’ 上游区和第二内含子内的遗传变异。结果在 9个品种的 5’ 上游区中都验证了一个HinfⅠ RFLP ,变异的酶切位点在 132 2位 ,等位基因H ,在皖南花猪 ,二花脸猪 ,金华猪 ,小梅山猪 ,滇南小耳猪 ,香猪 ,荣昌猪 ,北京黑猪和大白猪中的频率分别为 0 36 ,0 34 ,0 6 0 ,0 6 6 ,0 80 ,0 73,0 76 ,0 70和 0 90。大白猪和滇南小耳猪的HinfⅠ RFLP的基因型分布相似 ,二者分别与其它 7个猪种之间存在着极显著的差异 ;皖南花猪和二花脸猪相近 ,二者与另外 7个品种之间的差异也达到极显著水平。在第二内含子中 ,验证了一个HaeⅢ RFLP ,该多态性只出现在皖南花猪和大白猪中 ,等位基因D的频率分别为 0 99和 0 6 1。另外 ,发现一个新的多态HinfⅠ 酶切位点 ,测序结果表明 ,该多态位点的产生是由于 1970位碱基C突变为T造成的。该多态位点只在皖南花猪和大白猪中出现 ,等位基因B的频率在两品种中分别为 0 86和 0 5 8。在所有测定的猪种中 ,都没有发现MspⅠ RFLP。     

湖南地方品种猪肌细胞生成素基因多态性研究

本试验通过PCR-RFLP方法,检测了湖南地方品种猪,即沙子岭猪、桃源猪、宁乡猪和大围子猪共429头肌细胞生成素基因3′端353 bp侧翼序列,M sp I酶切后存在AA、AB和BB三种基因型,AA占有绝对优势,A等位基因频率平均为0.95,其中宁乡猪和沙子岭猪均为AA型。RFLP-M sp I基因型分布χ2检验结果表明,4个地方品种间只有桃源猪与其他3个品种间差异极显著;大围子猪与宁乡猪及其与沙子岭猪间差异显著。     

H-FABP基因型对中畜黑猪I系生长性能的影响

利用PCR RFLP技术(限制性内切酶采用HinfⅠ和HaeⅢ)检测了培育品种77头中畜黑猪I系的心肌脂肪酸结合蛋白(H FABP)基因座位的遗传变异,同时对H FABP的不同PCR RFLP基因型对生产性能的影响作了初步统计分析,旨在探讨利用H FABP进行肉质性状辅助选择,是否对生产性能产生不利影响。结果表明,在H FABP基因5′上游和内含子2 区段,均发现HinfⅠRFLP 和HaeⅢRFLP、HinfⅠ* RFLP;结果显示,在HinfⅠRFLP位点上,HH和hh 2种基因型间个体170日龄体重差异显著(P<0.05),除此之外,未发现其它酶切位点的不同基因型个体生长性能之间的显著差异。研究结果为今后开展猪肉质性状和生产性能的分子辅助选育奠定应用基础。     

部分引进猪种α1-岩藻糖转移酶基因多态性研究

本研究采用PCR RFLP技术对4个引进猪种杜洛克、约克夏、长白猪和皮特兰共计122头猪的FUT1基因进行了多态性分析。结果表明：4个猪种在该FUT1基因座位存在多态性，但抗性基因型AA仅在杜洛克和皮特兰猪中分布。卡方检验结果表明，长白猪与皮特兰间FUT1基因基因型分布差异极显著，长白猪与杜洛克猪之间差异显著，约克夏与皮特兰间差异也显著。     

不同猪种ESR基因多态性的PCR-RFLP分析

运用PCR-RFLP方法,检测了杜洛克、约克夏、长白猪、皮特兰、梅山猪、二花脸猪、枫泾猪、荣昌猪、苏太猪等9个国内外猪种的ESR基因PvuⅡ位点多态性.结果表明,在约克夏猪、二花脸猪、枫泾猪和苏太猪中检测到了AA、AB、BB 3种基因型,在杜洛克猪、皮特兰猪中检测到AB、BB 2种基因型,在长白猪、梅山猪、荣昌猪中只检测到了AB基因型.在本研究中不同品种的A、B基因频率差异显著,总体上在国外猪群体中A等位基因为优势等位基因,而地方猪种中B等位基因为优势等位基因.     

几个中外猪种H-FABP基因启动子区遗传变异分析

利用7个中国地方猪种、2个西方商业品种及1头东北野猪,通过设计2对引物,采用测序的方法研究猪心脏型脂肪酸结合蛋白（heart fatty acid-binding protein,H-FABP）基因启动子区1553 bp多态性,结果发现,在该基因启动子区存在18个SNPs位点,位点间的平均遗传距离为81.7 bp,其中江海型猪的多样性最低（0.18%）,华北型猪种多样性最高（0.34%）;NJ进化树分析结果发现,地域相近的猪种并不能完全聚在一起。本研究结果为进一步研究H-FABP基因与肉品质性状的关联性奠定了基础。     

北京油鸡和矮脚鸡心脏型、脂肪型脂肪酸结合蛋白基因多态性的研究

根据不同物种间同一基因核苷酸序列的保守性及相似性,设计特异性引物,利用聚合酶链式反应技术(PCR),扩增鸡心脏型脂肪酸结合蛋白(H—FABP)基因第二内含子序列;根据已经发表的鸡脂肪型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)基因mRNA序列,设计特异性引物,扩增鸡A-FABP基因第三内含子序列。选用Hha Ⅰ、Hae Ⅲ、Hinf Ⅰ、BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ、Pst Ⅰ、Xmn Ⅰ和Hind Ⅲ8种限制性内切酶对扩增产物分别进行单酶切,发现H—FABP基因第二内含子Hha Ⅰ PCR—RFLP及A-FABP基因第三内含子Hinf Ⅰ PCR—RFLP。     

6个品种鸡LPL基因的PCR-RFLP分析

采用PCR-RFLP方法对金水乌鸡、武定鸡、湖北红鸡、青脚麻鸡、矮黄鸡和隐性白羽肉鸡6个品种共计360只鸡LPL基因进行多态性分析,选用Hha Ⅰ、HaeⅢ、Hinf Ⅰ、Bam HⅠ、EcoRⅠ和PstⅠ 6种限制性内切酶对PCR产物进行单酶切,结果发现HinfⅠ-RFLP具有多态性,有AA和tBB两种基因型,采用独立性X2检验方法检验该基因座频率分布差异,结果表明,蛋用品种湖北红鸡与药用观赏型珍禽金水乌鸡间差异显著(P<0.05);矮黄鸡、隐性白羽鸡2个肉鸡品种间的差异不显著,而它们与其它品种间的差异均达到极显著水平(P<0.01);金水乌鸡、武定鸡、青脚麻鸡3个品种间差异不显著。     

不同品种马肌肉抑制素基因的克隆与PCR-RFLP多态性分析

肌肉生成抑制素(MSTN)又称GDF-8(growth differentiation fartor8)，属于TGF-β(transformny growth fartor beta转化生长因子)超家族一员。是一种对肌肉具有负调控作用的重要激素。研究以三河马、锡尼河马、乌珠穆沁马、乌审马、纯血马5个不同马种群共250匹为研究材料，对马肌肉抑制素基因的第一内含子进行PCR、克隆、测序，然后进行PCR-RFLP分析，扩增产物经Seal、Mspl、Hhal、DraI、SrfI等5种限制性内切酶酶切，结果DraI在5个种群中具有多态性，并表现为两种基因型(AA和AB)，而其他的内切酶均未发现多态位点。