鲜蛋中沙门氏菌的分离鉴定及生长模型分析

为了了解鲜蛋中沙门氏菌的污染情况及其生理特性,按照国家标准中蛋制品的检验程序,对养鸡场及市场共50个鸡蛋样品中的沙门氏菌进行分离,并对分离出的可疑菌株做生理生化鉴定试验,根据试验结果分析,确定其中1株为沙门氏菌,对其在温度37℃下的生长曲线进行数学分析,得出最适生长模型为MMF模型。     

食品能力验证样品中沙门氏菌的分离及鉴定

结合自身参加食品沙门氏菌能力验证的经历,总结能力验证中沙门氏菌分离与鉴定的关键点,并就如何提高沙门氏菌乃至整个实验室的检测水平进行讨论。     

棉花叶片中棉酚和单宁含量与绿盲蝽抗性的关系

 通过网室抗性鉴定和室内测定分析,系统研究了不同棉花品种（系）对绿盲蝽的抗性水平及棉花叶片棉酚和单宁含量与绿盲蝽抗性的关系。结果表明,不同棉花品种（系）叶片棉酚和单宁含量在不同时期存在差异;花铃期叶片棉酚和单宁含量与绿盲蝽抗性存在显著正相关,棉酚、单宁含量越高,棉花对绿盲蝽的抵抗作用越强。     

乳酸粪肠球菌的分离鉴定与系统进化分析

目的 分离鉴定一株疑似乳酸粪肠球菌;方法 通过对表型特性包括培养特性、形态学观察、生化试验等鉴定,同时结合16S rDNA系统进化分析;结果：该株革兰氏阳性菌能在10℃和45℃生长,接触酶阴性,发酵葡萄糖产酸不产气,可生长于6.5%NaCl和PH9.6的环境等,16S rDNA系统进化分析与粪肠球菌有最高同源性;结论 分离株为乳酸粪肠球菌。     

杂交水稻种子纯度田间小区正季种植鉴定结果与分析

为了全面掌握湖北省十堰市竹山县杂交水稻种子质量情况,防止劣质水稻种子流入市场给农业生产和农民利益造成损失,提高全县杂交水稻生产用种质量水平,竹山县种子管理局按照农业部、湖北省及十堰市开展2010年"种子执法年"活动的相关文件精神,切实加强种子行业管理,认真落实杂交水稻种子纯度田间种植鉴定工作。现将田间小区正季鉴定结果总结分析如下。     

罗布麻种子自然状态老化过程中生理生化指标测定与分析

采用引种于内蒙古农业大学农场2010年、2011年、2012年、2013年4个不同年份采集的内蒙古通辽地区罗布麻种子为材料,研究其自然老化过程中几项生理生化指标变化。结果表明:罗布麻种子在自然贮存条件下随着贮藏时间的推移,种子内部呈现贮藏物质还原糖、可溶性糖含量降低,过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性下降,丙二醛含量上升的趋势,罗布麻这些生理生化指标的变化,应该是导致罗布麻种子活力降低的重要因素。     

杧果果实后熟过程中PME基因家族的鉴定与表达分析

为探明影响杧果(Mangifera indica L.)软化的机理、研究果胶甲酯酶(pectin methylesterase, PME)基因家族在杧果果肉中的功能,本研究对‘红象牙’杧果软化期间果实硬度、可溶性固形物含量、微管结构、PME酶活和PME家族表达量进行测定,并对PME基因家族进行生物信息学分析。结果表明,杧果后熟软化过程中伴随着微管骨架的解聚、果实硬度的下降、可溶性固形物含量的升高以及PME活性的降低。在‘红象牙’杧果基因组中共筛选出51个PME基因,Ⅰ型PME (包含PME和PMEI结构域)基因有24个,Ⅱ型PME(仅含PME结构域)基因有27个。51个PME基因中有22个在后熟期表达,参与果实软化。同时,发现mango030191和mango030421两个基因在后熟期内高表达,可能在抑制果胶降解,抑制果实软化中发挥重要作用。Ⅰ型和Ⅱ型PME基因在系统发育树中占据不同分支,第1～2分支都是Ⅰ型PME基因,第3分支都是Ⅱ型PME基因。Ⅰ型和Ⅱ型PME基因拥有各自的基序、保守结构域、内含子外显子特征。本研究鉴定并提供了杧果PME基因家族成员的基本信息,为阐明杧果后熟过程中...     

‘白叶1号’返白过程中泛素化酶基因序列分析与表达

‘白叶1号’(Camellia sinensis cv.Baiye 1)是一种遇低温发生阶段性返白的特异茶树品种.泛素化酶系统由泛素活化酶El、泛素结合酶E2、泛素连接酶E3组成,前期从‘白叶1号’阶段性返白过程叶片中分离了多个泛素化酶差异表达基因.本研究以‘白叶1号’返白前期、返白期和复绿期的鲜叶为原料,探讨了‘白叶...     

山东地区乳房炎和非乳房炎牛奶中金黄色葡萄球菌的分离鉴定与耐药分析

为了解山东地区不同类型牛奶中金黄色葡萄球菌流行情况和耐药特征,对37个牧场的乳房炎和非乳房炎奶样进行细菌分离鉴定及MIC测定试验。采用常规方法与PCR技术进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定,微量肉汤稀释法进行MIC测定,卡方检验进行数据差异显著性分析。①共分离到150株金黄色葡萄球菌,检出率为11.26%(150/1332),且乳房炎奶样显著高于非乳房炎(P=0.009);②12种药物的MIC与EUCAST分布趋势大致相同;③分离菌株对青霉素(91.38%)耐药最严重,且乳房炎/非乳房炎奶样差异显著(P=0.047);④116株分离菌株中多重耐药(≥3)菌株为34(29.31%)株,乳房炎/非乳房炎奶样差异不显著(P=0.611);⑤威海对6种药物的耐药率在60%以上,其他地区仅对1~2种药物的耐药率在50%以上。乳房炎奶样的金黄色葡萄球菌检出率显著高于非乳房炎;分离菌株对青霉素严重耐药且乳房炎奶样多重耐药问题突出;不同地区均呈现不同程度的耐药。     

燕麦中菌落总数检测能力验证研究

为了了解福建省福清市食品企业菌落总数检测能力,福清市质量技术监督局组织实施了燕麦中菌落总数检测能力验证工作,福清市45家实验室参加了本次能力验证。介绍了燕麦中菌落总数能力验证计划的实施过程,包括方案设计、样品设备、均匀性稳定性实验、结果统计能力评价,并对能力验证结果进行了技术分析和技术建议。结果表明,菌落总数检测满意结果率88.9%,参加能力验证的绝大多数企业能准确检测菌落水平,福清市食品企业的菌落总数检测人员具有较高的水平。出现可疑结果和不满意结果的企业多数是饮用水企业,应加强饮用水企业的出厂检验监管。     

TaqMan实时荧光PCR快速检测与鉴定单核细胞增生李斯特氏菌能力验证样品

利用TaqMan 实时荧光PCR 技术对单核细胞增生李斯特氏菌能力验证样品进行快速鉴定和验证。依据GB 4789 系列标准的第一法对ACAS-PT526 能力验证中的样品D15 和样品D16 进行检测,通过增菌、分离、初筛和鉴定等传统培养法检测。鉴定过程中还使用了鉴定试剂条API Listeria 和全自动微生物鉴定系统。同时采用TaqMan 实时荧光PCR 技术对经过增菌的样品D15 与样品D16 的培养物和单核细胞增生李斯特氏菌标准菌株的培养物进行快速鉴定。结果表明,经API Listeria 试剂条鉴定,样品D15 为单核细胞增生李斯特氏菌,鉴定百分率为98.6%,T 值为1;经全自动微生物鉴定系统检测,样品D15 为单核细胞增生李斯特氏菌,99%可能性;样品D16 为金黄色葡萄球菌,99%可能性;经实时荧光PCR 鉴定,样品D15 LB1 增菌液培养物及李斯特显色培养基平板上的单菌落都具有显著的S 型扩增曲线。综上得出,实时荧光PCR 与GB 4789.30—2016 的第一法试验结果一致,样品D15 为单核细胞增生李斯特氏菌检出,样品D16 为单核细胞增生李斯特氏菌未检出,TaqMan 实时荧光PCR 方法可用于微生物的快速检验,尤其是对盲样检测的辅助验证。     

国内外水产品药物残留检测能力验证比对分析与发展建议

为进一步促进中国水产品药物残留检测能力验证的发展,提高中国水产品药物残留检测能力验证的水平、促进国际及国内各部委间组织的能力验证互认,笔者概述了国际著名权威机构FAPAS、APLAC及国内CNCA、中国合格评定委员会(CNAS)、中国检科院测试评价中心(ACAS)、农业部等对水产品药物残留检测能力的验证情况,比对分析了中国与国际权威机构在能力验证考核项目、样品制备方法、检测方法要求、结果反馈等方面的差异,并针对中国在水产品药物残留检测能力验证方面存在的问题提出了加强新参数项目研究、丰富样品制备考核手段、改进结果评定方法、加强技术交流等建议,以期为完善中国水产品药物残留检测能力验证活动提供参考。     

鸭沙门氏菌鞭毛抗原的提取与抗原性鉴定初报

【研究目的】提取沙门氏菌鞭毛蛋白并鉴定其抗原性;【方法】选用鸭沙门氏菌经半固体培养基诱导鞭毛,经肉汤培养后,用酸裂解、经差速离心、硫酸铵沉淀,分离出粗制鞭毛蛋白。将粗制的鞭毛蛋白用SDS-PAGE和磷钨酸负染投射电镜观察,并包板做ELISA检测其抗原性;【结果】SDS-PAGE显示提取的鞭毛蛋白相对分子质量约为58.0 KD,且纯度较高,抗原性较好,每1000 ml培养液可获得32.8mg鞭毛蛋白;【结论】酸裂解法可获得高质量的鞭毛蛋白,抗原性较好,为禽副伤寒沙门氏菌病诊断方法的建立奠定了基础。     

鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌基因组消减文库的构建

为了解鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌的基因组差别,筛选鸡白痢沙门氏菌特有的序列,利用SSH对鸡白痢沙门氏菌C79-13（实验方）与鸡伤寒沙门氏菌Sg9（驱动方）基因组进行了比较。选择四碱基内切酶Rsa I将C79-13与Sg9基因组DNA酶切,酶切的C79-13基因组DNA分成两份,分别与接头1和接头2R连接,然后进行两轮杂交和两轮PCR ,得到消减混合物, 将其与PCR?2.1克隆载体连接,转化感受态E.coli DH5α建立消减文库。结果共获得400个阳性克隆;筛选240个克隆制备质粒进行PCR检测,均扩增出100～2000 bp大小的片段。差异DNA消减文库的构建为进一步筛选、克隆鸡白痢沙门氏菌特异的未知新基因、建立分子鉴别新体系奠定了基础。     

呼和浩特地区乳中金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏性试验研究

对呼和浩特地区的部分原料乳进行调查,共采集到34个乳样,对其中金黄色葡萄球菌进行分离鉴定和药敏试验结果表明,原料乳中的主要致病菌为金黄色葡萄球菌,它们对红霉素、青霉素、链霉素、阿米卡星和氨苄西林有耐药性对头孢唑林高度敏感,对头孢噻肟钠中度敏感,对氧氟沙星、环丙沙星耐药性较弱。     

分子标记技术在蔬菜作物品种鉴定与纯度检测中的应用

品种鉴定与遗传纯度检测是蔬菜作物种子品质检验极为重要内容。本文综述了以蛋白质、DNA为基础的分子标记,如蛋白质与同工酶、RELP、RAPD、SSR、ISSR等分析技术应用于蔬菜种子检测的基本原理与进展。利用标记分析技术成功进行F1种子纯度检测的关键是亲本与杂交种间稳定差异位点的获得。已获得的重要园艺性状紧密连锁的遗传标记将有利于F1种子纯度鉴定。由于分子标记客观、稳定、快速、高效,这些技术将在今后种子检测中起到重要作用。     

猪圆环病毒1型ORF2基因的克隆与序列分析

根据GenBank中猪圆环病毒1型（PCV1）ORF2基因序列,设计一对引物,应用PCR方法从PK-15细胞和疑似患断奶仔猪多系统衰竭综合症（PMWS）的仔猪组织病料中分别扩增出PCV1 ORF2全基因（702bp）。将此基因片段克隆入pMD 18-T载体,筛选获得重组质粒pMD-PCV1-ORF2并对其测序,结果表明：所克隆的PK-15来源和组织病料来源的ORF2基因的同源性为99.4%,二者与Genbank上发表的PCV1 ORF2基因的同源性介于97.3% ~ 99.9%,与PCV2-ORF2基因同源性介于67.9% ~ 68.4%,二者编码的蛋白在几个功能区域比较保守;抗原表位预测表明PCV1 ORF2编码的蛋白具有良好的免疫原性     

奶粉加工环节阪崎克罗诺杆菌的分离鉴定及同源性分析

分析奶粉厂可能被阪崎克罗诺杆菌污染的环节,及被检出阪崎克罗诺杆菌的同源性,旨在有效降低奶粉厂阪崎克罗诺杆菌污染风险。利用生理生化法、PCR法和16SrDNA序列分析法分析在配料、生产线、设备及环境收集的微生物样品。共采样25处,其中8处有菌检出,3株鉴定为阪崎克罗诺杆菌。利用16srDNA法对阪崎克罗诺杆菌(ATCC 29544)C.sakazakii E、问题奶粉中的C.sakazakii A、回收细粉中的C.sakazakii H、准备间地漏中的C.sakazakii D四株进行同源性分析,结果表明C.sakazakii A与C.sakazakii H的同源性最高,说明成品中阪崎肠杆菌污染可能源于回收细粉。将8处有菌检出的环节设为关键控制点,其中回收细粉处为最为关键环节,与准备间地漏一同作为阪崎克罗诺杆菌危害关键控制点,本研究对奶粉厂阪崎克罗诺杆菌的控制提供了数据依据。