枇杷属植物野生种的茎段愈伤组织诱导植株再生研究

【目的】建立野生种枇杷茎段愈伤组织诱导植株再生的离体培养技术体系。【方法】以枇杷属植物的2个野生种、1个属间杂交后代为试材,采用茎段为外植体,在不同植物生长调节剂的组合配比培养条件下,开展野生枇杷茎段诱导愈伤组织以及愈伤组织诱导出不定芽的植株再生研究。【结果】最适合野生种枇杷茎段愈伤组织诱导植株再生的培养基配方为:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+TDZ 0.1 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1),如栎叶枇杷茎段愈伤组织诱导植株再生,其愈伤率、丛芽率和成苗率均达到100%,不定芽数最多可达38.75个;但对于属间杂交后代的石斑木×台湾枇杷最适合茎段愈伤组织诱导植株再生的培养基配方为:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1),其丛芽率和芽苗数量分别为100%和48个,成苗率也为100%;在众多的生长调节剂中,TDZ对野生枇杷的愈伤组织诱导再分化或脱分化是比较敏感的,高浓度的TDZ虽有利于愈伤组织诱导再分化不定芽,但不利于成苗。【结论】研究得出枇杷属植物以及属间杂交后代茎段愈伤诱导植株再生的共性规律和种间的差异性,建立起枇杷属植物野生种离体再生系统,简化植株再生诱导的步骤和缩短植株再生诱导的时间,能在短时间内产生一定数量的组培苗,为枇杷属种质资源研究积累了新的资料。     

金丝小枣花药离体培养再生植株研究

用ＭＳ培养基对金丝小束花药进行离体培养，诱导愈伤组织，并再生小植株。研究结果表明，花药的采接时期、低温处理及不同激素浓度对愈伤组织诱导有直接影响；６—ＢＡ是愈伤组织分化成绿色生长点及绿芽再生小植株的主要因素。     

矮牵牛愈伤组织的诱导及植株再生研究

以矮牵牛无菌苗为材料,研究不同激素配比对其不同外植体愈伤组织的诱导、不定芽的分化和生根诱导的影响。结果表明：叶柄为诱导愈伤组织的最佳器官。最佳愈伤组织诱导培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 2.0 mg/L,最佳愈伤组织分化培养基为MS＋6-BA 0.5mg/L＋IBA 0.1 mg/L,最佳生根培养基为1/2MS＋IBA 0.5 mg/L,生根率可达100%,生根后移栽成活,获得再生植株。     

石蒜愈伤组织的诱导及其植株再生研究

以石蒜为试材,研究了不同激素组合和外植体选择对石蒜愈伤组织诱导及植株再生的影响.结果表明:外植体选择是石蒜愈伤组织诱导的关键因素,3种外植体中,种子胚诱导愈伤组织的效果最好;在MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中,诱导愈伤率最高可达82.4％.并能较好地诱导愈伤组织发生不定芽,MS+ NAA 0.1mg/L能较好地诱导愈伤组织发生根.石蒜再生植株进行移栽的最佳基质应为腐殖质和珍珠岩以1∶1的比例组成,其成活率为70％.     

中国特有濒危植物八角莲胚状体的发生及其植株再生研究

以我国特有濒危药用植物八角莲(Dysosma versipellis (Hance) M.Cheng)为试材,采用DPS软件正交设计法和SPSS的Duncan's multiple range test,研究了不同植物激素对其愈伤组织形成、胚状体诱导及植株再生的影响,以期为离体培养条件下快速诱导八角莲愈伤组织、胚状体及其植株的再生,以及将来深入研究真菌诱导子诱导八角莲活性成分鬼臼毒素累积的作用机理、信号调控机制和人工种子制作等提供参考依据.结果 表明:八角莲叶和叶柄最适合作为诱导愈伤组织的材料;植物激素对愈伤组织形成的影响效果从大到小依次为2,4-D＞ TDZ＞KT＞NAA＞2-ip,愈伤组织形成的最佳培养基为MS+2,4-D 1 mg·L-1 +NAA 0.05 mg·L-1 +TDZ 0.5 mg·L-1 +2-ip 1 mg·L-1;诱导颗粒状愈伤组织胚状体形成的最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L-1 +NAA 0.1 mg·L-1,诱导率为71.33％;胚状体生根和植株再生培养基为MS+IBA 0.5 mg·L-1 +GA30.5 mg·L-1.     

五种拘杞植物胚乳培养三倍体的诱导研究

选取宁夏农林科学院枸杞研究中心培育的5种优质枸杞品种(系),研究了不同激素配比的培养基以及胚因子对不同基因枸杞胚乳诱导及分化的影响,以选择适合不同品种枸杞胚乳植株再生的最佳条件,从而进行三倍体育种。结果表明:5种材料都诱导出了愈伤组织,在不去胚情况下,最高诱导效率达到80.0%;将愈伤组织分别转入5种激素配比的分化培养基中,MS+0.2 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+3%蔗糖+0.4%琼脂为最适分化培养基,且宁杞3号分化率最高达10.7%;将分化出的绿色小芽转入1/2MS+0.01 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA生根培养基中诱导生根,15 d后形成再生植株。     

刺葡萄愈伤组织的诱导和分化培养

以刺葡萄叶片为材料,在1／2MS培养基上附加不同种类及浓度配比的植物激素,研究叶片愈伤组织的诱导及分化培养。实验结果表明：叶片愈伤组织的诱导较容易,最佳诱导培养基配方为以ZT1．0mg／L＋2,4-D2．0mg／L,诱导率可达100％,光培养条件下刺葡萄叶片愈伤组织的诱导率比暗培养的诱导率高。继代培养愈伤组织能诱导出根,但诱导出芽不易,刺葡萄叶片再生植株较难。增殖培养ZT以1．0mg／L＋NAA0．01mg／L为佳,1周增殖率可达1．292％。     

苹果体细胞悬浮培养及植株再生研究

以苹果试管苗叶片的再生不定芽嫩叶为试材,对苹果体细胞悬浮系的建立及植株再生的影响因素进行了研究.结果表明:在MS+NAA 0.5 mg/L+BA 2.0 mg/L培养基上可诱导获得高活力的愈伤组织.将该愈伤组织转入MS+2,4-D 2.0 mg/L+BA 1.0 mg/L液体培养基中培养,采用无菌筛网分离获得含单个细胞和少于8～10个细胞的小细胞团进行继代培养,建立体悬浮细胞培养系.将悬浮细胞转到MS+2,4-D 2.0 mg/L+BA 1.0 mg/L的固体增殖培养基上暗培养25 d后,可形成微型愈伤组织,将该愈伤组织转到MS+BA 5.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L的植株再生培养基上暗培养30 d后转入光下,光照培养30 d后53％的愈伤组织可再生植株.该研究建立的苹果体细胞悬浮培养技术,不仅可用于细胞融合及遗传转化过程中杂种细胞和转化细胞的分离及植株再生研究,而且对于利用组织培养技术筛选变异株系也具有重要意义.     

固化剂(Gelrite)浓度对草莓花药愈伤组织诱导及分化的影响

1971年Ｆｅｗｌｅｒ等首先由草莓花药经愈伤组织分化培养出不定芽并形成植株。 1979年 ,中国农业科学院果树研究所从草莓花药培养获得了单倍体植株(薛光荣等 ,1980 )。草莓花药培养可通过愈伤组织阶段经器官发生或胚状体形成完整植株 (ＩｓａｃＶ等 ,1994 ;徐振南等 ,1995 ) ,但愈伤组织不定芽分化率较低。影响愈伤组织分化能力的因素是多方面的 ,其中包括愈伤组织本身的结构及生理状况 (王海波 ,1991)。冯双华等 1998年曾报道琼脂浓度对水稻花药愈伤组织诱导率、愈伤组织的形态及其植株再生具有明显的影响。近年的研究表明 ,以Ｇｅｌｒｉｔ…     

不同红掌品种愈伤组织诱导及高效再生体系的建立

以"火焰"、"阿拉巴马"和"粉冠军"3个红掌盆花品种的叶柄、叶片为外植体,对红掌愈伤组织诱导及植株再生进行了研究,建立了红掌的高效再生体系。结果表明:红掌的叶柄较叶片更适宜愈伤组织的诱导,叶柄为外植体诱导愈伤组织的最适培养基:1/2MS+1.5mg/mL 6-BA+0.6mg/mL 2,4-D,诱导率为81.7%;以叶片为外植体诱导愈伤组织的最适宜培养基为:1/2MS+1.0mg/mL 6-BA+0.8mg/mL 2,4-D,诱导率为65.0%;"火焰"的愈伤组织诱导率最高,其次为"阿拉巴马","粉冠军"的愈伤组织诱导率最低。以叶柄和叶片作为外植体诱导产生的愈伤组织最适宜分化培养基为:1/2MS+1.0mg/mL 6-BA+0.2mg/mL NAA,分化率分别达到88.3%和73.3%;"火焰"的芽分化率仍最高,"阿拉巴马"次之,"粉冠军"的芽分化率最低。幼苗生根的最适宜培养基为:1/2MS+0.5mg/mL NAA。草炭土+珍珠岩(1:1)混合基质是理想的移栽基质,移栽成活率为95%。     

六月鲜枣愈伤组织诱导及胚状体发生

采用5因素4水平的正交试验设计,对六月鲜枣的幼叶、嫩茎、冷藏5d后的花药、花后48～50d的胚乳,利用3因素3水平的正交试验设计,对花后58～60d的幼胚及子叶,进行愈伤组织诱导再分化试验。探讨了不同激素、碳源和基本培养基对产生愈伤组织的影响。结果表明:碳源对胚乳、花药器官,基本培养基对嫩茎、幼叶、花药愈伤组织的诱导有显著影响,而且生长素种类和浓度对不同外植体的愈伤组织诱导作用不同;嫩茎、子叶及幼胚较易诱导产生愈伤组织,但只有子叶及幼胚产生的愈伤组织具较强的再生能力,并可诱导出不定芽,不定芽分化率分别为51.1%和9.5%,ZT较BA易诱导愈伤组织产生不定芽,不定芽转移生根成苗获得了完整植株。另外,用子叶及幼胚培养获得了大量胚状体,且胚状体最终可发育成苗。     

颠茄植株再生体系的建立

以颠茄种子萌发的无菌苗为试材,采用组织培养方法,以MS为基本培养基,研究IAA、NAA、6-BA、KT对愈伤组织诱导及分化的影响,探索适宜颠茄愈伤组织诱导和分化的培养基。结果表明:在MS+KT 0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L和MS+KT 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L培养基上,愈伤诱导率较高达100%,KT、6-BA添加生长素配比诱导愈伤组织效果不佳。KT单独诱导的愈伤组织宜在20d后转接,KT和6-BA配合使用诱导出的愈伤组织宜在40d后转接。生根适宜培养基为1/2MS+NAA 0.2~0.4mg/L。该研究建立了颠茄的植株再生体系,为颠茄的组织培养提供了技术体系。     

山杏愈伤组织诱导及植株再生

以山杏成熟胚和胚乳为外植体,以MS为基本培养基进行组织培养,研究了基于山杏经愈伤组织途径建立的再生植株技术。结果表明:以胚乳为外植体诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6-苄基腺嘌呤(6-BA)1.0mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;愈伤组织的继代及分化培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+萘乙酸(NAA)0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;以成熟胚诱导愈伤组织和丛生芽增殖分化培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;生根培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L。     

‘富有’和‘次郎’甜柿叶片再生植株的研究

 比较了不同生长调节剂及其种类浓度和培养时间对‘富有’和‘次郎’两个甜柿(Diospyros kaki Thunb. ) 品种的叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。TDZ诱导叶片愈伤组织和不定芽再生的能力很强, 在含ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的培养基中, 愈伤组织的形成率达96% , 愈伤组织不定芽分化率达80%以上,由0.5 mg·L ^{- 1} TDZ诱导形成的富有和次郎愈伤组织, 在含有ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的1/2DKW培养基培养30 d,不定芽分化率均达96%以上, 平均芽数分别为7.8和5.4, 所得再生苗的生根率近75%。     

光叶子花茎段愈伤组织的诱导及其植株再生的研究

 研究了光叶子花(Bougainvillea glabra Choisy) 茎段愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明:愈伤组织诱导以MS +BA 3.0 mg·L ^-1 + 2,4-D 0.2 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基最好, 茎段愈伤组织的诱导率和分化率分别达78.2%和25.6%。不定芽的产生有两种类型: 直接从茎段基部诱导产生不定芽和茎段基部形成大块愈伤组织后再从愈伤组织上分化出不定芽。丛生苗诱导以MS +BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1为培养基, 增殖倍数可达5.4, 当培养基中BA 3.0 mg·L^-1和2,4-D 0.5～1.0 mg·L^-1时再生植株会出现叶片变异现象。MS+ BA 0.2 mg·L^-1 + GA₃ 0.5 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基对有效苗培养具有较好的效果; 生根诱导以MS +NAA 3.0 mg·L^-1培养基诱导率最高, 为88.3%。     

月季‘萨蔓莎’愈伤组织的诱导及植株再生

 以试管苗的小叶为外植体, 探讨了月季品种‘萨蔓莎’愈伤组织诱导及植株再生的方法。结果表明: 高浓度的生长素能诱导小叶产生愈伤组织, 经2,4-D 7.0～10.0 mg/L光下诱导愈伤15 d的小叶外植体, 在含TDZ 1.5 mg/L的MS培养基上光下培养约20 d后有白色假珠芽形成, 此芽暗培养在含NAA、ZT和GA3 的培养基上产生新的假珠芽和新的愈伤组织, 通过持续选择继代生活力高的组织, 约1年后获得可长期继代的愈伤组织, 到目前为止已保存了16个月。此愈伤组织在TDZ 1.0 mg/L、NAA 0.01 mg/L和GA3 0.1 mg/L的诱导下30 d内分化出不定芽, 在含BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的培养基上不定芽伸长形成正常植株。     

桃离体组织分化再生植株的研究

  以奉化‘玉露’桃叶片、幼茎、下胚轴、子房、胚珠、胚乳及花后45～50 d 和75 d 的未成熟胚、完全成熟的种胚为外植体, 进行离体培养再分化试验。结果表明只有花后45～50 d 和75 d 的未成熟胚产生白色致密节球状的愈伤组织, 并可诱导出不定芽, 不定芽分化率分别为73. 8 %和15. 5 %; 62BA 诱导愈伤组织不定芽的效果优于KT。不定梢转移生根成苗获得了完整的再生植株。探讨了不同激素和碳源等对不定芽诱导的影响。     

枣愈伤组织培养及其应用研究进展

愈伤组织是进行植物离体培养与生物技术研究的常用材料。近年来，枣愈伤组织培养及其应用研究取得了重要进展。对枣茎段、叶片、花药和胚等不同组织的愈伤诱导培养体系及其在植株离体再生、多倍体诱导、遗传转化、悬浮细胞系建立、原生质体培养等领域的应用研究进展进行了综述，对今后的相关研究工作进行了展望，以期为枣愈伤组织培养的技术优化和科学利用提供借鉴和参考。     

西瓜未受精胚珠离体培养若干影响因素的研究

为探讨适宜的西瓜未受精胚珠离体培养方法,以‘大果黑美人’、‘早春翠玉’、‘中科6号’等为试材,研究了供体植株的基因型、4℃预处理时间、35℃高温预培养时间及植物生长调节剂对未受精胚珠的反应率和愈伤诱导率的影响。结果表明:不同材料(基因型)的胚珠反应率和愈伤诱导率都有显著性差异,愈伤诱导率最高的是‘中科6号’(92.3%),最低的是野生西瓜‘09005’(57.2%);4℃低温预处理没有显著提高胚珠反应率和愈伤诱导率,对于胚珠反应率和愈伤诱导率的影响因培养基不同而不同;35℃高温预培养可以提高胚珠反应率和愈伤诱导率,预培养3 d可以得到较高的愈伤诱导率和质量较好的愈伤组织;在诱导培养基MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 3 mg·L-1+TDZ0.05 mg·L-1上,愈伤诱导率最高为84.64%;植物生长调节剂TDZ相对于2,4-D和KT对西瓜未受精胚珠愈伤诱导的效果较好。     

中国李Nubiana胚性愈伤组织诱导及植株再生

以中国李Nubiana试管苗幼嫩叶片为外植体,探讨激素浓度配比、暗培养时间、琼脂浓度等对胚性愈伤组织诱导及TDZ浓度对胚性愈伤组织不定芽再生的影响,建立其愈伤组织诱导及不定芽再生体系。结果表明,外源激素对中国李Nubiana胚性愈伤组织诱导影响显著,TDZ不适合胚性愈伤组织的诱导;暗培养28 d,产生的愈伤组织质地较好,诱导愈伤组织的效果最佳。胚性愈伤组织在WPM+NAA 0.5 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+TDZ 2.0 mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0 g·L-1培养基上光培养可再生出不定芽,其再生率为6.7%。