不同培养条件对紫萁原叶体发育的影响

研究不同碳源浓度、不同激素水平、不同孢子成熟度等条件对紫萁(Osmunda japonica Thund.)原叶体萌发的影响。结果表明,蔗糖浓度为2%的培养基有利于孢子的萌发和原叶体的形成;随着无机盐浓度的降低,孢子萌发率上升,以1/4MS浓度最佳;1.0 mg/L 6-BA更有利于原叶体的发育;0.01 mg/L NAA上的原叶体长势较好;0.1~1.0 mg/L 2,4-D均有利于原叶体的发育,以0.5 mg/L为最佳浓度;还未完全成熟的孢子的萌发率较高,最高达50%以上。培养基配方为2%蔗糖+1/4MS+1 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+0.5 mg/L 2,4-D和孢子未完全成熟等条件更有利于紫萁原叶体的发育。     

紫萁孢子繁殖快速成苗技术研究

为了筛选出最佳的紫萁孢子育苗基质,弄清紫萁孢子育苗所需的环境条件,利用在湖北民族学院和杭州城郊两地采集的紫萁孢子,以壤土、山林腐殖土、红砂壤为试验基质进行紫萁孢子遮荫条件下育苗研究。结果表明:在保湿、控制温度、覆盖遮光率为75%的遮阳网的条件下孢子发芽率高,能正常形成原叶体,继续培养均能进入有性世代形成孢子体幼苗,其中在山林腐殖土和壤土按1:1的比例混合的基质上最适于孢子萌发和幼苗生长,出苗量可达3500株/m2;在杭州采集的紫萁孢子萌发后形成的原叶体、孢子体均比在湖北民族学院采集的耐高温性好。     

疏羽香鳞毛蕨配子体发育的研究

文章研究了疏羽香鳞毛蕨(Dryopteris fragrans(L.) Schott var. remotiuscula(Kom.)Kom.)配子体发育过程。结果表明,孢子褐色,赤道面观半圆形,极面观为椭圆形,单裂缝。孢子萌发类型为书带蕨型。丝状体2～9细胞长,有明显的顶端细胞,可形成多细胞板状的片状体,片状体顶端分生组织继续分裂形成原叶体,原叶体发育为三叉蕨型。原叶体边缘及背腹面均具毛状体,毛状体内含叶绿体数枚,先端多具帽状分泌物,数量丰富。颈卵器和精子器几乎同时形成,精子器近圆球形,由3个细胞组成,成熟的颈卵器由4列细胞组成,4～5层细胞高。成熟的原叶体为倒卵状心脏形。     

水蕨配子体和孢子体发育的研究

为探讨水蕨的生活史及其发育机制,采用土壤培养法,对粤东产水蕨的配子体和孢子体发育进程进行研究.结果表明:水蕨孢子于3月和11月播种,在室内自然条件下培养12 d后萌发形成丝状体,接着发育形成原叶体;1个月后原叶体分化出精子器和颈卵器,第2个月形成胚,胚经过3～4个月的发育形成成熟植株,长出新的孢子叶;孢子发育成熟约需1个月;4～6月是水蕨营养生长的高峰期.水蕨以孢子繁殖为主,其原叶体上能长出新的原叶体或片状结构,形状大多不规则,雌雄同体.此外,水蕨具有1个原叶体上发育出多株孢子体的现象.     

蕨菜孢子在离体培养条件下发育过程的形态观察

在离体条件下,培养并观察了蕨菜孢子早期发育过程中的形态变化规律。孢子接种后４～５ｄ开始萌发,７～８ｄ形成单列的或交叉形的丝状体,约２周后发育成片状体,到２０ｄ左右形成肉眼可见的心脏型原叶体（配子体）;２５ｄ左右原叶体上出现性器官,性器官成熟后形成精子和卵,精卵结合形成受精卵,受精后１０ｄ左右形成幼孢子体（蕨菜幼苗）。     

紫萁孢子的无菌培养

以紫萁孢子为外植体,研究不同培养基对紫萁离体培养各阶段的影响.结果表明:以孢子囊为外植体接种比直接接种孢子效果更理想;孢子萌发最佳培养基是1/2MS+0.3%活性炭;对原叶体增殖效果最好的是1/2 MS培养基;对孢子体诱导最佳方案是以灭菌河沙为基质的不完全培养基;激素处理对孢子体诱导有促进作用.     

菜蕨配子体的发育形态特征

为了解菜蕨[Callipteris esculenta (Retz.)J.Sm.]配子体的发育特征特性以及孢子繁育技术,采用人工培养方法培养菜蕨的孢子,详细观察其配子体的发育全过程.结果表明:孢子为二面体型,单裂缝,假根先出,孢子萌发为书带蕨型(Vittaria-Type);丝状体阶段长3～4个细胞;片状体为小楔形,倒三角形分生细胞出现早,宽3～5个细胞时进入原叶体阶段;原叶体发育为铁线蕨型(Adiantum-Type),成熟原叶体为对称心形,两翼宽大平展.成熟原叶体裸露,无毛状体,雌雄同体,初生假根具叶绿体,次生假根尖膨大或螺旋,成熟精子器具柄圆球体,颈卵器稍弯曲等,具有原始的性状也有进化的性状.在适宜的光照条件下原叶体正常发育且成苗率达82％.     

薄叶双盖蕨的配子体发育研究

采用人工方法培养薄叶双盖蕨(Diplazium pinfaense Ching)的孢子,观察其配子体发育过程。结果表明,薄叶双盖蕨孢子为二面体型,极面观椭圆形,赤道面观为肾形,具较宽而透明周壁,单裂缝;播孢5 d后萌发,假根先出,孢子萌发为书带蕨型(Vittaria-Type);播孢9 d后进入丝状体阶段,有2~4个细胞;播孢17 d后进入片状体阶段,倒三角形分生细胞出现早,为小楔形,仅3~5个细胞宽;播孢26 d后进入原叶体阶段,发育为铁线蕨型(Adiantum-Type),成熟原叶体为对称心形,两翼宽大平展。其初生假根含叶绿体,原叶体裸露,无毛状体,颈卵器短而直立。原叶体的正常发育可耐受较弱的自然光,适应郁闭度较高的生境。     

紫萁孢子叶组织培养技术研究

【目的】建立紫萁(Osmunda japonica Thunb.)孢子叶组织培养快繁体系,筛选其适宜的组织培养条件。【方法】以紫萁孢子叶穗为外植体,研究乙醇和HgCl_2处理不同时间对外植体的消毒效果;在加入0.3 mg/L NAA的1/4MS培养基中,再分别加入0.5 mg/L的2,4-D、IBA和KT,比较各处理对原叶体的诱导效果;在1/2MS基础培养基上,采用L_9(3~4)正交试验设计,探讨不同质量浓度KT、GA_3、NAA和6-BA组合对原叶体增殖的影响;同时,研究光合酵素稀释300,500和700倍对紫萁孢子体诱导的影响,以及1/2MS培养基中加入0.1,0.5,1.0 mg/L IBA或NAA对紫萁组培苗生根的影响。【结果】使用1 g/L HgCl_2对紫萁孢子叶穗消毒8 min的效果较好,萌发率为61.11%;紫萁原叶体最适宜的诱导培养基为1/4MS+KT 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,诱导率为88.55%;紫萁原叶体最适宜的增殖培养基为1/2MS+KT 5 mg/L+GA_3 3 mg/L+NAA 1 mg/L,增殖系数为9.6;稀释500倍的光合酵素对紫萁孢子体苗的转化及生长有促进作用,孢子体转化率为57.23%,孢子体高度为2.33 cm;1/2MS培养基中加入0.5 mg/L IBA,紫萁组培苗生根率与长势俱佳,生根率可达93.33%。【结论】初步建立了紫萁孢子适宜的组织培养体系,在相应条件下组培苗长势良好。     

鹿角蕨（鹿角蕨科）配子体发育及其濒危机制探讨

 采用改良Knops琼脂培养基和腐殖土分别培养鹿角蕨（Platycerium wallichii）孢子,解剖镜及光学显微镜下观察记录其孢子萌发及配子体发育的全部过程和有性繁殖情况,并在此基础上探讨了鹿角蕨的濒危原因。结果表明：鹿角蕨的成熟孢子橙黄色,两侧对称,赤道面观豆形,极面观椭圆形,单裂缝;孢子萌发类型为书带蕨型,原叶体发育为槲蕨型;成熟原叶体呈对称心脏形;毛状体在幼原叶体阶段开始出现;精子器和颈卵器的发生时间间隔过长和自然状况下受精期湿度太低阻碍了精卵结合是鹿角蕨自身在配子体世代的主要濒危原因;此外,分布区狭窄、个体数量少、分布地原生植被遭到破坏、适宜的温暖阴湿自然环境丧失及人为滥采乱挖等都在一定程度上加剧了鹿角蕨的濒危。     

不同培养基培养对白桫椤孢子萌发及其配子体生长发育的影响

利用光学显微镜对4种不同培养基培养条件下白桫椤(Sphaeropteris runoniana)孢子萌发和配子体的发育情况进行了观察。结果表明:培养于MS和1/2 MS上的白桫椤孢子不萌发;培养于1/4 MS上的孢子在接种后285 d萌发,培养于1/8 MS上的孢子在接种后40 d萌发。不同培养基培养条件下,白桫椤配子体在丝状体、片状体、心形原叶体、精子器、颈卵器以及幼孢子体的出现时间和数量等方面也存在差异,接种于1/8 MS上的孢子比接种于1/4 MS上的孢子萌发和发育速度快约7倍,孢子萌发率和配子体各个阶段的数量比率也较高。研究表明高盐浓度的培养基不适合白桫椤孢子的人工扩繁。     

紫萁试管苗生产技术研究

以紫萁孢子叶小段为接种材料,研究了影响孢子叶小段萌发的培养基组成及影响紫萁原叶体增殖的各项因素、孢子体苗分化的条件和孢子体试管苗的炼苗技术,结果表明:在温度25℃、光照12h·d-1、光照强度2000lx、培养基pH5.8等条件下,较适合原叶体增殖的培养基是1/2MS KT5.0mg·L-1 IBA1.0mg·L-1 KH2PO4200mg·L-1 活性炭0.5%。其分化出的孢子体苗的原叶体具有质地疏松、片状体大且肉质厚等性状。在温度20～28℃、湿度90%～100%的荫棚或林下,选择基质椰茸进行炼苗,根系粗壮3条以上、叶3片、叶长3cm以上的幼苗成活率可高达97.6%。     

赤霉素和土壤基质对猴腿蹄盖蕨发育过程的影响

采用显微摄影技术观察记录孢子萌发至形成幼苗的过程,研究了赤霉素(GA3)和土壤基质对孢子萌发成苗的影响。结果表明：孢子从片状体发育形成原叶体阶段开始需要外界提供充足的养分,原叶体发育成苗阶段需要充足的水分,以利于受精卵的形成。外源施加GA3可以使孢子萌发时间至少提前2 d,质量浓度为10 mg/L的GA3促进孢子萌发效...     

蕨菜孢子无菌繁殖研究

[目的]探讨蕨菜孢子无菌繁殖的最佳培养方法。[方法]以蕨菜孢子为材料,研究消毒方式、赤霉素(GA_3)浓度、光照和温度、无机盐和糖浓度对孢子萌发、原叶体发育、原叶体增殖、幼孢子体诱导的影响。[结果]5%NaClO溶液消毒5 min为蕨菜孢子最佳消毒方式;在含有0.2 mg/L GA_3的培养基上,孢子萌发速度明显提高,比CK提前13 d,心形原叶体出现时间也提前10 d;MS是蕨菜孢子萌发的最佳培养基,蕨菜孢子萌发温度最好在20~25℃,心形原叶体必须在光照条件下才能形成;蕨菜原叶体增殖最适培养基是MS,此时增殖系数达79.1;蕨菜原叶体增殖培养基最适糖浓度为1%,此时增殖系数是88.3;KT激素有利于蕨菜孢子体形成,最佳培养基为MS+KT 0.2 mg/L,叶片最多(4.6个),孢子体出现时间最短(35 d)。[结论]该研究结果可为蕨菜产业化快繁体系建立提供理论依据。     

小叶海金沙配子体发育和快速繁殖研究

采用土壤法培养和组织培养的方法,分析小叶海金沙配子体的发育和快速繁殖技术.研究发现小叶海金沙的孢子呈金黄色,极面观钝三角形,赤道观为半圆形或圆形,三裂缝.孢子萌发类型为书带蕨型,原叶体发育类型为铁线蕨型.在1/4MS培养基上,其增殖率最高.     

紫萁孢子的无菌培养

以紫萁孢子为外植体,研究了不同培养基对紫萁离体培养各阶段的影响。结果表明：以孢子囊为外植估接种比直接种孢子效果更理想;孢子萌发最佳培养基是1/2MS 0.3％活性炭;对原叶俸增殖效果最好的是1/2MS培养基;对孢子体诱导最佳方案是以灭菌河沙为基质的不完全培养基;激素处理对孢子体诱导有促进作用。     

鸟巢蕨组培快繁技术研究

以鸟巢蕨(Neottopteris nidus)孢子为原材料进行组培快繁,考察了孢子处理方式、基本培养基、激素及孢子体诱导方式等条件对培养效果的影响.结果表明,把经过消毒灭菌的孢子囊从孢子叶上切下,破碎取出孢子后接种到1/2MS培养基上,孢子萌发较快,萌发率高.萌发后的原叶体接种到不添加激素的MS培养基上能得到较大的增殖系数.原叶体在试管内诱导孢子体难度较大,可采用1g/L的KH2PO4溶液作诱导剂在试管外诱导,有利于原叶体向孢子体的转化.     

不同播期对大棚蕨菜孢子萌发与成苗特性的影响

在田间生产条件下,以蕨菜孢子为试材,研究了4月中旬、5月中旬、6月中旬、7月中旬、8月中旬5个不同播期对大棚蕨菜孢子萌发、原叶体及孢子体形成的影响。结果表明:4月份播孢形成原叶体和孢子体用时最短,分别为10 d和20 d,并且形成率最高,分别达到95%和35%,孢子苗成苗数量最多为40 500株/m2;6、7月份原叶体、孢子体形成率均低,分别为39%、28%和6%、8%。由此可见,在伊春地区孢子苗最佳播期是4月中旬,其次是5、8月份。     

鱼尾星蕨组织培养与快速繁殖的研究

利用鱼尾星蕨的孢子为外植体,研究了不同培养基、不同激素以及浓度对其孢子萌发、原叶体增殖、孢子体诱导和增殖的影响。结果表明,鱼尾星蕨的成熟孢子在1/2MS培养基上萌发速度最快,萌发率最高;鱼尾星蕨的原叶体在1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上增殖速度较快,但增殖过程中不能形成孢子体;在1/2MS+AgNO31.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L培养基上成功诱导出孢子体;孢子体可再进行分株扩增,从而获得大量的孢子无菌苗。     

刺齿贯众的组织培养*

 对刺齿贯众孢子萌发、原叶体增殖、孢子体的诱导进行了试验、观察和分析，研究了培养基和植物激素对其生长的影响。结果显示：成熟孢子在1/2 MS蔗糖浓度为1%培养基上59d萌发90%以上，且有利于原叶体的形成。原叶体在1/2 MS+Kt 0.5 mg/L培养基上60d增殖速率可达1∶11。试管苗在1/2 MS+IBA 2.0mg/L的培养基上长势较好，根系粗壮且发达。该物种组培和快繁的成功，为它离体保存和持续利用提供了技术支撑。