间接免疫荧光检测禽脑脊髓炎病毒抗体

ＡＥＶ Ｖａｎ Ｒｏｅｋｅｌ鸡胚适应株在鸡胚成纤维细胞和鸡胚神经胶质细胞传代,用盲传至第６代的ＣＥＦ,ＣＥＢ制成荧光标本。建立了ＡＥＶ荧光抗体检测方法,确定了待检血清稀释度１：１０和荧光抗体ＦＩＴＣ羊抗鸡ＩｇＧ的稀释率１：１０的工作浓度。通过对ＮＤＶ,ＭＤＶ,ＩＢＤＶ,ＡＩＶ,Ｒｅｏ等标准阳性血清的交叉试验,证实该法特性强且简单,方便经济,适合于鸡群ＡＥＶ抗体的检测。     

抗禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的研究——禽脑脊髓炎病毒抗原的培养和纯化

为获得用于制备AEV单克隆抗体的抗原，将禽脑脊髓炎病毒（AEV VR）接种于鸡胚成纤维细胞（CEF）盲传，通过间接免疫荧光试验（IFA）监测AEV增殖情况，以第六代CEF培养物作为种毒扩大培养，将其培养物经差速率心后的半提纯物接种6日龄SPF鸡胚、1日龄SPF鸡，再将半提纯物经密度梯度离心后进行PAGE－SDS电泳，电镜观察。结果证实，AEV VR在CEF上增殖成功。     

利用鸡胚成纤维细胞培养禽脑脊髓炎病毒的研究

利用鸡胚成纤维细胞 (CEF)培养禽脑脊髓炎病毒 (AEV) ,经过六次盲传发现 :AEV在 CEF上无细胞病变 (CPE) ,但利用 CEF细胞上清接种 SPF鸡胚 ,可产生不同程度的 AE鸡胚病变。分别取不同时间的感染细胞上清 ,测定 AEV浓度 ,结合培养条件 ,进而确定 AEV培养的最佳时机。结果表明 :以 AEV在 CEF上培养 7天最好 ,病毒滴度可达 10 2 .8EID50 / 0 .2 ml。将经 CEF培养的 AEV差速离心 (浓缩约 5 0 0倍 ) ,接种 SPF鸡胚 ,可产生典型的鸡胚病变 ,其滴度为 8× 10 5.0 EID50 / 0 .2 m l。通过 Cs Cl密度梯度离心提纯病毒 ,在电镜下观察到了大小基本一致的病毒粒子 ,病毒直径约为 2 5 nm。利用 AEV感染的 CEF或通过“细胞飞片”制备荧光片 ,建立了间接免疫荧光快速检验 CEF是否感染 AEV的方法。     

用单克隆抗体检测禽脑脊髓炎病毒抗原

建立了抗禽脊髓炎病毒（ＡＥＶ）的单克隆抗体（ＭＡｂ）ＶＲ９－１。接种ＡＥ鸡胚适应毒Ｖａｎ Ｒｏｃｋｃｌ株、２种疫苗株和２种野毒株的雏鸡脑冰冻切片、鸡胚成纤维细胞和鸡胚脑细胞，用间接免疫荧光和免疫过氧化物酶染色检查，结果，均可与ＭＡｂ ＶＲ９－１起反应。该ＭＡｂ也可用于石蜡包埋切片的抗生物素蛋白－生物素－过氧化物酶染色。试验结果表明，该ＭＡｂ可认别ＡＥＶ毒株的一个共同抗原决定簇，可用于ＡＥＶ检测和定     

禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体制备

禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）在患鸡体内含量很低,且细胞培养的复制水平也很低,故对该病毒的研究一直不够深入,国外有关ＡＥＶ单克隆抗体的报告首见于１９９４年［１］。本研究制备了３株抗ＡＥＶ单克隆抗体,为ＡＥＶ的实验室诊断提供了一种简单、快速、可靠的方法,同时...     

禽脑脊髓炎病毒的分离与初步鉴定研究

通过SPF鸡胚连续快速传代,从自然发病雏鸡脑组织中分离出一株食脑脊髓炎病毒（AEV）,经鸡胚接种,雏鸡接种、琼脂扩散试验和电镜观察,初步鉴定该株病毒为AEV,暂命名为AEV-SD961株。     

禽脑脊髓炎病毒感染鸡胚的病理学研究

６日龄ＳＰＦ鸡胚经卵黄囊分别接种禽脑脊髓炎病毒ＶａｎＲｏｅｋｅｌ株、１１４３株和ＮＨ９３７株，１０日后剖杀。鸡胚主要病变：眼观活动减弱，发育不良，体重减轻，皮下和脑部出血，脑积水和萎缩，脑重量明显减轻；光镜下见中枢神经组织非化脓性脑脊髓炎，腺胃、十二指肠、肝、胰、肾淋巴细胞浸润，骨骼肌萎缩、肌间水肿，其中神经细胞中央染色质溶解具有证病意义；电镜下脑神经细胞胞核淡染，胞浆内近核处粗面内质网崩解，十二指肠上皮细胞、胰岛细胞胞浆内含有约２５～３０ｎｍ密集或散在的病毒颗粒。     

禽脑脊髓炎病毒的分离鉴定

通过ＳＰＦ鸡胚连续、快速传代，从自然发病雏鸡脑组织中分离出一株禽脑脊髓炎病毒，暂命名为ＡＥＶ－ＮＨ９３７株，该病毒在发病鸡胚的肠上皮细胞、胰岛细胞和大脑神经细胞的胞浆中呈颗粒状，直径２５－３０ｎｍ，对盐酸、氯仿、胰蛋白酶具有抵抗力，在二价镁离子保护下可抵抗热效应，病毒滴度６．１６，中和指数２４５。     

禽脑脊髓炎的诊断

１９９３年７月，呼和浩特地区某鸡场１４日龄雏鸡群发病，病雏表现精神沉郁，斜视，站立困难和头颈震颤等症状，发病率４５％，死亡率１１％，抽样采血琼扩试验阳性率５０％，病理组织学检查见非化浓性脑脊髓炎，雏鸡和鸡胚接种发病，诊断为禽脑脊髓炎。     

用鸡胚敏感试验监测蛋鸡群禽脑脊髓炎

通过鸡胚敏感试验监测了哈尔滨地区１７个蛋鸡群，其中１１／１７（占６４．７％群有免疫力；５／１７（占２９．４％）群最近或过去曾发生本病，但抵抗力已降低；１／１７（占５．９％）群对禽脑脊髓炎病毒攻击易感，１７个蛋鸡群总的阳性率为９５．１％，说明哈尔滨市产蛋鸡群中ＡＥＶ感染是十分广泛的。     

禽脑脊髓炎的病理学研究

禽脑脊髓炎的病理学研究赵振华，林曦，禹旺盛，郝先谱，顾玉芳，马学恩，李润清，赵心力，王风龙，吉仁泰（内蒙古农牧学院禽脑脊髓炎课题组，呼和浩特０１００１８）禽脑脊髓炎（ＡｖｉａｎＥｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ，ＡＥ）是由禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）引起...     

用酶联免疫吸附试验检测禽脑脊髓炎病毒抗体

用酶联免疫吸附试验检测禽脑脊髓炎病毒抗体曹永长毕英佐何洁（华南农业大学动物科学系，广州５１０６４２）禽脑脊髓炎（ＡｖｉａｎＥｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ，简称ＡＥ）是由禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）引起的一种危害严重的传染病，主要侵害幼年鸡群，其特征是...     

应用原位杂交检测禽脑脊髓炎病毒

禽脑脊髓炎病毒(AEV)是属于小RNA病毒科、肠病毒属的一种正链RNA病毒，病毒粒子具有六边形轮廓，无囊膜，大小为22～25nm，病毒基因组全长为7055nt，具有PloyA尾，它主要侵害幼鸡中枢神经系统，从而引起以非化脓性脑炎为主要病理特征的一种病毒性传染病。由于AEV致病性     

单抗间接Dot-ELISA检测禽脑脊髓炎病毒抗原的研究

利用制备的禽脑脊髓炎病毒 (AEV)单抗建立了检测AEV抗原的间接Dot ELISA方法 ,对AEV最低检出量为 1 6 0 8μg/mL。人工感染 1日龄SPF鸡 ,取发病鸡 (6～1 3日龄 )相应病料 ,各病料样本阳性检出率分别为 :脑 1 0 0 % ,胰 96 % ,十二指肠 98% ,腺胃 98%。对 40份临床自然发病鸡病料检测 ,阳性检出率为 92 %。对 1 0份AEV病原分离阳性样品 ,检测阳性率为 1 0 0 % ,而SPF鸡对照均为阴性     

河南省禽脑脊髓炎的发生初报

河南省禽脑脊髓炎的发生初报陈洪科，卢中华，刘洪涛，张红英禽脑脊髓炎（ＡｖｉａｎＥｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ．ＡＥ），１９３０年首次发现于美国，目前在世界上所有的养禽地区均有发生。我国自１９８０年以来，先后在广州、辽宁、江苏、黑龙江、河北、山东、...     

环境潜在的禽脑脊髓炎病毒

某肉鸡场从1986年建场以来,先后引进不同品种肉鸡的种蛋,由本场进行孵化,各批都不同程度地受到禽脑脊髓炎病毒的威胁。使育雏成活率明显下降,经济效益低下,给肉鸡生产带来了极大的损失。通过对