骏枣叶片组织培养及植株再生技术研究

通过对骏枣叶片诱导愈伤组织、愈伤组织诱导不定芽、不定根的分化及再生植株移植的最佳条件的探讨,建立了稳定的骏枣叶片离体培养及再生植株体系.     

金昌枣叶片组织培养及植株再生

通过对金昌枣叶片诱导形成愈伤组织,诱导愈伤组织分化形成不定芽、不定根和再生植株及移栽条件的探讨,建立金昌枣叶片离体组织培养,形成再生植株的实用技术体系.     

包衣尿素在春白菜上的应用效果研究

以枣优良品种骏枣为试材,研究了多种因素对其离体叶片及大田幼嫩茎段再生效率的影响。结果表明,幼嫩茎段再生较容易。叶片再生与生长调节物质种类和浓度及叶片成熟度有关。枣叶片不定芽再生的最佳培养基为1/2MS(大量元素减半) TDZ0.5mg/L IBA0.2mg/L。不定芽再生率以上部叶片最高。     

辣椒枣试管苗叶片再生植株研究

以辣椒枣(Ziziphus jujuba Mill.)组培苗叶片为试材,研究了不同培养方式、接种方式以及不同生长调节剂对离体叶片诱导不定芽再生的影响。结果表明,适当的暗处理有利于辣椒枣叶片愈伤组织的形成,并能促进愈伤组织尽快形成芽点,有利于缩短叶片再生培养时间;叶片反放便于愈伤组织及芽点的观察,褐化率低,最终的不定芽再生数高于叶片正放,是辣椒枣叶片再生培养的最佳放置方式。正交试验结果表明,基本培养基,TDZ,IBA和糖4个因子对辣椒枣叶片再生影响大小排序为:基本培养基>糖>TDZ>IBA;1/2 MS(大)为最优培养基,WPM不适合作为辣椒枣的叶片再生培养基;辣椒枣组培苗叶片再生的最优培养基为1/2 MS(大)+TDZ 0.3 mg/L+IBA 0.1 mg/L+糖20 g/L,平均每叶片再生不定芽能达到5.4个。     

叶片成熟度对苹果试管苗叶片再生植株的影响

试验研究了叶片成熟度与苹果试管苗叶片再生植株的关系，结果表明，同一新梢不同部位叶片再生能力存在差异，以新梢顶端将展开幼叶的植株再生能力最强；继代培养21d的新梢叶片再生植株效果最好；同一叶片，中部比顶部或基部的叶段理锡 于生植株。     

‘京枣39’离体叶片高效再生体系的建立

【目的】‘京枣39’是一种优质的枣鲜食新品种，目前尚无有效的离体再生体系，影响了自根苗的培育和苗木纯度。为了解决枣遗传转化效率低等问题，本研究探究了枣叶片再生的不同影响因素，以期建立高效的叶片再生体系。【方法】以‘京枣39’组培苗叶片为试材，研究了不同接种方式、基本培养基种类、植物生长调节剂种类和浓度配比对离体叶片直接诱导不定芽再生的影响。【结果】正交试验结果表明：叶片正放的接种方式再生率远高于叶片反放，是‘京枣39’叶片再生不定芽的最佳放置方式；基本培养基对‘京枣39’叶片再生的影响要大于植物生长调节剂，且最优培养基为1/2 MS，最佳植物生长调节剂为细胞分裂素6-BA，本研究确立的‘京枣39’组培苗叶片再生的最优体系为1/2 MS+1 mg/L噻苯隆+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L麦芽糖+6 g/L琼脂，再生率可达79.17%，平均每叶片再生不定芽能达到4.67个。进而初探并建立了‘京枣39’组培苗的最佳扩繁体系为：MS+20 g/L麦芽糖+6 g/L琼脂+3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA，分枝率高达88%，平均分枝数达2.76枝...     

茶壶枣离体多倍体诱导关键技术研究

目的离体多倍体育种是枣树育种的重要方法,对其关键技术的研究有利于建立和完善枣树离体多倍体育种体系,加快枣树多倍体种质的创制。方法以茶壶枣无菌叶片为材料,将预培养不同天数（7 ~ 20 d）的叶片固定后制成石蜡切片,进行细胞学观察以确定适宜的预培养时间。在此基础上,将叶片不定芽再生技术与秋水仙素染色体加倍技术相结合,在叶片预培养8、9、10、11 d后,分别用70和90 mg/L的秋水仙素处理48和72 h,并对处理后得到的不定芽进行流式细胞术倍性检测。结果通过对叶片最佳预培养时间的细胞学研究可以得出,茶壶枣无菌叶片在预培养8 ~ 9 d时,分生细胞的分裂能力最强,且未出现分化现象,在此时期用秋水仙素对叶片进行处理,可大大提高诱导率,并且可以有效避免嵌合体和混倍体的出现。染色体加倍试验发现,在预培养8 d后,用70 mg/L的秋水仙素处理72 h,其诱导率最高,达4.11%,并成功获得8株多倍体植株。通过流式细胞术确定这8株多倍体均为纯合四倍体。结论本研究探索出了将茶壶枣叶片不定芽再生体系与秋水仙素染色体加倍技术相结合,人工诱导茶壶枣多倍体的技术方法。      

银白杨叶片不定芽再生影响因素的研究

该文以银白杨无菌试管苗叶片为外植体 ,进行了不同培养基及不同因子对银白杨叶片不定芽诱导的研究 ,建立了叶片不定芽再生植株体系 ,为今后的遗传工程改良奠定了基础 .结果表明 :银白杨叶片不定芽诱导的最适培养基是MS附加 6 BA和NAA(5∶1) (即MS +6 BA 0 5mg L +NAA 0 1mg L +蔗糖 2 5 % +琼脂 0 5 5 % ,pH 5 8) ,不定芽再生率达 95 %以上 ;当 6 BA NAA <5时 ,叶片不定芽再生率和再生系数均降低 ,当 5≤ 6 BA NAA≤ 30时 ,随着比值的增大 ,不定芽再生率明显下降 ,不定芽再生系数也减少 ;叶片不定芽再生能力强的最佳取材位置是自试管苗顶端向下伸展叶的第 1～ 3片叶 ;生根试管植株叶片的不定芽再生能力强于无根试管植株 ;叶片不定芽诱导的最佳光照时间为每天 14h .     

不同基因型孔雀草高效植株再生体系的建立

 将孔雀草品种T. patula'Little Hero Golden'的叶片、子叶和下胚轴接种于4种含有不同浓度IAA、NAA和BA的MS培养基上，比较不同外植体的再生植株的能力。结果表明，叶片再生植株能力较子叶和下胚轴强。随后，进一步将其叶片接种于9种添加不同浓度NAA和BA的MS培养基上，分化结果显示，在MS+NAA 1.5 mg·L-1+BA 1.0 mg·L-1的培养基上植株再生率最高，达75%。5份材料的叶片分别接种在该培养基上，再生率均达70%以上，其中T. patula21614的再生率达85%。所有再生植株均能成苗并表现出正常的形态特征。从而建立了适合于５种基因型孔雀草的离体高效再生体系。     

甘薯不同外植体体细胞胚的发生及植株再生(英文)

[目的]分别以甘薯品种徐薯22的叶片与茎尖作为外植体,研究利用不同外植体通过体细胞胚胎再生途径得到再生植株的方法。[方法]将徐薯22的叶片和茎尖分别置于MSB和MSD培养基中诱导胚性愈伤,再将胚性愈伤置于MS培养基培养,观察体细胞胚的发生情况,最后对不同外植体得到的植株再生频率进行比较。[结果]用叶片作为外植体得到的胚性愈伤平均诱导频率为95.69%,而茎尖的则为30.56%;不同外植体在体细胞胚发生途径中的形态特征有一定差异;用叶片作为外植体的植株再生频率为60.61%,用茎尖的则为22.00%,且采用不同外植体诱导得到的再生植株无形态变化。[结论]在该试验中,体细胞胚的发生及植株再生的最适外植体为甘薯品种徐薯22的叶片。     

甘薯不同外植体体细胞胚的发生及植株再生

[目的]分别以甘薯品种徐薯22的叶片与茎尖作为外植体,研究利用不同外植体通过体细胞胚胎再生途径得到再生植株的方法。[方法]将徐薯22的叶片和茎尖分别置于MSB和MSD培养基中诱导胚性愈伤,再将胚性愈伤置于MS培养基培养,观察体细胞胚的发生情况,最后对不同外植体得到的植株再生频率进行比较。[结果]用叶片作为外植体得到的胚性愈伤平均诱导频率为95.69%,而茎尖的则为30.56%;不同外植体在体细胞胚发生途径中的形态特征有一定差异;用叶片作为外植体的植株再生频率为60.61%,用茎尖的则为22.00%,且采用不同外植体诱导得到的再生植株无形态变化。[结论]在该试验中,体细胞胚的发生及植株再生的最适外植体为甘薯品种徐薯22的叶片。     

PhytagelR作为固化剂获得苹果叶片高频率植株再生

以昌红、红世界、红金和群红4个无病毒苹果无性系为试材,用PhytagelR代替琼脂作为固化剂,研究了N6、MS和NN69培养基上附加0.5 mg/L的IBA以及各培养基处理的不同培养方法对其离体叶片植株再生效率的影响.结果表明,NN69培养基优于MS和N6培养基,再生率最高可达到100%;IBA对植株再生有促进作用;暗培养有利于离体叶片植株再生.     

苹果胚性细胞的诱导及植株再生研究

分别以苹果胚性组织幼胚子叶和珠心以及非胚性组织离体叶片为试材,对苹果胚性细胞的诱导及植株再生的影响因素进行了研究。结果表明：外植体来源对苹果胚性细胞的诱导及植株再生能力影响显著。虽然胚性组织（幼胚子叶和珠心组织）均可高频率诱导胚性细胞,但其植株再生潜力差。而叶片诱导胚性细胞受培养基中生长调节剂种类和浓度影响明显。在含有2,4-D和BA的MS培养基上,叶片可诱导胚性细胞,胚性细胞在接种于含低浓度BA的分化培养基上可获得较高频率的植株再生。与胚性组织相比,苹果叶片细胞具有较高的全能性,可作为苹果细胞工程中较为理想的细胞来源。     

西瓜体细胞无性系变异初探

对西瓜体细胞无性系变异进行了初步研究，结果表明：西瓜未成熟子叶和幼苗子叶的再生植株中存在明显的变异，其中以四倍体变异最为普遍，再生植株叶片气孔大小和保卫细胞内叶绿体数目可以作为从再生植株中早期鉴别四倍体植株的可靠指标。此外再生植株中还出现无权、浅裂刻叶和板叶变异类型，且有嵌合变异现象。RAPD分析结果表明，西瓜再生植株的基因组DNA在供试的部分引物上表现出DNA多态性。     

玉米毛状根再生植株氮高效利用生理机制初探

以玉米毛状根再生植株为材料,探究玉米毛状根再生植株氮高效利用生理机制。采用水培试验设计,对六叶期植株根系形态学指标、叶片氮含量、SPAD值及光合作用特性进行测定。结果表明,毛状根再生植株根系形态指标、固氮能力、SPAD值以及光合作用参数明显高于对照组。毛状根再生植株的根系发达,促进了生长环境中氮营养元素吸收,提高了植株的氮利用效率,进而提高了植株光合能力。本试验为玉米氮高效利用生理机制研究提供了理论基础。     

抗肝炎转基因枸杞新品种培育的初步研究

以质粒pMVL-HisE制备金粉子弹,通过基因枪轰击枸杞叶片,经壮观霉素筛选获得了抗性完整再生植株,为探索提高转基因植株同质化程度的可能途径,对再生植株在高浓度的壮观霉素选择压下进行了2轮次的再生抗性筛选,并通过腋芽繁殖的方式继代4~6次,并进一步对枸杞叶绿体转化植株进行PCR扩增分子检测,结果初步证明外源抗肝炎病毒基因已经导入转基因枸杞植株体内。     

抗肝炎转基因枸杞新品种培育的初步研究

以质粒pMVL-HisE制备金粉子弹,通过基因枪轰击枸杞叶片,经壮观霉素筛选获得了抗性完整的再生植株;为探索提高转基因植株同质化程度的可能途径,对再生植株在高浓度的壮观霉素选择压下进行了2轮次的再生抗性筛选,并通过腋芽繁殖的方式继代4~6次,并进一步对枸杞叶绿体转化植株进行PCR扩增分子检测,结果初步证明外源抗肝炎病毒基因已经导入转基因枸杞植株体内。     

甘蓝型油菜单倍体植株群体的构建

以油菜双低（低芥酸、低硫苷）品种＂沪油12＂的小孢子来源植株为试验材料,研究了供体植株不同外植体部位不定芽再生情况及影响不定芽诱导的一些因素,并对甘蓝型油菜小孢子来源的再生组培苗进行了染色体倍性的鉴定.结果表明,利用节间茎段进行不定芽诱导是一种较好的快速再生植株方式,具有出芽快,遗传特性保持好的特点.茎段具有较强的不定芽分化能力,而叶柄和叶片难以诱导分化出芽.通过优化培养基,建立了甘蓝型油菜小孢子来源植株茎段高频不定芽再生系统.通过对甘蓝型油菜组培苗的叶片气孔保卫细胞和根尖染色体数目的观察,确定了一批小孢子来源的单倍体植株.     

流式细胞术鉴定苹果花药培养再生植株倍性的方法

苹果花药培养再生获得的纯合基因型植株倍性各异。为了进一步在育种和遗传分析中应用这些株系,需要准确鉴定其倍性,而流式细胞术测定植物细胞DNA含量是一种简单、快速、精确的倍性鉴定方法。试验用4种不同的解离液对苹果花药培养再生植株的叶片样品进行解离,并进行了DNA含量检测。结果表明,WPB解离液解离样品后上机检测,主峰高且明显。利用WPB解离液对苹果花药培养再生植株叶片进行解离,解离后不经过离心,直接染色,是用流式细胞术鉴定苹果花药培养再生植株倍性的最佳方法。     

60Co-γ射线处理对SH40叶片再生和试管苗的影响

目的 本试验以脱毒SH40和用60Co-γ射线辐射诱变的SH40试管苗为试材,研究了60Co对SH40叶片再生和植株形态的影响.方法 运用组织培养技术比较辐射前后SH40的叶片再生率,观察继代苗的植株形态并且测定叶绿素含量.结果 在相同的培养条件下,当TDZ浓度为1.5 mg/L和2.0 mg/L时,经辐射试管苗的叶片再生率以及平均出芽是都有所降低,并且叶裂加深、偏叶、皱缩叶、花斑叶、褪绿叶、漏斗叶、狭长叶、一柄两叶所占的比例明显增加;辐射使幼苗的生长受到抑制,增值系数和叶绿素含量明显减少.结论 辐射诱变抑制了SH40试管苗的叶片再生,使叶片的外形发生了较大的变化,畸形叶所占比例增大,植株的苗高、增值系数和叶绿素含量降低.