猪精液冷冻保存技术研究进展

猪精液冷冻保存技术对生猪产业发展有重要意义,有利于提高优秀种公猪的利用率以及实现优秀种质资源的长久保存,促进种猪场降本增效。目前中国猪精液冷冻保存技术取得了一系列进步,国内应用猪冻精配种的受胎率以及产活仔数基本达到了国外冻精配种水平。但是,由于冻融过程会对猪精子造成一定程度的损伤,精子的受精能力下降,受精窗口期缩短,国内、外应用冻精配种的生产成绩仍与常温保存精液存在不小差距。文章回顾了国内、外猪精液冷冻保存技术的发展历程,介绍了猪精液和精子的基本特点,简述了降温过程造成精子损伤的机理,并从冷冻稀释液成分这一角度分析介绍了减小冷冻损伤的机理与方法,如添加冷冻保护剂减少细胞内外冰晶形成、维持细胞内外渗透压以及稳定细胞膜结构;添加抗菌物质抑制解冻后细菌的快速繁殖;添加抗氧化物降低活性氧水平,缓解氧化应激,保护精子结构和受精能力等,最后对猪精液冷冻保存技术未来的发展方向进行展望,以期为相关研究以及实际应用提供参考。     

猪精液冷冻技术研究进展

本文综述了猪冷冻精液的国内外发展简史，对冷冻保存机理进行了简要阐述，并从冷冻保存稀释液、冷冻保护剂及其浓度、诱发结晶和解冻等方面阐述了影响猪冷冻精液的因素，指出了目前在猪精液冷冻理论和实践中存在的问题，并针对这些问题提出了一定的解决办法。     

猪精液冷冻技术研究

1956年英国人Polge开始研究猪精液的冷冻保存.后来的研究中,利用牛精液冷冻方法冷冻猪精液,解冻后的精子具有活力,但没有受精能力,虽然在1970年之前有几例猪冻精成功受胎的报道,但其结果不能被重复.     

猪精液冷冻保存研究进展

根据国内外的研究进展,本文简要阐述了猪精液冷冻保存的机理和操作方法,对影响猪冷冻精液质量的因素进行了分析,同时指出了目前在猪精液冷冻保存技术的理论和实践中存在的问题,并提出了该技术中需要解决的问题和展望。     

猪精液冷冻保存技术的研究进展

猪的精液冷冻保存技术使得不同地区优秀种公猪精液得以交流,克服了精液保存时效性和地域性的困难,能大幅度地利用优秀种公猪资源,降低生产成本,有利于遗传资源保护和优秀种质资源的推广。文章介绍了国内外猪冷冻精液的研究现状和存在问题,为猪的精液冷冻保存技术发展提供了理论参考。     

猪精液冷冻技术研究进展

猪精液冷冻技术是指将猪精液作特殊处理后在超低温液氮（-196℃）状态下冷冻,以达到长期保存的目的。由于猪冷冻精液的生产难度大,冻精存活率低,受胎率低及鲜精少等诸多原因,使得该技术一直难以在生产中大面积推广,严重制约了我国猪品种的改良进程。故本文对近年来猪精液冷冻技术的研究成果作一综述,以期找到一种较好的猪精液冷冻技术方案。     

猪精液超低温冷冻保存研究进展

猪人工授精(AI)技术已经广泛应用于畜牧业生产,但精液来源基本是17℃保存的新鲜猪精液,不利于精液长期保存和猪种资源保存。超低温冷冻保存技术是猪精液长期保存最有效的方法,冷冻精液可以实现不同地区、不同国家优良种猪精液间的交流,从而大大提高猪种资源的利用率,但冷冻解冻后的精液质量较差,受胎率、窝产仔数远低于鲜精,极大地限制了猪精液冷冻保存技术的广泛应用。本文综述了猪精液冷冻保存研究概况、猪精液冷冻损伤机理和猪精液冷冻保存影响因素,以期为猪精液超低温冷冻保存研究提供新的思路和方法。     

猪精液冷冻技术

<正>精液冷冻保存技术(Semen freezing)是将精液特殊处理后,通过液氮(-196℃)、干冰(-79℃)或其它冷源冷冻,超低温保存,使精液达到长期保存。精液冷冻保存技术的主要原理是精子在冷冻状态下,代谢几乎停止,生命保持相对静止状态,升温后又能复苏而不失去受精能力。     

猪精液冷冻技术研究进展

本文综述了猪冷冻精液的国内外发展简史，对冷冻保存机理进行了简要阐述，并从冷冻保存稀释液、冷冻保护剂及其浓度、诱发结晶和解冻等方面阐述了影响猪冷冻精液的因素，指出了目前在猪精液冷冻理论和实践中的存在问题，并针对这些问题提出了一定的解决办法。     

猪精液冷冻技术的研究

以解冻后的精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和人工授精结果为判定指标 ,比较了几种冷冻稀释液、解冻液及冷冻 -解冻程序对猪精液冷冻的效果 ,并对所筛选出的最佳稀释液和冷冻程序做了改进。结果如下 :(1) 号稀释液冷冻解冻后的精子活力 (32 .4± 7.3) %、活率 (4 2 .2± 3.2 ) %、顶体完整率 (6 2 .3± 0 .8) %和弯尾率 (4 2 .6± 7.5 ) %均显著高于 、 、 号稀释液 (P<0 .0 5 )。 (2 )在 号稀释液中添加 0 .5 %、1%和 2 %的 O.E.P(氨基 -钠 -十二烷硫酸酯 )使精子活率提高 5 %、弯尾率提高 6 %、顶体完整率提高近 10 % ,与对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 )。 (3)应用改进的稀释液 ( 液加 1% O.E.P) ,细管法比颗粒法冷冻精子活率提高近 7个百分点 ,活力提高 6个百分点 (P<0 .0 5 )。(4 )室温预平衡 4h的精子活力和活率都比对照组 (0 h)有显著提高 (P<0 .0 5 ) ,而预平衡 2、6 h的精子活力和活率与对照组差异不显著 (P>0 .0 5 )。 (5 ) 号解冻液解冻后精子活力 (4 2 .9± 2 .6 ) %显著高于 、 、 号解冻液 (P<0 .0 5 )。 (6 )用 5 0℃水浴解冻精子的活力 (4 6 .3± 2 .6 ) %显著高于 39℃ (4 2 .9± 2 .6 ) %和 70℃水浴 (4 1.1± 5 .7) %解冻的精子活力 (P<0 .0 5 )。 (7)精清和 号解冻液     

猪精液冷冻技术研究

手握法采集约克种公猪(12月龄)精液,于37℃离心后弃去精清,收集浓缩段富含精子部分,采用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。通过对不同稀释液及冷冻保护剂进行筛选研究,结果表明,Ⅶ号稀释液优于其他6种稀释液(P<0 05);甘油为较佳的冷冻保护剂(P<0 01),其适宜浓度为2%;干解冻效果优于湿解冻,其适宜温度为40～45℃,解冻后精子活率达0 46～0 52;稀释液中添加安钠咖可有效延长精子的冻后存活时间(P<0 01)。     

猪精液的冷冻保存技术

综述了国内外猪冷冻精液的发展简史及研究成果,对猪精液的冷冻保存机理进行了简要阐述,并从稀释液、冷冻保护剂及其浓度、冷冻前处理、冷冻剂型、诱发结晶、冷冻速率、解冻等方面阐述了影响猪精液冷冻的因素,指出了目前在猪精液冷冻理论和实践中存在的问题,并提出了解决办法.     

冷冻速率和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响

为优化冷冻和解冻方法,提高冷冻效果,本试验比较了不同冷冻速率(-100 ℃ 10 min、-120 ℃ 10 min、-140 ℃ 10 min)和不同解冻温度(37 ℃ 30 s、45 ℃ 30 s、52 ℃ 30 s、60 ℃ 30 s)对猪精液冷冻效果的影响。结果表明,采用-120 ℃熏蒸10 min,解冻后精子活力为0.36,质膜完整率和顶体完整率也优于其他2组,且差异显著(P<0.05)。采用37 ℃ 30 s方法解冻,精子活力、质膜完整率显著高于其他3组,顶体完整率也高于其他3组,但差异不显著(P>0.05),其畸形率最低和60 ℃ 30 s组差异明显(P<0.05),但与45 ℃ 30 s组和52 ℃ 30 s组差异不显著(P>0.05)。因此,采用-120 ℃平衡10 min冷冻,37 ℃ 30 s水浴解冻方法更为适合0.25 mL细管猪冻精解冻。     

Deep Freezing of Boar Semen Packaged in Plastic Bags and Straws

For practical reasons, a large volume (i.e. 5 ml) of frozen boar semen per insemination dose is desirable, but successful freezing has not been achieved, since optimal cooling rates have not yet been established. Post-thaw motility and the acrosome intep'ty of semen from four boars frozen with a programmable freezin machine, in mini-(0.25 ml), maxi-(5 ml) plastic straws and in 10 × 5 cm PVC- or Teflon FEP-plastic bags (0.35 – 0.12 mm thick, 5 ml) was studied. The freezing of the semen was monitored using thermocouples placed in the straws and the bags. The freezing curve started from +5°C, at a rate of −3°C/min, to – 6°C, it was held for 1 min at −6°C, and was followed by further drop to −100°C at a rate of −20°C/min, with subsequent storage in LN₂. The bags had a much shorter freezing point plnteau, compared to the maxi-straws. Post-thaw sperm motility was significantly higher when semen was frozen in mini-straws or in bags than in maxi-straws. The freezing procedure did not cause major acrosomal damages, significantly more normal apical ridges being present in the bags and mini-straws than in the maxi-straws. This in vitro evaluation indicates that the freezing method employed is satisfactory for freezing large volumes of boar semen into plastic bags .     

不同浓度芦丁和冷冻速率对猪精子冷冻保存效果的研究

【目的】 探讨冷冻稀释液中添加不同浓度芦丁和不同冷冻速率对杜洛克公猪精子冷冻保存效果的影响及其二者的互作关系,以期为指导生产实践和提高优良种猪利用率提供依据。【方法】 试验分为6组,分别为空白对照组（冷冻稀释液Ⅰ液）和试验组（分别在冷冻稀释液Ⅰ液中添加0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mmol/L芦丁）,在距离液氮面上1 cm （快冷冻）和3 cm （慢冷冻）处分别进行冷冻。在液氮中保存30 d后,检测冷冻-解冻精子的运动参数、质膜完整率（MI）、顶体完整率（AI）、DNA完整率、线粒体膜电位（MMP）、活性氧（ROS）水平、丙二醛（MDA）和ATP含量,以及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性来评价解冻后的精液品质。【结果】 冷冻速率方面,在相同浓度芦丁冷冻液中,慢冷冻效果均好于快冷冻效果,差异显著（P<0.05）。芦丁浓度方面,快冷冻和慢冷冻组均以添加0.6 mmol/L芦丁的效果最好（P<0.05）,添加0.8 mmol/L芦丁的效果次之。二者互作方面,冷冻速率与芦丁浓度间存在交互作用,其中慢冷冻×0.6 mmol/L芦丁组合的精子的运动参数、质膜完整率、顶体完整率、DNA完整率、线粒体膜电位、ATP含量均显著高于其他组合试验组（P<0.05）,ROS水平显著低于其他组合试验组（P<0.05）,SOD、CAT和GSH-Px的活性较其他组合试验组均显著提高（P<0.05）。【结论】 不同芦丁浓度与不同冷冻速率间存在互作效应,其中在冷冻稀释液中添加0.6 mmol/L芦丁慢冷冻猪精子效果最好。     

猪精液冷冻技术试验

从稀释液和解冻液的筛选，平衡时间、平衡温度、冷冻剂型的选择等方面进行试验。试验结果：猪精液冷冻后活率为３０％－６０％；解冻后的复苏率为５１．４２％－５８．７２％；保存３０天的冻精与保存３６０天的冻精受胎率无明显差异（Ｐ＞０．０１）；冻精保存期一年以上；输精受胎率达６３．６４％（６０％－６６．６６％），平均窝产仔６．１头。     

稀释液中添加N-乙酰半胱氨酸对猪精液冷冻保存效果的影响

本文以手握法采集的猪精液为试验材料,以解冻后精子的活率、顶体完整率、低渗膨胀率、运动学参数(VAP、LIN、ALH、BCF)和膜脂质过氧化反应为评定标准,旨在探讨N-乙酰半胱氨酸对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明,在冷冻稀释液中添加1mmol/L的N-乙酰半胱氨酸可以显著地提高解冻后精子的活率和顶体完整率,降低精子的低渗膨胀百分率。在运动学参数方面,只有VAP显著升高,而对其它运动学参数没有影响。在冷冻稀释液中添加N-乙酰半胱氨酸对膜脂质过氧化反应没有影响。     

乌苏里貉精液冷冻技术研究

为探索乌苏里貉精液冷冻技术,通过试验,筛选出了适合于乌苏里貉精液的鲜精稀释液和冷冻保护液配方,摸索出了乌苏里貉精液的冷冻程序,包括降温、平衡和预冷冻等各技术环节以及冷冻精液的最适解冻温度,解冻后在生物显微镜下观察,精子活力均在4~5级。