莱芜猪和杜洛克猪心脏脂肪酸结合蛋白基因(H-FABP) 表达差异和肉质性状的关系

肌内脂肪(Intramuscular fat,IMF)含量是猪肉品质的一个主要的决定因子,心脏脂肪酸结合蛋白基因(heart fatty-acid-binding protein,H-FABP)是影响肌内脂肪含量的候选基因(Gerbens et al.,2001),本研究利用荧光定量RT-PCR方法.以遗传基础相距较远、肌内脂肪含量差异较大的莱芜猪和杜洛克猪为研究对象,对该基因在两品种背最长肌中的表达及与肌内脂肪等肉质性状相关关系进行了初步研究.     

脂联素(A dipoQ)及其受体基因(A dipoR1and A dipoR2)在猪背最长肌和腰大肌中的表达差异

脂联素(AdipoQ)是脂肪组织分泌的一种细胞因子,通过血液循环系统到达靶器官与其受体1和2(AdipoR1和AdipoR2)结合,参与脂质和能量代谢及胰岛素敏感性调节方面的生物学过程.利用荧光定量PCR技术检测了210日龄长白猪和荣昌猪的背最长肌和腰大肌组织中Adip0Q、AdipoR1和AdipoR2基因mRNA丰度的表达差异,并分析了基因相对表达量与猪肥胖指数(porcine obesityindex,POI)、肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量和背最长肌横截面面积的相关性.结果表明,在不同性别的长白猪和荣昌猪的两种肌肉组织中均检测到AdipoQ、AdipoR1和AdipoR2的表达,但表达量在品种、性别和组织间存在明显差异.AdipoQ和AdipoR1基因表达量与POI和IMF含量呈负相关,与背最长肌横截面面积呈正相关,但均未达到显著水平(P＞0.05),A dipoR2基因表达量与IMF含量呈显著负相关(P＜0.05).研究结果提示,AdipoQ、AdipoR1和AdipoR2表达量与脂肪沉积性状呈负相关,与肌肉生长性状呈正相关,这与其增加脂肪酸氧化,减少脂肪沉积的功能相符.     

鸡心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）基因多态性对肉质性状和组织表达的影响

肌内脂肪含量(intramuscular fat,IMF)被认为是影响畜禽肉质风味的主要因素,而作为影响畜禽肌内脂肪沉积的候选基因,心脏型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid-binding proteins,H-FABP)基因对鸡肌内脂肪的沉积起着重要的作用.本实验选择H-FABP基因的3个变异(SNP或插入缺失)对华南农业大学杏花鸡×隐性白洛克鸡全同胞家系F2代资源群进行了标记-性状关联分析,并利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术对不同组织、不同日龄及不同基因型的H-FABP基因mRNA表达水平上的差异进行了研究.结果表明,G+926A位点多态性与胸肌粗脂肪含量呈极显著相关(P<0.01);14 bp插入缺失位点与鸡肉质等性状关联分析的结果都是差异不显著(P>0.05),仅与70日龄和84日龄体重等生长性状的相关性达到极显著相关水平(P<0.01);C+2851T位点与腿肌粗脂肪含量显著相关(P<0.05).qRT-PCR及单倍型分析结果及关联分析结果相一致,进一步表明H-FABP基因可以做为IMF等肉质性状的侯选基因.     

猪背膘组织二脂酰甘油酰基转移酶基因(DGAT1和DGAT2)的发育性表达分析

酰基辅酶A:二脂酰甘油酰基转移酶(acyl-coA:diacylglycerol acyltransferase,DGAT)是催化甘油三酯合成最后一步反应的关键酶,包括DGAT1和DGAT2两种;阐明其在发育过程中的表达规律对于找到控制中外猪种脂肪沉积能力差异的基因十分必要.本研究分别用RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR的方法分别对莱芜猪和杜洛克3日龄仔猪和成年猪背膘组织中DGAT1和DGAT2 mRNA表达量进行了分析.结果表明,莱芜猪和杜洛克成年猪DGAT1 mRNA的表达量均高于3日龄仔猪,分别为5.0倍和2.7倍;成年猪DGAT2 mRNA表达量高于3日龄仔猪,分别为27.6倍(P＜0.01)和4.8倍(P＜0.05).两品种成年猪和3日龄仔猪DGAT2基因表达量的变化均高于DGAT1.品种间同一发育时期比较,杜洛克3日龄仔猪背膘组织中DGAT2基因的表达量高于莱芜猪,但成年莱芜猪背膘组织中DGAT2基因的表达量高于杜洛克,差异均不显著(P＞0.05).提示DGAT2基因可能与中外猪品种脂肪沉积能力的差异有关.     

金华猪×皮特兰猪F2的肉质及相关组织学特性与CAST和MyoG基因PCR-Msp I多态性的关系

选择具有优良肉质的本地金华猪与肉质较差的引进品种皮特兰猪杂交的金皮F2(金华猪×皮特兰猪)为研究对象,检测其CAST(calpastatin)和MyoG(myogenin)基因的PCR-Msp I多态性,并结合肌球蛋白重链(MHC)免疫组织化学方法,研究猪背腰最长肌的肌肉组织学特性,并对其进行图像分析.结果表明,金皮F2猪背腰最长肌MHCs阳性纤维(慢肌)的比例为7.62%,MHCf阳性纤维(快肌)为92.38%.CAST基因的PCR扩增产物长度为1404 bp,酶切后分为A(628 499 277 bp)和B(499 371 277 257 bp)两种等位基因;MyoG基因的PCR扩增产物长度为1050 bp,酶切后分为C(462 408 180 bp)和D(408 290 180 162 bp)两种等位基因.AA、AB和BB基因型频率分别为0.1795、0.5897和0.2308,A和B的基因频率分别为0.4743和0.5256.CC、CD和DD的基因型频率为0.3671、0.5696和0.0633,C和D的基因频率分别为0.6519和0.3481.统计结果表明,AA、AB、AB、CC、CD和DD基因型对眼肌面积、系水率、pH值、导电率等屠宰性状均无显著的影响.CAST基因的不同基因型对肌纤维的轴比有显著影响(P<0.05),AA基因型有产生较多轴比大(近似椭圆形)的肌纤维的倾向,而BB则控制形成更多的轴比小(近似于圆形)的肌纤维.具有AA基因型的个体有更多的肌间结缔组织,而具有BB基因型的个体的肌间结缔组织较少(P<0.05),AB基因型的个体介于两者之间.MyoG基因Msp I酶切后的各种基因型对肌肉的肌纤维大小和密度有显著影响,具有DD基因型的个体的肌纤维面积较大,而具有CC基因型者肌纤维密度最大.     

MyoG基因型对二花脸猪早期生长性状及肌肉组织学特性的影响

肌细胞生成素（myogenin,MyoG)是骨骼肌转录因子MyoG家族的一员，在肌细胞的形成过程中起着中心调控作用。利用21窝不同日龄的二花脸猪(Sus scrofa Erhua）共97头，根据日龄组分布分成1组（日龄阶段）：49d，2组：58－60d,3组：61－70d，4组：71－80d，5组：81－90 d，6组：228d,采用索氏脂肪抽提法和石蜡组织切片－图像分析法对其背景长肌及半腱肌的肌肉组织学特性进行了测定。根据MyoG基因PCR－RFLP多态性，对二花脸猪不同的MyoG基因型与相关性状即初生重、20日龄体重，断奶重及肌肉组织学特征的关系进行了分析。结果表明：（1）在二花脸猪不同的MyoG基因型间，初生重差异极显著（P＜0．01），但20日龄体重，断奶重无显著差异；（2）背最长肌的干肉样中的粗脂肪百分含量，肌纤维面积，肌纤维面密度、脂肪面密度在1－6日龄组内不同的MyoG基因型间差异均不显著，平均直径在1－5组增表现为AB＜BB，4组组内差异显著（P＜0．05），6组表现为AB＞BB；肌纤维密度在1－5组表现为AB＞BB，4组组内差异显著（P＜0．05），6组表现为AB＜BB；（3）半腱肌中除6组肌纤维密度表现为AB＜BB差异显著（P＜0．05），外其余性状表现为组内基因型间差异不显著。     

2个猪品种的背最长肌组织中兰尼定受体（RYR1）基因表达的发育性变化

本研究采用实时荧光定量PCR方法检测了长白猪和梅山猪背最长肌组织中RYR1基因mRNA表达量在初生（0月龄）、1月龄、2月龄、3月龄、4月龄和5月龄间的变化及其与体重、肌纤维面积（CSA）和肌内脂肪含量（IMF）之间的相关性。结果表明：长白猪的体重、CSA在多数月龄均高于梅山猪,而梅山猪的IMF在多数月龄均高于长白猪。两品种RYR1基因表达量的发育性表达模式极为相似,均表现为波动起伏中逐渐上升的趋势。相同月龄时,梅山猪RYR1基因的表达量均高于长白猪。本文初步揭示了两猪种生长发育过程中RYR1基因表达的发育性变化模式和品种差异,为进一步研究RYR1基因对猪肉质性状的影响提供了基础数据。     

猪APOA5和APOC3基因mRNA的表达差异及与肌内脂肪沉积的相关性分析

为了探究载脂蛋白A5（apolipoprotein A5,APOA5）基因和载脂蛋白C3（apolipoprotein C3,APOC3）基因组织表达差异及其与肌内脂肪（intramuscular fat,IMF）沉积的相关性,本研究利用荧光定量PCR方法分析APOA5和APOC3基因mRNA在可乐猪和江口萝卜猪7个组织中的相对表达量及其与IMF沉积的相关性。研究结果表明：APOA5和APOC3基因在可乐猪和江口萝卜猪的7个组织中均有不同程度表达,在肝脏中表达量最高,在皮下脂肪和背最长肌中表达量次之;APOA5基因在可乐猪多数组织中的表达量显著低于江口萝卜猪（p〈0.05）,而APOC3基因未呈现类似规律性;可乐猪中,除心脏外,其它组织均表现为APOC3基因mRNA表达量高于APOA5,江口萝卜猪心脏、肝脏、脾脏、小肠和背最长肌中同样呈现上述表达差异。相关及回归分析表明,IMF沉积量与可乐猪APOC3 mRNA表达丰度呈线性正相关（p〈0.05）。根据研究结果,可以推测APOA5和APOC3基因与IMF沉积有一定关联性。     

金华猪&#215;皮特兰猪F2的肉质及相关组织学特性与CAST和MyoG基因PCR—Msp Ⅰ多态性的关系

选择具有优良肉质的本地金华猪与肉质较差的引进品种皮特兰猪杂交的金皮F2（金华猪&#215;皮特兰猪）为研究对象,检测其CAST（calpastatin）和MyoG（myogenin）基因的PCR-MspⅠ多态性,并结合肌球蛋白重链（MHC）免疫组织化学方法,研究猪背腰最长肌的肌肉组织学特性,并对其进行图像分析。结果表明,金皮R猪背腰最长肌MHCs阳性纤维（慢肌）的比例为7．62％,MHCf阳性纤维（快肌）为92．38％。CAST基因的PCR扩增产物长度为1404bp,酶切后分为A（628＋499＋277bp）和B（499＋371＋277＋257bp）两种等位基因;MyoG基因的PCR扩增产物长度为1050bp,酶切后分为C（462＋408＋180bp）和D（408＋290＋180＋162bp）两种等位基因。AA、AB和BB基因型频率分别为0．1795、0．5897和0．2308,A和B的基因频率分别为0．4743和0．5256。CC、CD和DD的基因型频率为O．3671、0．5696和0．0633,C和D的基因频率分别为0．6519和O．3481。统计结果表明,AA、AB、AB、CC、CD和DD基因型对眼肌面积、系水率、pH值、导电率等屠宰性状均无显著的影响。CAST基因的不同基因型对肌纤维的轴比有显著影响（P〈0．05）,AA基因型有产生较多轴比大（近似椭圆形）的肌纤维的倾向,而BB则控制形成更多的轴比小（近似于圆形）的肌纤维。具有AA基因型的个体有更多的肌间结缔组织,而具有BB基因型的个体的肌间结缔组织较少（P〈0．05）,AB基因型的个体介于两者之间。MyoG基因MspⅠ酶切后的各种基因型对肌肉的肌纤维大小和密度有显著影响,具有DD基因型的个体的肌纤维面积较大,而具有CC基因型者肌纤维密度最大。     

CAST基因5'调控区的多态性与鸡肉质性状的关联性分析

为探讨钙蛋白酶抑制蛋白(Calpastatin,CAST)基因5'调控区的多态性与鸡肉质性状的关系,本研究以中国农业科学院家禽研究所选育的F、D、Y、B和S3等5个优质肉鸡(Gallus gallus)品系为试验素材,利用聚合酶链式反应限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测CAST基因的SNPs,并分析其多态性与肌肉pH值、维生素B1、肉色、系水力、肌内脂肪和肌纤维密度之间的关系.结果显示,在距CDS-198位点发现1个突变位点(G→A),G-198A位点检测到3种基因型GG、GA和AA,相关分析显示,AA基因型个体的肌内脂肪和肌纤维密度显著高于GG型和GA型个体(P＜0.05),而其他肉质性状无显著差异(P＞0.05).由此可见,对于肉质性状而言,AA是最有利基因型,本研究结果初步表明CAST基因G-198A多态位点的A等位基因是提高鸡肉质性状的一个潜在的DNA标记.     

与PPAR基因连锁的5个微卫星标记与猪肉质性状的相关性*

从已公布的猪13号染色体连锁图谱中选择与PPAR(peroxisome proliferator activated receptor)基因连锁的5个微卫星位点，在苏太猪群体中对这些位点进行群体遗传学特性分析。结果表明, 各位点等位基因数6~9个，杂合度0.59~0.81，多态信息含量0.51~0.76；背膘厚与嫩度、系水力和肌内脂间的相关系数分别为-0.358、0.020和0.311，且背膘厚与嫩度及肌内脂间的相关性达到极显著水平(P <0.01）。方差分析结果显示, 微卫星位点SW482对背膘厚影响显著(P <0.05)；SW937对系水力影响达到极显著水平(P <0.01)；其它位点S0222、S0281和S0021对各性状影响均未达到显著水平(P >0.05)。     

Volatile profiles of dry-cured meat products from three different Iberian x Duroc genotypes

Volatile profiles of two Iberian dry-cured products, dry-cured loin and ham, from three different Iberian x Duroc genotypes, was assessed. Three groups of 10 pigs, each (5 males and 5 females) from different genotypes, were studied: GEN1 = male Iberian x female Duroc1; GEN2 = male Duroc1 x female Iberian; and GEN3 = male Duroc2 x female Iberian. The genotype Duroc1 (DU1) corresponded to pigs selected for the production of dry-cured meat products (hams, loins, and shoulders), with a high level of fattening, while the genotype Duroc2 (DU2) corresponded to animals selected for meat production. Genotype slightly affected the volatile profiles of both dry-cured meat products, although dry-cured loin from GEN3 showed higher hexanal content. Dry-cured loin showed a volatile profile very different to that found in dry-cured ham. Volatile compounds of dry-cured meat products were mainly originated by lipid and protein degradation. Most of the volatile detected in both meat products came from lipid oxidation such as acids, aldehydes, ketones, alcohols, and hydrocarbons. In addition, a high proportion of volatile compounds from the Maillard reaction was found. Branched aldehydes and some sulfur and nitrogen compounds have their origin in the amino acids degradation by the Strecker reaction, while branched alcohols and acids come from the lipid oxidation of branched aldehydes. Dry-cured ham showed a higher number and a higher level of compounds with origin in protein and lipid degradation than dry-cured loin, which agrees with the longer ripening of the hams (24 months) with respect to the loins (4 months). In dry-cured loins, apart from these compounds, seasoning mixture provides high amount of volatiles, such as terpenes (from paprika and oregano) and sulfur compounds (from garlic), which have great importance in the overall aroma of this product.     

运输季节对生猪应激及猪肉品质的影响

为了研究运输季节对猪宰前应激及宰后猪肉品质的影响,该文以杜大长三元杂交猪为对象,测定了夏、秋和冬3个季节运输条件下猪的血液生化指标、血细胞系数以及宰后猪肉温度、p H值、保水性、色泽和剪切力的变化。结果表明:秋季运输猪血液中白细胞数、血红蛋白、红细胞压积、葡萄糖、促肾上腺皮质激素和皮质醇浓度显著低于夏季和冬季组(P0.05),胴体表面皮肤损伤也显著降低(P0.05)。运输季节对宰后猪肉胴体温度、p H值、色泽及保水性有显著性影响(P0.05)。与秋季运输相比,夏季运输猪宰后45 min胴体温度、滴水损失率、L值显著升高,a*值和剪切力显著下降(P0.05);冬季运输猪宰后猪肉a*值增加(P0.05),但滴水损失率与秋季组相比并无显著性差异(P0.05)。因此猪在秋季运输能显著降低宰前动物应激,提高宰后猪肉品质,夏季和冬季如能对运输环境分别进行防暑和保暖处理可能会对猪应激反应和猪肉品质产生积极的作用。该研究结果对于屠宰行业实际生产过程中缓解生猪宰前运输应激,改善动物福利以及提高猪肉品质提供参考。     

待宰时间和致晕方式对生猪应激及猪肉品质的影响

国内外对于生猪宰前因素已经做过大量的研究,但总体来讲,对于待宰时间的研究一直没有形成定论;由于生产成本等问题,国内对于CO2致晕的应用与研究均较少;对于不同的电击晕方式,在同一体系下的成批量的比较涉及很少,另外对于应激指标的选择一直没有统一的标准。该文研究了在电击晕、二氧化碳致晕和不同待宰时间(3、6和12h)条件下,杜大长三元杂交猪血液应激指标和猪肉品质的变化。结果显示:待宰3h的生猪血液指标显著低于另外2种方式,而二氧化碳致晕方式使得生猪血液中乳酸含量、肌酸激酶含量、皮质醇含量和乳酸脱氢酶含量显著低于不击晕和电击晕方式。不同待宰时间对胴体背最长肌宰后24h的温度、pH值、蒸煮损失、明亮度、红色度和黄色度没有显著影响(P>0.05),但是待宰3h的生猪胴体宰后45min的pH值和温度明显较低,汁液损失和剪切力也显著小于待宰6和12h的值;而与不击晕和电击晕方式相比,二氧化碳致晕产生的猪肉宰后45min的pH值和温度较低、汁液损失较大、明亮度较大、红色度和黄色度值较小。因此生猪待宰3h并通过二氧化碳致晕产生的应激反应与猪肉品质影响最小。生产中应加强对待宰时间和致晕方式的控制,并注意利用各种处理方法对肉品质影响的协同作用,从而最大程度实现猪肉品质的改良。     

面向从江香猪选育的肌内脂肪活体超声无损测定

为探索从江香猪肌内脂肪含量的超声活体预测方法,该文选取110头从江香猪育肥猪开展活体测定,以超声图像为研究对象,利用Matlab R2015b软件提取灰度-梯度共生矩阵(gray gradient cooccurrence matrix,GGCM)及4个角度灰度共生矩阵(gray level cooccurrence matrix,GLCM)图像纹理特征参数。通过逐步回归分析法构建肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量预测模型,再将此模型应用于另外42头从江香猪,验证模型准确性。逐步回归分析结果表明,背膘厚、灰度平均和梯度熵3个参数指标达到显著水平(P0.05),回归预测模型决定系数R2=0.369。线性回归及相关分析得出,估测值与实测值间RMSE为0.686,皮尔逊积矩相关系数(pearson correlation coefficients)和斯皮尔曼相关系数(spearman correlation coefficients)分别为0.592和0.640(P0.001)。该研究所构建的拟合回归模型可应用于从江香猪肌内脂肪活体预测,为后期高肌内脂肪含量从江香猪的选育提供更为便捷有效的手段。     

猪MC4R基因Asp298Asn位点的多态性及其与商品猪背膘厚的关系

黑素皮质素受体4 ( melanocortin 4 receptor, MC4R) 是G 蛋白耦联受体( G protein coupled receptors,GPCRs) 超家族的一个成员, 在人和小鼠的体重、能量稳态和采食量的调控中发挥重要作用。本研究采用PCR-RFLP技术对MC4R的298位点错义突变（Asp298Asn）在莱芜猪、大莱二元杂交猪和商品猪中的多态性进行了检测,对该突变与商品猪背膘厚的关系进行了关联分析。结果表明,在33头莱芜猪中只检测到11基因型,而在大莱二元杂交猪和商品猪中11、12和22基因型均有分布,且等位基因1的频率均高于等位基因2;在该突变位点三个群体均处于Hardy-Weinberg平衡状态（P>0.05）。商品猪不同基因型个体背膘厚差异显著,22基因型个体的背膘厚显著高于12基因型（P <0.01）和11基因型（P <0.05）个体。因此,MC4R基因298位点的Asp298Asn错义突变与商品猪的背膘厚有关,可以作为以西方猪种为杂交亲本的商品猪背膘厚的分子标记。     

Relationship between kinase phosphorylation, muscle fiber typing, and glycogen accumulation in longissimus muscle of beef cattle with high and low intramuscular fat

The objective of this study was to examine the association of adenosine monophosphate (AMP)-activated protein kinase (AMPK) with glycogen content in bovine muscle and their links with intramuscular fat (IMF) and muscle fiber type composition. Five steers with high intramuscular fat (High IMF, IMF content is 5.71 +/- 0.36%) and five steers with low intramuscular fat (Low IMF, IMF content is 2.09 +/- 0.19%) in the longissimus thoracis muscle (LM) were selected for immunoblotting, glycogen, and myofiber type composition analyses. The glycogen content was higher in Low IMF muscle than in High IMF muscle (1.07 +/- 0.07 versus 0.85 +/- 0.08 g/100 g muscle, P < 0.05). Phosphorylation of the AMPK alpha subunit at Thr 172, which is correlated with its activity, was lower (P < 0.05) in High IMF compared to Low IMF. In agreement with the lower AMPK phosphorylation in High IMF muscle, the phosphorylation of acetyl-CoA carboxylase (ACC) was also lower (P < 0.05) in High IMF muscle than in Low IMF muscle. Glycogen synthase kinase 3 (GSK3) down-regulates glycogen synthesis through phosphorylation of glycogen synthase. The phosphorylation of GSK3 in High IMF was lower (P < 0.05) than that in Low IMF, which should down-regulate glycogen synthase activity and reduce the glycogen content in High IMF beef. Type IIB myosin isoform was absent in beef muscle. No noticeable difference in myosin isoform composition was observed between Low and High IMF muscle. In summary, High IMF cattle had lower LM glycogen levels than low IMF cattle, and AMPK activity was less in High IMF than in Low IMF cattle. The difference in glycogen content between Low and High IMF muscle was not correlated with muscle fiber composition. This data shows that LM lipid and glycogen metabolisms are affected by AMPK activity. Thus, AMPK may be a molecular target to alter IMF and glycogen levels in beef muscle.     

Salt-induced changes in pork myofibrillar tissue investigated by FT-IR microspectroscopy and light microscopy

FT-IR microspectroscopy and light microscopy were used to investigate pork muscle musculus semitendinosus samples, taken from three animals, that were subjected to brine salting at different concentrations (0.9, 3, 6, and 9% NaCl). Differences in spectral characteristics and in microstructure were observed in meat from animals differing in initial pH and varying salt concentrations. The FT-IR data displayed changes in the amide I region from 1700 to 1600 cm(-1). This spectral range was analyzed by principal component analysis (PCA) and partial least-squares regression (PLSR). These methods revealed correlations between the spectral data and the different animals, salt content, moisture content, pH value, and myofiber diameter. A shrinking share of alpha-helical components was related to an increase in salt concentration in the muscle. At the same time, a greater share in nonhydrogenated C=O groups (1668 cm(-1)) was related to an increase in salt concentration in the meat. The share of aggregated beta-strands differed with respect to the different animals but was not influenced by salt concentration. The meat at higher pHs (>6) had less aggregated beta-strands than that at lower pHs (5.6-5.7). It could be demonstrated that simultaneous with changes in microstructure, pH value, salt, and moisture content were alterations in the protein amide I region as measured by FT-IR microspectroscopy, revealing a relationship between these biophysical and chemical parameters and secondary protein structure attributes.