Bt杀虫晶体蛋白的研究概述

苏云金芽孢杆菌 (Bt)杀虫晶体蛋白对许多农业害虫有很高的活性。许多试验表明Bt晶体蛋白之间具有协同增效作用 ,蛋白的混配比单一的蛋白具有更高的活性。本文对Bt杀虫晶体蛋白分类方法、蛋白活性以及蛋白之间的协同作用进行综述。     

昆虫中肠Bt毒素受体氨肽酶N的研究进展

氨肽酶N(APN)是昆虫中肠中主要的Bt毒素受体,它与Cry毒素特异结合后,毒素插入细胞膜,在膜上形成孔洞,细胞裂解,最终导致昆虫死亡.APN的变异导致昆虫对Bt敏感性下降甚至产生抗性.就APN的结构特征、分类、APN与Cry毒素的相互作用机制以及APN与昆虫Bt抗性的关系作一综述.     

苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因的研究进展

从Bt基因的分类、结构和特性、杀虫机理、在农业上的应用及昆虫对Bt产生抗性的机制等方面进行了论述。     

苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因工程研究进展

概述苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白的结构、功能及其基因分类,综述苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白的基因工程研究及应用。     

杀虫晶体蛋白基因CrylAc在生防菌B-916中的表达

枯草芽孢杆菌生防菌B-916对水稻纹枯病和稻曲病具有良好的防治效果，为拓宽其防治范围，兼治病虫害，本研究采用B-916内源芽孢形成期特异表达启动子成功实现了杀虫晶体蛋白基因CrylAc在野生型生防菌B-916的高效表达，成功构建了兼治水稻病、虫害的工程菌E-916。经SDS—PAGE电泳分析，异源CrylAc基因在对数生长后期其表达产物杀虫晶体蛋白占到胞内总蛋白的28％。杀虫和抑菌试验结果表明构建的工程菌对水稻二化螟具有杀虫活性，且保持了其原有对水稻纹枯病的拮抗性能。构建的工程菌具有良好的分离稳定性，连续培养25h，稳定性高于95％；连续培养50h稳定性高于70％；连续稀释培养50h，质粒丢失频率为每代小于10^-3个。     

十株Bt野生菌杀虫晶体蛋白及基因型分析

利用PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE蛋白分析方法,分析了从我国千山地区不同森林地带土壤中分离的10株Bt菌的32类杀虫晶体蛋白基因类型和表达蛋白。研究表明,电镜照片显示晶体形状较为多样,有长菱形、菱形、方形、球形。同时含有cry1、cry7、cry16类基因的有1株菌,同时含有cry1、cry2类基因的有1株菌,含有cry30类基因的有1株菌,含有cry1基因的有3株菌,4株菌不含所鉴定的32类基因。同时也发现,绝大多数含有cry1基因的菌株表达了130ku蛋白,含有cry2基因的菌株表达了60ku的蛋白,含有cry30基因的菌株表达了30ku的蛋白。     

苏云金芽胞杆菌ICP基因工程菌的研究进展

综述了近年来国内外利用杀虫细菌苏云金杆菌ＩＣＰ基因构建工程菌，包括植物根际定居菌、植物疫苗、重组杀蚊蓝细菌和杆状病毒Ｂｔ重组菌等研究的历程及现状、成功及存在问题，文中亦讨论了该研究领域的应用前景。     

植物Bt抗虫基因工程研究进展

本文概述了苏云金芽孢杆菌的分类,杀虫蛋白的特性,杀虫蛋白与基因型之间的关系,Bt杀虫蛋白基因在植物抗虫基因工程中的应用;讨论了它在植物Bt抗虫基因工程研究中存在的问题及其解决的途径,并提出了今后可能发展的方向。     

杀虫晶体蛋白基因Cry1Ac在生防菌B-916中的表达

枯草芽孢杆菌生防菌B-916对水稻纹枯病和稻曲病具有良好的防治效果,为拓宽其防治范围,兼治病虫害,本研究采用B-916内源芽孢形成期特异表达启动子成功实现了杀虫晶体蛋白基因Cry1Ac在野生型生防菌B-916的高效表达,成功构建了兼治水稻病、虫害的工程菌E-916.经SDS-PAGE电泳分析,异源Cry1Ac基因在对数生长后期其表达产物杀虫晶体蛋白占到胞内总蛋白的28%.杀虫和抑菌试验结果表明构建的工程菌对水稻二化螟具有杀虫活性,且保持了其原有对水稻纹枯病的拮抗性能.构建的工程菌具有良好的分离稳定性,连续培养25 h,稳定性高于95%;连续培养50 h 稳定性高于70%;连续稀释培养50 h,质粒丢失频率为每代小于10-3个.     

苏云金杆菌杀虫晶体蛋白基因crylA的克隆及特征分析

苏云金芽孢杆菌猝倒亚种(Bacillus tburingiensis subsp sotto)对鳞翅目幼虫有高毒力。根据crylA类基因序列设计特异引物，应用PCR技术从该茁株中扩增得到一大小约为3．6kL的DNA片段。将获得的片段克隆至pGEM7zf中并转化大肠杆菌DH5α。在ABI PRISM377自动测序仪上对其5’及3’端进行部分测字，结果表明其核苷酸序列与crylA基因高度同源。     

苏云金芽孢杆菌的研究发展史与"十一五"立项思考

论述了苏云金杆菌研究发展史以及主要研究领域和今后的研究热点,并对“十一五”立项进行了探讨。     

Bt油悬浮剂防治马尾松毛虫试验

试验表明,农药新剂型———8000IU·μL-1Bt油悬浮剂防治马尾松毛虫效果好,在每公顷用药量3000mL情况下,第5天防效可达90%以上,同时可提高效率降低成本。     

苏云金芽孢杆菌外孢囊蛋白基因敲除载体的构建

以苏云金芽孢杆菌(Bt)库斯塔克亚种(subsp.kurstaki) 8010为研究材料,通过PCR技术获得Bt8010的外孢囊蛋白基因上下游序列,以含有卡那基因的pDG780质粒为中间载体,通过酶切、连接和PCR,构建含外孢囊蛋白基因上游序列、卡那基因、外孢囊蛋白基因下游序列的基因敲除载体pRN5101UKD,为后续...     

几株Bt菌株对紫外线的抗性研究

[目的]寻求高抗紫外线的Bt菌株。[方法]采用不同照射时间的紫外线(UV)对1株野生型Bt菌株及3株Bt菌株Bt001、Bt200、Bt087进行照射处理后再置于32℃培养箱中培养16h。[结果]Bt野生菌株在UV处理3min后已基本全部失活,而Bt001、Bt200、Bt087在UV处理8min后仍有活性。菌株Bt001、Bt200、Bt087对UV的抗性均强于野生Bt菌株,其中,Bt200相对弱些,UV处理9min后已无菌落;Bt087最弱,UV处理8min后已无菌落;而菌株Bt001对UV的抗性最强,UV处理13min后仍有菌落出现,说明不同的Bt菌株,其遗传背景是不同的。另外,Bt001经紫外线照射9min培养16h后发现有9个菌落发生明显的变异,菌落呈棕黄色,菌落明显比原始菌落小,油镜下观察涂片,其菌体比原始菌体小,说明Bt001为明显发生突变的菌株。[结论]菌株Bt001对UV的抗性最强。     

东北地区土壤中4株Bt菌株的研究

对从东北地区土壤中分离出的4株编号分别为HB-4、HB-11、HB-37和HB-69的苏云金芽孢杆菌菌株进行了形态特征、发酵特性、生化反应、鞭毛血清型鉴定及毒力测定的研究。结果表明,4株菌株的血清型分别为:H3abc、H14、H5ab和H3abc。4株菌株对小菜蛾均有较高毒力,HB-37对玉米螟有较高毒力,HB-4对玉米螟有低毒,HB-11对尖音库蚊有低毒。     

苏云金芽孢杆菌-菌株20增效物质的筛选

以2龄小菜蛾幼虫为试虫,研究了NaH2PO4、CuSO4、Success、硼酸、柠檬酸、阿维菌素6种助剂对Bt 20的增效作用。结果表明:Success对Bt 20的增效效果最好。小菜蛾在第2天的校正死亡率达到42.2%~95.6%,第3天的校正死亡率达到48.9%~100.0%,第4天校正死亡率达到50.2%~100.0%。     

化学添加剂对Bt防治棉铃虫的增效作用

测定了 2 0种化学添加剂 ,在添加 1 .0 %的剂量下对Bt毒杀棉铃虫幼虫的增效作用。初筛和复筛结果表明 ,CuSO4( 1 .0 % )、ZnCl2 ( 1 .0 % )和硼酸等 6种物质有增效作用 ,其中CuSO4的增效作用最好 ,增效比为 1 5 .67,其次为ZnCl2 ,增效比为 1 1 .2。     

无机化学添加剂与Bt混合对小菜蛾杀虫效果的影响

供试 ６ 种无机化学添加剂对 Ｂｔ的杀虫效果的影响有显著差异,其中添加 Ｋ２ Ｃ Ｏ３ 、 Ｍ ｇ Ｃｌ２ 的增效最显著,分别较单用 Ｂｔ增效了 １．０７５０ 倍和 ０．９４１５ 倍．添加 ０．０１ ｇ· Ｌ－ １ 的 Ｚｎ Ｓ Ｏ４ 也有一定的增效作用（０．１５３５倍）．而硼砂、 Ｃａ Ｃ Ｏ３ 对 Ｂｔ无增效作用． Ｆｅ２ （ Ｓ Ｏ４ ）３ 反而有极显著的减效作用．此外,添加剂的质量浓度对 Ｂｔ的杀虫效果也有极大的影响,因此在实际应用添加剂时要注意最佳质量浓度的选择     

棉铃虫对苏云金杆菌(B.t)的抗性监测及延缓抗性策略

室内采用Ｂ．ｔ连续多代汰选的棉铃虫,对Ｂ．ｔ能产生较强的抗药性,抗性倍数为２４．１３。采用浸叶法测定宿县、蒙城、安庆棉区棉铃虫对Ｂ．ｔ的抗性,结果表明：宿县、蒙城淮北棉区,棉铃虫对Ｂ．ｔ已产生早期低度抗性,抗性倍数分别为３．４１和２．５２。安庆棉区棉铃虫对Ｂ．ｔ尚未产生抗性,抗性倍数为１．３７。讨论了治理抗性的对策。     

苏云金杆菌深层发酵补料分批培养工艺研究

补料培养与分批培养进行平行对比实验结果 ,补料培养相对于分批培养 ,培养过程Bt最大菌数平均提高了 4 0亿 /ml,晶体含量平均提高了 0 83mg/ml,毒力效价平均提高 1 80 0IU/μl。且补料工艺对生长高峰期溶氧的改善有明显的效果。