茄病镰刀菌毒素的研究Ⅰ．毒素的分离、鉴定及生物测定

将从豌豆根腐病病株分离获得的茄病镰刀菌（Ｆｕ）Ｄ－０１６菌株接种在ＰＳＤ培养液中，且２５℃恒温箱内黑暗静止培养１４天后，可获得具有毒性的培养滤液。培养滤液及提取的粗毒素经生物测定都具有植物毒性效应。粗毒素经分离纯化后进行的初步鉴定表明，该菌可产生茄病镰刀菌烯醇和Ｔ＿２、二醋酸草镰刀菌烯醇、Ｈ－Ｔ＿２等毒素。     

茄子黄萎病菌的研究及其毒素的生物测定

从闵行区虹桥乡茄子上分离到的Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ，经过接种试验，形态鉴定，温度测定后确定Ｖｅｒｔｉ－ｃｉｌｌｉｕｍｄａｈｌｉａｅｋｌｅｂ，并且用查氏液体培养该菌制成粗毒素对茄苗进行毒性测定，结果表明所制备的粗毒素对茄苗具有毒害作用，毒素经６０℃温度处理４２ｈ其毒性仍保持不变。     

茄子黄萎病菌的研究及其毒素的生物测定

从闵行区虹桥乡茄子上分离到的Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ，经过接种试验、形态鉴定、温度测定后确定为Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｄａｈｌｉａｅｋｌｅｂ，并且用查氏液体培养该菌制成粗毒素对茄苗进行毒性测定。结果表明所制备的粗毒素对茄苗具有毒害作用，毒素经６０℃温度处理４２ｈ，其毒性仍保持不变．     

茄病镰刀菌毒素的研究Ⅱ．毒素与豌豆品种抗病性的关系

茄病镰刀菌（Ｆｕｓａｒｕａｎｓｏｌａｎｉｆ．ｓｐ．ｐｉｓｉ）是甘肃中部干旱山区豌豆根腐病的主要病原菌。在研究了该菌毒素的分离、鉴定及生物测定的基础上，为探索利用毒素间接测定品种的抗性，进一步研究了毒素与病程的关系，测定了１７个豌豆品种对该菌的抗性及对其毒素的耐性之间的相关性。结果表明：毒素与该病病程密切相关；豌豆品种对茄病镰刀菌的抗性与其对１０％产毒培养滤液的耐性之间呈显著的正相关，并且有直线回归关系。因而认为，用测定该毒素对豌豆胚根生长抑制率的方法来代替活菌间接测定品种的抗性是可行的。     

西瓜种传尖孢镰刀菌致病性及其粗毒素对种子发芽的影响

采用浸胚根法和浸根法对京欣一号西瓜种壳分离得到的尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)进行致病性试验.结果表明:从接种后发病幼苗上分离得到的分离物与最初接种所用的镰刀菌菌落形态和生长速率等性状基本相同,采用相同的引物对rDNA进行PCR扩增获得的核苷酸序列完全相同,说明这二者为同一种菌,从而证明西瓜种子上所携带的尖孢镰刀菌具有致病性,在国内首次报道了西瓜种传尖孢镰刀菌具有致病性.西瓜种传尖孢镰刀菌培养滤液和粗毒素提取物处理西瓜种子后,种子的发芽势、发芽率和发芽指数均显著降低,其中发芽势下降了16.7%～29.0%,发芽率下降了14.4%～22.3%,发芽指数下降了19.1%～37.1%,说明培养滤液和粗毒素提取物可影响西瓜种子发芽.     

甘蓝种传尖孢镰刀菌粗毒素的研究

为研究甘蓝感病(北农早生)和抗病(珍奇)品种种传尖孢镰刀菌Fusarium-CG和Fusarium-HM的培养滤液和粗毒素对种子发芽的影响,采用乙酸乙酯和乙醚萃取法提取粗毒素中的镰刀菌酸并利用HPLC法进行定量分析,利用粗毒素浸渍甘蓝幼苗根部测定其对幼苗的致枯萎作用.结果表明:Fusarium-CG和Fusarium-HM的培养滤液和粗毒素对种予的发芽具有明显的抑制作用;粗毒素浸溃甘蓝幼苗根部能够引起幼苗枯萎;其粗毒素中镰刀菌酸质量浓度分别为552和105/μg/mL,并且粗毒素对甘蓝的致害作用随着镰刀7菌酸含量的升高和处理时间的延长而加重,当用镰刀菌酸质量浓度为25 μg/mL的粗毒素处理甘蓝幼苗24 h后,幼苗病情指数在2.6～15.9之问,而用镰刀菌酸质量浓度为100μg/mL的粗毒素处理甘蓝幼苗96 h后,幼苗病情指数在78.o～97.8之间.浸溃24 h时粗毒-t对感病品种的致萎作用强于抗病品种,当用镰刀菌酸质量浓度为25μg/mL 的 Fusarium-CG和Fusarium-HM的粗毒素处理甘蓝幼苗24h后,抗病(珍奇)品种的病情指数分别为2.6和4.2,而感病(北农早生)品种的病情指数分别为15.2和15.9.     

几种植物致病镰刀菌毒素滤液的生物测定

于1985—1986年采集了西瓜枯萎病菌(F. Oxysporum f. sp. niveum)等8种致病镰刀菌,经分离、接种、再分离、纯化,获得纯培养,经鉴别培养基鉴别后,又对几种尖孢菌进行交互接种试验,证明其为不同专化型。分别做液体振荡培养,用毒素滤液漫苗法,观察幼苗的病状表现,从而确定毒素的有无。结果证明,西瓜枯萎病菌等六种致病镰刀菌均能产生毒素。     

玉米茎腐病菌毒素的初步研究(Ⅰ)

本文在国际上首次报道了引起玉米茎腐病的禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)可在Richard和小麦粒培养基上产生毒素。培养物经过滤、离心或甲醇浸提,再通过活性炭柱吸附和甲醇洗脱获得毒素晶体。毒素生物活性测定表明:无论是培养滤液还是粗提纯毒素对玉米种子萌发、胚根和胚芽生长有明显的抑制作用,对3叶期幼苗的叶片亦有致萎作用,同时还能使根系发生褐变,与病株根系症状类似。电导测定证明,2×10~3μgg1的粗毒素和培养液都可引起叶片细胞膜损伤。     

赤霉菌毒素不同制剂对小麦的生物效应

用赤霉菌病麦粒水浸滤器、蔡氏液体培养滤液及马铃薯液体培养滤液处理小麦不同抗性品种的萌动种子，测定其胚根、胚芽生长长度，结果表明，三种培养滤液体积分数大时可抑制根、芽生长，体积分数小时则促进其生长，具双重生物效应。Ｔ－２毒素仅具抑制效应，病菌滤液和纯毒素均可用于鉴定小麦品种抗赤霉病性。     

赤霉菌毒素不同制剂对小麦的生物效应

用赤霉菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）病麦粒水浸滤液、蔡氏（Ｃｚａｐｅｋ）液体培养滤液及马铃薯液体培养滤波处理小麦不同抗性品种的萌动种子，测定其胚根、胚芽生长长度．结果表明，三种培养滤液体积分数大时可抑制根、芽生长，体积分数小时则促进其生长，具双重生物效应．Ｔ－２毒素仅具抑制效应．病菌滤液和纯毒素均可用于鉴定小麦品种抗赤霉病性．     

坪草腐霉病菌毒素产生除草活性物质的条件优化

从多年生黑麦草上分离得到了5株腐霉菌(编号依次为PA1、PA2、PA3、PA4、PA5),通过鉴定,PA1和PA5菌株为瓜果腐霉菌(Pythiumaphanidermatum)。将所得5株菌株分别在PD培养基、PS培养基、玉米粉培养基、改良Fries培养基、Czapek-Dox培养基和Richard培养基中进行培养,所得培养滤液、粗毒素对马唐和反枝苋的除草生物活性进行了测定。结果表明,在PD培养基中所产生的毒素除草生物活性最强,在供试的5株菌株中以PA1菌株所产生的毒素除草活性最强。PA1菌株在PD培养基中培养所得粗毒素对马唐、反枝苋、虎尾草、金色狗尾草、野燕麦、稗草、藜7种杂草的生长有明显的抑制作用;对玉米、小麦有轻微药害,而对大豆安全。试验发现,PA1菌株产毒的适宜pH值为7.0,以培养5d的毒素除草活性最强;在100~150r/min条件下,振荡培养所得粗毒素的除草活性要明显高于静止培养。     

暗孢节菱孢菌非蛋白类毒素的基本性质研究

用改进的Fries培养基在最佳条件下培养出的暗孢节菱孢菌[Arthrinium phaeospermum(corda)M.B.Ellis]滤液,采用硫酸铵沉淀制备蛋白类、非蛋白类粗毒素。经致病性检测,前者生物活性低于后者小分子毒素成分。基本性质研究显示非蛋白粗毒素有一定专化性,但专化性不强,介于专化性与非专化性毒素之间;具有较强的热和紫外线稳定性、对pH敏感,易受碱性物质影响;9种不同极性物质对毒素的生物活性有不同影响,该毒素可能为极性较大的物质。     

生物工程应用于作物育种的试验研究 第5报 水稻抗稻瘟病细胞突变体的筛选

以稻瘟病病原菌毒素滤液为选择压力,在水稻种胚愈伤组织的诱导.继代和分化过程中,筛选出一批水稻抗病细胞突变体。稻瘟病病原菌毒素滤液可代替孢子悬液直接用于抗病细胞突变体筛选与鉴定。在愈伤组织诱导培养基中加入45％的毒素滤液,或在愈伤组织诱导培养基与分化培养基均加入30％或45％的毒素滤液,效果较好。经毒素处理筛选出的绿苗,其后代有一部分无性系的抗病性是稳定的,可供选择利用;过氧化物酶同工酶与植株和愈伤组织的抗病性有关,可作为选择抗病突变体的指标。本文还对完善这项试验及与水稻育种有关的问题,进行了初步讨论。     

花生叶腐病菌毒素提取及致病性研究

本试验用改良的Richard培养液培养花生叶腐病菌,滤液经活性炭吸附,甲醇洗脱,旋转蒸发得到粗毒素。对粗毒素进行生物活性检测,发现粗毒素在花生叶片上能形成花生叶腐病典型症状,并可抑制花生胚根的生长。经检测发现该毒素对花生细胞膜有破坏作用,并能降低花生叶绿素含量。毒素的化学成分含有蛋白质和可溶性糖。     

HMC毒素培养滤液诱导C103玉米抗小斑病的研究

以1对同核异质玉米C103自交系为试材,采用离体叶片法检测适宜浓度的玉米小斑病菌C小种(HMC)毒素培养滤液来诱导玉米的抗病性.结果表明:对照的玉米病斑面积是处理组的7.9～12.2倍,差异极显著,并以1:60预处理效果最佳;经0～72 h的动态检测,与对照相比,诱导玉米的过氧化物酶活性平均提高了57.8%,苯丙氨酸解氨酶活性平均提高了52.9%,有害物质丙二醛的含量平均降低了38.2%;低浓度HMC毒素培养滤液能够作为激发子诱导专化寄主玉米获得抗病性.     

菌核菌粗毒素对向日葵种子及幼苗的毒害作用

利用向日葵菌核菌粗毒素和病菌培养滤液处理向日葵的种子和幼苗,研究粗毒素对种子萌发、胚根生长的影响,对幼苗的致萎作用、对幼苗离体叶片的致病作用以及对叶片细胞膜透性的影响。结果表明:菌核菌粗毒素对向日葵种子萌发、胚根伸长和幼苗生长都有毒害或抑制作用,对离体叶片也具有强烈的致病作用,且粗毒素和培养滤液引起的症状基本相同。同时,草酸毒素可作用于寄主细胞膜,引起细胞膜透性的增加,造成膜功能的紊乱。     

C型魏氏梭菌外毒素产生的主要影响因素研究

从不同菌株、不同培养基、不同培养温度和不同培养时间对C型魏氏梭菌在培养过程中毒素产生的影响及不同菌株的交叉保护力方面进行了研究.结果表明,在3株C型魏氏梭菌中.C_(59-2)株在相同培养条件下产生的毒素最高,肉肝胃酶消化汤更有助于该菌株产生高滴度的致死性毒素,并且在35℃培养16-20 h后可产生较高滴度的致死性毒素,1μL魏氏梭菌培养物上清液即可致8/8小鼠死亡,不同菌株之间具有较好的交叉免疫力,这些结果为研制C型魏氏梭菌高效疫苗打下了基础.     

蜡蚧轮枝菌Lecanicillium lecanii次生代谢产物对烟粉虱Bemisia tabaci的忌避作用模型

蜡蚧轮枝菌Lecanicillium lecanii(Z imm.)viegas V l6063菌株在2种不同培养基发酵培养后,经萃取、干燥浓缩得到4种不同的毒素粗提物(次生代谢产物),用均匀设计法设计实验方案研究了4种不同毒素粗提物对4种不同寄主植物上烟粉虱Bem isia tabaci(Gennad ius)成虫的忌避作用,并构建了模型,分析结果表明,忌避作用与毒素粗提物浓度显著相关,忌避率随毒素粗提物浓度增大而增大,1 g/L浓度的毒素粗提物忌避率与烟粉虱的寄主植物相关不显著,毒素的忌避作用与培养基相关不显著,从菌株发酵的菌丝体和发酵液中提取的毒素粗提物的忌避率差异不显著。     

水稻纹枯病菌粗毒素提取及活性初步研究

1材料与方法 1．1材料供试水稻品种为金优602,购于广东省良种引进服务有限公司。供试菌株为水稻纹枯病菌菌株GD-11,取自该实验室的菌种保藏室。