FBXO31基因促进顺铂诱导的肝癌细胞凋亡

目的 探讨FBXO31基因对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响.方法 通过脂质体转染法将FBXO31基因表达质粒转染至肝癌HepG2细胞,再用2 mg/L顺铂处理,分别用MTT、流式细胞术、免疫印迹检测细胞活性、凋亡、FBXO31蛋白表达.结果 与pcDNA组比较,FBXO31组细胞活力显著降低,细胞凋亡明显增多,FBXO31蛋白表达显著升高(P＜0.01或0.05).结论 上调FBXO31基因表达促进顺铂诱导的肝癌细胞凋亡.     

小鼠卵母细胞和早期胚胎端粒酶活性的测定

为了解小鼠早期发育过程中端粒酶的活性变化,本研究利用端粒重复序列扩增法(TRAP)进行了小鼠卵母细胞和附植前胚胎端粒酶活性的测定。结果表明,小鼠卵母细胞、桑椹胚和囊胚为端粒酶阳性,而2-细胞和8-细胞为阴性。依据电泳条带在成像系统下的光密度,计算相对总产品产量(TPG)的定量比较发现,囊胚端粒酶活性最高,为269.331;桑椹胚次之,为96.231;卵母细胞最低,为85.782。小鼠桑椹胚和囊胚胚胎记数及单细胞端粒酶活性比较结果显示,囊胚单细胞TPG最低,为3.45;桑椹胚单细胞略高于囊胚,为4.00;而卵母细胞最高,为85.782,大约是囊胚细胞的25倍。     

香樟不同树龄和组织的端粒酶活性测定

从江西乐安县“中国第一古樟林”、安福县古樟群落和南昌县黄马香樟基地选7株不同树龄的香樟,取不同叶位高度的新叶和老叶,以及8个不同组织,即种皮、茎干树皮、枝条树皮、老叶、嫩叶、叶芽、花芽和花。利用6条先导引物和1条反向引物进行端粒酶扩展引物的筛选,其中TS21和RP引物的扩展效果最好。对所取样品用TRAP法测定端粒酶活性,结果显示端粒酶活性随着树龄的增加呈现下降的趋势;不同叶位高度叶片的端粒酶活性随着高度的增加逐渐降低;新叶端粒酶活性高于老叶;叶芽和花芽中端粒酶活性较高,说明分化能力较强的组织具有较高的端粒酶活性。     

氯硝柳胺对肺癌细胞株顺铂敏感性的影响

目的 研究氯硝柳胺对肺癌细胞株顺铂敏感性的影响.方法 氯硝柳胺和(或)顺铂处理人肺癌细胞株A549及顺铂耐药细胞株A549/DDP,用CCK-8法、流式细胞术检测细胞增殖、凋亡变化.结果 氯硝柳胺呈剂量依赖性抑制A549、A549/DDP细胞增殖,24h IC50分别为(2.607±0.06)、(1.135±0.09) μmol/L.氯硝柳胺联合顺铂明显增加A549/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率(P＜0.05).结论 氯硝柳胺可抑制肺癌细胞生长和增加顺铂耐药细胞的敏感性.     

原花青素对SMMC-7721肿瘤细胞凋亡及其端粒酶活性的影响

采用M TT法、HE染色、DNA电泳、TUNEL法和TRAP法(端粒重复序列扩增法),研究原花青素对人肝癌细胞SMM C-7721株凋亡及端粒酶活性的影响,探讨了其抗癌机制。结果表明,原花青素可抑制SMM C-7721肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低细胞端粒酶活性。说明原花青素具有诱导肿瘤细胞凋亡和降低肿瘤细胞端粒酶活性2种抗肿瘤作用。     

低剂量与高剂量顺铂联合5-氟脲嘧啶及平阳霉素治疗晚期鼻咽癌的疗效比较

目的：比较低剂量与高剂量顺铂（ＤＤＰ）联合５－氟脲嘧啶（５－Ｆｕ）、平阳霉素（ＢＬＭ）（简称ＰＦＢ方案）对晚期鼻咽癌的疗效及毒性反应。方法：经病理学确诊的放疗后复发或有远处转移的晚期鼻咽癌３８例,随机分为单次高剂量ＤＤＰ组（ＨＤ－ＤＤＰ组）１７例与低剂量ＤＤＰ连续５ｄ静滴组（ＬＤ－ＤＤＰ组）２１例。ＨＤ－ＤＤＰ组予ＤＤＰ１００ｍｇ／ｍ２,第１天静脉输入,配合水化;ＬＤ－ＤＤＰ组予ＤＤＰ２０～３０ｍｇ／ｍ２第１～５天静脉输入,不予水化。两组同时联合５－Ｆｕ、ＢＬＭ,每３～４周重复。结果：总有效率（完全缓解＋部分缓解）：ＨＤ－ＤＤＰ组５２．９％,ＬＤ－ＤＤＰ组４７．６％（Ｐ＞０．０５）。对不同转移部位有效率以肺转移疗效较好（５８．３％、６０％）,肝转移无效。毒性反应：Ⅱ度以上呕吐发生率ＨＤ－ＤＤＰ组９０．４％,明显高于ＬＤ－ＤＤＰ组的４８．１％（Ｐ＜０．００１）;ＨＤ－ＤＤＰ组与ＬＤ－ＤＤＰ组的白细胞降低发生率分别为５２．３％、３３．３％（Ｐ＞０．０５）;肾毒性发生率分别为７．１％、５．５％（Ｐ＞０．０５）。结论：低剂量ＤＤＰ连续５ｄ静滴的ＰＦＢ方案疗效与高剂量ＤＤＰ的ＰＦＢ方案疗效接近,毒性反应轻微,应用简便     

低氧对团头鲂心肌细胞凋亡及抗氧化酶活性的影响

以团头鲂为研究对象,采用HE染色及电镜方法观察低氧对心脏组织结构的影响。结果显示,低氧可导致团头鲂心脏组织结构的变化及线粒体损伤;通过TUNEL及荧光定量PCR检测发现低氧能诱导心肌细胞凋亡并引起抑凋亡基因Bcl-2表达量的变化;基于蔗糖梯度离心法提取心脏线粒体,并分析线粒体中MDA含量及SOD活性的变化,结果显示低氧(DO:(2.5±0.5)mg/L)可引起团头鲂心脏线粒体中MDA含量及SOD活性的降低。     

巴西菇多糖对肝癌细胞株凋亡的影响及其机制

目的：研究巴西菇多糖诱导人肝癌细胞株(SMMC—7721)凋亡的作用及机制。方法：采用电镜、DNA电泳、免疫组化法，对SMMC—772l株细胞凋亡以及凋亡抑制基因bcl—2的表达进行检测。结果：SMMC—772l株细胞经巴西菇多糖处理后出现核固缩、膜起泡、凋亡小体形成．琼脂糖凝胶电泳呈现出典型凋亡DNA梯状带．细胞内bcl—2表达较对照组低。结论：巴西菇多糖能诱导SMMC—772l株细胞发生典型凋亡．其抑制细胞内bcl—2的表达，是诱发肿瘤细胞凋亡的机制之一。     

谷胱甘肽与顺铂联用对肺癌A549细胞增殖的影响

目的探讨谷胱甘肽与顺铂联用对肺癌A549细胞增殖的影响。方法应用MTT法及细胞计数评价细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧(ROS)水平,Western blot检测P53表达。结果 0.3、0.9g/L谷胱甘肽与3mg/L顺铂联用72h,1、3、9g/L谷胱甘肽与9mg/L顺铂联用30h,均可显著降低顺铂对A549细胞增殖的抑制作用(P<0.01)。9g/L谷胱甘肽与9mg/L顺铂联用,可减少A549细胞ROS产生和早期凋亡(P<0.01)。谷胱甘肽、顺铂单独或联用对P53蛋白表达无影响。结论谷胱甘肽与顺铂联用对A549增殖的影响取决于谷胱甘肽剂量。     

PDTC和顺铂对人鼻咽癌细胞株CNE1、CNE-GL、CNE2Z的联合作用

目的观察PDTC和顺铂（DD）对人鼻咽癌细胞株CNE1、CNE1-GL、CNE2Z的联合抑制效应。方法单独及联合应用PDTC和DDP处理后,采用MTT法测定CNE1、CNE1-GL、CNE2Z细胞的生长抑制效应。采用直线回归法求出中效浓度,利用中效原理计算联合用药指数。结果在实验剂量范围内,单独及联合应用PDTC和DDP的生长抑制效应具有剂量依赖性。对CNE1细胞,药物效应（抑制率）大于85%时,具有协同作用（CI〈l）;对CNE1-GL、CNE2Z细胞,两药合用具有拮抗作用。结论单独及联合应用PDTC和DDP对CNE1、CNE1-GL、CNE2Z具有生长抑制作用,两药联用对CNE1细胞具有协同作用。     

脱氧核酶对端粒酶hTERT mRNA的切割以及对鼻咽癌细胞凋亡相关基因的影响

目的:探讨脱氧核酶对端粒酶蛋白亚基hTERTmRNA的切割作用及对人鼻咽癌细胞凋亡相关基因表达的影响。方法:针对hTERT基因的核苷酸序列,合成“10～23”型脱氧核酶及其类似物,提取总RNA在体外切割hTERTmRNA;转染鼻咽癌细胞后,用RT-PCR扩增hTERT基因片段,用PCR-ELISA法测定端粒酶活性,用RT-PCR和荧光免疫测定凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。结果:未经修饰的脱氧核酶DzT和在DzT的3'末段添加倒位连接T碱基的脱氧核酶DzTi在体外能够有效地切割hTERTmRNA;在转染鼻咽癌细胞后,DzTi比DzT对hTERTmRNA表现出更强的切割作用,DzTi能够显著地降低鼻咽癌细胞端粒酶活性(P<0.01)、抑制鼻咽癌细胞的生长(P<0.05)和bcl-2基因的表达(P<0.05),上调bax基因的表达(P<0.05)。DzT和DzTi的催化中心的一个碱基被替换后形成的脱氧寡核苷酸DzT'和DzTi'在体外和胞内均不表现对hTERTmRNA的切割作用。结论:人工合成的脱氧核酶确实能够高效特异地切割端粒酶hTERTmRNA,并降低鼻咽癌细胞的端粒酶活性,促进鼻咽癌细胞凋亡。作为一种新发现的催化性核酸,脱氧核酶在肿瘤的基因治疗领域中将具有极其重要的应用价值。     

滋养细胞肿瘤组织中端粒酶及相关亚基hTERT mRNA、hTR mRNA的检测及意义

目的:探讨端粒酶及相关亚基hTERTmRNA、hTRmRNA在正常妊娠绒毛组织、葡萄胎和绒毛膜癌中的意义。方法:以正常绒毛组织为对照,采用端粒重复片段扩增(TRAP)检测端粒酶的活性;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测端粒酶相关亚基hTERTmR-NA、hTRmRNA的表达。结果:端粒酶活性在正常绒毛组织、葡萄胎及绒毛膜癌中的阳性率分别为:10.3%、33.3%、66.7%(χ2=21.69,P<0.01)。在正常绒毛组织、葡萄胎及绒毛膜癌中的hTERTmRNA的灰度比分别为:(0.85±0.24)、(2.02±0.56)、(6.38±0.71),(P<0.05);hTRmRNA的灰度比分别为:(2.00±0.35)、(2.15±0.41)、(2.31±0.73)(P>0.05)。结论:端粒酶在滋养细胞疾病恶变中起着重要作用,检测其活性及相关亚基有助于滋养细胞疾病的早期诊断及了解预后。     

端粒酶活性在子宫颈癌组织中的表达

目的 :了解不同临床分期、组织学分级子宫颈鳞癌组织中端粒酶活性。方法 :采用以 PCR为基础的端粒酶重复扩增方法及非变性 PAGE银染定性法检测不同临床分期、组织学分级子宫颈鳞癌组织中端粒酶活性。结果 :在子宫颈癌组织中端粒酶活性的表达率较正常宫颈、不典型增生宫颈组织的端粒酶活性高 (P<0 .0 1 ) ,且不同临床分期的子宫颈癌宫颈组织间端粒酶的表达率差异有显著性 (P〈0 .0 5) ,但不同病理分级的子宫颈癌宫颈组织间端粒酶活性的表达率差异无显著性 (P>0 .0 5)。结论 :端粒酶在子宫颈癌组织中呈现高表达 ,且与临床分期有关 ,端粒酶可望成为检测子宫颈癌的一个重要指标。     

异鼠李素对鼻咽癌细胞生长和增殖的影响

目的 观察异鼠李素对鼻咽癌细胞生长和增殖的抑制作用.方法 采用不同质量浓度(10、20、40、80 mg/L)异鼠李素处理CNE-2细胞,分别用MTT法、台盼蓝染色、平皿培养和倒置显微镜观察细胞生长抑制率、细胞活力、集落形成、形态变化.结果 异鼠李素组的CNE-2细胞生长抑制率均高于对照组(P<0.05),且抑制作用呈...     

鼻咽炎和鼻咽癌细胞中CD147、Fascin蛋白表达

目的探讨鼻咽炎和鼻咽癌细胞中CD147、Fascin蛋白表达的意义。方法用免疫组化SP法检测25例鼻咽黏膜慢性炎和30例鼻咽癌细胞中CD147和Fascin蛋白的表达。结果在鼻咽黏膜慢性炎和鼻咽癌细胞中,CD147蛋白阳性表达率分别为24.0%（6/25）和76.7%（23/30）,组间差异有显著统计学意义（P〈0.01）;Fascin蛋白阳性表达率分别为16.0%（4/25）和93.3%（28/30）,组间差异有显著统计学意义（P〈0.01）;30例鼻咽癌中CD147与Fascin蛋白表达呈正相关（P〈0.05）。结论鼻咽癌细胞中均有CD147和Fascin蛋白过表达,可能协同参与鼻咽癌的侵袭、转移过程。     

686例鼻咽癌的CT分析

目的：通过分析鼻咽癌的ＣＴ表现，提高对鼻咽癌放疗前后的认为。方法：对６８６例病理证实的鼻咽癌，全部做鼻咽部ＣＴ横断扫描，并详细分析所得资料。结果：鼻咽癌放疗前后的ＣＴ表现，主要有鼻咽癌以及周围软组织改变、淋巴结肿大、颅底骨质增生硬化、颅内直接侵犯、颅内转移、副鼻窦及乳突炎症。结论：ＣＴ检查可以较好地显示鼻咽癌放疗前后的表现，辅助放疗的定位及定量，也有利于病例的追踪。     

川芎嗪逆转人鼻咽癌顺铂耐药细胞系多药耐药性的实验研究

目的探讨川芎嗪（TMP）对人鼻咽癌顺铂（DDP）耐药细胞系（CNE2/DDP）多药耐药性的逆转作用。方法 TMP处理CNE2/DDP细胞后,分别用MTT法、流式细胞术、RT-PCR检测其对DDP耐药性的逆转作用、细胞凋亡和bcl-2mRNA表达的影响。结果 50、100mg/LTMP处理后,CNE2/DDP细胞对DDP耐药性的相对逆转率分别为57.50%、85.72%,差异有统计学意义（P〈0.01）。与对照组比较,50mg/LTMP处理可使CNE2/DDP细胞凋亡率明显增高（P〈0.01）,而bcl-2mRNA表达明显降低（P〈0.05）。结论 TMP可部分逆转CNE2/DDP细胞对DDP的耐药性。TMP可增强DDP对CNE2/DDP细胞的促凋亡作用,下调bcl-2mRNA表达。