酸性电解水对副溶血性弧菌的杀灭效果

为探讨酸性电解水(AEW)对海产品的保鲜作用,以不同NaCl浓度和电解质得到酸性电解水,比较酸性和碱性、近中性电解水及不同稀释度酸性电解水对副溶血性弧菌(VP)的杀灭效果。结果表明:近中性电解水,NaCl浓度在0.05%以上及NaCl、KCl、CaCl2和MgCl2溶液所得酸性电解水均比对照在2 min内使1 ml菌液中减少(7.81～8.70)lg10的副溶血性弧菌;稀释10倍的酸性电解水比对照减少5.62 lg10的副溶血性弧菌,稀释50或100倍的酸性电解水几乎没有杀菌效果。扫描电子显微镜观察显示,酸性电解水处理副溶血性弧菌2 min后,细胞外膜被破坏,部分细胞内容物溢出。因此酸性电解水可以杀灭副溶血性弧菌,可以用于海产品加工中的消毒。     

凡纳滨对虾循环水养殖系统弧菌消长研究

以鉴别性培养基TCBS琼脂采用平板菌落计数法对凡纳滨对虾循环水养殖系统水体中弧菌的消长进行了监测.结果表明,循环水养殖系统中主要存在非O1群霍乱弧菌、副溶血性弧菌、梅氏弧菌、溶藻弧菌和普通变形杆菌等病原细菌;与传统换水养殖模式相比,循环水养殖系统对非O1群霍乱弧菌、溶藻弧菌和普通变形杆菌控制效果更好,对副溶血性弧菌和梅氏弧菌控制效果相当;在整个养殖过程中,循环水养殖系统弧菌和普通变形杆菌的数量均低于对虾发病的阈值(104 CFU/mL);循环水养殖模式和传统换水养殖模式的水体pH值均在7～10范围内波动,但仅发现非O1群霍乱弧菌和副溶血性弧菌的消长与pH值波动有一定相关性.     

EMA-LAMP方法快速检测食源性副溶血性弧菌活细胞

将一种DNA染料叠氮溴化乙锭(EMA)与环介导等温扩增技术(LAMP)相结合,建立一种能快速检测食品中食源性副溶血性弧菌活细胞的新方法.结果表明,EMA-LAMP方法最低检测限为1×10 CFU/mL,PCR方法最低检测限为1×103 CFU/mL.与PCR方法相比较,EMA-LAMP检测方法具有快速、灵敏度高、操作简便等优点,并能检测鉴定副溶血性弧菌病原活细胞.     

基于二维相关红外光谱强酸性电解水对三种食源性致病菌的灭菌机制

本研究旨在利用二维相关红外光谱结合红外光谱差减法探究强酸性电解水(Acidic electrolyzed water,AEW)杀灭食源性致病菌的分子作用机制。经AEW处理后的三种常见食源性致病菌(副溶血性弧菌、沙门氏杆菌、单增李斯特菌),以其和电解水接触时间为微扰条件,分析其和电解水接触过程中光谱动态变化过程,获取电解水处理对其相应化学基团的干扰信息。结果显示,AEW使致病菌蛋白质二级结构发生改变,使β折叠含量逐渐增高,β转角含量逐渐降低。本研究为以后利用光谱技术揭示电解水灭菌分子机制奠定了基础。     

副溶血性弧菌保藏条件研究

针对副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)在低温条件下容易进入不可培养状态,难以保藏的问题,通过平板菌落计数法对副溶血性弧菌的4℃冰箱保藏条件进行了探讨。结果表明,NaCl对副溶血性弧菌4℃保藏有保护作用,其中以45 g/L NaCl保护效果最佳,而且45 g/L NaCl不影响副溶血性弧菌的生长。将副溶血性弧菌细胞浸于45 g/L NaCl溶液或以含45 g/L NaCl的培养基培养后直接于4℃保藏,保藏90 d,活细胞数仅由109下降到106。     

EMA结合PCR技术有效鉴别副溶血弧菌死活细胞

将EMA(Ethidium monoazide)选择渗透性和PCR技术相结合,建立检验副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus死活细胞的EMA-PCR新方法.研究表明,25μg/mL或更高质量浓度的EMA可以抑制2.0×107 CFU/mL的副溶血弧菌死细胞DNA的扩增,未经EMA处理的对应样品PCR反...     

强酸性水对畜禽粪便杀菌的试验研究

以规模化养猪场的新鲜粪便为处理对象,利用强酸性水对其进行杀菌处理。考察了粪大肠杆菌数随处理时间的变化规律、适宜的强酸性水的用量以及不同理化性质的强酸性水对菌落的杀灭情况;比较了无菌蒸馏水、NaClO溶液和强酸性水3种处理液对粪便中菌落的灭活效果。结果表明,强酸性水在前5 min内有较快的杀菌速率;当强酸性水(其理化性质为:有效氯含量(ACC)30.43 mg.L-1、pH<2.7、ORP>1 100 mV)的用量为75 mL时,1 g粪便中的粪大肠杆菌可被完全灭活;无菌蒸馏水对病菌并无杀灭作用,向1 g粪便中加入具有相近ACC的强酸性水(30.43 mg.L-1)和NaClO溶液(30.50 mg.L-1)各75 mL,作用5 min后,对粪大肠杆菌的杀灭率均能达到100%,细菌总数分别降低了近4个对数值和5个对数值;提高强酸性水的理化性质可取得较好的杀菌效果。     

强酸性水对畜禽粪便杀菌的试验研究

以规模化养猪场的新鲜粪便为处理对象,利用强酸性水对其进行杀菌处理。考察了粪大肠杆菌数随处理时间的变化规律、适宜的强酸性水的用量以及不同理化性质的强酸性水对菌落的杀灭情况;比较了无菌蒸馏水、NaClO溶液和强酸性水3种处理液对粪便中菌落的灭活效果。结果表明,强酸性水在前5 min内有较快的杀菌速率;当强酸性水(其理化性质为:有效氯含量(ACC)30.43 mg.L-1、pH<2.7、ORP>1 100 mV)的用量为75 mL时,1 g粪便中的粪大肠杆菌可被完全灭活;无菌蒸馏水对病菌并无杀灭作用,向1 g粪便中加入具有相近ACC的强酸性水(30.43 mg.L-1)和NaClO溶液(30.50 mg.L-1)各75 mL,作用5 min后,对粪大肠杆菌的杀灭率均能达到100%,细菌总数分别降低了近4个对数值和5个对数值;提高强酸性水的理化性质可取得较好的杀菌效果。     

虾-鱼-蟹海水养殖池塘细菌数量动态及其与理化因子的关系

对广东省汕尾地区虾-鱼-蟹海水综合养殖池塘的水体和沉积物进行每14 d一次的周期性采样,研究异养细菌、弧菌、芽孢杆菌和粪大肠菌群的变动规律及其与常见理化因子的关系.结果发现,水体环境中各类细菌的数量波动范围为:异养细菌6.4× 103～3.00× 105 CFU/mL,弧菌0.1×103～1.65×104 CFU/mL,芽孢杆菌0.06×103～1.09× 103 CFU/mL;沉积环境中各类细菌数量的波动范围为:异养细菌5.8×105～2.95×107 CFU/g,弧菌0.8×104～2.75×105 CFU/g,芽孢杆菌6.1×104～5.30×106 CFU/g.水体环境异养细菌与沉积环境异养细菌具有显著的线性正相关关系(P＜0.05),水体环境异养细菌和芽孢杆菌与水温呈线性正相关,但相关性不显著;芽孢杆菌与DO具有显著的线性正相关关系;弧菌与DO具有线性的负相关关系,但不显著.     

海参养殖池塘异养菌与弧菌数量变化特征分析

本研究对海参养殖池塘水体中的异养菌、弧菌数量变化进行监测,结果表明,表层水体异养菌数量为4.4×103~2.3×105 CFU/mL,中层水体异养菌数量为7.95×103~1.60×105CFU/mL,底层水体异养菌数量为5.0×103~1.6×105CFU/mL;表层水体弧菌数量为0~7.85×103 CFU/mL,中层水体弧菌数量为0~1.8×103 CFU/mL,底层水体弧菌数量为0~1.32×104 CFU/mL。池塘水环境中的异养菌总数和弧菌数均呈现出较为明显的季节变化,春季、夏季处于较高水平,秋季、冬季处于较低水平。其中,弧菌数量受温度影响较大,冬季达到最低值,随着养殖池塘水温的回升而逐渐升高。     

超声波联合微酸电解水清洗对生菜品质的影响

[目的]研究超声波对微酸电解水的稳定性及其对微酸电解水处理生菜品质的影响。[方法]以余氯浓度为指标,考察了超声波对微酸性电解水稳定性的影响;以生菜的菌落总数和质构为指标,考察了超声波联合微酸电解水处理对生菜品质的影响。[结果]超声波联合微酸性电解水时,超声波会对微酸性电解水产生一定的影响,两者联合使用对生菜的灭菌能力则有很大的提高,且对生菜的品质不会产生较大的影响。[结论]该研究可为相关清洗设备的研发及基础研究提供理论依据。     

强酸性电解水的杀菌机理与应用

 电解水是一种新型机能水,为稀食盐水在电场作用下电解出的水溶液,根据电解方式及程度不同分为酸性电解水与碱性电解水。强酸性电解水具有低pH（2~3）、高氧化还原电位（900~1200mV）及一定的有效氯含量（10~160mg/L）,表现出较强的杀菌能力,而且与传统的杀菌剂相比具有广谱高效、操作简单、安全无害、环境友好等优点,近年来已被作为一种新型杀菌剂广泛应用于医疗、农业、食品加工等行业的杀菌消毒。笔者介绍了强酸性电解水的特性、生产原理、杀菌机理与杀菌效果,阐述了影响强酸性电解水杀菌效果的因素及其在农业中的应用,并展望了强酸性电解水的应用前景。     

电解水对金黄色葡萄球菌生物被膜的影响

为了阐明不同性质的电解水在控制金黄色葡萄球菌生物被膜中的作用,本研究分别使用酸性、碱性和中性电解水处理生物被膜,并测定处理前后生物被膜生物量、活性、活菌数和构造的变化。结果表明,酸性电解水能够有效杀死生物被膜中的菌体,但不能有效去除生物被膜;其有效氯含量与杀菌作用呈正相关。碱性电解水能够有效去除生物被膜,其pH值直接影响去除能力。中性电解水的作用与酸性电解水相似。不锈钢表面的生物被膜用碱性、酸性和中性电解水处理10min后,活菌数从7.5lgCFU/cm2分别减少至5.3,2.3和3.2lgCFU/cm2。电解水有潜力成为生物被膜杀菌剂和去除剂。     

酸性电解水对肉源性荧光假单胞菌的致死效应

【目的】研究酸性电解水（AEW）能否有效控制肉源性荧光假单胞菌,探究处理后菌体变化,为新型杀菌剂的开发提供思路。【方法】使用不同有效氯浓度酸性电解水（20、40和60 mg?L ^-1）将肉源性荧光假单胞菌分别处理5、10、15、20、25和30 min后,通过平板计数检测酸性电解水对肉源性荧光假单胞菌的致死效果;收集未处理及20、40和60 mg?L ^-1酸性电解水各处理5 min后菌液,利用扫描电子显微镜观测酸性电解水对肉源性荧光假单胞菌细胞形态的影响;利用多种荧光探针检测酸性电解水对肉源性荧光假单胞菌细胞膜完整性、胞内pH、胞内ATP浓度、膜电位的影响;提取胞外聚合物（EPS）探究酸性电解水与EPS的相互作用。 【结果】20、40和60 mg?L ^-1的酸性电解水均可在5 min内杀死10 ⁷CFU/mL肉源性荧光假单胞菌,酸性电解水浓度大于40 mg·L ^-1时对肉源性荧光假单胞菌的杀菌效果没有显著影响（P>0.05）,10 min处理后均已无活菌检出。扫描电子显微镜结果表明3种浓度酸性电解水的处理均可使肉源性荧光假单胞菌菌体干瘪皱缩,失去原本饱满的细胞形态,60 mg·L ^-1电解水处理下破损程度最大。酸性电解水可显著降低肉源性荧光假单胞菌的膜完整性、胞内pH、膜电位、胞内ATP浓度和EPS含量（P<0.05）。20、40和60 mg·L ^-1酸性电解水处理后菌体膜完整性分别降低到2.26%、1.87%和1.20%,膜电位分别消散40%、50%和50%,胞内pH由7.50分别降低到6.53、5.90和5.83,3种浓度处理后胞内ATP浓度已降至最低。杀菌效果显著依赖于酸性电解水浓度的升高,当处理浓度高于40 mg?L ^-1时,胞内pH、膜电位和胞内ATP浓度的降低无显著差异。酸性电解水处理下EPS中蛋白、总糖含量显著降低,松散胞外聚合物 （L-EPS）中蛋白和总糖分别降低71.08%和62.23%,而紧密胞外聚合物（B-EPS）中蛋白和总糖分别降低99.32%和40.62%。当EPS反向添加到酸性电解水中时则可显著降低酸性电解水氧化还原电位（ORP）（P<0.05）,但对有效氯浓度（ACC）和pH没有显著影响（P>0.05）。 【结论】酸性电解水对肉源性荧光假单胞菌具有良好的杀菌效果,可破坏肉源性荧光假单胞菌细胞膜,同时EPS对酸性电解水杀菌效果具有一定的阻碍作用。     

微酸性电解水暂养的杂色鲍存活率及品质变化

微酸性电解水(SAEW)因其广谱杀菌作用,在果蔬保鲜、器械消毒等领域有了较多应用,但在水产品保活方面的应用较少。在水温(10±1)℃下,将平均体质量(34.3±5) g的杂色鲍(Haliotis diversicolor)在由沃汰智能电解水机和海水晶制成的SAEW中静养,以不加SAEW为对照。2 d后检测杂色鲍的存活率和菌落总数,并采用感官评定和挥发性盐基氮(TVB-N)值等方法分析了4℃贮藏后杂色鲍的品质变化。结果显示:暂养第9 d,电解水组鲍鱼存活率为66.7%,大于海水组存活率(50%);贮藏方面,9 d后海水组TVB-N值为/100 g,超过限值15 mg达到54.5,优于海水组。15 d后,电解水组鲍鱼菌落总数为5.9 log10 CFU/g,超过食品微生物可接受上限7 log10 CFU氏菌(Shewanella)为优势菌。结果表明,SAEW在水产品保活、保鲜中具有一定的应用潜力。     

酸性氧化电位水的杀菌特性及在食品中应用

综述了酸性氧化电位水对细菌的杀菌作用、杀菌机理和在食品行业中的应用研究。通过对酸性氧化电位水的杀菌因素和杀菌过程中微观结构变化分析,指出杀菌机理中以化学因素（有效氯）为主,物理因素（氧化还原电位）为辅。应加强对酸性氧化电位水在食品杀菌和消毒方面的应用研究。另外,还应加强酸性氧化电位水具体组分的测定,建立其与杀菌效果之间的关系,促进杀菌机理的研究。     

酸性电解水对低温条件下单增李斯特菌杀灭效果

单增李斯特菌是能在低温下生长的一种微生物。冷藏即食食品和冷冻食品加工设备中单增李斯特菌的生长是主要的食品安全问题。酸性电解水(AEW)是一种新型高效、安全且无残留的非热灭菌技术。AEW用于灭活4℃条件下的浮游态、生物膜态及冷藏金针菇样品上单增李斯特菌。通过检测AEW处理前后菌落总数变化、生物被膜、生物被膜结构参数以及毒力基因表达,进一步分析样品实验等。结果表明,当电解质NaCl浓度为0.10%,处理时间为1 min、30 min时,4℃和37℃下的单增李斯特菌菌落总数、生物被膜清除率存在极显著差异,相同处理时间,AEW较难杀灭4℃条件下的单增李斯特菌及难清除其生物被膜,本研究为评估冷链中食品和冷藏食品及食品加工设备的安全性提供了新的理论基础,对冷藏食品使用抗菌剂提出更高要求。     

多重PCR方法检测食品中霍乱弧菌、副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌

通过扩增霍乱弧菌(VC)、副溶血性弧菌(VP)和单核细胞增生李斯特氏菌(LM)的特异性核酸片段,建立了VC、VP和LM的多重PCR检测方法,相应的扩增片段分别为588、450、234 bp。该方法特异性强、灵敏度高、简便、快速,可实现对上述致病菌的同时检测,在接种食品中检测灵敏度达到103 CFU/mL。     

副溶血弧菌在玻璃器皿上的粘附及去除

[目的]研究副溶血性弧菌在玻璃器皿上的粘附及去除技术.[方法]以栽玻片模拟厨房中的玻璃类和陶瓷类厨具,选用酒精、醋酸及乳酸链球菌素作为抑菌剂对人工污染粘附到载玻片上的副溶血性弧菌进行处理,通过观察副溶血性弧菌在栽玻片上的存活数和去除率考察3种抑菌剂及其协同抑菌作用.[结果]载玻片上粘附的副溶血性弧菌的活菌数经生理盐水和不同浓度的酒精、醋酸和乳酸菌链球菌素作用后均有一定程度的降低,抑菌剂组残留的活菌数（残留率）明显低于生理盐水对照组,各抑菌组的抑菌能力均随着抑菌剂浓度的增加而增强.协同抑菌试验结果表明,pH 4.0、35％酒精、1.0 g,/L乳酸链球菌素的组合能有效抑制副溶血性弧菌在玻片上的粘附,具有良好的协同效应.[结论]副溶血性弧菌在玻璃器皿上有一定的粘附力,但酒精、醋酸和乳酸菌链球菌素具有较好的除菌效果.     

基于NHS基团修饰的副溶血性弧菌免疫磁珠制备及其富集性能评价

[目的]制备NHS基团修饰的副溶血弧菌免疫磁珠并评价其富集性能。[方法]采用偶联率确定免疫磁珠最佳制备条件(磁珠粒径、偶联时间和抗体加入量),采用捕捉率确定免疫磁珠最佳富集条件(菌悬液p H、孵育时间和免疫磁珠加入量),并通过方法的特异性、灵敏度、精密度和稳定性评价免疫磁珠富集性能。[结果]0.1 m L N2型NHS磁珠可与0.2 m L副溶血弧菌抗血清偶联2 h制备IMB_(VP),加入到副溶血弧菌菌悬液(p H 7.0~7.4)中孵育2 h,IMB_(VP)最佳工作液体积为0.4 m L。该方法特异性好、灵敏度高(15 cfu/50 m L)、精密度高(批内变异系数和批间变异系数均在3%~6%)、稳定性好(准确度大于91%)。[结论]自制副溶血弧菌免疫磁珠富集性能好,方法工作效率高,成本低,为副溶血弧菌高效快速检测提供了可靠的富集手段。