白星花金龟的羽化及交配行为

为了探明白星花金龟Protaetia brevitarsis Lewis的羽化节律和羽化进程、交配行为及交配节律,在室内恒定条件下(光照周期为L∥D=14h∥10h,温度为(25±2)℃,相对湿度为75%~80%),对白星花金龟的羽化及交配行为进行了观察,结果表明:1)羽化在白天和晚上均可发生,雌雄羽化节律均表现出驼峰型,雌虫羽化最高峰出现在04:00-06:00,雄虫的羽化最高峰出现在16:00-18:00;2)羽化进程为33d,羽化高峰期为开始羽化后的15~33d,羽化数占总数的76.77%,雌虫较雄虫羽化早;3)交配行为分为相遇和交配。相遇包括相互避让、相互攻击、爬背、抱对、交配等;交配包括爬背、抱对和交配,部分具有配后保护行为;4)72h内交配不止一次的占30%,交配持续时间最短的为95s,最长的295s,平均(182±28)s;5)24h内抱对出现了两个高峰:18:00-20:00和20:00-22:00,抱对率分别为92.5%和90%,且差异不显著(P0.05),但是和其他时间段具有显著性差异(P0.05);6)24h内有两个交配高峰,分别为12:00-14:00和20:00-22:00,交配率分别为35%和40%,且和其他时间段呈显著差异(P0.05)。白星花金龟在00:00-08:00和16:00-20:00时间段未发生交配现象。     

白星花金龟行为学观察及其信息素的诱虫效果

白星花金龟(Potosia brevitarsis Lewis)在我国北方许多省份均有分布，成虫主要取食植物的花、嫩叶及果实。近几年陕西省水果产业迅速发展，为该虫提供了适宜的生存环境，使其田间种群数量急剧增加，很快上升为果园主要害虫之一。白星花金龟成虫对葡萄、桃、梨、苹果等果树的花及果实危害较严重，有用化学药剂防治该虫的报道，但害虫发生盛期正值这些水果成熟期，所以喷施化学药剂防虫的传统方法不宜采用。     

贵州修文猕猴桃园白星花金龟越冬情况调查

为明确白星花金龟在猕猴桃园的越冬情况,于2018—2019年在贵州修文开展了白星花金龟越冬场所及分布调查。结果表明,白星花金龟主要在田边堆肥、杂草堆积处、树干周围等场所越冬。幼虫占调查越冬虫态的96.09%,越冬场所类型对虫口数量存在显著影响(P<0.05)。12月下旬调查,幼虫主要分布在0~30 cm土层中,至第二年1月下旬,活虫总数明显减少,以0~10 cm土层中虫口减退率最高,为79.66%。幼虫主要分布在11?40 cm土层。其中,31~40 cm土层虫量有所增加,虫口减退率为-3.17%,越冬种群在土层中存在一定下潜。幼虫集中在距树干31~90 cm的土层中,除东、东南方向虫口数量较低外,树干其他方位数量均无显著差异。     

白星花金龟对9种植物的趋避行为

为明确对白星花金龟具有引诱或驱避作用的植物及醇提物, 利用自制选择行为装置和“Y”形嗅觉仪, 测定白星花金龟对9种气味植物鲜叶及醇提物的行为反应。结果表明:白星花金龟雌、雄成虫对植物及醇提物的嗅觉反应相似, 对紫茎泽兰、青蒿、菖蒲醇提物有极显著负趋性(P<0.01); 雌成虫对香樟、苍耳醇提物具有显著负趋性(P<0.05), 对蛇床和蓖麻醇提物有极显著正趋性(P<0.01); 幼虫对臭牡丹、苍耳、蓖麻醇提物表现为正趋性; 各龄幼虫对紫茎泽兰、菖蒲醇提物均表现出负趋性, 且随着龄期的增加负趋性逐渐增大。研究结果可为白星花金龟的引诱剂或驱避剂研发提供试验依据。     

几种短链脂肪醇对白星花金龟的引诱活性研究

分别吸附收集白星花金龟Potosia brevitarsis Lewis成虫取食桃果实过程及桃果实单独存在环境中的挥发性物质, 经GC-MS分析发现,成虫取食桃果实环境中含有桃果实中检测不到的信号化合物乙醇。在田间初步评价了乙醇及其8种类似物甲醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、正戊醇、正己醇对白星花金龟成虫的引诱活性。结果表明:甲醇、乙醇、正丙醇及异丙醇等对试虫均有一定的引诱作用,其中乙醇及异丙醇的引诱活性最高;乙醇10倍稀释液的引诱活性与未经稀释的乙醇相当,100倍稀释液的引诱活性明显降低;异丙醇的引诱活性随着供试浓度的降低而降低;乙醇与异丙醇以等体积混合时的引诱活性较佳,其3种比例混合物的引诱活性均随着使用浓度的降低而降低。     

白星花金龟在玉米田的空间分布和抽样技术

应用平均拥挤度指标、扩散指数等6种聚集度指标以及Iwao回归法、Taylor幂函数法等方法分析了白星花金龟种群在玉米田空间分布特征。结果表明:白星花金龟种群呈现聚集分布特征,并且聚集程度较高;分析拟合了白星花金龟在玉米田中的理论抽样数学模型。     

白星花金龟生活习性观察

白星花金龟(Potosia brevitarsis Lewi)不仅严重为害各种水果.近年来在鲜食玉米田中的为害也愈来愈重.该虫在把玉米的籽粒吃光的同时,还传播植物病害,如腐烂病等.给生产带来严重损失.可是关于白星花金龟的生物学特性等的研究报道很少.     

新疆白星花金龟绿僵菌分离鉴定及致病力测定

从新疆吐鲁番地区和乌鲁木齐市安宁渠镇白星花金龟幼虫体中分离得到的2个新疆本土绿僵菌菌株TLF和ANQ。通过形态学初步鉴定菌株ANQ和TLF为金龟子绿僵菌。利用ITS1/ITS4和ITS4/ITS86引物分别测定了菌株TLF和ANQ的rDNA-ITS序列,2个菌株与金龟子绿僵菌相似性达99.1%~99.6%。室内毒力测定结果显示,菌株TLF和ANQ对白星花金龟各龄幼虫均具有高的致病力,死亡率分别达到90%~100%和73.3%~100%。2个菌株对白星花金龟1龄和2龄幼虫的致病力显著高于3龄幼虫,表现出随着白星花金龟幼虫龄期的增大致病力均呈降低的趋势。在相同处理时间内菌株TLF较ANQ致病力强。     

白星花金龟成虫在吐鲁番葡萄上的发生规律及寄主对其繁殖能力的影响

近年来,白星花金龟Protaetia brevitarsis Lewis (Coleoptera: Scarabaeidae)已经成为吐鲁番葡萄、桃等果树成熟期的重要害虫。为明确其在吐鲁番葡萄上的发生规律,连续两年调查了新疆吐鲁番亚尔镇白星花金龟成虫的发生时期,并对日活跃高峰期和产卵高峰期进行了分析,同时开展了寄主对白星花金龟成虫繁殖的影响研究。结果表明:白星花金龟成虫在新疆发生时期为5月下旬至10月上旬,发生高峰期为6月中旬;产卵高峰期为7月上中旬;日活跃高峰期有两个,分别为10:00-12:00和16:00-18:00;不同寄主对白星花金龟成虫繁殖的影响不同,该虫单独取食葡萄不产卵,取食番茄、西瓜、桃和杏的成虫繁殖能力高于取食桑葚的试虫。     

不同生境下两种引诱剂对白星花金龟的协同诱集效果评价

为评价糖醋液诱芯协同处理对白星花金龟的诱集效果,分别在葡萄园、玉米田和杨树林悬挂诱捕器,采用糖醋液、诱芯及糖醋液诱芯协同处理诱集白星花金龟。结果表明,在整个生育期3种处理在葡萄园与玉米田的诱集总量分别为1 621.7头和1 543.0头,显著高于杨树林中的诱集量(41.7头)。白星花金龟在葡萄园有2次发生盛期,分别为6月上旬和8月上旬,在玉米田有3次发生盛期,分别为6月上旬、7月中旬和8月下旬;两种生境中5月至8月下旬雌少雄多,之后雌虫略多于雄虫,整体上雌雄比分别为1∶1.4(葡萄园)和1∶1.3(玉米田)。在葡萄园和玉米田中糖醋液诱芯协同处理的诱集量从始至终都优于糖醋液、诱芯单独处理及两处理之和,甚至在葡萄园中显著高于糖醋液与诱芯单独处理之和,表明2种引诱剂协同处理可显著提高诱集效果。     

象耳豆根结线虫果胶酸裂解酶基因的克隆及其RNAi 效应分析

 从象耳豆根结线虫中首次克隆了果胶酸裂解酶基因Me-pel-1,该基因cDNA 的开放阅读框(ORF)长813 bp,编码270 个氨基酸,具有果胶酸裂解酶第3 家族的4 个保守域特征。ME-PEL-1 与南方根结线虫的果胶酸裂解酶MI-PEL-1 和爪哇根结线虫的果胶酸裂解酶MJ-PEL-1 相似性最高,且系统进化树显示ME-PEL-1 也与它们最为接近。利用RNAi 技术对象耳豆根结线虫2 龄幼虫的Me-pel-1 进行沉默,结果发现Me-pel-1 基因被干扰后,象耳豆根结线虫2 龄幼虫对番茄的侵染率显著降低。该结果表明Me-pel-1 基因在象耳豆根结线虫侵染寄主的过程中发挥重要作用。     

四种钙结合蛋白基因在沙葱萤叶甲幼虫生长发育中的作用

为明确沙葱萤叶甲Galeruca daurica钙结合蛋白基因的功能,利用本实验室组装的沙葱萤叶甲转录组数据库鉴定钙结合蛋白基因序列,采用RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术沉默沙葱萤叶甲3龄幼虫体内钙调蛋白（calmodulin,CaM）、钙网蛋白（calreticulin,CRT）、类钙磷蛋白（calcyphosine-like,CAPSL）和类肌钙蛋白C（troponin C-like,TnCl）共4种钙结合蛋白基因,观察幼虫发育历期、存活率、体重及蛹重的变化;应用实时荧光定量PCR测定干扰效率。结果表明,共筛选到41条编码钙结合蛋白的基因序列,选取4条具有完整开放阅读框的钙结合蛋白基因序列进行后续研究。4种钙结合蛋白基因的干扰效率从高到低依次为CAPSL（94.4%）、TnCl（76.2%）、CRT（70.5%）和CaM（54.5%）;干扰效率最高的时间分别为干扰后第4、2、6和2天。沉默CAPSL后,沙葱萤叶甲幼虫体重显著降低了21.0%~34.9%,存活率显著下降了53.5%,发育历期显著缩短了15.1%,蛹重显著降低了15.8%。沉默TnCl后,沙葱萤叶甲幼虫体重显著降低了10.5%~25.0%,存活率显著下降了19.1%,蛹重显著降低了11.0%,而对发育历期无显著影响。沉默CaM后,沙葱萤叶甲幼虫体重显著降低了5.9%~6.6%,存活率显著降低了8.7%,而幼虫发育历期和蛹重无显著变化。沉默CRT后,沙葱萤叶甲幼虫体重、蛹重、存活率和发育历期均无显著变化。表明CAPSL、TnCl和CaM在沙葱萤叶甲幼虫生长发育过程中发挥着重要作用,而CRT可能未参与沙葱萤叶甲幼虫生长发育的调控过程。     

Ingested RNA interference for managing the populations of the Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata

BACKGROUND: RNA interference (RNAi) is a breakthrough technology for conducting functional genomics studies and also as a potential tool for crop protection against insect pests. The major challenge for efficient pest control using RNAi in the field is the development of efficient and reliable methods for production and delivery of double‐stranded RNA (dsRNA). In this paper, the potential of feeding dsRNA expressed in bacteria or synthesized in vitro to manage populations of Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata (Say) (CPB), was investigated. RESULTS: Feeding RNAi successfully triggered the silencing of all five target genes tested and caused significant mortality and reduced body weight gain in the treated beetles. This study provides the first example of an effective RNAi response in insects after feeding dsRNA produced in bacteria. CONCLUSION: These results suggest that the efficient induction of RNAi using bacteria to deliver dsRNA is a possible method for management of CPB. This could be also a promising bioassay approach for genome‐wide screens to identify effective target genes for use as novel RNAi‐based insecticides. Copyright © 2010 Society of Chemical Industry