酸枣成熟胚离体培养研究

为了建立酸枣成熟胚离体培养再生体系,以酸枣成熟胚为试验材料,研究启动培养基和增殖培养基对不同贮藏处理酸枣成熟胚萌芽率及增殖的影响。结果表明：以常温保存1a的成熟胚萌芽率较高（57.78％）,最佳启动培养基为不添加任何植物激素的M S培养基,而最适增殖培养基为1/2MS＋1.0 mg/L 6 BA＋0.3 mg/L NAA＋1.5 g/L PVP。     

小麦成熟胚离体培养研究

以美国小麦品种Overley成熟胚作为外植体进行离体培养,研究外源激素对小麦成熟胚诱导愈伤组织、分化出苗以及试管苗增殖的影响。试验结果表明,在MS培养基中添加2,4-D3mg·L-1愈伤组织诱导频率较高,成愈率为84.0%;在添加有KT2～3mg·L-1的MS分化培养基中愈伤组织分化率较高,可达85%以上;将试管苗转接至添加0.2mg·L-1的NAA和0.5～2.0mg·L-1的6-BA的培养基中,试管苗有一定的分化增殖,但最高分化率仅为33.3%,增殖系数2.05。     

小麦幼胚离体培养条件的优化研究

为了寻求一种最佳的春性小麦幼胚离体培养基,选用两个春性小麦品种的幼胚置于L3、MS和B5三种基本培养基上,经过愈伤组织的形成与分化培养,对成愈率与分化率进行了研究。结果表明春性小麦幼胚离体培养的最佳诱导培养基为L3D2,最佳分化培养基为L3D0 1ZT10。     

甜荞离体胚培养研究

将甜荞的成熟胚和未成熟胚在含有不同种类和浓度的ＭＳ培养基中进行离体培养。在基本培养基中，胚芽生长发育不明显，胚根形成根系，下胚轴长成细长状。在含有１０ｍｇ／ＬＩＡＡ和１０ｍｇ／ＬＢＡ的培养基中，胚芽、胚根发育不良，下胚轴呈粗短状。当培养基中附加０２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ和４０ｍｇ／ＬＢＡ时，胚芽生长发育正常，能长成小植株，但根系愈伤组织化。当培养基中添加１０ｍｇ／ＬＮＡＡ和４０ｍｇ／ＬＢＡ时，胚发育良好，生长旺盛，根系发达，形成正常小植株，３２ｄ时小植株分化出花蕾并能开花和结实。高浓度的ＢＡ与ＮＡＡ共同使用对于甜荞胚的正常生长和发育具有良好的促进作用。     

文冠果成熟胚离体培养及细胞学研究

以文冠果成熟胚为外植体,进行了初代培养、继代培养和生根培养研究,结果表明:初代培养诱导文冠果成熟胚形成不定芽的适宜培养基是MS+2.0mg.L-16-BA+0.1mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,分化率可达94.7%;继代高生长的适宜培养基是MS+0.5mg.L-16-BA+0.5mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,培养50d后,苗高大于0.5cm芽数量平均达11.67株;生根培养的适宜培养基是WPM+1.0mg.L-1IBA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,生根率为70.30%,平均根数为3.57条。并通过石蜡切片技术,观察愈伤组织诱导、愈伤组织分化不定芽以及不定芽发育过程。     

金花茶及其远缘杂种末成熟胚离体培养的初步研究

金花茶授粉(包括杂交授粉)后4个月以上(子叶大于1mm)的未成熟胚(包括生理落果)在修改的MS(HCl—B_11mg/l、烟酸1mg/l)附加NAA0.01、ZT_1、IBA0.5、谷氨酰胺20、丝氨酸2、LH500、琼脂0.76～0.8％、蔗糖6—8％,pH=5.8的培养基上,能发育成幼株。不带子叶的未成熟胚亦能成长,但生长较慢。未成熟胚在离体培养过程中,子叶增长很慢,增大甚少。     

冬小麦未熟胚离体培养研究

通过两件对8个品种（系），1817个幼离体培养的结果发现，幼胚在培养基上放置的方向与其是诱导出愈伤组织，还是直接萌发出芽有着十分密切的关系。利用麦基一号培养基，完全没有必要附加激素即可正常进行小麦幼胚离体培养，辐射处理剂量对冬小麦幼胚离体培养有一定的影响。该试验还证培养基的组分是提高未熟胚诱导成苗率的关键。也验证不同品种（系）辐射处理冬小麦种子的剂量和培养其中的激素，都会对未熟胚的离体培养产生重要影响。     

不同小麦品种成熟胚离体培养的研究

以湖北省当前推广小麦品种鄂恩4号、鄂麦14和豫麦70成熟胚为外植体,采用MS基本培养基,配制20种不同激素浓度及盐胁迫组合的培养基,研究不同基因型、2,4-D浓度及NaCl含量对成熟胚愈伤组织形成的影响。结果表明,不同基因型出愈率差异较大,2,4-D浓度对愈伤组织的形成存在差异,鄂恩4号出愈率最高,在MS 2,4-D8.0mg·L-1培养基上,愈伤组织诱导率达100%,豫麦70次之,在MS 2,4-D6.0mg·L-1培养基上出愈率为90.0%,鄂麦14较差,在MS 2,4-D8.0mg·L-1培养基上出愈率为83.3%。2,4-D浓度在4.0～8.0mg·L-1范围内,对愈伤组织形成有促进作用;盐胁迫条件下,当NaCl浓度大于0.3%时,明显抑制愈伤组织的形成,其中鄂恩4号的耐盐性较强。     

不同消毒方式对华中枸骨组织培养的影响

[目的]考察不同消毒方式对华中枸骨组织培养的影响.[方法]以华中枸骨的带芽新梢茎段为外植体,分顶芽和侧芽,研究乙醇、升汞的作用时间以及吐温的用量对外植体消毒的影响.[结果]华中枸骨新梢顶芽的最佳消毒方式为：浓度75％乙醇作用50 s,浓度0.1％升汞作用6 min,Tween-801滴;侧芽的最佳消毒方式为：浓度75％乙醇作用50 s,浓度0.1％升汞作用7min.[结论]该方法优化了华中枸骨组织培养的消毒方法,为华中枸骨的进一步开发利用提供依据.     

蛇足石杉茎尖灭菌方法与组织培养的研究

[目的]研究蛇足石杉组织培养的灭菌方法和培养条件。[方法]以野生孢子体茎尖为外植体,先用不同灭菌液单独或配合使用对外植体进行表面灭菌,将表面无菌外植体转到添加多种抗生素和孔雀石绿的培养基上杀灭内生菌,然后将外植体分别接种到不同的培养基上,筛选茎尖培养的最佳灭菌方法和培养条件。[结果]最佳表面灭菌方法为70%乙醇灭菌40 s,0.1%升汞溶液灭菌8 min,70%双氧水溶液灭菌10 min,培养2周,表面无菌率为63%。适宜的杀灭内生菌方法为表面无菌的外植体在附加0.5 mg/L孔雀石绿和100 mg/L抗生素AAS的培养基上培养4~6周,无菌率达52%。适宜的培养基为1/4MS矿质元素+1/2MS有机元素+2%蔗糖+4.5 g/L琼脂,pH5.8。在此培养基上茎尖外植体可生长出新枝,并可再生根。[结论]建立了蛇足石杉茎尖组织培养的灭菌方法且筛选出适合其生长的适宜培养基,为蛇足石杉组织培养的深入研究提供实验基础。     

小麦成熟胚的组织培养

【研究目的】为了筛选出小麦(TriticumaestivumL.)成熟胚(MEs)培养和遗传转化受体材料的优良基因型,【方法】以27份优良普通小麦冬性主栽品种或高代育种品系为试材,采用整粒切胚诱愈方法(endosperm-supportedmethod),对小麦成熟胚进行组织培养研究。【结果】结果表明,在成熟胚培养过程中光照、温度、培养基2,4-D浓度、基因型等因素对小麦成熟胚组织培养影响较大;同时小麦成熟胚组织培养存在着较强的基因型依赖性,不同基因型愈伤组织诱导率、分化率、成苗率的差异具有统计学意义(P<0.01)。通过研究从27个小麦基因型中筛选出了3个适合于成熟胚整粒切胚诱愈的基因型,即山农2618、泰山021、河北341,他们的成苗率分别达到了15.38%、25.27%、21.33%。【结论】小麦成熟胚组织培养优良基因型的筛选,为以后小麦的遗传转化和应用基因工程技术进行遗传改良奠定了基础。     

朱砂根外植体消毒及启动培养的研究

以朱砂根优良单株为材料,进行朱砂根外植体表面消毒及启动培养研究,从外植体材料、消毒试剂、消毒流程以及启动培养的基本培养基、植物激素等因素进行试验,通过完全随机试验设计和正交试验设计优化出最佳的外体植消毒流程和启动培养的培养基组合。结果表明,带腋芽茎段外植体的最佳消毒流程是先用75%乙醇消毒50~60 s,再用0.1%Hg Cl2溶液灭菌7 min,其污染率控制在28.9%,成活率达66.7%;朱砂根启动培养的培养基最佳组合为改良MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L。该研究结果为朱砂根的组培工厂化育苗奠定重要基础。     

蝴蝶兰种子胚组织培养优化技术研究

以蝴蝶兰种子胚为外植体,探讨了不同采收期、不同培养基以及在培养基中添加多种附加物对原球茎形成和成苗的影响。结果表明:授粉后120~150 d的成熟种子胚适宜于组织培养,以花宝1号为基本培养基,附加椰子汁、香蕉、土豆汁能很好地诱导原球茎,诱导率达95%以上。添加有机附加物对不同花色的蝴蝶兰品种的培养效果不同,不添加植物生长调节剂也有利于种子萌发。用花多多4号3~4 g/L+Tryptone 2~2.5 g/L+1/3MS+6BA 1.0 mg/L+NAA 0.02 mg/L+CW 100 g/L+AC 0.5~1.0 g/L有利于原球体和幼苗的生长,成苗率达90%以上。     

省沽油组培过程中外植体灭菌技术的研究

[目的]寻求省沽油组织培养中适宜的外植体灭菌方法。[方法]研究了70%乙醇、0.1%HgCl2、0.1%HgCl2+70%乙醇组合在不同灭菌时间内对外植体生长的影响。[结果]适宜的外植体灭菌技术:茎尖用1%HgCl2+70%乙醇处理时间分别为5 min+50 s,成活率100%;茎段用1%HgCl2处理时间为15 m,成活率95%;幼叶用1%HgCl2处理时间为12 min,成活率85%。[结论]1%HgCl2+70%乙醇、1%HgCl2是省沽油外植体的有效灭菌剂。     

萼脊兰胚培养与快速繁殖研究

[目的]研究萼脊兰的组织培养和快速繁殖技术。[方法]以萼脊兰的胚为材料，进行无菌胚培养，筛选适宜的培养基和适宜浓度的添加物。[结果]萼脊兰胚的萌发以1／4MS最适宜，培养80d时萌发率高达70％以上，其次为I／8MS、1／2MS。不同激素种类和不同浓度激素对胚萌发的影响比较大，以浓度0．5mg／LKT的效果最佳。有机添加物对萼脊兰胚的萌发有明显的影响，效果以10％椰子水最好。培养基中添加活性炭，对胚的萌发具有显著的促进作用。[结论]该研究建立起一套杂交兰快速繁殖及成苗的途径，可为以后的生产研究奠定理论基础。     

“早钟6号”枇杷离体胚的组织培养

本研究以"早钟6号"枇杷的离体胚为外植体,建立了枇杷试管苗的离体再生体系,结果表明:试管苗茎段适宜的诱导培养基为:MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;最适增殖培养基为:MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;适宜生根培养基为:1/2 MS+NAA 0.4 mg/L+IBA 0.2 mg/L,本研究为枇杷试管苗的工厂化生产及生物技术等方面的研究奠定了基础。     

Study on Microwave Sterilization of Solid Culture Medium

In this paper,microwave sterilization craft of solid culture medium in fungus growth is studied.The results show that microwave not only can be used to sterilize the micro-organisms which is useless for fungus growth in the solid culture medium,but also has positive effect on fungus growth;and the sterilization process is featured with shorter time and higher efficiency compared with the traditional method.