猪和鸡可食性组织中氨苄青霉素残留的微生物学检测法

为监控氨苄青霉素 ( Ampicillin,AMP)在动物性食品中的残留 ,建立了 AMP在猪肌肉、肝脏、肾脏和鸡肌肉组织中残留的微生物学检测法。组织样品用 1%磷酸盐缓冲液 ( p H6 .0 ) 5倍稀释并提取。以藤黄微球菌 ( Micrococcus lutea)CMCC( B) 2 80 0 1为工作菌 ,用微生物学杯碟法测定提取液中 AMP的浓度 ,并选择各类代表抗菌药进行特异性试验。结果显示 :AMP的最低定量限在缓冲液和组织中分别为 0 .0 0 5 mg/ L和 0 .0 2 5μg/ g,标准曲线和组织标准曲线线性范围分别在 0 .0 0 5～ 0 .0 4 m g/ L 和 0 .0 2 5～ 0 .1μg/ g之间。组织中 AMP的回收率多在 90 %以上 ,日内和日间变异系数分别小于 5 %和 15 %。在 MRL( 0 .0 5 μg/ g)浓度时 ,AMP与阿莫西林和青霉素分别有 80 .4 3%和 86 .4 3%的交叉反应。表明该方法快速、灵敏、简便 ,各参数均符合兽药残留检测要求 ,与其他抗菌药无交叉反应 ,适用于测定 AMP在猪和鸡组织中的残留     

地克珠利在健康鸡及球虫感染鸡体内残留的比较研究

比较研究健康鸡和多型艾美尔球虫混合感染鸡饮水（3mg／L,连续自由饮水9d）地克珠利后在血浆、皮肤＋脂肪、肝脏、肾脏、肌肉组织中的残留量,用甲醇提取血浆中的药物,用乙腈提取组织中的药物,用高效液相色谱法测定。结果表明,感染鸡组织中的残留量比健康鸡组织中的残留量要低,消除更快,说明肉鸡的多型艾美尔球虫混合感染对地克珠利在其体内的残留和消除规律有一定的影响。     

氧氟沙星在肉鸡体内残留的研究

建立了氧氟沙星在肉鸡组织内残留的高效液相色谱分析法。采用荧光检测器，激发波长278nm，发射波长445nm。色谱柱为Hypersil BDS—C18，柱温40℃；以磷酸（三乙胺调pH至2．5）-乙腈（86：14）为流动相，流速1．0mL／min；进样量为20μL。氧氟沙星在肌肉、肝脏和肾脏中的平均回收率分别为96．3％、87．5％和76．4％，检测限为10ng／g，在10～1000ng／mL浓度范围内，氧氟沙星的峰面积与其浓度呈良好的线性相关，达到了氧氟沙星残留分析的要求。利用建立的方法对氧氟沙星在肉鸡体内的残留消除规律进行了研究，以1L水添加500mg的剂量，对120只肉鸡连续给药5d，对不同停药时间所取肌肉、肝脏和肾脏样品中的药物残留进行分析。结果表明，氧氟沙星在肉仔鸡组织中的残留消除速度较为缓慢，至休药23d时，仍可在肝脏和肾脏分别检出39和35μg/kg的氧氟沙星残留。在本实验的条件下，建议氧氟沙星临床休药期以25d为宜。     

禽蛋中农药残留检测方法研究进展

禽蛋是人类获取动物蛋白的重要来源之一,禽蛋中残留的农药导致食品安全隐患,威胁人类健康,因此迫切需要建立有效的检测方法,为禽蛋产品的质量安全提供技术保障.文章综述了近十年来国内外文献报道及我国国家标准中规定的禽蛋样品农药残留的前处理方法和分析检测方法,为进一步研究建立简便高效的分析检测新方法、新技术提供参考.     

商品蛋鸡成髓细胞瘤、血管瘤型J亚群白血病病毒特性的研究

2007年7月山东某蛋鸡场150日龄海兰褐蛋鸡发病,前期经病理学和免疫组织化学检测证明和ALV—J密切相关。取4只病鸡的肝组织处理后接种鸡胚成纤维细胞（CEF）培养,用ALV—J单抗G2-3进行间接免疫荧光检测,结果呈现强阳性,将反应为阳性的4株病毒分别命名为WS0701、WS0702、WS0703和WS0704;根据ALV-J原型株HPRS-103的序列设计1对针对外源性ALV—J的引物P1和P2,提取阳性CEF基因组DNA作为模板,PCR扩增后,得到长度为924bp的片段;PCR扩增产物测序结果显示,与HPRS-103的同源性为95．0％～97．5％,与国内分离株的同源性为92．0％～95．9％;遗传变异分析结果表明成髓细胞瘤型、血管瘤型ALV-J与国内毒株的同源性较远,而与HPRS-103的同源性最近,这说明ALV—J在蛋鸡体内复制的过程中有返祖现象,并呈现了新的肿瘤学特征。     

Prevalence of Cryptosporidium spp. oocysts in cattle and wildlife in Morogoro region, Tanzania

Prevalences of Cryptosporidium spp. oocysts in cattle (n = 486) on five selected farms in Morogoro municipality and three species of herbivorous wildlife (n = 87) from Mikumi National Park, Morogoro, Tanzania, were determined using the modified Ziehl-Neelsen staining technique. Of 486 bovine faecal samples, 5.3% were positive for Cryptosporidium spp. The prevalence of Cryptosporidium was higher in calves less than 3 months of age compared to weaned calves and adults. Cryptosporidium spp. oocysts were detected in both diarrhoeic and non-diarrhoeic animals, but there was a significantly higher prevalence (P < 0.001) of oocyst shedding in diarrhoeic than in non-diarrhoeic animals. Of the 87 faecal specimens from the wildlife species, 36 were from the African buffaloes (Syncerus caffer), 25 from zebra (Equus zebra) and 26 from the wildebeest (Connochaetes gnou). Cryptosporidium spp. oocysts were detected in eight (22%) buffaloes, seven (28%) zebras and seven (27%) wildebeests. Confirmation of the diagnosis was performed using anti-Cryptosporidium monoclonal antibody specific for Cryptosporidium muris, Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium baileyi (Pathasure Cryptosporidium test kit).     

喹烯酮在鸡食用组织中的残留研究

为建立定量测定鸡食用组织中喹烯酮的高效液相色谱检测方法,并依据测定的结果制定最高残留限量,确定其休药期。选用63只鸡,按正常饲料添加喹烯酮(75 mg/kg)饲喂2.5月后,按既定时间点采样。组织样品用乙酸乙酯等试剂提取处理纯化后进样,在312 nm波长处检测,流动相为甲醇-水(70∶30),流速为1.0 mL/min。结果表明,在试验条件下,脂肪、肝脏、肾脏、肌肉组织中的最低检出浓度均为0.005μg/g。平均回收率肌肉为99.23%±2.75%,脂肪为105.15%±8.65%;肝脏为93.55%±11.16%;肾脏为104.10%±9.80%。喹烯酮在肌肉皮脂中1 d后均无残留,而在肝脏和肾脏中的残留量也很小,2 d以后再无残留。精密度考察喹烯酮的日内和日间各组织各浓度的相对标准差均小于8.5%。因此,本试验测定方法灵敏度高,重复性好。停药后4 h所有可食用鸡组织中喹烯酮浓度均低于计算所得的安全组织浓度,故该药在鸡上使用无休药期,即休药期为0 d。     

鸡肉和鸡肝中有机磷农药残留的检测

试验研究了鸡肌肉和肝脏组织中10种有机磷农药残留的气相色谱－火焰光度检测方法。用丙酮和二氯甲烷混合溶剂提取,磷酸缓冲溶液沉淀蛋白质等,凝胶色谱法去除剩余油脂等,用配有火焰光度检测器的气相色谱仪检测,外标法定量。在0.05、0.2、1 mg/kg添加水平,肌肉组织的平均添加回收率在74.2%～108.0％,变异系数在1.6%～17. 3%之间。肝脏组织的平均添加回收率在69.8%~103.0％,变异系数在1.0%～16.0 %之间。     

HPLC-MS/MS法研究恩诺沙星在鸡蛋中残留消除规律

建立了高效液相色谱—串联质谱法（HPLC-MS/MS）检测鸡蛋中恩诺沙星、环丙沙星残留的方法。鸡蛋样品经1%乙酸乙腈提取、正己烷除脂, 用HPLC-MS/MS进行检测。恩诺沙星、环丙沙星在0.5~500 ng/mL浓度时线性关系良好（r≥0.999）;恩诺沙星回收率为87.7%~99.1%、环丙沙星的回收率为89.1%~101.4%, 检测限为0.5 μg/kg, 定量限为1.0 μg/kg。应用该方法初步研究了恩诺沙星及其代谢物环丙沙星在鸡蛋中的残留消除规律。结果表明, 给药后鸡蛋中恩诺沙星及其代谢物蓄积迅速, 停药8 d后痕量恩诺沙星代谢缓慢, 25 d后恩诺沙星代谢完全。     

生鲜禽蛋中兽药使用现状及药物残留有关规定的概述

从国内外禽蛋贸易、蛋禽的安全用药、禽蛋中的食品安全标准、我国禽蛋中兽药残留现状以及相关问题的分析和建议进行综述,以期为养殖企业规范用药、监管部门政策制定和调整、科研机构针对禽蛋食品安全相关研究的开展提供参考。     

噁喹酸、氟甲喹在鸡组织中残留量的检测方法研究

用荧光检测的高效液相色谱法同时检测鸡组织中噁喹酸、氟甲喹的残留量。用1 mol/L磷酸二氢钾溶液作为提取液,过C18固相萃取柱净化、浓缩。HPLC条件:荧光检测器,激发波长325 nm;发射波长369 nm。流动相:0.02 mol/L磷酸-乙腈-四氢呋喃(69∶16∶15)。噁喹酸、氟甲喹标准曲线线性范围在10~500 ng/mL。对不同组织的3种浓度进行回收率测定,其回收率在61%~92%之间,变异系数在15%以内。噁喹酸、氟甲喹的检测灵敏度为20 ng/g。     

如皋鸡Mx基因2032位点多态性与经济性状的关联分析

采用错配PCR-RFLP对如皋鸡Mx基因2032位点多态性进行检测,结果如皋鸡Mx基因2032位点经RsaⅠ酶切后,检测到AA、AG和GG3种基因型,基因型频率分别为0.161、0.678和0.161,抗性等位基因A的频率为0.500。χ2适合性检验表明,如皋鸡Mx基因在RsaⅠ酶切位点上等位基因的分布显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态。分析这3种基因型与如皋鸡一些经济性状间的关联性,结果表明:抗性纯合子AA基因型的个体各阶段体重、体尺以及主要屠宰性状均小于AG和GG基因型的个体,但是除了体斜长和胫围外,AA基因型个体的重要经济性状包括常规肉质与AG和GG基因型的个体差异不显著。     

鸡蛋中兽药残留形成过程及防控措施分析

应用药物治疗产蛋期蛋鸡的感染性疾病时,常会引发鸡蛋中的兽药残留问题。这些残留的兽药会直接危害消费者的生命健康（如过敏反应等）,此外,还会诱导人体内的细菌产生耐药性,造成人类感染性疾病的治疗困难。本文结合鸡蛋的形成过程,对鸡蛋中兽药残留的特点、形成过程及防控措施进行了详细分析。     

高效液相色谱法检测鸡可食性组织中的磺胺氯吡嗪残留

对建立的一种鸡组织中磺胺氯吡嗪钠残留检测的高效液相色谱法进行复核验证。鸡组织样品中磺胺氯吡嗪钠残留经乙腈提取,正己烷去脂肪,MCX固相萃取小柱净化。采用高效液相色谱紫外检测器检测,流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液(35:65,V/V),紫外检测波长为272nm,外标法定量。结果显示,磺胺氯吡嗪钠标准工作液在0.04~20.0μg/mL范围内具有良好的线性关系(R^2=0.9999)。在鸡肌肉、肝脏、肾脏、皮脂各组织中添加浓度分别为40、100、200μg/kg时,各组织样品中磺胺氯吡嗪钠的回收率范围为74.70%~93.67%。磺胺氯吡嗪钠的检测限为20μg/kg,定量限为40μg/kg。复核验证的鸡组织中磺胺氯吡嗪钠残留检测高效液相色谱法可行,方法简便快捷,回收率高,适合鸡组织中磺胺氯吡嗪的残留检测。     

鸡蛋中氟苯尼考残留的现状及思考

鸡蛋中氟苯尼考残留问题较为突出,用药习惯及偏好、非法添加处方外其他药物、使用中交叉污染、贩卖产蛋前期鸡蛋及违法违规滥用药物是造成其残留的主要原因。为规范氟苯尼考的使用,降低兽药残留风险,养殖主体要合理合规使用药物,定期对饲料加工车间进行清洁处理,严格实行凭兽医处方购买使用的规定,在执业兽医指导下正确使用氟苯尼考;在监管执法方面,有关部门要进一步完善氟苯尼考相关的兽药残留标准,明确监管权责,在不同环节、不同主体的生产、流通、经营、使用过程中实行有效监管。     

鸡蛋中喹诺酮类兽药残留现状及对策建议

就鸡蛋中喹诺酮类兽药残留现状、残留危害、原因分析及对策建议进行综述,以期为养殖场(户)用药的规范、相关部门监管执法的开展、鸡蛋中喹诺酮类兽药残留的质量安全标准和评定程序的研究与制定提供参考。     

安卡鸡TLR4基因外显子2多态性及其与经济性状的关联分析

研究采用PCR-SSCP对安卡鸡TLR4基因外显子2多态性进行检测,并分析其多态性对经济性状的影响。结果表明:安卡鸡TLR4基因存在AA、AB和BB 3种基因型,基因型频率分别为0.3143、0.4000和0.2857,等位基因A、B的频率分别为0.5143和0.4857。χ2适合性检验表明,安卡鸡TLR4基因外显子2等位基因的分布处于Hardy-Weinberg平衡状态。序列分析结果显示,TLR4基因外显子2的114 bp和142 bp处各有1个G/A突变,G114A为沉默突变,没有引起氨基酸改变,G142A为错义突变,氨基酸由谷氨酸转变为赖氨酸。分析这3种基因型与安卡鸡一些重要经济性状间的关联性,表明,3种基因型个体间的生长发育性状、屠宰性状以及常规肉质等重要经济指标差异不显著,安卡鸡TLR4基因外显子2对重要经济性状没有显著的影响。     

Different Serum Haemolytic Complement Levels in Indigenous Chickens from Benin,Bolivia, Cameroon,India and Tanzania

Titres of classical (CPW) and alternative (APW) complement pathways were measured in clinically healthy local chicken populations (ecotypes) from Africa (Benin, n = 78; Cameroon, n = 299; Tanzania, n = 101), Asia (India, n = 96) and South America (Bolivia, n = 64). A wide variation was found in haemolytic complement levels between the various ecotypes. Distributions of the classical and alternative complement titres were not normal but were skewed to the right. Differences in complement were found both within and between ecotypes. Furthermore, CPW titres of the indigenous chickens were lower than those determined in commercial layer chickens. This suggests that complement levels background and husbandry. The relationships between complement levels, the chicken MHC(B) complex, environmental antigenic pressure, and survival of the scavenging local chickens are discussed.     

高效液相色谱荧光检测法检测鸡肉中甲砜霉素残留

研究建立了用高效液相色谱荧光法检测鸡肉中甲砜霉素残留的方法。鸡肉经丙酮、二氯甲烷提取,饱和正己烷脱脂,氮吹仪吹干浓缩后,以乙腈―磷酸二氢钠溶液（0.01 mol/L,含0.005 mol/L十二烷基硫酸钠和0.1%三乙胺)（32∶68,V/V）为流动相,流速为1.0 mL/min,荧光检测激发波长为225 nm,发射波长为290 nm。甲砜霉素在0.01～1.75 mg/L浓度范围内,本方法线性关系良好,相关系数为0.9991。当甲砜霉素添加水平为5～500 μg/kg时,该方法平均回收率为79.49%～89.71%,相对标准偏差为4.96%～9.61%;日内相对标准偏差为5.68%～7.47%;日间相对标准偏差为8.89%～11.32%。甲砜霉素检测限为1.5 μg/kg（S/N＝3）,定量限5 μg/kg（S/N＝10）。所建立的方法简便、快速、灵敏度高,适用于鸡肉中甲砜霉素残留的高灵敏度检测。     

鸡肝脏和肌肉组织中常山酮残留的ELISA检测

将常山酮进行人工改造,制备了半抗原常山酮琥珀酸衍生物（Hal-suc）.采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法将半抗原与牛血清白蛋白（BSA）、卵清白蛋白（OVA）偶联,制备免疫原和包被原.动物免疫6次后采血制备抗血清,以间接ELISA法测定血清效价,测得抗血清的最佳工作浓度为1∶102 400.建立了常山酮在鸡肝脏和肌肉组织中检测的ELISA法,该方法在50、100、500 ng/g 的添加浓度水平下,在鸡肝脏和肌肉组织中测得的平均回收率范围分别为74.2%～96.8%和74.3%～90.0%,检测限分别为28和19 ng/g.