神经干细胞的研究现状及展望

神经干细胞是一类具有自我复制、自我更新能力,高度增殖和多种分化潜能的神经前体细胞.为了进一步了解神经干细胞的特性,探求神经系统疾病治疗的新途径,文章参阅国内外相关文献,重点介绍了神经干细胞的分布、纯化培养的方法、增殖和分化的影响因素、应用及目前存在的问题等.     

动物精原干细胞移植研究概况

精原干细胞移植技术是一种新兴的动物繁殖技术,可以提高雄性动物的生殖能力.该技术是从适龄雄性供体动物采集精原干细胞,注射入适龄受体动物的生精小管中使其产生精子的技术.精原干细胞移植首先在小鼠试验中获得成功,接着人们将这项技术应用到家畜等大中型动物中并获得成功.随着这项技术的不断深入研究,精原干细胞不但可以在同种间进行移植,而且在异种间的移植也获得成功.通过对培养体系的不断完善,筛选、移植方法的不断改进,可以获得更高的移植成功率.精原干细胞移植为提高优良品种家畜的生产效率、保护野生动物资源、转基因动物的生产及不育症的治疗提供了一种新的方法.     

肌源干细胞研究进展

近年研究发现,成体骨骼肌中不但存在单能的成肌干细胞卫星细胞,而且还含有多能的肌源干细胞。肌源干细胞起源于胚胎血管祖细胞,在适当的微环境中,可分化为血细胞、成骨细胞、神经细胞等不同胚层的组织细胞。肌源干细胞的表面标志已被初步认识,对其分化的研究,及其分离纯化的技术研究正在进一步深入。文章对肌源干细胞的起源、分离纯化、表面标志、分化潜能及存在问题与展望做一综述。     

哺乳动物PGCs用于胚胎干细胞培养的研究

本文综述了哺乳动物原始生殖细胞（PGCs）的研究进展；归纳了影响用PGCs分离胚胎干培养的因素。阐述了在PGCs用于胚胎干细胞培养研究中存在的问题及应用前景。     

犬造血干细胞移植的作用机制及应用研究进展

造血干细胞(hematopoietic stem cell, HSC)位于造血系统的顶端, 是造血系统中唯一具有多能性和自我更新能力的细胞, 可以分化为各种功能的血细胞, 维持血液系统的建立和动态平衡, 是目前研究最为透彻、临床应用最为成熟的成体干细胞。造血干细胞的这些重要特性, 使得基于造血干细胞在治病机制研究和临床应用中的研究取得了很大进展。以造血干细胞为基础的再生医学治疗是目前治疗恶性血液病和遗传病的首选方法, 如造血干细胞治疗犬白细胞黏附缺陷综合征、犬遗传性贫血、犬淋巴瘤、犬白细胞减少症、犬X连锁严重联合免疫缺陷病等, 但由于白细胞抗原匹配的供体稀缺、可获得的造血干细胞数量有限等原因, 无法满足临床需求, 因此, 如何通过体外培养获得满足临床需要的造血干细胞成为近年来学者们研究的热点问题。作者参照现有研究成果对造血干细胞的来源和体外分离培养、治病机制进行系统的描述, 并对造血干细胞移植治疗遗传性溶血性贫血、白细胞黏附缺陷综合征、淋巴瘤、白细胞减少症、X连锁严重联合免疫缺陷病的临床研究进行综述, 以期为今后将造血干细胞广泛应用于临床治疗提供参考依据。     

哺乳动物成体干细胞的研究进展

干细胞具有自我更新能力,能够产生高度分化的功能细胞。干细胞按照发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。胚胎干细胞的发育等级较高,是全能干细胞,而成体干细胞的发育等级较低,是多能或单能干细胞。一般认为成年组织或器官内的干细胞具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,然而,研究结果表明,组织特异性干细胞同样具有分化成其他细胞或组织的潜能,这为干细胞的应用开创了更广泛的空间。作者主要综述了干细胞的研究进展及几种成体干细胞的诱导分化。     

哺乳动物胚胎干细胞研究进展

胚胎性干细胞包括从动物早期胚胎的卵裂球、囊胚内细胞团细胞分离建系的胚胎干细胞（embryonic stem cell,ESC）、从胚胎生殖嵴原始生殖细胞（primordial germ cell,PGC）分离建系的胚胎生殖细胞（embryonic germ cell,EGC）和来源于畸胎瘤中的胚胎性癌细胞（embryonic carcinoma cell,ECC）。ESC具有发育分化的多潜能性和无限的自我更新能力,能在体外长期培养并具有向机体各种组织细胞分化的潜能。所以,被广泛应用于胚胎发育与细胞分化调控的研究,作为修复器官与器官移植的种子细胞,并可用于转基因动物的生产。作者主要综述了干细胞的最新研究进展,ESC培养扩增诱导机制,定向分化方法。     

Conversion of Goat Fibroblasts into Lineage‐Specific Cells Using a Direct Reprogramming Strategy

Direct reprogramming is an efficient strategy to convert one cell type to another. In this study, due to the failure of maintaining the undifferentiated state of goat embryotic stem‐ and induced pluripotent stem‐like cells in vitro, we explored an alternative way to directly convert goat fibroblasts to lineage‐specific cells. The ‘Yamanaka factors’ was ectopically expressed in fibroblasts for a short term to situate cells in a metastable state. By culturing with lineage‐specific media for 1–2 weeks, the cardiomyocyte‐like cells and neurocyte‐like cells were generated and confirmed by the quantitative RT‐PCR and immunocytochemical staining. The metastable‐state cells could also be converted into oocyte‐like cells (OLCs) after culturing in media with retinoic acid (RA) and bovine follicular fluid (bFF) for 2–3 weeks. The generated OLCs were surrounded by cumulus granulosa cell‐like cells and formed a structure resembling goat cumulus‐oocyte complex from ovaries. This primary follicular structure could be developed further in oocyte mature medium and expressed germ cell‐specific markers. In addition, we found that the induction efficiency was higher and OLC cell size was bigger in bFF than in RA treatment. Altogether, the direct reprogramming of goat fibroblasts into lineage‐specific cells can facilitate stem cell research in domestic animals.     

小鼠胚胎干细胞向骨骼肌细胞分化的研究进展

近年来,胚胎干细胞的应用越来越广泛,在体外将小鼠胚胎干细胞诱导分化为肌肉细胞,并且利用这些分化得来的肌肉细胞治疗肌肉退行性疾病,一直是胚胎干细胞研究领域的热点,而胚胎干细胞的分化机制更是其中的难点。目前,用于诱导小鼠胚胎干细胞分化为骨骼肌细胞的方法很多,但分化的效率并不是很高,所以研究胚胎干细胞向骨骼肌细胞方向分化的机制显得尤为重要。文章仅就最近几年对小鼠胚胎干细胞向骨骼肌细胞方向分化的一些方法及其机制作一综述。     

猪雄性生殖干细胞的分离培养及鉴定

本试验旨在探索猪雄性生殖干细胞(mGSCs)体外分离、培养的适宜条件,建立猪雄性生殖干细胞体外培养体系。采用两步酶消化法对新生小猪睾丸生殖干细胞进行了体外分离和初步的培养鉴定,并利用层黏连蛋白和明胶的不同贴壁特性,比较2种差易贴壁分选方法的富集效果,并对传代后的干细胞培养1周后进行碱性磷酸酶染色鉴定,通过免疫荧光技术检测培养细胞是否表达干细胞标志蛋白OCT-4。试验结果表明,层黏连蛋白更适用于猪生殖干细胞的富集、培养,细胞分选效率及增殖生长明显优于采用明胶分选的方法。培养的mGSCs拥有与小鼠mGSCs相同的形态、增殖及表达特征。鉴定结果显示,生长细胞克隆碱性磷酸酶染色呈阳性,支持细胞碱性磷酸酶染色呈阴性;培养的生殖干细胞克隆表达转录蛋白OCT-4,而饲养层支持细胞OCT-4抗体染色则呈阴性。结果表明培养的干细胞克隆仍保持较好的干细胞活性,保持正常的自我复制和分化潜能,初步建立了生殖干细胞培养体系。     

Isolation,proliferation and characterization of endometrial canine stem cells

In the last decade, progenitor cells isolated from dissociated endometrial tissue have been the subject of many studies in several animal species. Recently, endometrial cells showing characteristics of mesenchymal stem cells (MSC) have been demonstrated in human, pig and cow uterine tissue samples. The aim of this study was the isolation and characterization of stromal cells from the endometrium of healthy bitches, a tissue that after elective surgery is routinely discarded. Multipotent stromal cells could be isolated from all bitches enrolled in the study (n = 7). The multipotency of cells was demonstrated by their capacity to differentiate into adipocytic, osteocytic and chondrocytic lineages. Clonogenicity and cell proliferation ability were also tested. Furthermore, gene expression analysis by RT‐PCR was used to compare the expression of a set of genes (CD44, CD29, CD34, CD45, CD90, CD13, CD133, CD73, CD31 CD105, Oct4) with adipose tissue‐derived MSC. Stromal cells isolated from uterine endometrium showed similar morphology, ability of subculture and plasticity, and also expressed a panel of genes comparable with adipose tissue‐derived MSC. These data suggest that endometrial stromal cells fulfil the basic criteria proposed by the “Mesenchymal and Tissue Stem Cell Committee of the International Society for Cellular Therapy” for the identification of mesenchymal stem cells. Although endometrial mesenchymal stem cells (EnMSC) showed a lower replicative ability in comparison with adipose tissue‐derived MSC, they could be considered a cell therapeutic agent alternative to adipose tissue or bone marrow‐derived MSC in dog.     

干细胞分化调控研究进展

干细胞具有自我更新和多向分化潜能,使之成为再生医学、组织工程和创伤修复等研究领域的热点。明确干细胞分化调控机制是干细胞应用的重要前提和理论基础,现对近期干细胞分化调控研究进展作一综述。     

饲养层细胞对胚胎干细胞的影响及其分离培养的影响因素

胚胎干细胞及其相关研究是生命科学领域中最有活力、最有影响力、最有应用前景的研究方向之一，它与遗传工程，转基因技术等相结合具有重大的理论意义与实践价值。饲养层细胞在胚胎干细胞分离培养的过程中起着异常重要的作用。作者结合实践经验就饲养层细胞对胚胎干细胞的影响进行了概述，介绍了饲养层细胞的分类，并分析了饲养层细胞分离培养的影响因素。     

Perspectives on avian stem cells for poultry breeding

Stem cells have prulipotency to differentiate into many types of cell lineages. Recent progress of avian biotechnology enabled us to analyze the developmental fate of the stem cells: embryonic stem cells / primordial germ cells (PGCs). The stem cells were identified in the central area of the area pellucida of the stage X blastoderms. These cells could be applied for production of germline chimeras and organ regeneration. Generation of medical substrate in transgenic chickens has considerable interests in pharmaceuticals. Sex alteration of the offspring should be enormously beneficial to the poultry industry. Fertilization of the sex‐reversed sperm could lead to sexual alteration of the offspring. These strategies using stem cells / PGCs should be one of the most powerful tools for future poultry breeding.     

胚胎干细胞向生殖细胞分化的研究进展

生殖细胞来源于原始生殖细胞,其在体内的分化机制已基本清楚。随着生殖细胞研究的不断深入,通过体外诱导途径获得生殖细胞已成为现实。将胚胎干细胞体外分化为上胚层样细胞,进而分化为原始生殖样或原始生殖细胞。将它们迁移入胎儿生殖腺,具有减数分裂及产生精子能力,与卵子结合移入缺生精管的生殖腺的新生鼠可以产生健康后代。为此,体外诱导生殖细胞的成功,进一步阐明了胚胎干细胞向生殖细胞分化的机制,为更有效利用干细胞造福人类奠定了基础。     

黄牛精原干细胞研究进展

精原干细胞（spermatogonial stem cells, SSCs）是一类原始精原细胞,具有自我更新以维持自身数量相对稳定和定向分化成精母细胞的能力。随着黄牛精原干细胞研究的深入与完善,目前在黄牛精原干细胞领域的研究和应用已经取得了显著的进展。本文系统阐述了黄牛精原干细胞的分离纯化、体外培养、移植鉴定和永生化细胞系培养等方面的基本状况,同时探讨了我国黄牛精原干细胞研究领域中目前存在的问题,分析了黄牛精原干细胞的应用前景。     

毛囊干细胞的分离方法及其应用

毛囊干细胞是皮肤组织工程理想的种子细胞,分离纯化是其研究的基础手段。毛囊干细胞能分化成毛囊、皮脂腺、表皮,在组织维持与更新及某些临床疾病的治疗中均起到重要的作用。作者介绍了近年来毛囊干细胞几种常用的分离纯化方法,包括组织块法和酶消化法等,为进一步研究毛囊干细胞的特性和应用提供参考。     

毛囊干细胞的研究进展

毛囊干细胞具有干细胞的一般特征,经研究将其定位于毛囊隆突部。毛囊干细胞具有自己特定的表面标志物,并经诱导可分化为各类细胞,笔者对毛囊干细胞在临床上的应用进行了阐述。     

干细胞的研究和利用

干细胞是指分化程度低、多潜能的细胞 ,主要指胚胎细胞和幼稚细胞。人们对干细胞的研究和利用是基于细胞发育的全能性以及干细胞分化多潜能的特性。目前 ,对干细胞的研究引起各方面的强烈关注。有关胚胎干细胞及干细胞疗法得到了普遍重视 ,其中 ,造血干细胞被成功应用于临床疾病治疗。在对干细胞的研究和利用中取得了实质性突破的同时 ,也暴露出一些有关道德和伦理方面的社会问题。但是 ,随着对干细胞研究的深入 ,对干细胞的利用已展现出广阔的前景和产业化的可能。     

胚胎干细胞分化研究进展

胚胎干细胞分化的研究已成为生物学领域中的研究热点,也是生物工程、组织工程产业化的主要方向,文章对胚胎干细胞的生物学性质、分化机制、诱导途径及研究进展做一综述.