禽流感抗体检测中鸭血清非特异性凝集因子去除方法的研究

为探讨不同方法对血凝抑制试验中鸭血清非特异性凝集因子的去除效果，通过对同一批鸭血清分别经不同方法处理后进行一系列对比试验。结果发现，使用鸡红细胞吸附处理法比水浴前处理法（56℃，1min），更能有效去除非特异反应。经20%、10%鸡红细胞悬液预处理同一批鸭血清，表明20%、10%鸡红细胞悬液吸附处理能明显降低血清中非特异凝集因子的影响，20%鸡红细胞吸附在去除非特异性凝集上整体效果最好。在消除非特异性凝集因子上，采用20%鸡红细胞能够获得理想效果。     

不同条件制配鸡红细胞悬液对血凝-血凝抑制试验影响初探

新城疫血凝-血凝抑制(HA-HI)试验是免疫检测最常用的方法之一,本试验旨在探究不同条件下制备1%鸡红细胞悬液对血凝-血凝抑制试验结果的影响。试验表明,母鸡红细胞悬液相对于同品种公鸡对新城疫抗原更敏感;在紧急大量检测新城疫样品时,可以采集鸡心脏血进行快速大量制备HA-HI试验所需的红细胞悬液;1%~1.5%浓度范围的鸡红细胞悬液对HA试验是有效的,但要注意判读误差。     

猪细小病毒HA、HI微量法试验的优化

为进一步优化猪细小病毒HA、HI微量法试验,比较了不同红细胞悬液浓度、不同液体体积、不同形状微量板对试验的影响.结果表明,豚鼠红细胞悬液浓度由原来的0.25％提高到0.5％,用50 μL体积进行HA试验,用25 μL体积进行HI试验,在“V”型微量板上的试验结果更清晰、更易判断.     

苗药复方在鸡胚中抗新城疫病毒的试验观察

用鸡胚培养法和红细胞凝集试验(HA)观察苗药复方提取液在鸡胚中对新城疫病毒的抑制作用。第1组接种病毒尿囊液与苗药复方提取液混合液,鸡胚72 h后存活率为88.9%,HA滴度为0;第1I组接种利巴韦林和病毒尿囊液混合液,鸡胚72 h存活率为47.1%,HA滴度为4log_2;第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,鸡胚72 h后存活率为0,HA滴度为91og_2;第1V组只接种生理盐水,鸡胚72h存活率为100%,HA滴度0。第1组与第1II组差异极显著(P<0.01),第Ⅰ组与第II组差异显著(P<0.05)。试验表明,苗药复方提取液对鸡胚接种的新城疫病毒有较强的抑制作用。     

新城疫HA-HI试验中可用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞

在鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验中,将豚鼠红细胞用戊二醛醛化处理后配制成2%细胞悬液,与2%新鲜豚鼠红细胞、1%新鲜鸡红细胞获得的检测结果基本一致.经醛化的豚鼠红细胞在4℃或室温条件下也能长时间保存而不溶血.结果表明,在新城疫HA-HI试验中可以用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞.     

实验室常用检测技术之血凝抑制试验的应用

正1原理以及适用少数具有血凝性的病毒(如新城疫病毒、流感病毒和减蛋综合征病毒等)能够与鸡的红细胞发生凝集现象,而这种红细胞凝集现象可被特异性免疫血清所抑制。因此可以用于检测血清中的抗体水平、鉴定病毒、辅助诊断病毒性疾病等。2所需物品标准抗原、1%红细胞悬液、灭菌生理盐水或是PBS溶液、待检血清、96孔微量V型板、微量移液器以及适配吸头、5毫升移液器、5毫升吸头、记号笔等。3检验流程3.1工作抗原的配制首先检测HA,结果判定要严格100%凝集,根据HA结果配制4单位病毒液与8单位病毒液。如:     

血凝、血凝抑制实验在生产中的应用详解

1血凝实验(HA)、血凝抑制实验(HI)简介一些禽病病毒如新城疫病毒、流感病毒、传染性支气管炎病毒(经浓缩和酶处理后)、腺病毒127株及几种支原体具有凝集红细胞的活性(血凝素-神经酸酶HN蛋白与红细胞表面受体结合)。这种红细胞凝集现象可被特异性免疫血清所抑制,即血凝抑制实验(HI)。用该实验可检测鸡体注苗后抗体应答水平及证实是否曾受感染。HI实验的基本成分是血凝(HA)抗原,系列稀释的血清和红细胞悬液(0·5%~1·0%)。实验可在小试管或微量板(96孔V型板)中进行。生产中一般多用固定抗原稀释血清法(β-法),而很少用固定血清稀释抗原…     

禽流感血凝抗原(H5亚型,Re-6株)的制造试验

1材料和方法生产用毒种的繁殖。将毒种用灭菌生理盐水作1万倍稀释,尿囊腔内接种10日龄无特定病原(SPF)鸡胚,每胚0.1毫升,置36℃孵育,收获接种72小时的感染鸡胚液,装于灭菌容器内。将检验无菌且1%鸡红细胞悬液凝集(HA)效价≥10 log2的鸡胚液混合,定量分装,-70℃冷冻保存。     

鸡新城疫病毒的简易纯化与电镜检测

用人Ｏ型红细胞吸附－释放病毒的方法纯化粪便中的鸡新城疫病毒（ＮＤＶ），然后再用电镜检查。结果表明，此法具有简便、快速、敏感等特点，可作为检测ＮＤＶ及其它具有血凝性病毒的常规方法推广应用。     

重组鸡α-干扰素对新城疫病毒复制的影响

毕赤酵母表达鸡α-干扰素经纯化后,以50000U、5000U和500U分别与200ELD50新城疫病毒疫苗株LaSota和中等毒力Q株等量混合,接种9～10日龄SPF鸡胚,记录鸡胚死亡情况并测定尿囊液HA效价,结果表明,高浓度重组干扰素可使病毒致死鸡胚时间延长,并使Q株在尿囊液中的HA效价下降2～3个滴度。