酸枣(Zizyphus jujuba Mill)组织培养结合60Co-γ射线辐照诱发突变株

建立了酸枣离体组织培养结合^60Co-γ射线辐照获得突变株的技术。（1)酸枣叶片外植体在含有ZEA 1mg/L,2,4-D0.5mg/L和NAA0.5mg/L的MS培养基上诱导愈伤组织：经^60Co-γ射线辐照后在含有ZEA1mg/L和NAA0.5mg/L的MS培养基上诱导幼苗；（2）试管苗用20-30Gy^60Co-γ射线辐照后，在BAP2mg/L和IBA0.4mg/L的MS培养基上进行不定苗繁殖。（3）不定苗在含有IBA1mg/L和IAA0.4mg/L的MS培养基上生根。此外，用200-450Gy^60Co-γ射线辐照种仁，也能获得突变株。     

转基因马铃薯内源农杆菌脱除

[目的]解决采用抗生素抑菌导致转基因马铃薯植株生长与分化受到抑制的问题。[方法]利用转基因植株诱导试管微型薯,由试管微型薯抽枝获得转基因脱菌植株。[结果]参试3个马铃薯品种中,SI、sⅡ最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋6-BA0．5ms／L＋GA,0．1mg／L＋cef 150me／L,NT最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋ZT0．5mg／L＋GA,0．1mg／L＋cef150mg／L;薯块抽枝最佳培养基为Ms＋ZT0．5mg／L＋NAA0．1mg／L;薯块直径O．5～0．7cm抽枝数最高;转基因脱菌植株在无抗生素快繁培养基中经30d培养污染率为0,脱菌植株茎段粗壮,无分枝现象。[结论]建立的方法脱茵简单易行,为转基因个体的筛选和生长排除了障碍。     

转基因马铃薯内源农杆菌脱除

[目的]解决采用抗生素抑菌导致转基因马铃薯植株生长与分化受到抑制的问题。[方法]利用转基因植株诱导试管微型薯,由试管微型薯抽枝获得转基因脱菌植株。[结果]参试3个马铃薯品种中,SⅠ、SⅡ最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋6-BA0.5mg/L＋GA30.1mg/L＋cef150mg/L,NT最佳试管微型薯诱导培养基为MS＋ZT0.5mg/L＋GA30.1mg/L＋cef150mg/L;薯块抽枝最佳培养基为MS＋ZT0.5mg/L＋NAA0.1mg/L;薯块直径0.5-0.7cm抽枝数最高;转基因脱菌植株在无抗生素快繁培养基中经30d培养污染率为0,脱菌植株茎段粗壮,无分枝现象。[结论]建立的方法脱菌简单易行,为转基因个体的筛选和生长排除了障碍。     

马铃薯试管薯的诱导与利用研究

在三角瓶内诱导微型薯(试管薯),其适宜的诱导培养基为 MS加 5mg/L的 6-BA,在20～24℃条件下全黑暗培养30～35天即可收获。     

马铃薯微型薯诱导因素的研究

以马铃薯栽培品种粤引85-38试管苗为材料进行微型薯诱导试验。结果表明：培养基（MS＋8.0%蔗糖）中添加500 mg.L-1的矮壮素或5 mg.L-1的6-BA均能促进微型薯的形成,增加结薯数量和鲜薯产量,矮壮素和6-BA配合使用虽能提高微型薯的大薯率和鲜薯产量,但平均结薯数量却下降。温度在20~25℃有利于微型薯的形成和膨大;液体培养基诱导微型薯的效果优于固体培养基,是诱导微型薯较好的培养方式;经过壮苗的试管苗诱导微型薯效果优于未经壮苗的植株。     

凤尾蕨组培快繁技术研究

对凤尾蕨进行外植体诱导、继代培养和生根培养试验,结果表明,最适的原叶体诱导培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L,孢子体诱导培养基和孢子体增殖培养基均为MS＋NAA2．0mg／L,生根培养基为1／2MS,培养温度23℃±2℃,光照强度1000lux左右,利用该技术可实现凤尾蕨组培苗规模化生产。     

6种枸杞植物花药培养单倍体的诱导

[目的]获得6种枸杞花粉植物。[方法]以6种枸杞花药为材料,在含不同激素的9种MS培养基上分别进行光照和黑暗离体培养。[结果]6种材料都诱导出了愈伤组织,最高愈伤组织诱导率可达20％,愈伤组织转入培养基（MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L）分化出大量绿色小芽,转入生根培养基（MS＋NAA0．1mg／L）中,20d后得到完整植株。[结论]材料不同,在同一培养基上的诱导率不同,在光照培养下愈伤组织诱导率比暗培养条件下的诱导率高。     

马铃薯脱毒试管苗快繁培养研究初报

选用四个马铃薯脱毒良种，分别在四种附加不同激素浓度的MS培养基上进行脱毒试管苗快繁培养研究。结果表明不同马铃薯品种需要不同的培养基，9号配方MS 6-BA 2．5mg／L NAA0．1mg／L GA0．1mg／L可作为中薯3号、郑薯5号的诱导培养基，①号配方MS 6-BA0．8mg／L NAA0．1mg／L GA0．1mg／L作扩繁培养基。中薯4号的诱导与扩繁适合用①号培养基。     

转基因马铃薯离体快繁与微型薯诱导技术研究

开展转基因马铃薯再生植株的快繁与微型薯诱导技术的研究,为下游种薯规模化生产提供技术和方法。试验结果表明,以不加任何外源激素的MS培养基为最适壮苗增殖培养基。以二步培养法进行微型薯诱导,诱导率较高,即MS 蔗糖8% 琼脂6 g/L的固体培养基上光照培养两周后加入诱薯液体培养基MS 6-BA 4.0 mg/L NAA 0.02 mg/L CCC 500 mg/L 蔗糖8%,结薯率达41.4%。移栽基质选用草炭和珍珠岩以2∶1搭配,优化移栽方法,成活率达80%以上,3月后结薯,微型薯均重3 g。     

低温及碳源对拟南芥菜胚愈伤组织诱导和植株再生的影响

以低温处理1～4d的野生型拟南芥菜种子胚为外植体，分别培养在附加激素为2，4－D（0．05mg／L），BA（0．05mg／L）的B5和MS两种基础培养基上，每种培养基的碳源分别为蔗糖和葡萄糖．结果发现均有愈伤组织的形成，其中B5＋蔗糖培养基有较高的诱导频率；当蔗糖为碳源时，胚外植体先萌发出子叶，然后在下胚轴长出愈伤组织，而改用葡萄糖时，整个胚外植体都形成愈伤组织；将诱导出的愈伤组织转移到B5、MS和1／2MS3种附加2，4－D（0．05mg／L）和BA（0．5mg／L）培养基上进行植株的再生，发现在MS和1／2MS两种培养基上有芽的生成．再将生芽组织转接到1／2MS生根培养基上，均可诱导生根．剥去种皮与低温处理种子有相同的效应，都能打破种子的休眠，这表明低温打破种子休眠的效应部位不是在胚．     

不同因子对翅果油树愈伤组织诱导及分化的影响

翅果油树的繁殖和保存是目前急需解决的问题。本试验选用试管芽苗上的叶片作为外植体, 研究不同因子对愈伤组织诱导及其分化的影响。结果表明: MS+BA1mg/L+2 .4 D1 5mg/L为最佳愈伤组织诱导培养基; 在愈伤组织诱导时, 光照条件以前期暗培养、后期光培养为宜, 温度以24℃~26℃为宜; 在诱导愈伤组织芽分化时,芽分化的培养基以MS+BA1mg/L+IBA0. 05mg/L最为合适, 温度以26℃左右为宜。     

光皮桦叶片再生体系的建立

【目的】建立光皮桦叶片高效再生体系,为光皮桦的良种培育及遗传转化研究提供依据。【方法】以光皮桦无菌叶片为外殖体,分别用含0.6 mg/L TDZ 的MS、WPM和1/2MS培养基进行不定芽诱导分化,筛选最佳基本培养基;向筛选出的最佳基本培养基中添加0.05 mg/L NAA及不同质量浓度（0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2 mg/L）TDZ的激素组合组成不定芽分化培养基,用于诱导不定芽分化,筛选最佳不定芽诱导分化培养基;以1/2MS培养基为基本培养基,分别附加0,0.05,0.1,0.5,1.0,2.0 mg/L的IBA或0.5,1.0,2.0,3.0 mg/L的NAA组成生根培养基,用于再生苗生根,筛选最佳生根培养基,建立光皮桦叶片再生体系。【结果】光皮桦无菌叶片诱导不定芽的最适基本培养基为MS培养基,其诱导的不定芽最多,且芽生长状况良好,颜色深绿;最适不定芽诱导分化培养基为：MS+TDZ 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5.5 g/L,在该培养基上叶片丛生芽诱导率可达到80.00%,平均不定芽数高达12.00个,且芽生长健壮,呈深绿色;最适再生苗生根培养基为：1/2MS+IBA 1.0 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂5.5 g/L,在该培养基上再生苗的生根率达100%,平均根数为14.5个,平均根长为11 cm,根较粗壮,基部无愈伤组织,且产生了很多毛细根。【结论】建立了光皮桦无菌苗叶片的高效再生体系。     

悬铃木再生组织培养体系的建立

为优化从而建立悬铃木再生的组织培养体系,本研究以茎段作为外植体,设计不同的实验方式进行其诱导,分析消毒时间、激素配比、生根培养等对悬铃木再生的组织培养体系的影响,筛选出不同阶段的最佳培养基。结果表明:悬铃木茎段的最佳的消毒条件是0.1%HgCl2消毒17min,最适初代培养基为MS+ZT4mg/L+IAA1.0mg/L,增殖培养基为MS+ZT3mg/L+IAA1.0mg/L,生根培养基为MS+IBA0.1mg/L。     

尾叶桉的组织培养与快速繁殖

[目的]为尾叶桉资源开发及其转基因研究奠定基础。[方法]以尾叶桉无菌苗的下胚轴为外植体,研究不同激素种类及配比对其愈伤组织诱导、芽分化和增殖的影响,并分析不同浓度IBA对其生根的影响。[结果]不同激素组合对愈伤组织的诱导形成均有显著影响,诱导率为35.0%~95.0%。诱导尾叶桉愈伤组织形成的最适培养基为MS+6-BA0.60 mg/L+2,4-D0.10 mg/L,诱导芽分化的最适培养基为MS+NAA0.10 mg/L+TDZ2μmol/L,诱导芽增殖的最适培养基为MS+6-BA0.40 mg/L+NAA0.05 mg/L。尾叶桉再生苗的最适生根培养基为1/4 MS+0.50 mg/LIBA。生根苗在自然环境中炼苗9 d后再移栽,其成活率在90%以上。[结论]接种初期暗培养5 d再转入光照培养和添加50.00~100.00 mg/L Vc,均可有效防止尾叶桉愈伤组织的褐化,提高诱芽率。     

海南钻喙兰原球茎的形态建成和快速繁殖

[目的]为海南钻喙兰的组培快繁提供依据。[方法]以钻喙兰种子作外植体,研究了不同诱导培养基、增殖培养基、生根培养基在钻喙兰组培快繁中的效果。[结果]诱导类原球茎体以MS附加6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L的激素配比较好,分化时间短。增殖培养基为MS+6-BA0~3.0 mg/L+NAA0~0.2 mg/L,以MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L效果最好,平均增殖系数为3~8,把生长健壮并具有2~3片真叶的单个小芽,转接到生根培养基1/2 MS+NAA1.0 mg/L上,经60 d培养,即可获得生长健壮的完整植株。钻喙兰试管苗的移栽基质以粗椰糠∶河沙=1∶1的比例混合较好,湿度80%~90%,移栽成活率达90%以上。[结论]海南钻喙兰种子在温度(25±2)℃,光照强度1 500~2 000lx,光照时间12 h/d的条件下,最适诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L;最适增殖培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,生根培养基为1/2 MS+NAA1.0 mg/L。     

60 Co-γ辐照处理对绿莴笋种子的影响

[目的]选育品质优良的绿莴笋品种。[方法]用剂量分别为0(对照)、20、40、60、80、100、150、200 Gy的60Coγ-射线辐射处理泰国绿莴笋种子,研究60Coγ-辐射处理对绿莴笋种子萌发及幼苗生长的影响。[结果]60Coγ-辐射剂量为20、150、200 Gy时,绿莴笋种子发芽率高于对照。绿莴笋种子发芽率与60Coγ-辐射剂量呈正相关,辐射剂量为20 Gy时发芽率最高。60Coγ-辐射剂量为60 Gy时绿莴笋幼苗长势较对照好。辐射剂量在20~60 Gy范围内时,剂量越大,幼苗长势越好。绿莴笋幼苗根长在辐射前期与60Coγ-辐射剂量呈正相关,芽长与60Coγ-辐射剂量呈正相关。[结论]60Coγ-辐射剂量为20 Gy时绿莴笋种子发芽率最高,辐射剂量为60 Gy时绿莴笋幼苗长势最好。     

金柑组织培养与快速繁殖体系的建立

为了建立金柑(Fortunella japonica (Thunb.) Swingle)组织培养与快速繁殖体系,本研究以金柑胚根、子叶、茎段、叶片等不同外植体为材料,采用器官发生型以及短枝扦插型为主要培养途径,进行金柑的组织培养,研究不同浓度的植物生长调节剂对金柑快速繁殖体系建立的影响以及愈伤组织诱导和分化的最适条件,筛选出诱导愈伤组织形成不定芽的最佳外植体与最适培养基。研究结果表明,金柑诱导愈伤组织形成不定芽的最佳外植体为幼嫩的茎段,诱导金柑子叶形成愈伤组织的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA +1.0 mg/L NAA+3% 蔗糖+0.7% 琼脂,诱导子叶愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+3% 蔗糖+0.7% 琼脂。由此证明上述组织培养途径是可行的。     

柳枝稷的组织培养技术研究

[目的]探索柳枝稷的不同组培条件,优化其诱导和分化培养基。[方法]以柳枝稷幼穗为外植体进行组织培养获得组培苗,建立相应的植株再生系统。[结果]愈伤组织诱导培养基为MS＋5．00mg／L2,4-D＋0．15mg／L6．BA＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;继代与增殖培养基为MS＋4．00mg／L2,4-D＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;分化培养基为MS＋0．2mg／L KT＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;生根培养基为1／2MS＋0．80％蔗糖＋0．70％琼脂。愈伤组织诱导和继代培养阶段培养温度为24℃,在分化和生根培养阶段培养温度为28℃。幼穗外植体的出愈率达95％,愈伤组织增殖率在800％-1000％以上,分化率达80％以上,生根率在98％以上。经炼苗后,获得的组培苗的移栽成活率达95％以上。[结论]采用优化激素搭配的培养基可得到高效的诱导率、分化率和生根率。     

亳菊叶片组织培养技术优化的研究

[目的]研究不同植物生长物质对诱导亳菊叶片愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。[方法]以亳菊组培苗的叶片作为外植体,使用正接和背接2种方式接种于正交设计的培养基中,诱导叶片形成愈伤组织;再将愈伤组织接种于新配制的培养基中,对愈伤组织诱导率和芽分化率进行方差和极差分析。[结果]诱导亳菊叶片形成愈伤组织最佳的培养基组合为MS＋2.0 mg/L 2,4-D＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA;诱导愈伤组织分化成不定芽的最佳培养基是MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/LNAA。[结论]为亳菊的遗传转化体系构建和诱变育种提供了高效的操作系统。     

Landersberg生态型拟南芥愈伤组织的诱导和植株再生体系的研究

以landersberg生态型的拟南芥为试材,建立了一套简便有效的组培体系。无菌苗的生长采用竖直培养,易于收集外植体。莲座叶、叶柄、下胚轴、根分别作为外植体在B5+5 mg/L2,4-D+0.5 mg/L KT培养基上诱导愈伤组织,结果表明,莲座叶作外植体出愈慢,出愈率低,愈伤组织质量较差;叶柄、下胚轴和根作外植体出愈快,且愈伤组织质量好,后期易分化。根外植体在MS+5 mg/L KT+0.1 mg/L IAA配方的出芽诱导培养基上诱导2～3周后,愈伤组织能有效分化出芽,分化率达100％。分化出的芽移至MS+2 mg/L NAA培养基上竖直培养,2周左右诱导分化出根,然后移至MS培养基上开花结果。