测定α-淀粉酶活性的两种方法的比较研究

α-淀粉酶活性是衡量小麦穗发芽的一个生理指标,为此提出了对小麦α-淀粉酶活性的快速测定方法的研究。α-淀粉酶活性的测定方法有多种,本文仅探讨了常用的3.5-二硝基水杨酸法和凝胶扩散法。结果表明,两种方法的测定结果差异不显著,而且两者呈显著正相关;从变异系数上看,后者的变异程度较低,其精度较高;从误差来源上看,前者引起误差的因素较后者多;后者较为简便快速,准确度较高,重复性较好,可用于大批量样品的分析。     

小麦α-淀粉酶活性测定方法比较

采用凝胶扩散法、3,5-二硝基水杨酸比色法和降落值法分别测定小麦α-淀粉酶活性,对测定结果进行了比较分析,结果表明:虽然3种方法都可以测定α-淀粉酶活性,但是凝胶扩散法与3,5-二硝基水杨酸比色法的结果存在显著的曲线相关,直线性相关不显著,3,5-二硝基水杨酸比色法与降落值法的结果呈极显著负线性相关。通过比较研究,认为降落值法是测定大量样品α-淀粉酶活性的最佳方法。     

小麦穗发芽与籽粒内可溶性糖和α-淀粉酶活性的品种差异

为了探索不同小麦品种潜在穗发芽能力存在的差异,分别对豫麦34、豫麦18、豫麦70和豫麦49等4个河南主栽小麦品种在籽粒发育后期的潜在发芽势、可溶性糖含量和α-淀粉酶活性进行了测定,结果表明,①所有品种在开花20 d后均有一定的发芽能力,其中豫麦34潜在发芽能力明显高于其他几个参试品种;②豫麦34籽粒可溶性糖含量相对较高,而豫麦18最低,且4个品种在花后20 d的可溶性糖含量都略有升高的趋势,而在花后25~30 d又开始下降;③α-淀粉酶活性与可溶性糖含量的变化规律在整个籽粒发育过程中大体呈一致趋势;④穗发芽率与籽粒可溶性糖含量及α-淀粉酶活性呈正相关关系,豫麦34和豫麦49的籽粒可溶性糖含量与α-淀粉酶活性达极显著正相关。因此,小麦穗发芽现象与籽粒内较长时间维持高的可溶性糖的含量和α-淀粉酶活性有密切关系。     

小麦种子萌发和幼苗生长与α-淀粉酶活性关系的研究

研究了不同小麦品种间萌发速率与淀粉酶活性的关系和同一品种用植物激素——油菜素的内酯(BR)(0.01、0.1、1ppm)浸种后,小麦种子萌发和生长与淀粉酶活性的关系。结果表明:小麦不同品种间种子的发芽速率与α—淀粉酶的活性成正相关。用BR浸种处理后,小麦种子的发芽率有所提高,小麦种子的萌发速率和萌发期幼苗生长与α—淀粉酶的活性成正相关。     

不同产区烤烟醇化过程中α-淀粉酶活性的变化

以六大烤烟产区(云南、湖北、东北、四川、贵州和福建)的烟叶为试验材料,研究醇化过程中烤烟α-淀粉酶活性的变化。结果表明,醇化过程中烤烟α-淀粉酶活性随时间的延长先上升后下降,且在醇化15个月时其活性达到最大;相关分析显示,α-淀粉酶活性与烤烟感官质量呈极显著正相关;α-淀粉酶活性与醇化时间的回归模型为y赞=-0.017 x2+0.52 x+1.77,方程检验极显著。通过检测α-淀粉酶活性,利用回归模型预测烤烟的感官质量,从而为烟叶工业利用提供指导。     

低温冷害对不同玉米种子萌发及α-淀粉酶活性的影响

东北地区玉米春季播种时,常有“倒春寒”现象,低温冷害频发会造成玉米减产,针对这一问题,选择黑龙江省不同积温带种植的玉米杂交种为材料,以25℃为对照,以15和8℃为低温胁迫处理,研究低温冷害对不同玉米品种种子萌发特性和α-淀粉酶活性的影响。结果表明,低温冷害显著影响各品种种子发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数和α-淀粉酶活性,表现为25℃>15℃>8℃。不同玉米品种抗低温能力差异显著,其中福玉208、中邦9号、呼单1779三个品种受温度影响较大,齐禾401、京农科728、嫩单19、富尔116、嫩单35这些品种抗低温能力较好。     

小麦子粒α-淀粉酶活性测定方法的改进

α-淀粉酶活性是与小麦穗发芽有关的重要生理指标。对测定α-淀粉酶活性的3,5-二硝基水杨酸法进行了常量法和微量法试验。通过对比研究,提出了改进的微量测定方法,并对其利用进行了讨论。     

中华鲟摄食不同水平的两种糖后淀粉酶活性的变化

用质量分数各为0(对照组)、10%、20%、30%、40%的糊精和α-淀粉为糖源的9种纯化饲料投喂中华鲟Acipenser sinensis幼鱼(初重为9.39±0.97 g),60 d后测定其摄食8 h内肝、胃、十二指肠、瓣肠的淀粉酶活性。结果表明:在含有可消化糖饲料的各试验组中,摄食后中华鲟胃淀粉酶活性缓慢下降,然后上升,十二指肠与瓣肠淀粉酶活性则上升,肝脏中无淀粉酶活性;在摄食含有糊精饲料的各试验组(2-5组)鱼中,胃、十二指肠、瓣肠淀粉酶活性最高值分别出现在摄食后5、3、3 h的20%、30%、10%糊精试验组。在饲料中含有α-淀粉的各试验组(6-9组)中,胃、十二指肠、瓣肠淀粉酶活性最高值分别出现在摄食后5、5、3 h的40%、20%、20%α-淀粉试验组。未添加可消化糖的对照组鱼淀粉酶活性显著低于添加可消化糖的各组(P<0.05)。两种糖比较,中华鲟饲料中添加质量分数为30%的糊精最适宜。     

大麦Amy32b的遗传多样性及其对α-淀粉酶活性的影响

【目的】通过对Amy32b遗传多样性研究,发掘与α-淀粉酶活性相关的等位变异。【方法】设计能够覆盖Amy32b序列的特异引物,研究该基因在中国大麦的等位变异类型:单核苷酸多态性位点(SNP)及插入(insert)、缺失(delete)等。利用RT-PCR获得Amy32b的全长cDNA序列,分别将携带等位变异的全长cDNA和截短cDNA连入表达载体pET-28a(+),并对表达产物进行纯化、活力测定及比较研究。【结果】根据对已公布的Amy32b(x05166)的扩增,发现在基因编码区有一多态性位点G/A(cSNP)和1个A碱基的插入/缺失突变。分别位于Amy32b的碱基序列2 269 bp和2 403 bp,其中,G/A转换导致第355位氨基酸由谷氨酸(E)替换为赖氨酸(K);A碱基插入导致终止密码的形成,引发了碱基片段缺失以及编码氨基酸序列和α-淀粉酶蛋白C端的提前终止。克隆出Amy32b全长和截短cDNA,长度分别为1 314 bp和1 266 bp。酶活性测定结果表明,两种全长重组酶(rAmy32b_A和rAmy32b_G)均具有正常且相同的淀粉酶活性,而截短的突变酶(rΔAmy32b)未能测出淀粉酶活性。【结论】Amy32b的碱基插入/缺失突变形成终止子,引发碱基片段缺失和编码α-淀粉酶C端截短,造成酶活性的丧失;而G/A转换造成的氨基酸替换则对该酶活性没有影响。     

中国大麦地方品种的遗传多样性及α-淀粉酶活性的 全基因组关联分析

【目的】了解中国大麦地方品种的遗传多样性,为大麦α-淀粉酶活性基因寻找有效的分子标记。【方法】利用覆盖全基因组的41对简单重复序列（SSR）标记引物,对257份中国大麦地方品种进行PCR扩增;采用Nei’s遗传距离和邻接（neighbour-joining）法进行聚类分析;在对群体结构和连锁不平衡分析的基础上,进行基于全基因组的表型与基因型的关联分析。【结果】共鉴定出709个等位变异,平均每个位点的等位变异数为17个。41个SSR标记位点的多态性信息指数（PI）变化范围为0.23（Bmag 0385）—0.94（Bmac0032）,平均为0.6385。257个中国大麦地方品种聚合成9个不同的结构类群,发现5个与大麦α-淀粉酶活性显著关联的标记位点。【结论】中国大麦地方品种中蕴藏着丰富的遗传等位变异;各类群的特性和品种来源符合“遗传关系密切、表型特征特性相同、地理生态相近”的同类群聚集规律。在5个关联位点中,位于7H染色体上的Bmag0385位点,其等位变异A215的酶活增强效应最大;此外,7H上Bmac0273的等位变异A141的增效作用较大,可用于啤酒大麦育种的分子标记辅助选择。     

春小麦籽粒发育过程中α——淀粉酶活性的研究

本实验研究旨在运用比色法来测定萌发种子的α—淀粉酶活性,结果发现,供试品种中除垦北1号α—淀粉酶活性较高以外,大都在200麦芽糖μgg~(-1)m~(-1)左右。由α—淀粉酶活性状态可直接判断种子生活力强弱,从而可以确定种子质量及其应用价值高低。     

小麦主要性状的遗传模型分析

选用８个小麦品种采用双列杂交方法组配了２８个杂交组合,对其主要性状进行了遗传研究,结果表明：单株粒重和穗数符合加快模型;千粒重,穗粒数,结实小穗数,穗长符合加性－显性模型,株高,颈长符合加性－显性－上位性模型。     

野生二粒小麦α-淀粉酶抑制因子编码基因序列分析

对3份野生二粒小麦(Triticum dicoccoides)材料的抗虫24 kDaα-淀粉酶抑制因子编码基因进行分离克隆,得到72个24 kDaα-淀粉酶抑制因子基因,并进行序列分析。结果发现,α-淀粉酶抑制因子在野生二粒小麦中以多拷贝形式存在,经卡方检验初步推断野生二粒小麦中的α-淀粉酶抑制因子成熟蛋白编码基因序列变异类型在供试材料间无显著差异。序列分析表明,24 kDaα-淀粉酶抑制因子成熟蛋白编码基因序列无论在野生二粒小麦种内还是与小麦属的其他物种之间,都具有很高的一致性,说明该基因在进化过程中十分保守。     

不同浸泡条件对小麦发芽前后α-淀粉酶活力的影响

[目的]优化小麦发芽前浸泡条件。[方法]采用L(934)正交试验进行优化,通过分光光度法测定α-淀粉酶活力。[结果]各因素对小麦发芽前浸泡对α-淀粉酶活力影响的主次顺序依次为:浸泡温度>浸泡方式>加碱量。小麦发芽前最适浸泡条件为15℃,"浸4断10",加碱(生石灰)量0.015%。[结论]最佳的浸泡条件对发芽产生了积极的影响,使发芽过程中的α"淀粉酶活力有较大的增强。     

小麦种子糊粉层细胞内非GA3诱导性α-淀粉酶同功酶的分析

测定了小麦品种RL4137不同吸水时间除胚半切种子内的α-淀粉酶活性以及同功酶分析。结果表明，这些酶可能与曾经报道过的发育中的种皮内不存在GA3刺激下诱导的α-AMY2相同。但具有热不稳定性。     

利用α-淀粉酶和β-淀粉酶制备缓慢消化淀粉

以普通玉米淀粉为原料,分别利用α-淀粉酶和β-淀粉酶制备缓慢消化淀粉(SDS),并通过正交试验优化了制备SDS的最佳工艺条件.通过正交试验确定α-淀粉酶法制备SDS的最佳条件为:pH 6.5,酶反应时间50min,温度50℃,α-淀粉酶用量240 U,在此条件下SDS最高产率为7.11%;通过正交试验确定β-淀粉酶法制...     

红凤菜总黄酮和总酚含量及其抗氧化和α-淀粉酶抑制活性的研究

为探究红凤菜一年中总黄酮、总酚含量及其抗氧化、抑制α-淀粉酶活性的动态变化,收集2019年1-12月的12份红凤菜,以95％乙醇提取,得到12份提取物.采用紫外可见分光光度法测定不同月份红凤菜总黄酮和总酚含量;以维生素C为阳性对照,采用ABTS和DPPH法,评价不同月份红凤菜抗氧化能力;以阿卡波糖为阳性对照,采用α-淀粉酶抑制试验,评价不同月份红凤菜抑制α-淀粉酶活性.结果表明:红凤菜1、2、12月总黄酮和总酚含量较高,抗氧化能力和抑制α-淀粉酶活性较强.这一研究提示红凤菜更适合在1、2、12月药用及食用.     

普通小麦千粒重的配合力与遗传模型分析

采用Griffing方法2,利用8×8不完全双列杂交法分析了8个普通小麦品种千粒重的配合力和遗传模型。结果表明,千粒重遗传符合加性———显性模型,以加性效应为主,平均显性度为0 3714。小麦品种郑9023和扬麦158的一般配合力效应值高,可作为改良籽粒粒重的最佳亲本。     

高产小麦主要性状的遗传模型分析

选用 1 9个高产小麦品种 ,形成 1 0 9 1 9增广 NCII设计 ,对 1 8个数量性状进行遗传研究。结果表明 ,一节高比、二节高比符合加性效应模型 ,三节高比和退化小穗数符合加性—显性效应模型 ,株粒重、株穗数、单穗重、单株生物产量、千粒重、穗粒数、有效小穗数、穗长、株高、穗颈长、穗下一节长、穗下二节长、穗下三节长、颈高比等 1 4个性状不符合加性—显性效应模型 ,还存在其它效应。对三节高比和退化小穗数二性状的遗传参数估计结果表明 :二性状雌、雄亲的遗传变异主要是加性效应 ,平均显性度为程度不同的部分显性 ;二性状增、减效等位基因频率在雌亲组中和雄亲组中 ,平均来说都不相等 ;二性状在雄亲组中显性等位基因占优势 ,在雌亲组中显、隐性等位基因频率大致相等 ,穗下三节高比的提高和退化小穗数的减少是由显性基因控制的 ,且均为部分显性。     

小麦矮秆基因Rht3和赤霉酸不敏感基因Gai3与α-淀粉酶的表达

以小麦赤霉酸反应不敏感的Rht3矮秆基因两个近等基因系及其分离群体为材料,分析了Rht3、Gai3与α-淀粉酶表达的相互关系.结果表明,Rht3、Gai3能强烈地抑制萌发籽粒α-淀粉酶的表达,降低α-淀粉酶活性水平.高矮亲本间α-淀粉酶活性差异明显,矮扬3、矮苏3和扬麦3号、苏麦3号的α-淀粉酶OD值分别为0.071,0.080和0.635,0.720.经χ2测验,两群体中α-淀粉酶活性高、中、低的分离比率符合1:2:1的理论比.株高与α-淀粉酶活性间的相关系数分别为0.791 5和0.688 8达极显著水平.赤霉酸反应与α-淀粉酶活性的相关系数更高,分别为0.854 0和0.735 3.对几株Rht3与Gai3重组类型植株的α-淀粉酶活性分析表明,Rht3对α-淀粉酶活性的影响更大.