马铃薯抗Y病毒资源材料的鉴定与筛选

用洋酸浆(Physalis floridana)、A6(Solanum demissum×Aquila)的后代、黄苗榆烟(Nicotianatabacum)、鲁特格尔斯番茄(Lycopersicon esculentum cv.Rutgers)4种指示植物汁液摩擦接种法,对55份马铃薯普通栽培种进行Y病毒的带毒鉴定试验,选出33份不带马铃薯Y病毒的材料;用接种过的番茄为砧木,以不带马铃薯Y病毒的材料为接穗进行嫁接传毒试验;对嫁接后能正常生长30 d以上的材料又回接了该种病毒病的寄主进行抗性鉴定试验。通过试验筛选出10份抗马铃薯PVY病毒的材料,其中免疫的有1份,过敏的有9份,从而为马铃薯抗Y病毒育种提供资源材料。     

马铃薯病毒外壳蛋白融合基因转化马铃薯及其抗病性分析

将多种病毒的有效核酸片断拼接成融合基因转入马铃薯可获得多抗马铃薯材料。针对马铃薯生产中分布广泛、危害严重并经常混合感染的马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)和马铃薯S病毒(PVS),开展了利用基因工程方法获得兼抗4种马铃薯病毒转基因马铃薯材料的研究。试验在前期获得含4种马铃薯病毒外壳蛋白基因片段的质粒pART27-XSYV-rh的基础上,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化马铃薯(Solanum tuberosum)品种‘陇薯3号’,PCR扩增和PCR-Southern杂交证明,4价融合基因已整合到马铃薯基因组中。qRT-PCR分析表明,该融合基因在转基因植株中能正常表达。3株转基因植株的抗病性鉴定结果表明,2株对4种病毒同时具有抗性;1株对PLRV侵染表现阳性,对另外3种病毒同时具有抗性。     

北方晚熟马铃薯病毒抗性鉴定及分子标记检测

病毒病等病害是中国马铃薯产业的重要限制因子。为了马铃薯病毒病等病害的防治,研究通过病毒接种鉴定了15个北方晚熟马铃薯品种(系)对马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、马铃薯S病毒(Potato virus S,PVS)和马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)四种主要马铃薯病毒的抗性,同时检测了这些品种部分病害的相关分子标记。有10份试验材料至少对一种病毒表现出抗性,其中‘京张薯4号’‘冀张薯8号’‘冀张薯12号’‘2013-19-14’和‘2013-89-2’同时具有3种病毒抗性,表明京张薯和冀张薯系列马铃薯具有较好病毒综合抗性。标记检测结果显示,‘冀张薯8号’‘2013-38-32’和‘2013-89-2’的PVY抗性可能来源分别为Ry_adg、Ry_chc、Ry_sto,而‘冀张薯12号’的PVX抗性可能来源于Rx1。根据标记与抗性表型的符合程度推测,上述马铃薯品种(系)的PVY抗性可能主要来源Ry_sto,PVX抗性可...     

定西市马铃薯种质资源引进与利用

为了明确从国内外引进的马铃薯种质资源在定西旱作区的表现,分早熟、中熟、晚熟,采用对比法对45份马铃薯种质资源的形态学特征、生物学特性进行了鉴定分析和评价。试验结果表明：在引进的45份材料中,晚熟材料有23份,田间抗病性强的材料有10份,抗旱性强的材料有23份,商品薯率在80％以上的材料有8份。对种质资源进行育种利用,通过配置优良组合,进一步挖掘资源潜力,筛选出‘冀张薯8号’等优良亲本材料。同时提出加强种质资源的深入鉴定,进行以拓宽遗传基础为主要目的的种质创新,丰富其遗传多样性,为以后针对不同用途利用这些资源提供有价值的参考依据。     

定西市马铃薯种质资源引进与利用

为了明确从国内外引进的马铃薯种质资源在定西旱作区的表现,分早熟、中熟、晚熟,采用对比法对45份马铃薯种质资源的形态学特征、生物学特性进行了鉴定分析和评价。试验结果表明:在引进的45份材料中,晚熟材料有23份,田间抗病性强的材料有10份,抗旱性强的材料有23份,商品薯率在80%以上的材料有8份。对种质资源进行育种利用,通过配置优良组合,进一步挖掘资源潜力,筛选出‘冀张薯8号’等优良亲本材料。同时提出加强种质资源的深入鉴定,进行以拓宽遗传基础为主要目的的种质创新,丰富其遗传多样性,为以后针对不同用途利用这些资源提供有价值的参考依据。     

1个与卡瓦胡椒特异的SCAR标记的获得

采用6份卡瓦胡椒材料、21份栽培胡椒和野生胡椒材料、1份不同属的草胡椒材料共计28份试验材料,在对它们进行了RAPD研究的基础上,进行了SCAR分子标记研究。设计1对卡瓦胡椒特异SCAR引物P8.1和P8.2,用这对特异引物对本次试验的28份材料进行PCR扩增,结果只有6份卡瓦胡椒材料扩增出了预期大小355bp的特异带,其它材料均无任何扩增。这说明引物P8.1和P8.2为卡瓦胡椒特异SCAR引物,这对卡瓦胡椒种质资源的鉴定有一定帮助。     

国外马铃薯资源的引进与鉴定

我国马铃薯育种一直以高产为育种目标 ,而忽视了品种加工和品质性状的选择 ,特别是缺乏特殊用途的品种类型[1] 。为了扩大遗传基础 ,丰富品种资源 ,对国外引进的 14份马铃薯材料农艺性状、产量性状及品质性状进行分析与鉴定 ,试图筛选综合性状好的作为马铃薯育种的亲本材料或直接利用。经过试验比较 ,其中有 4份材料综合性状比较好。     

马铃薯种质资源的抗病毒筛选：实生种子及无性系的筛选和鉴定

１９９０－１９９２年间，应用喷枪、磨擦和蚜虫接种，对从国际马铃薯中心引入的１０８份杂交组合的实生种子，进行了抗病毒鉴定筛选。评价出一批对马铃薯Ｙ病毒抗性较强的组合如：３８８９８５（１９．４％），３８９３６０（１９．９％）和较抗马铃薯卷叶病毒的组合如３８８９８５、３９０１９４等。结合对病毒的抗性和经济性状选出７份株系，这些材料可以作为抗病毒育种资源利用。     

应用三重RT-PCR技术检测三种马铃薯病毒

马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯M病毒(PVM)和马铃薯A病毒(PVA)是导致马铃薯种薯退化的重要病毒,有时复合侵染,因此建立快速、准确检测体系尤为重要。试验从中、英文文献中查找引物,通过筛选和综合评价,每种病毒确定1对特异性引物,再通过对PCR部分Mg2+、d NTPs、Taq DNA聚合酶浓度梯度优化,最终建立了稳定的三重RT-PCR反应体系,得到长度分别为711、520、273 bp的特异性条带。应用该体系和DAS-ELISA方法同时对田间150份马铃薯毒源样品进行检测,两种方法检测结果吻合,三重RT-PCR体系的灵敏度更高、特异性更强,可以用于马铃薯田间样品检测。     

用酶联免疫吸附法(ELISA)测定马铃薯块茎卷叶病毒

酶联免疫吸附试验法从首次报道以来(Voller等,1976;Clark和Adams,1977)已被认为是鉴定马铃薯y病毒、A病毒和卷叶病毒的很有前途的方法。与标准方法相比,这一技术在灵敏和快速,特别是用常规提取法鉴定叶片中的马铃薯病毒等方面,都有其优越性。应用Pollhne滚轮榨汁器(Gugerli,1979b),一