槟榔APV1病毒多克隆抗体制备及酶联免疫检测

槟榔是海南重要的经济作物,APV1 (areca palm velarivirus 1)病毒引起的槟榔黄化病严重危害槟榔产业的健康发展。研发快速精准的APV1病毒检测技术对于防控槟榔黄化病具有重要意义。本研究利用RT-PCR扩增APV1病毒的外壳蛋白(CP)基因序列,构建原核表达载体pET30a-APV1-CP并转化至大肠杆菌,经诱导表达和蛋白纯化获得APV1-CP蛋白。通过注射兔子获得多克隆抗体,经检测其效价为102 400。采用ELISA和RT-PCR分别对槟榔APV1病毒检测,发现两种检测方法大部分的检测结果基本一致。APV1病毒ELISA检测技术对槟榔种苗的检测及槟榔黄化病的防控具有重要的实用价值。     

酶联免疫法定量检测市售燕窝及其加工制品中特征蛋白含量

燕窝唾液酸糖蛋白是一种燕窝特征蛋白,在燕窝中高丰度存在且热稳定。其含量的高低指示了燕窝的掺伪情况以及燕窝制品中燕窝的添加量。通过竞争酶联免疫检测方法对市售燕盏及其加工制品中的燕窝唾液酸糖蛋白含量进行调查,结果显示燕窝专柜、农批市场、餐馆等各个环节无论是50元以上包装精美的高档燕盏,还是10元左右的低价散装产品均存在唾液酸糖蛋白含量较低的样品。唾液酸糖蛋白含量和燕窝制品的单价总体上呈正相关,部分燕窝制品未检出燕窝唾液酸糖蛋白。     

小麦赤霉病菌定性和定量ELISA检测方法的建立

以3株小麦赤霉菌(禾谷镰刀菌BDX4-5,BDX3-2,HwH4-5)的混合菌体蛋白为免疫原,制备多克隆抗体,建立了检测小麦赤霉菌的间接ELISA法。结果表明,小麦赤霉菌抗血清的效价为1∶640 000,灵敏度为0.005μg/mL。由ELISA法测定的结果可知,此抗体可以与镰刀菌发生特异性反应,而与其他供试的病原真菌的菌体蛋白呈阴性反应。对田间人工接种的小麦籽粒进行了ELISA定量测定,病菌的生物菌量与病害的发病程度相符合。     

解读酶联免疫（ELISA）法测定食品中玉米赤霉烯酮的影响因素

以酶联免疫（ELISA）法测定食品中玉米赤霉烯酮为例,通过对标本采集及其处理、测量前的物品准备、操作过程的影响因素、判读结果的分析等环节中注意事项的描述及分析,减少人为因素对实验的影响,提高检测的准确度。该文中部分内容在酶联免疫（ELISA）法测定食品中真菌毒素时是通用的,在食品卫生检测中会经常用到。     

异戊烯基腺苷组细胞分裂素的快速酶联免吸附测定法的建立

从样品制备，ＥＬＩＳＡ类型及免疫反应时间三方面着手建立了异戊烯基腺苷（ｉＰＡ）组细胞分裂素的快速酶联免疫吸附测定法。用ＮａＩＯ４氧化合成免疫原ｉＰＡ－Ｎ９－ＢＳＡ（ＢＳＡ：牛血清白蛋白）。由此获得的兔抗血清效价达１：３４５００。交叉反应试验表明该抗血清只识别ｉＰＡ组细胞分裂素。因此本研究中采用直接型（即固相抗体型）ＥＬＩＳＡ，并将最佳免疫反应平衡时间缩短至３０ｍｉｎ（４℃）。所建立的ｉＰＡ组ＥＬＩ     

酶联免疫快速检测奶酪中AFM1检测方法的建立

建立奶酪中AFM1的酶联免疫快速检测方法。3种奶酪样品用80%的甲醇水于90℃加热回流15 min后用三氯甲烷萃取净化,挥干三氯甲烷后用10%甲醇水复溶凝结物,最后用酶联免疫试剂盒检测AFM1的含量。结果表明,3种不同样品重复测定值相对标准偏差均少于5%,对样品分别添加AFM1标准溶液0.25,0.50,1.0μg/kg,回收率为85.1%~88.5%。所建立的酶联免疫快速检测奶酪中的AFM1的检测方法,具有重复性良好、结果相对偏差小和加标回收率高等特点。     

酶联免疫快速检测奶酪中AFM_1检测方法的建立

建立奶酪中AFM1的酶联免疫快速检测方法。3种奶酪样品用80%的甲醇水于90℃加热回流15 min后用三氯甲烷萃取净化,挥干三氯甲烷后用10%甲醇水复溶凝结物,最后用酶联免疫试剂盒检测AFM1的含量。结果表明,3种不同样品重复测定值相对标准偏差均少于5%,对样品分别添加AFM1标准溶液0.25,0.50,1.0μg/kg,回收率为85.1%~88.5%。所建立的酶联免疫快速检测奶酪中的AFM1的检测方法,具有重复性良好、结果相对偏差小和加标回收率高等特点。     

异戊烯基腺苷组细胞分裂素的快速酶联免疫吸附测定法的建立

从样品制备，ＥＬＩＳＡ类型及免疫反应时间三方面着手建立了异戊烯基腺苷（ｉＰＡ）组细胞分裂素的快速酶联免疫吸附测定法。用ＮａＩＯ４氧化合成免疫原ｉＰＡ－Ｎ９－ＢＳＡ（ＢＳＡ：牛血清白蛋白）。由此获得的免抗血清效价达１：３４５００。交叉反应试验表明该抗血清只识别ｉＰＡ组细胞分裂素。因此本研究中采用直接型（即固相抗体型）ＥＬＩＳＡ，并将最佳免疫反应平衡时间缩短至３０ｍｉｎ（４℃）。所建立的ｉＰＡ组ＥＬＩＳＡ检测极限为４．７ｆｍｏｌｉＰＡ／孔，线性检测范围０．０１～５０ｐｍｏｌｉＰＡ／孔，板内、板间的变异系数分别为３．７％和５．３％。样品的稀释曲线与标准曲线平行，回收率为８７．１％，表明本研究中采用的８０％甲醇提取、Ｓｅｐ－ｐａｋＣ１８柱初纯化的快速制样程序适合于该ＥＬＩＳＡ。对大豆植株不同部位ｉＰＡｓ含量测定结果表明，根瘤与根尖内ｉＰＡｓ含量显著高于幼叶与顶芽内的ｉＰＡｓ含量。     

食品安全检测中的酶联免疫技术应用

酶联免疫技术(ELISA)是在免疫学和细胞工程学基础上发展的一种微量检测技术,具有操作简便、灵敏性高等优点,已在食品农药残留、重金属污染、食品添加剂检测等诸多方面表现出了独特的优势,在食品安全检测领域有着广阔的应用前景。分析酶联免疫技术的原理和方法,从生物毒素、药物残留、致病微生物、重金属污染和食品的品质等方面评述其在食品安全检测中的应用。     

酶联免疫吸附测定(ELISA)需要注意的问题

由于酶联免疫吸附测定(ELISA)具有样品前处理简便、快速准确、所需仪器廉价等优点,已广泛应用于免疫学检验的各领域中。国家标准GB/T5009.111-2003、GB/T 5009.22-2003规定了ELISA方法作为粮食行业中呕吐毒素、黄曲霉毒素     

赤霉素对杂交水稻生育后期剑叶中活性氧清除剂的影响

杂交水稻早衰组合威优49（V49）和后健组合威优35（V35）于始穗和齐穗时分别喷施赤霉素（GA3）后，其剑叶中超氧化物歧化酶（SOD）活性和过氧化物酶（POX）活性增高，早衰组合V49增加更为明显。两组合剑叶中叶绿素含量均有所降低，早衰组合降低的幅度小于后健组合。GA3处理后两组合上述指标的差异在齐穗以后更加显著。GA3使两     

水稻细胞质雄性不育与内源GA1＋4和IAA的关系

以水稻野败型与ＢＴ型细胞质雄性不育系及其保持系为材料，用酶联免疫检测法测定了幼穗与倒二叶中内源ＧＡ１＋４与ＩＡＡ含量。结果表明，珍汕９７Ａ与花７６－４９Ａ倒二叶中的ＧＡ１＋４含量低于各自保持系的。珍汕９７Ａ幼穗ＧＡ１＋４含量低于其保持系的，而花７６－４９Ａ的幼穗ＧＡ１＋４含量近似于其保持系的，与此不同，珍汕９７Ａ与花７６－４９Ａ的幼穗与倒二叶中ＩＡＡ含量则均显著低于各自保持系的。其中珍汕９７Ａ的Ｉ     

转枯草芽孢杆菌纤溶酶基因对烟草激素代谢的影响

010018 内蒙古呼和浩特市内蒙古农业大学西区1449信箱     

酶联免疫吸附法快速检测谷物中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇

应用ELISA法快速检测麦类、谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),最低检出限为10μg/L,检测范围为10-1 000μg/L。用10%甲醇水溶液提取含DON的小麦及玉米样品,回收率为86～93%,变异系数为4.1%～17.4%。     

脱落酸与赤霉素对瓜尔豆叶片光合作用及内源激素的影响

通过大田随机区组试验设计,在管理、密度、肥水等条件一致的情况下,在瓜尔豆始花期、盛花期、盛荚期和鼓粒期叶面喷施不同浓度的脱落酸与赤霉素,研究其对瓜尔豆叶片光合作用及内源激素的影响,旨在为利用植物生长调节剂对瓜尔豆的高产栽培提供理论依据。试验结果表明,不同浓度的脱落酸处理均能在各个生育时期降低植株叶片的净光合速率和蒸腾速率,关闭气孔,从而抑制其光合作用;而不同浓度的赤霉素处理能明显地增加植株叶片的净光合速率和蒸腾速率,促进其光合作用;脱落酸与赤霉素处理均能降低叶片叶绿体含量,并且赤霉素处理降低更显著。不同浓度的脱落酸处理降低了植株叶片内源吲哚乙酸、赤霉素和激动素的含量,升高了内源脱落酸的含量;而不同浓度的赤霉素处理增加了植株叶片内源吲哚乙酸、赤霉素和激动素的含量,降低了脱落酸的含量,在调节激素动态平衡的基础上对植株进行调控。     

水稻长节间基因对GA3敏感性和不育系改良

带有长节间基因eui水稻不论在苗期和抽穗期对GA3的敏感性均高于等位的Eui基因，尤其对茎部的第1和第2节间影响较大，属1-2节间伸长型。带有Eui基因则对第2和第3节间伸长影响较大，属2-3节间伸长型。带有eui基因的珍长保持系作为供体，将eui导入野败不育系二九南1号、二九青、V20以及矮败不育系协青早，使其穗伸出长度提高了82     

抗卡那霉素单克隆抗体细胞株的筛选及间接ELISA法的建立

采用碳二亚胺(EDC)法合成卡那霉素完全抗原,免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得3株能稳定分泌抗卡那霉素单克隆抗体的杂交瘤(5D7、6H8、7G4)。选择其中的5D7株抗体,经ELISA鉴定,细胞上清的效价达103以上,腹水效价达到5×104以上;建立了间接竞争ELISA法,通过优化,其检测限为0.5ng/mL,抗体IC50为3.7ng/mL,与妥布霉素交叉反应率为63.8%,与其他抗生素无交叉。可见ELISA具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于KAN残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。     

油木奈——初始坐果机制研究

以成年油木奈树为材料,对其初始坐果进行了研究。结果表明,盛花后2周内,油木奈出现大量的落花落果;幼果(子房)低水平的GA1+3与油木奈的落花落果高峰关系密切,而内源细胞分裂素ZRs和[diH]ZRs以及ABA与幼果(子房)的生长呈显著的正相关;初始坐果期,油木奈的雌配子体发育缓慢,且有相当数量的胚囊中途退化、败育,无法正常受精,从而导致其大量的落花落果。文中就油木奈的初始坐果机制进行了讨论。     

缺锌对不同基因型玉米激素代谢的影响

为探索缺锌导致玉米生长受抑和体内激素代谢的关系,用溶液培养的方法研究不同供锌水平下,玉米体内的色氨酸、IAA、GA3、GA4和ABA含量变化,并在缺锌处理一段时间后施用色氨酸或IAA检验其对缺锌症状的影响。结果表明,缺锌与低锌均使玉米体内的色氨酸和IAA含量降低,敏感基因型比非敏感基因型降低的更多,同时IAA由地上部向根部的运输受阻;缺锌早期非敏感基因型茎叶的ABA和GA4的含量升高,而敏感基因型则降低,这与调节它们的抗性大小和代偿性生长有关。在同一时期缺锌,不同基因型玉米GA3含量均升高;色氨酸与IAA对敏感基因型玉米的缺锌症状有一定的恢复作用,但对非敏感基因型玉米的缺锌则没有恢复作用。缺锌时玉米体内的IAA、GA3、GA4和ABA等激素水平与生长之间并非总是一致的相关关系,生长速率也会影响体内的激素水平,同时激素水平还参与植物的抗性调节。     

PP_(333)、GA_3和BA对马铃薯试管苗生长调节作用的研究

针对马铃薯试管苗在继代培养中,苗生长细长、瘦弱和叶嫩黄等现象,在培养马铃薯的培养基中附加不同浓度的生长调节剂PP_(333)(mg/1,单位下同)、GA_3、BA、GA_3+BA、PP_(333)+GA_3、PP_(333)+BA和PP_(333)+GA_3+BA等进行培养壮苗的试验.加入PP_(333)各处理对试管苗的高、茎粗和增绿效应明显,但高浓度的PP_(333)对试管苗生长过于抑制;加GA_3对PP_(333)有拮抗作用.适宜浓度的PP_(333)+GA_3+BA能培养壮苗,并促进侧芽分化,增加叶面积、叶绿素含量和干物质的累积.各处理对马铃薯试管苗的抑制生长效应为PP_(333)>PP_(333)+BA>PP_(333)+GA_3>PP_(333)+GA_3+BA>BA>GA_3>GA_3+BA;生理效应和移栽苗成活率的顺序为PP_(333)+GA_3+BA>PP_(333)+GA_3>GA_3+BA>PP_(333)+BA>GA_3>BA>PP_(333).