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采用RNeasy Plant Mini Kit法、RNAiso Plus法、RNAiso for Polysaccharide-rich Plant Tissue法、CTAB法和SDS法,并结合4种抽提试剂组合,分别提取青天葵叶片总RNA.通过琼脂糖凝胶电泳、紫外检测及RT-PCR反应对提取效果进行了比较分析.结果表明:除RNAiso Plus法外,其它方法提取的总RNA均有一定程度的DNA污染.RNAiso Plus法组③(1/5体积KAC+4/5体积PCI)完整性最好,SDS法组④(1/5体积NaCl+ 4/5体积PCI)浓度最高,为372.4 ng/μL.5种方法共20个处理组获得的RNA反转录后均能扩增出18S rRNA基因片段.该研究建立起了适用于青天葵叶片的总RNA提取方法,为青天葵的基因克隆、表达及转录组分析奠定了技术基础. 相似文献
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以竹柳皮为试材,采用紫外分光光度法,以总黄酮吸附率和解吸率为考察指标,考察9种不同型号大孔树脂对竹柳皮总黄酮吸附-解吸性能,筛选出最佳大孔树脂型号,通过对工艺各参数优化,确定最佳纯化工艺,并测定竹柳皮纯化前后抗氧化活性。结果表明:D101型大孔树脂对竹柳皮中总黄酮有较好的吸附和解吸效果,最佳纯化工艺为60%乙醇提取2次,上柱液浓度为1.0 mg·m L-1,径高比为1∶15,上样速度为1.0 BV·h-1,上样体积为5 BV,洗脱溶剂为60%乙醇,洗脱速度为1.0 BV·h-1,收集0.8~2.2 BV洗脱范围内洗脱液,纯化后总黄酮含量可达64.94%,总黄酮收率高达98.34%。纯化后总黄酮的DPPH自由基清除活性、还原力分别约是纯化前粗提物的3倍和2倍。D101型大孔树脂适合纯化竹柳皮中的总黄酮,且纯化后的竹柳皮总黄酮具有更好的抗氧化活性。该试验可为竹柳皮的深入开发、产业附加值的提高提供参考依据。 相似文献
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以青天葵全转录组测序获得的142 220条unigene为试材,采用MicroSAtellite(MISA)软件分析青天葵简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)的分布频率和重复基元的类型等特征,利用Primer 5.0对符合鉴定要求的SSR基元进行引物设计,并通过SSRFinder校验SSR引物,以期为青天葵遗传多样性分析、分子标记辅助育种、遗传图谱绘制等种质资源研究提供参考依据。结果表明:在青天葵转录组共检测到分布在5 223条unigene上的5 684个SSR位点,SSR发生频率为3.67%,分布密度为1/13kb。二核苷酸重复为青天葵SSR主要基元类型,其中AG/CT和AT/AT基序出现频率最高,占SSR总数的52.9%。设计筛选得到2 486条SSR引物。青天葵转录组SSR位点出现频率高、类型丰富、多态性潜能较高。 相似文献
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以芳香新塔花为试材,采用Al Cl3比色法测定芳香新塔花总黄酮含量,并通过DPPH自由基(DPPH·)法、羟基自由基(·OH)法和测定还原能力的方法评价其抗氧化能力。结果表明:芦丁在0.009 6~0.033 6 mg·m L-1范围内具有良好的线性关系,平均加样回收率为99.78%(RSD为1.30%),芳香新塔花中总黄酮含量为40 mg·g-1;芳香新塔花总黄酮对DPPH·、·OH的清除作用及其还原力在同等条件下与维生素C相比较弱,且在试验浓度范围内抗氧化能力和浓度存在良好的量效关系,可见芳香新塔花总黄酮具有良好的体外抗氧化活性。 相似文献
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以分蘖洋葱‘M-3’鳞茎为试材,用超声波辅助提取黄酮类化合物,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面法优化分蘖洋葱总黄酮提取工艺,用DPPH法对总黄酮化合物抗氧化活性进行评价。结果表明:最佳提取工艺参数为料液比1∶45 g·mL^-1、乙醇体积分数60%、提取时间40 min、提取温度48℃、超声波功率310 W。在该条件下,分蘖洋葱总黄酮的提取率为3.584%,与模型预测值3.622%相近。分蘖洋葱总黄酮提取物对DPPH·具有一定的清除作用,IC50值为0.179 mg·mL^-1。优选的超声波提取工艺提高了分蘖洋葱总黄酮提取率,具有较强的抗氧化活性。 相似文献
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以桔梗总黄酮为试材,采用Plackett-Burman和中心组合设计(central compos-ite design,CCD)优化桔梗总黄酮的提取工艺,使用3种抗氧化体系,研究其体外抗氧化活性,以期为桔梗总黄酮的开发和应用提供参考依据.结果 表明:桔梗总黄酮的最佳提取工艺条件为乙醇浓度63%,液料比22∶1 mL·g-1,浸泡时间63 min,超声提取10 min,总黄酮实际得率为0.45%,纯度为58.22%.桔梗总黄酮和维生素C对DPPH·的IC50值分别为0.546 mg·mL-1和8μg·mL-1,对·OH的IC50值分别为0.196 mg·mL-1和0.368 mg·mL-1,总抗氧化能力与维生素C无显著差异. 相似文献
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以伸筋草为试材,在单因素试验的基础上,以总黄酮提取率为指标,采用正交实验L9(34)优化乙醇辅助回流提取总黄酮的最佳工艺条件,并通过总黄酮对羟基自由基和1,1-苯基-2-苦肼基自由基的清除能力来评价其抗氧化性。结果表明:最佳提取工艺参数为乙醇体积分数75%,液料比60∶1mL/g,提取时间150min,提取温度80℃,在此条件下,总黄酮的平均提取率为1.82%;总黄酮质量浓度为0.014 0mg/mL时,对·OH和DPPH·的清除率可分别达72.65%和93.02%,说明总黄酮对·OH和DPPH·有较好的清除能力。 相似文献
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以超声波法提取的六盘水野生刺梨根、茎、叶中的黄酮为试材,比较其DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除能力,以期为刺梨野生资源的进一步开发提供参考依据.结果 表明:刺梨根、茎、叶黄酮对DPPH自由基的清除率分别是11.3%、5.2%、66.9%;对ABTS自由基清除率分别是61.1%、28.9%、89.3%;对羟基自由基的清除率分别是58.1%、19.3%、81.5%;对超氧自由基的清除率分别是48%、42%、50%,清除能力的强弱依次为刺梨叶中黄酮>根中黄酮>茎中黄酮.说明刺梨根、茎、叶中黄酮可以作为天然抗氧化剂开发,尤其是刺梨叶片的黄酮. 相似文献
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以涉县柴胡茎叶为试材,采用单因素试验和四因素三水平的正交实验设计,研究优化了总黄酮乙醇回流浸提工艺,并分析测定提取物及与维生素C复配后的抗氧化活性,以期为涉县柴胡的进一步开发利用提供参考依据。结果表明:1)涉县柴胡茎叶总黄酮最佳提取工艺为料液比1:20g·mL-1,提取时间2h,提取温度70℃,乙醇浓度60%;2)最优条件下涉县柴胡茎叶总黄酮对DPPH·、·OH、■的半抑制浓度分别为0.223、0.413mg·mL-1和0.445mg·mL-1;3)与维生素C复配后表现出一定协同作用,试验组内复配液(1:3)协同作用最强。综上可知,涉县柴胡茎叶中总黄酮具有很好的抗氧化能力。 相似文献
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以龙牙百合叶片为研究对象,采用优化超声波法提取龙牙百合叶片总黄酮,对黄酮进行了抗氧化活性分析,并在单因素试验的基础上采用正交实验法,研究了乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度对总黄酮提取效果的影响,并确定了最佳工艺条件,对其体外抗氧化活性进行了初步研究。结果表明:最佳工艺条件为提取温度50℃,乙醇浓度80%,料液比1∶5g·mL~(-1),提取时间30min。此条件下,百合叶总黄酮含量为12.691mg·g~(-1)。抗氧化试验结果表明,龙牙百合叶总黄酮提取液对DPPH·的清除效果优于相同浓度下维生素C溶液,并呈显著差异。 相似文献