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将细粒棘球蚴原头蚴培养于含7μg/ml莫能菌素的NCTC 135培养液中,对其在36小时内的活动及结构变化作了观察。光镜下观察,培养至12小时部份虫体停止活动;至24小时已有半数虫体结构模糊,美蓝着染证明部分死亡,至36小时所有原头蚴结构模糊,全部死亡。电镜下观察,虫体高尔基复合体最先出现退行性变化,随后线粒体结构破坏,进而引起整个胞质胶胞核的改变,至36小时细胞死亡。文中就莫能菌素作用的特点及细胞器改变的意义作了讨论。 相似文献
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补体对体外细粒棘球蚴原头蚴有较强杀伤作用,单抗介入后能加强这一作用。由此表明宿主体液因子对原头蚴的免疫机理可能有3,即补体经典途径、补体旁路途径和抗体直接作用。 相似文献
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用冷藏法刺激细粒棘球蚴原头节外翻试验刘金明,陈燕军,王爱华,顾惠明,哈斯也提,罗琼(中国农科院上海家畜寄生虫病研究所)(新疆畜牧科学院兽医研究所)寄生蠕虫的体外培养,是研究其形态发生学、营养、生理生化及与宿主相互关系的一种重要方法[1]。成功地培养细... 相似文献
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用感染包虫的绵羊肝包囊中的活原头蚴腹腔接种BALB/C鼠,8个月后取鼠脾细胞与Sp2/o骨髓瘤细胞融合。经IHA筛选,获得14个阳性杂交瘤细胞株,对其中3株进行了克隆和进一步研究。结果表明,5C5与细颈囊尾蚴、脑包虫和肝片吸虫抗原均不发生交叉反应,腹水抗体的IHA效价为1:2048,属IgG2b亚类:3C5和6C4与细颈囊尾蚴和脑包虫有轻度交叉反应,腹水抗体的IHA效价为1:128,均属IgM类。 相似文献
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用抗体依赖性细胞介导的细胞毒(ADCC)试验在体外观察了单克隆抗体对细粒棘球蚴原头节的杀伤作用。原头节在1C2、2E3、3E6、3F10、3C2 5株单抗浓缩上清(1:5)及嗜酸性粒细胞存在情况下培养40小时,发育抑制率分别为100%,100%,100%,100%,57%;死亡率分别为100%,100%,100%,96%和14%。这一结果显示我们所获单抗中部分具有较强保护性,为寻求保护性抗原提供了线索,同时表明ADCC是宿主获得性抵抗力的重要组成部分。 相似文献
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细粒棘球蚴生发层细胞的体外培养 总被引:4,自引:1,他引:4
将分散的绵羊源细粒棘球蚴生发层细胞在5%CO2、37℃恒温箱中进行连续传代培养,细胞培养液为RPMI1640完全培养基,细胞支持物在1~14代时交替为24孔细胞培养板和用胶原蛋白包被的24孔细胞培养板,14代后仅为24孔细胞培养板。细胞经40~45d传代培养(8代)后增殖缓慢。12代开始至25代止,各孔细胞又逐步转变成快速增殖细胞,第26代细胞在对数增长期内的倍增时间约为24h。这一细胞增殖速率持续至34代后约有减缓。传代增殖细胞呈小点形、圆形和椭圆形,大部分行悬浮生长。行贴壁生长的细胞经长期培养后融合成合胞体,并最终形成类组织块 相似文献
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按照多房棘球绦虫幼虫-泡球蚴培养的培养基(RPMI-1640、M199和MEM)分为3组:Ⅰ组为含10%胎牛血清的RPMI-1640;Ⅱ组为含10%胎牛血清的MEM;HI组为含10%胎牛血清的M199。将泡球蚴在3种细胞培养液中进行培养,观察其存活、生长以及发育情况。结果显示,培养9d的泡球蚴的成活率分别为:Ⅰ组90.10%、Ⅱ组50.25%、Ⅲ组22.03%;成囊率分别为:Ⅰ组57.12%、Ⅱ组63.15%、Ⅲ组48.17%;头节外翻率分别为:Ⅰ组98.28%、Ⅱ组88.65%、Ⅲ组75.50%。可见,大多数虫体在早期向囊发育,一部分虫体头节外翻,并伴有规律的伸缩运动,但随时间的延长虫体运动减缓,又向囊蚴发育。通过对多房棘球绦虫泡球蚴的体外培养,初步表明合有10%小牛血清的细胞培养基RPMI-1640较适合泡球蚴的生长发育,为研究寄生虫发育提供了最基本的数据资料。 相似文献
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细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,坛)是一种重要的人兽共惠寄生虫。现已报道细粒棘球绦虫有10个基因型(G1~G10),我国仅发现G1和G6。细粒棘球绦虫六钩蚴阶段的Eg95,原头蚴阶段的EgFABP,成虫阶段的EgM9和Eg31分别被认为是最有前途的用于免疫保护的抗原。其中Eg95基因工程疫苗已经商业化生产,对羊免疫保护率达到了95%以上。 相似文献
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细粒棘球蚴生发层细胞的分离及初期培养 总被引:1,自引:0,他引:1
绵羊源细粒棘球蚴生发展,经研磨法或0.25%胰蛋白酶消化法处理,均可获得能在体外增殖的生发细胞。该细胞用RPMI1640完全培养基培养于胶原蛋白包被的培养板中,72小时即开始增殖。 相似文献
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本研究观察了不同超排处理方法对羔山羊卵母细胞体外成熟及体外受精的影响,并将体外受精胚胎进行了移植,以便探讨利用羔山羊卵母细胞生产体外受精胚胎的技术途径。对2~4月龄羔山羊用FSH、FSH+LH(静脉注射)和FSH+LH(肌肉注射)三种方法进行超排处理,平均分别回收16.0、20.3和15.0枚卵母细胞。将这些卵母细胞进行20~24h的成熟培养后,其成熟率分别为45.5%,44.4%和76.5%。成熟卵母细胞经体外受精,体外发育培养后其2~4细胞胚胎的发生率分别为5.6%a、6.7%和31.7%b(b,vs,a,P<0.05)。将9枚2~4细胞期胚胎移植给6只受体母羊,结果有2只妊娠并产羔2只。 相似文献
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肽对体外混合培养瘤胃微生物发酵和生长影响的研究 总被引:19,自引:1,他引:19
用混合瘤胃微生物体外培养的方法研究肽和氯化铵对不同结构碳水化合物发酵和微生物合成的影响.碳水化合物来源是葡萄糖、木糖、淀粉、酸化纤维、Sigma纯纤维、滤纸纤维、玉米秸、小麦秸和稻草.试验采用2×3×3因子设计,采样时间分别为1h、2h、4h、8h、12h、24h和48h.结果表明,与氯化铵相比,肽显著提高葡萄糖在2h的发酵产气量、4h的TVFA生成量和4h的微生物合成量(P<0.05),对48h发酵终产物没有显著影响(P>0.05);肽对木糖和淀粉发酵的促进作用发生在8~12h(P<0.05),对48h发酵的终产物没有显著影响(P>0.05).肽对纤维素和农作物秸秆发酵的促进作用主要在培养12~48h(P<0.05),显著提高48h发酵的终产物量(P<0.05),但Sigma纯纤维素的微生物合成量例外(P>0.05).与氯化铵相比,肽对葡萄糖产气量的最大提高幅度是22.2%(2h)、TVFA的最大提高幅度是74.7%(1h),微生物合成量的最大提高幅度是133.5%(4h).在纤维素中,肽对酸化纤维发酵的促进作用最明显,产气量、TVFA生成量和微生物合成量的最大提高幅度分别为572.2%(24h)、743.2%(24h)和91.1%(12h).在农作物秸秆中,肽对小麦秸秆发酵的促进作用最强,产气量、TVFA生成量和微生物合成量的最大提高幅度分别为189.5%(24h)、239.1%(24h)和82.4%(24h). 相似文献
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莫能菌素和盐霉素在鸡组织中的残留分析方法研究 总被引:9,自引:0,他引:9
本文报道用高效液相色谱柱后衍生化检测肉鸡肌肉、肝脏和脂肪组织中莫能菌素和盐霉素的残留。肉鸡肌肉、肝脏和脂肪组织经异辛烷提取,用硅胶柱净化分离,洗脱液浓缩后用甲醇/水溶解。以甲醇/冰乙酸/水(943/30/30,v/v)作为流动相,香草醛为衍生剂,用RP-C18柱在可见波长520nm处检测。将莫能茵素和盐霉素分别以0.10,0.20,0.40和0.20,0.40,0.800644g/g分别添加到空白肉鸡组织中,测得莫能菌素和盐霉素在肌肉、肝脏和脂肪组织中的平均回收率分别为97.7%、91.1%、92.1%和94.1%、85.4%、90.7%,变异系数范围在2.7%-16.8%之间。用该方法测定肉鸡组织中莫能菌素和盐霉素残留的最低检测限分别为0.05μg/g0.1μg/g。 相似文献
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电激活对完全体外化牛细胞核移植的影响 总被引:21,自引:1,他引:21
牛卵母细胞在体外成熟23~24h时去核,去核卵用80V/mm40μs两次电脉冲激活(Ⅰ组)或不激活(Ⅱ组),然后将体外受精、发育的8~32细胞期胚胎的单个卵裂球注入卵周隙,用80V/mm40μs两次电脉冲诱导卵裂球与去核卵母细胞融合。Ⅰ组操作后存活率和融合率(88.4%和55.0%)显著低于Ⅱ组(95.9%和65.1%,P<0.05)。融合卵体外培养24h和5~8d后,Ⅰ组核移植胚胎的卵裂率和桑椹/囊胚发育率(63.0%和15.2%)与Ⅱ组(50.5%和7.8%)无显著差异,但Ⅰ组结果均好于Ⅱ组。将来自两组的25枚桑椹和囊胚移植到16头同期受体,在已检查过的8头受体中2头受体妊娠,其中1头于妊娠后4个多月流产,1头于妊娠期满后产出一雄性牛犊。研究结果表明:去核卵母细胞的电激活尽管对重组卵的存活与融合不利,但可改善核移植胚的卵裂和发育。本研究在我国首次获得牛细胞核移植的成功,证明用IVM卵母细胞和IVF胚胎进行完全体外化的牛细胞核移植是可行的。 相似文献