检测猪伪狂犬病血清抗体的斑点酶联免疫吸附试验方法的建立和评价

以斑点酶联免疫吸附试验(简称 Dot-ELISA)检测128份接种伪狂犬病病毒(PRV)前后的实验猪血清及49头份现地猪血清,并与微量病毒中和试验(MIVN)作比较.结果,Dot-ELISA 能检出抗 PRV 特异抗体,与MIVN 的检出符合率为95.9%,两种方法无显著性差异(P>0.05).Dot-ELISA 检出人工感染猪血清抗体的时间(接毒后第5天)早于 MIVN(接毒后第9天).Dot-ELISA 检测猪血清 PRV 抗体,具有特异性强、敏感性高、快速简便等优点,适合于大批检疫和流行病学调查.     

赤羽病微量血清中和试验方法的建立与应用

以自美国、澳大利亚引进的赤羽病病毒和标准阳性血清,参考国际上常规微量血清中和试验方法,建立了赤羽病(AKV)微量血清中和试验方法。用以对澳大利亚进口的四批绵羊(共1092头)作赤羽病检疫,检出血清阳性反应绵羊70头,有效地防止了国外赤羽病的传人。     

检测猪脑心肌炎病毒重组非结构蛋白2C间接ELISA方法的建立

以猪脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)重组非结构蛋白2C作为包被抗原,确定间接ELISA反应的最佳工作条件;通过病毒阻断试验和交叉试验检验方法的特异性;通过与血清中和试验比较,确定方法的敏感性;通过对试验感染猪的血清2C抗体产生动态的检测,分析建立方法用于EMCV感染早期诊断的意义。结果显示,建立的间接ELISA方法能够特异地检出EMCV感染猪的血清2C抗体,与猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)等的抗血清没有交叉反应;与血清中和试验检测结果的符合率为95.7%(22/23),相对敏感性为90.9%(10/11);仔猪感染EMCV后第4天,应用建立的间接ELISA方法即能够检出血清中的特异性2C抗体。结果表明,建立了可以替代血清中和试验的基于EMCV重组非结构蛋白2C的间接ELISA方法。     

口蹄疫LPB-ELISA抗体滴度、血凝抗体滴度和中和抗体滴度相关性的比较研究

为了评价口蹄疫液相阻断LPB-ELISA抗体滴度、血凝抗体滴度、中和抗体滴度的关系,本研究对野外采集的38份牛血清分别进行LPB-ELISA、正向间接血凝(IHA)和微量细胞中和试验(VNT),检测各份血清的LPB-ELISA抗体滴度、血凝抗体滴度和中和抗体滴度,并进行相关性分析比较。结果表明LPB-ELISA抗体滴度和中和抗体滴度相关性极显著,相关系数r=0.489(P<0.01);LPB-ELISA抗体滴度和血凝抗体滴度相关系数仅为0.149,血凝抗体滴度和中和抗体滴度相关系数为0.179,相关性均不显著。本研究为利用LPB-ELISA方法进行口蹄疫血清学监测和普查提供了试验依据。     

埃博拉病毒抗体间接血凝检测方法的建立

以纯化后的埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)糖蛋白(GP)作为抗原,致敏醛化的绵羊红细胞,进行最佳反应条件优化,建立间接血凝抗体检测方法。以EBOV高免马血清、纯化的IgG和精制免疫球蛋白F(ab’)_2为待检样品进行检测,并将检测结果与假病毒中和试验检测结果相比较。结果显示,该方法可特异性检测EBOV抗体,与马尔堡病毒、裂谷热病毒等的阳性血清均不发生反应;与假病毒中和试验测得的抗体效价增长规律相一致。结果表明,本试验成功建立了EBOV抗体间接血凝检测方法,该方法安全、简便、快捷,为EBOV疫苗免疫后的效果评价提供了又一新的检测方法。     

猪流行性腹泻病毒实验感染猪血清抗体的消长规律

应用微量中和试验(MT)、间接血凝试验(IHA)和间接酶联免疫吸附试验(间接ELISA)对三种不同途径即滴鼻、口服和肌肉注射人工感染猪流行性腹泻病毒的12头仔猪的血清抗体进行了检测。感染猪在第1～2周时即可测出抗体,3～5周后抗体滴度达高峰,抗体持续时间最短为18周,最长可达22周以上。其中以肌注和滴鼻组抗体产生较早,而口服组稍晚。肌注组抗体上升较快,抗体持续时间较短,而滴鼻和口服组抗体上升稍慢,抗体持续时间较长。     

鸡传染性支气管炎微量血凝抑制试验方法的研究

用胰酶处理鸡传染性支气管炎病毒(IBV)制成血凝(HA)抗原,HA＝1:16384,用此抗原建立了微量血凝抑制试验(HI)方法检测IBV阳性血清。IBV阳性血清鸡胚病毒中和试验(NT)结果与HI效价呈正相关,相关系数r＝0.29,HI效价达1:8以上可保护鸡胚抵抗200个MLD的IBV攻击,表明HI抗体是保护性抗体,该方法具有较大的实用价值。     

监测和诊断禽流感

常规鉴定禽流感病毒的方法是血凝试验 (HA)，血凝抑制试验 (HI)，琼脂扩散试验 (AGP)以及病毒中和试验 (NT)等。 　　检测采取的病料主要是血液、鸡蛋、肝脏等。 　　琼脂扩散试验可以检测出各种血凝亚型的病毒，但检出率较低，往往检测为阴性的鸡群，并不能保证没有感染禽流感。血凝抑制试验可以用于区别禽流感的血清亚型，且敏感性高，但一种血凝抗原只能检出相应的抗体，而不能查出其他血清亚型抗体。不过一个地区流行的禽流感病毒，其血清亚型在一定时间内是相对稳定的，所以用该地区流行的病毒株抗原做血凝抑制试…     

鸡新城疫病的检疫

本文总结了鸡新城疫病的检疫方法,常用的检疫方法有病毒分离培养、血凝试验(HA)、血凝抑制(HI)试验、荧光抗体检测和PCR等,由于病毒表面有血凝素,对鸡红细胞有凝集作用,通过此特征可对鸡群进行血清抗体检测,从而判断感染情况。     

新城疫病毒感染绵羊诱导免疫应答反应的实验研究

为探索新城疫病毒(NDV)作为羊病毒病疫苗载体的可行性,验证NDV感染绵羊的可能性,本研究采用NDV Clone-30株分别通过滴鼻和气管灌注两种途径接种绵羊,接种后观察临床症状,检测接种动物排毒情况,通过血凝抑制试验检测接种绵羊特异性血凝抑制抗体,ELISA试验检测接种绵羊血清特异性IgG抗体,微量中和试验检测接种绵羊血清中和抗体.研究结果表明,NDV在绵羊体内是非致病性的,并且通过两种接种途径在绵羊体内均可以产生血凝抑制抗体、NDV特异性IgG抗体和中和抗体反应.本研究结果表明NDV有可能作为宿主限制性疫苗载体用于预防无特效疫苗的羊类疾病,且与气管灌注接种途径比,滴鼻接种途径相对安全.     

IHA法检测O型口蹄疫抗体中的前带现象

正向间接血凝试验(IHA)是监测口蹄疫流行和免疫抗体水平的一种简单、快速、准确、经济的检测方法.正向间接血凝为一种微量的定量反应试验,当待检血清中抗体浓度过高,易造成前带现象[1-2],影响判定结果.2008年我州用IHA方法检测O型口蹄疫抗体效价试验中,达日县10份牦牛血清,试验结果均发生前带现象.     

马动脉炎病毒血凝抑制试验研究及其应用

用马动脉炎病毒（EAV）免疫SPF豚鼠，4周后采血做血凝抑制试验（HI），其抗血清可以抑制血凝抗原对小鼠红细胞的凝集反应，抗原和抗血清在4℃感作24h后可以检测到最高的HI抗体效价，同时结果显示HI抗体与中和抗体产物呈正相关。对561份来自新西兰、吉尔吉斯、沙特阿拉伯及内蒙古、新疆的马血清用HI试验和微量血清中和试验（NT）进行EAV抗体检测，HI和NT阳性符合率为94．7％，血凝抑制抗体与中和抗体效价呈显著的正相关。     

间接Dot-PPA-ELISA检测猪细小病毒血清抗体

猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是引起妊娠母猪繁殖障碍的主要病原之一。PPV还可引起仔猪的皮炎和腹泻。我国各省市猪场猪细小病毒血清阳性率也很高。目前对该病的诊断准确率高的方法有间接荧光抗体技术、银加强胶体金技术、聚合酶链式反应法等,这些方法技术条件要求高,难在基层推广应用。血清中和试验、血凝和血凝抑制试验等操作较为简便,但准确率不高。     

间接血凝检测牛传染性鼻气管炎抗体的探讨

对96份待检牛血清,同时用间接血凝试验(IHA)和血清中和试验(SN)检测牛传染性鼻气管炎(IBR)抗体,结果,IHA检出阳性牛58头;SN检出阳性牛48头,其中47头IHA亦为阳性。48头SN阴性牛中,有11头IHA为阳性。其它7种病的阳性血清对IBR红细胞抗原全部为阴性。     

乌兰县柯柯镇北柯柯村绒山羊衣原体病的血清学调查

应用衣原体间接血凝试验(IHA)对青海省乌兰县柯柯镇北柯柯村的267份绒山羊的血清,进行衣原体间接血凝抗体的检测。结果检出39份阳性血清,血清阳性率为14.61%。(39/267)     

猪繁殖与呼吸障碍综合症的防治

5．1．3血清学检查可用四种方法检测血清中的PRRS病毒抗体。免疫过氧化物酶试验(IPMA)：本方法特异性和敏感性较好，但操作复杂、费用高；间接荧光抗体试验(免疫荧光染色法-IFA)：本方法可最早于感染后6d，一般于感染后两周检出抗体，抗体效价于感染后5～6周达到峰值(1：40000)；血清中和试验(SN)：因SN抗体比IFA出现     

应用进口鸡传染性支气管炎ELISA试剂盒检测鸡传染性支气管炎抗体

鸡传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒引起鸡的一种急性高度接触性的呼吸道传染病,是严重危害我国乃至世界养鸡业的重要疾病之一。已有多种血清学方法可用于IB抗体检测,我国目前常用的方法有琼脂扩散试验(AGP)、血清中和试验(SN)、间接血凝试验(IHA)等。国内很多学者先后建立了ELISA方法检测IB抗体均取得理想结果,但仅限于实验室检测,在基层推广应用还有一定困难。     

用微量酶标抗体血清中和试验检测猪瘟病毒抗体的初步研究

检测猪瘟病毒(HCV)抗体的实验室诊断方法有琼脂扩散试验、对流免疫电泳试验、补体结合试验、间接酶标抗体试验和间接荧光抗体试验等。但这些实验的敏感性都比较低,而且不能区分出HCV和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的抗体。据报道,用酶标抗体和荧光抗体血清中和试验检测HCV     

细胞培养在动物检疫中的应用

细胞培养技术有其广泛的应用范围，特别是在免疫学和病毒学方面的应用，在动物检疫工作中，有着直接的关系。一、中和试验中和试验是一种十分重要的血清学试验，但如果以动物或鸡胚作试验，则耗费量大，而且对于口岸检疫来说，受检量大，检疫期又有限，而且各动物间存在着个体差异，检出、准确率又低。而采用细胞培养进行中和试验，则可免去上述缺点，准确性也高。在口岸动物检疫工作中，以微量中和试验为主，大都采用96孔平底微量组织细胞培养板，接种细胞，再加受检血清和已知滴度的病毒抗原。当血清中含有抗体，就可中和抗原，而使细胞形…     

乐都县牛衣原体病的血清学调查

用间接血凝试验(IHA)对青海省乐都县牛进行衣原体感染抗体检测.共检测血清232份,检出阳性5份,阳性率2.16％.