一株致病性异育银鲫源维氏气单胞菌的分离鉴定

从急性患病异育银鲫Carassius auratus gibelio肝胰脏中分离到一株优势菌。对该菌株进行了显微和超微结构观察、生理生化表型鉴定、16S rRNA和毒力基因分析及人工感染实验。结果显示:分离菌呈短杆状、两头钝圆、端生鞭毛,为革兰氏阴性菌;发酵葡萄糖产酸,氧化酶、触酶试验阳性,高盐浓度不生长;16S rRNA序列与气单胞菌属Aeromonas的基因相似性为98%以上,系统发育分析进一步表明该菌为维氏气单胞菌A.veronii,在该菌中可检测到肠毒素基因,且回接感染能导致健康银鲫发病,表明该菌具有致病性。     

气单胞菌基因研究

气单胞菌在一定条件下能引进养殖鱼类的大批死亡，从基因水平认识该菌对研究该菌的致病条件及防治该菌引起的各种病症等都大有帮助。自８０年代中期开始，人们陆续对嗜水气单胞菌及其它气单胞菌的气溶素基因、溶血毒素基因和蛋白酶等基因进行了研究。本文从气单胞菌溶血毒素基因及分布、毒素的调控与分泌和蛋白酶基因等方面简要综述了近年来对气单胞菌基因的研究。     

牛蛙腹水病病原研究

从患腹水病的牛蛙腹水中分离到二株细菌，人工感染可使牛蛙、青蛙、银鲫和ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠致死，生理生化及Ｇ＋Ｃ含量测定属于气单胞菌属的嗜水气单胞菌。该菌与本地分离的出血性败血症菌株间的交叉凝集反应小于１：４０。     

水产动物气单胞菌鉴定方法研究进展

<正>气单胞菌属于γ-变形菌纲、气单胞菌目、气单胞菌科、气单胞菌属(Aeromonas),该属包括嗜水气单胞菌(A.hydrophila)、温和气单胞菌(A.sobria)、豚鼠气单胞菌(A.caviae)、维氏气单胞菌(A.veronii)和杀鲑气单胞菌(A.salmonicida)等20个种,其中嗜水气单胞菌和杀鲑气单胞菌又分别包括5个亚种[1]。气单胞菌广泛分布于自然生态系统     

微量菌鉴系统在水产养殖中的应用

运用专门检测发酵性革兰氏阴性杆菌的微量菌鉴系统——CDRC-菌鉴系统，鉴定水产养殖中分离自患病动物血液、肝胰腺和养殖水体的9个菌株，鉴定结果为9个菌株均为弧菌科细菌，其中4株属于气单胞菌属，分别为嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和豚鼠气单胞菌，其余5株属于弧菌属，为副溶血性弧菌和溶藻弧菌。     

黄金鲫温和气单胞菌鉴定及溶血素基因检测

采用常规的培养特征、理化特性及分子生物学的方法,从患病的黄金鲫体内分离到的优势菌YD-1进行了回感试验、表观生物学、药敏试验及毒力因子检测等系统性研究。结果表明,该菌在盐度1-3%、PH4-9,温度10-30℃的营养肉汤培养基中均能生长。该菌株16S rRNA基因序列（GenBank收录号: KC561935, 长度1446bp）和gyrB基因序列（GenBank收录号: KC561934, 长度1169bp）分别与其他气单胞菌属细菌的基因同源性相思似在97%-99%之间,构建系统发育树确定该菌株为温和气单胞菌(Aeromonas sobria)。人工回感试验可引起健康银鲫死亡。对该菌毒力因子进行检测,可扩增出溶血素基因片段。药敏试验显示：该菌对多粘菌素、头孢呋辛、米诺环素、复达新、菌必治、新霉素等6种药物敏感。     

细菌性败血病（暴发性出血病）的综合防治

一、病原嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、弧菌、鲁克氏耶尔森氏菌等。二、危害鲫、鳊、鲂、鲢、鳙、鲮等,水温9～36℃时暴发流行。细菌性败血病是近年来大量出现的流行病。此病     

鳖池水体中优势菌的初步研究

对各种养鳖池中的水体进行细菌分离,共获得四种优势菌,经细菌学鉴定分别为嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)、温和气单胞菌(A.sobria)、豚鼠气单胞菌(A.caviae)和费氏枸椽酸杆菌(Citrobacterfreundii)。各水体中均存在此四种优势菌,且其对小鼠的毒力反应一致,24h内供试小鼠全部死亡。此四菌株亦可诱发中华鳖发病死亡,当感染菌数为5×107个/只,7d内幼鳖发病死亡率达100%。     

甲鱼爆发性传染病病原体分离及抗血清制备

从患病甲鱼的肝脏中分离到9株细菌,其中7株为温和气单胞菌,2株为豚鼠气单胞菌。两种菌JA—1和JA—2对鲫鱼的半数致死量(LD_(50))各为4.3×10~5和5.5×10~7,在两种菌培养的上清液中均有一种具有溶血活性的毒素。研究表明:甲鱼的爆发性传染病是由温和气单胞菌和豚鼠气单胞菌引起,用两种菌为菌种做成菌苗,结合免疫增效剂免疫家兔制得血清,效价可达1:512,治愈率达100％。     

黄芪多糖和当归多糖对维氏气单胞菌诱导鲫细胞凋亡的影响

为研究黄芪多糖(APS)和当归多糖(ASP)对维氏气单胞菌诱导鲫细胞凋亡的影响,实验设阴性对照组、阳性对照组,黄芪多糖组和当归多糖组,通过对鲫用维氏气单胞菌攻毒处理,用流式细胞仪测定血细胞的凋亡比例和细胞周期变化,并用荧光显微镜和透射电镜观察凋亡细胞的形态。结果显示,维氏气单胞菌攻毒后阳性对照组鲫血细胞的细胞凋亡率均极显著高于多糖组和阴性对照组;多糖组能显著降低鲫的细胞凋亡率且黄芪多糖组效果更显著;攻毒后鲫肝细胞和肾脏淋巴细胞出现染色质凝集、细胞核固缩边集和细胞空泡化及凋亡小体;同阴性对照组相比;维氏气单胞菌攻毒可以引起鲫血细胞周期中S/G2+M期细胞比例极显著下降,sub-G1极显著升高,抑制细胞分裂诱发凋亡;多糖组则G0/G1期细胞极显著降低,S/G2+M期细胞极显著升高,sub-G1极显著降低,促进细胞分裂抑制凋亡。黄芪多糖和当归多糖添加量在1%时能抑制维氏气单胞菌攻毒引起的细胞凋亡。     

常见病害防治方法

淡水鱼类细菌性败血症 病原：嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、鲁氏耶尔森菌、豚鼠气单胞菌和产碱假单胞菌等多种革兰氏阴性杆菌。     

中华鳖“拟白斑病”病原菌分离鉴定及药敏实验

本对中山市养殖中华鳖暴发的以体表产生白膜病症的一种疫病病原体进行分离鉴定及药敏实验。从自然感染症状明显的中华鳖内脏器官中分离所得的菌株，经生理生化特性测定，并参考实验菌菌落、菌体特征，初步鉴定为气单胞菌科维隆气单胞菌温和生物型种(简称为温和气单胞菌Aeromonas sobria)。并且，用多种常用鱼病防治药物对分离菌进行了药敏实验，以期筛选出对该病原菌较敏感的药物用于指导生产上防治疫病。     

豚鼠气单胞菌快速检测间接ELISA法的建立

应用从患败血症的鳗鲡中分离、纯化出的豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)菌株AB40511NA1,制备了兔抗血清,建立了快速检测豚鼠气单胞菌的间接ELISA方法.研究结果显示:AB40511NA1兔抗血清的效价为1:16000.该法对AB40511NA1最低检测量为6×104 cfu·mL-1;与水产养殖动物主要致病菌嗜水气单胞菌(A. hydrophila)、温和气单胞菌(A. sobria)、鳗弧菌(V. anguillarum)、溶藻弧菌(V.alginolyticus)、副溶血弧菌(V. parahaemolyticus)及非O1-群霍乱弧菌(Non-O1 Vibrio cholerae)均无交叉反应,特异性强;能快速、准确、方便地检测出豚鼠气单胞菌.     

2株水产病原气单胞菌拮抗菌的筛选鉴定及生物学特性

气单胞菌是水产养殖鱼类的重要病原菌,暂无针对多种气单胞菌感染防治的有效措施。红树林沉积物中芽孢杆菌丰富,是活性微生物的重要储库。笔者自深圳东涌红树林沉积物中筛选获得2株对6种鱼类病原性气单胞菌均具有较强拮抗活性的菌株AH10和AQ1,基于形态学、生理生化特性和分子生物学分析结果,将2株拮抗菌鉴定为解淀粉芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌。生物学特性测试结果表明,2株菌的生长特性相似,最适生长温度为32℃、pH 5～7、盐度0～20。药敏试验结果显示,2株菌除对四环素耐药、对链霉素中度敏感外,对绝大多数抗生素均高度敏感。拮抗试验结果显示,2株菌除对嗜水气单胞菌、舒氏气单胞菌等6种气单胞菌具有拮抗作用外,亦均对爱德华氏菌、类志贺邻单胞菌等水产病原菌具有拮抗作用。其中,解淀粉芽孢杆菌AH10和贝莱斯芽孢杆菌AQ1分别对类志贺邻单胞菌和杀鲑气单胞菌的拮抗作用最强。生物安全试验表明,2株菌对斑马鱼和鲢均无致病性,生物安全性良好。本研究结果可为水产养殖中气单胞菌病的生物防治提供新的微生物资源,具有较好的应用前景和进一步研究价值。     

鱼类气单胞菌败血症及疫苗应用技术

气单胞菌是一类主要分布于淡水水体的细菌，可见于河流、湖泊、池塘等多种水域，是水产养殖业的重要病原菌。近年来，气单胞菌引起的疾病日益增多，其危害程度也大大强于以往。20世纪80年代末，我国暴发了养殖鱼类细菌性败血症，当时称鱼类暴发病，危害鲫、鲢、鳊、鳙、鲤多种养殖鱼类，给我国淡水养殖业造成了极为严重的损失，     

鲫鳃出血病2种病原菌的分离及鉴定

从患有鳃出血病的鲫鳃组织分离出2种革兰氏阴性杆菌,并进行形态特征及16S r RNA基因序列分析。结果显示,这2种病原菌为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)和阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)。体外溶血试验结果显示,2种菌对鱼的红细胞都有较强的溶血作用,且维氏气单胞菌的溶血速率明显高于阴沟肠杆菌。人工感染试验显示,这2种菌都具有较强的毒力,两者混合感染比单独感染致病率更高;但单独感染时阴沟肠杆菌比维氏气单胞菌引起的鳃出血症状更明显。5种常用水产药的耐药性结果表明两种菌都有一定的耐药性,但是维氏气单胞菌的耐药性更强。     

室内循环水养殖美洲鲥高发细菌病的分离及防控建议

在高密度水泥池养殖环境下采集患病美洲鲥(Alosa sapidissima),从肝脏、脾脏、腹腔、体表等部位分离纯化病原菌,进行生理生化鉴定及药敏试验。结果显示,病原菌主要为气单胞菌属(温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌);药敏试验结果表明,病原菌主要对恩诺沙星、盐酸多四环素、甲砜霉素、氟苯尼考等4种抗生素较为敏感,对硫酸新霉素、氟甲喹敏感性一般,对磺胺间甲氧嘧啶钠、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶具有耐药性。应保持养殖环境的适宜,提前预防疾病;当发生疾病时,及时采取治疗措施,并做好环境卫生的消控。     

3株水产病原维氏气单胞菌对常用抗菌药物耐药性比较分析

为有效防治维氏气单胞菌引起的水产养殖动物疾病,试验采用纸片扩散法(K-B法)测定3株不同宿主来源的维氏气单胞菌对37种抗菌类药物的敏感性,并采用试管稀释法测定养殖中常用的5种抗菌药物对3株病原菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).结果显示,氟苯尼考对3株维氏气单胞菌JDM2020、CPA2020和GJL2...     

淡水养殖中国花鲈“溃烂病”病因分析及药敏试验

对淡水养殖的中国花鲈“溃烂病”进行了病因分析和病原菌生理生化特征测定及药敏试验。结果表明：“溃烂病”由病原菌和养殖水环境的恶化共同引起,病原菌为温和气单胞菌,在所检测的21种药物中,该菌除对头孢他啶耐药外,其他均敏感。     

被动转移免疫在鲫感染温和气单胞菌中的作用

实验用鲫平均体重100g，采用免疫物质被动转移试验，探讨体液免疫在鲫感染温和气单胞菌（Aeromonas sobria)中的保护作用。结果表明，无论免疫物质是来自异源还是自源，是由相关的嗜水气单胞菌（A.hydrophia)诱导产生还是由攻毒的温和气单胞直接刺激，均具有良好的免疫保护作用。实验还发现，再次攻毒时，在所有抗体组的鲫存活率为100%时，全血被动转移组的死亡率高达55.6%；免疫前后免疫复合物发生明显变化。说明抗体在保护鲫免疫受温和气单胞菌的致死性感染中发挥决定性的作用。