桃内酯芳香物质合成相关的环氧化物水解酶候选基因的鉴别

环氧化物水解酶(EH)因其重要的生物学功能而在哺乳动物以及诸多植物中被广泛关注,更是果实典型“桃香”气味——内酯芳香物质生物合成的一个重要酶,但在桃等果实中的研究较少且鲜有该家族成员的系统报道或生物学功能的解析。为鉴别桃果实中与内酯芳香物质合成相关的环氧化物水解酶家族成员,本研究使用了同源序列比对和关键词搜索等方法,在桃中共筛选获得7个环氧化物水解酶家族成员。序列比对分析结果表明,这7个成员均有典型的α/β水解酶折叠结构和环氧化物水解酶保守的序列片段。进化树分析结果显示,桃的环氧化物水解酶成员与拟南芥、烟草等其他物种中已被鉴别的环氧化物水解酶成员的亲缘关系很近。基因表达分析结果显示,在桃的发育成熟进程中7个EH基因均在果实的中果皮表达,在果实发育前期均呈现较高的表达水平,转录模式包括3种类型。综合已报道的内酯芳香物质的生物合成通路以及前人指出的内酯芳香物质含量在果实成熟期开始显著增加的变化规律,推测桃环氧化物水解酶成员的表达量可能与内酯芳香物质的积累负相关。本研究结果为后续深入挖掘桃或者其他果实环氧化物水解酶家族成员的生物学功能尤其是参与内酯芳香物质合成的分子机理提供了参考。     

乙醇处理对大久保桃挥发性芳香物质的影响

采用顶空固相微萃取法(Headspace Solid-Phase Micro-Extractions,HS-SPME),提取大久保桃的香气成分,经气相色谱-质谱(Gas Chromatography-Mass Spectrometry,GC-MS)联机分析,分类分析表明,果实香气成分主要是挥发性醇类、酯类、醛类和少量的酮类.在采摘后桃果实随着贮藏期的延长,主要芳香物质含量均会发生变化.10℃下,内酯类物质随贮藏期的延长含量升高,乙醇处理促进桃果实内酯类物质的生成,且有利于苯甲醛、芳樟醇的合成;0℃T,2 mL·kg-1乙醇处理显著促进桃果实货架期内酯类物质的生成,提高了苯甲醛、酯类物质和紫罗酮的含量.     

番茄果实芳香物质的研究进展

 本文对番茄果实芳香物质的研究进展进行了综述,从番茄果实主要芳香物质的种类,不同芳香物质对番茄果实风味的具体贡献入手,阐述了不同品种间、不同成熟时期、不同栽培条件下番茄果实芳香物质的变化情况和芳香物质分子遗传标记进展;对番茄果实挥发性芳香物质的形成途径、关键酶及影响番茄果实芳香物质变化的外界因素进行了分析,并对番茄果实芳香物质的分离、鉴定方法进行了概述。     

采后桃果实风味物质研究进展

讨论了桃果实风味物质及其变化规律,确定了桃果实风味物质主要包括醛类、酮类、醇类、酯类、内酯类、烃类等化合物,并且是以脂肪酸为前体物质及β-氧化为主要合成途径。调查表明不同产地、品种、部位和贮藏方式的桃果实中挥发性芳香物质(VFC)种类和数量都呈现差异性。结合国内外风味物质研究进展,阐述了风味物质分离、提取、鉴定和分析技术和方法进展,为果蔬风味品质的研究提供参考。     

不同处理对桃果实MA贮藏期和货架期挥发性芳香物质含量的影响

为了探明乙烯与桃果实冷害之间的关系,以'八月脆'桃果实为试验材料,研究了乙烯吸收剂、1-MCP、外源乙烯对低温MA贮藏期间和货架期桃果实的主要风味物质含量的影响.结果表明:外源乙烯处理能使桃果实贮藏前期保持很好的风味,但后期风味最差.低温MA贮藏期间和货架期期间1-MCP处理与乙烯吸收剂处理类似,贮藏后期还能保持较好的桃风味,且1-MCP处理效果更好.低温MA贮藏期间,己醛、苯甲醛含量受低温抑制明显,未随乙烯存在与否而明显变化;反-2-己烯醛随外源乙烯有无而变化,芳樟醇、γ-癸内酯含量和脂氧合酶(LOX)活性因乙烯存在而降低或后期降低,这些物质变化可以作为评价桃果实冷害的指标.     

设施栽培桃果实芳香成分的GC-MS分析

研究设施栽培桃果实香气成分及含量的变化,为桃树设施栽培品质变淡的原凶提供理论参考.采用固相微萃取和气相色谱-质谱联用(SPME/GC/MS)技术,分别测定了设施内外‘春雪'、‘春捷'、‘五月阳光'等3个桃品种成熟果实的挥发性物质,并对果实成熟后挥发性物质的变化进行了探讨.结果显示:设施栽培的春雪、春捷、五月阳光桃中各检测到51、52、45种挥发性物质,分别比露天栽培的少6种、3种、1种.醛类、酯类、内酯类及醇类物质为设施栽培桃主要的香气物质.设施栽培的春雪、春捷桃醇类、醛类物质高于露地,而酯类、内酯类物质低于露地;设施栽培的五月阳光醇类、酯类高于露地,而内酯类物质则低于露地.E-2-己烯醛、E-2-己烯-1-醇只存在于设施栽培的果实中,且含苗很高.对设施春捷桃花后30、40、50、58、68、78、86d香气成分研究发现,果实发育早期香气组分主要是苯甲醛、E-2-己烯醛等醛类物质,而在果实成熟期,酯类物质增加,内酯类等成熟桃果实特征香气成分开始出现.     

套袋处理对苹果芳香物质含量及果实品质的影响

近年来国内外的研究表明,在套袋处理微气候环境下苹果发育期间的果面色泽、果皮光洁度等果实外观质量有一定提高〔２〕,但对套袋引起的果肉风味品质及相关生理变化研究较少,在果肉挥发性物质研究方面目前尚未有报道〔１,５〕。本试验以几种新型苹果纸袋为试材,研究了...     

不同基因型黄瓜果实芳香物质组成及含量差异研究

【目的】研究不同基因型黄瓜果实芳香物质主要组成成分及含量的差异,为黄瓜的品质育种及其栽培提供依据。【方法】以11个不同基因型黄瓜果实为材料,采取固相微萃取结合气相色谱-质谱联用仪(GC-MS),对黄瓜果实的香气物质组成进行分析,并根据其香气值确定黄瓜果实的特征香气成分。【结果】从11个不同基因型黄瓜果实中共检测到78种芳香物质,主要包括醛类、醇类、酮类、烃类及酯类,其中醛类和醇类物质的相对含量最高,分别占芳香物质总量的56.30%～83.95%及7.78%～21.33%,表明醛类和醇类是黄瓜果实芳香物质的主体香气成分;烃类芳香物质1,4-辛二烯在黄瓜中属首次检出。【结论】根据检出芳香物质的香气值,确定(E,Z)-2,6-壬二烯醛、(E)-6-壬烯醛、(E)-2-壬烯醛、己醛、壬醛、(Z)-2-庚烯醛等16种化合物为黄瓜果实的特征香气成分,其中9种特征香气成分为不同基因型黄瓜所共有。     

甜瓜不同品种类型芳香物质和营养品质的比较分析

试验采用固相微萃取(SPME)和气相色谱.质谱联用技术(GC-MS)等方法测定了10个不同品种类型的甜瓜芳香物质,结果表明薄皮甜瓜芳香物质的种类比厚皮甜瓜多,在薄皮甜瓜中分离出的芳香物质以乙酸乙酯、乙酸-2-甲基丙酯和乙酸正己酯等乙酸酯类为主;在厚皮甜瓜中,哈密瓜的芳香物质主要以正辛醇、2-辛醇和辛醛等醇醛类物质为主;网纹甜瓜和薄皮型厚皮甜瓜中甜1号以(Z,Z)-3,6-壬二烯醛、(Z)-6-壬烯醛和正壬醇等饱和与不饱和的九碳脂肪醛和脂肪醇为主;光皮型厚皮甜瓜中,白兰瓜和伊丽莎白甜瓜主要以乙酸甲酯、乙酸乙酯和乙酸-2-甲基丙基酯等低分子的酯类物质为主,这与薄皮甜瓜的芳香物质相似,但在白兰瓜和伊丽莎白中没有分离出醛类物质,光皮型厚皮甜瓜心里美2号、元首和天蜜以(Z,Z)-3,6-壬二烯醛、壬醛和正壬醇等饱和与不饱和的九碳脂肪醛和脂肪醇为主.对十个品种的营养品质分析表明,薄皮甜瓜之间的营养品质含量都有显著性差异;在厚皮甜瓜中,光皮型厚皮的营养品质优于其它厚皮甜瓜;薄皮甜瓜的糖酸比显著低于厚皮甜瓜.     

不同矮化砧木对“寒富”苹果果实芳香物质的影响

分析不同矮化砧木寒富苹果果实芳香物质的组成及含量,研究其形成因子,旨在为确定合理砧穗组合和优质高效栽培提供理论依据。采用静态顶空和气相色谱-质谱联用技术对5个矮化砧木6种砧穗组合的寒富苹果果实中的芳香物质的组成成分和含量进行检测。结果表明,在5个矮化砧木6种砧穗组合的寒富苹果中共检测到醇类、酯类等32种挥发性成分,2-甲基-1-丁醇、丁酸-2-甲基已酯和丁酸乙酯的含量最高;特征香气为丁酸-2-甲基乙酯、丁酸乙酯、丁酸-2-甲基已酯、已酸乙酯、丁酸-2-甲基丁酯、乙酸-2-甲基丁酯、2-甲基-1-丁醇;寒富/M9/山定子、寒富/GM256/山定子、寒富/77-34/山定子、寒富/M7、寒富/M7/山定子、寒富/MM106/山定子特征香气成分别为6、6、3、7、5和5种;丁酸-2-甲基乙酯的香气值最高;寒富/M7和寒富/GM256/山定子果实中特征香气成分种类多而且含量高。寒富苹果的香气成分以醇类和酯类为主,不同砧木寒富苹果特征香气的种类和含量存在差异,寒富/M7和寒富/GM256/山定子2个组合有利于果实中特征香气的积累,对提高果实品质有益。     

菠萝贮藏过程中香气成分的变化

采用顶空固相微萃取技术,研究巴厘菠萝果实贮藏过程中香气成分的组成及变化。结果表明,巴厘菠萝果实贮藏过程中主要香气成分是酯类,且含量随贮藏时间的延长增加。己酸甲酯是主要的酯类成分,在贮藏过程中含量也随时间的延长而增加。巴厘菠萝在果实贮藏期间,各香气成分的相对含量变化较大。     

桃单果重与6个物候期性状的遗传关联分析

【目的】关联分析作为传统连锁分析方法的有效补充,可以鉴定果树的数量性状位点（Quantitative Trait Loci, QTLs）。本研究通过关联分析定位桃单果重及6个物候期性状的QTLs,以研究性状间的遗传相关,为提高桃品质育种的效率奠定理论基础。【方法】以来源于中国6个生态群的104份桃地方品种为试材,利用分布于桃8条连锁群上的53对SSR（Simple Sequence Repeats）引物,用STRUCTURE 2.3.3和TASSEL 2.0.1软件分别对群体结构和全基因组SSR位点间的连锁不平衡（Linkage Disequilibrium, LD）状况进行分析。在结合单果重和6个物候期性状表型数据后进行关联分析,以定位各性状的QTLs。【结果】群体结构显示供试的104份桃地方品种基于数学模型可以分为5群;LD分析表明在53个SSR位点组成的1378个成对组合中,23个成对位点存在着显著LD且得到统计概率支持。虽然相关性分析表明单果重只与展叶期显著相关,但关联分析却显示单果重不仅与盛花期、展叶期、果实成熟期和落叶期均具有相同的关联位点;而且桃单果重的关联位点与不同连锁群上盛花期、果实发育期和落叶期的关联位点也存在显著的LD现象。对单果重具有最大增效表型效应的等位变异UDP96-013-206同时具有提前花期1.46 d、延迟果实成熟期13.77 d、延迟落叶期2.17 d的表型效应。【结论】本研究得到27个与桃单果重及6个物候期性状关联的QTLs,部分位点与前人定位的连锁群相同。关联分析表明单果重与盛花期、展叶期、果实成熟期、果实发育期和落叶期确实存在遗传相关,主要表现为这几个性状可能受到基因多效性调控或者受连锁群内及连锁群间存在连锁或关联关系的基因调控。     

蟠桃采后贮藏前后香气成分变化的研究

[目的]分析研究采后新疆蟠桃在贮藏前后期果实香气成分的变化.[方法]采用顶空-固相微萃取( HS - SPME)与气-质联用(GC - MS)技术对蟠桃果实香气成分进行提取和分析;比较溶剂萃取(LLE)、水蒸气蒸馏(SDE)和HS - SPME 3种提取方法对蟠桃香气成分分析的影响.[结果]HS - SPME最佳萃取条件为萃取头50/30μm DVB/CAR/PDMS灰色,萃取时间40 min,萃取温度50℃;HS - SPME - GC - MS在蟠桃果实贮藏前后期分别检测出53和44种挥发性物质.[结论]贮藏前后期蟠桃果实所含的挥发性成分有较大的差异,作为蟠桃香气的特征组分酯类和内酯类物质在贮藏第4周后含量显著减少.     

桃果实生长素结合蛋白ABP1的组织定位及蛋白表达分析

【目的】生长素几乎参与调控植物发育的各个方面。生长素信号转导存在由ABP1（auxin binding protein 1）介导的途径,ABP1作为一种生长素快速响应蛋白参与调控果实发育等生理过程,其主要存在于正在发育的胚及胚的周围组织中。本文旨在研究ABP1是否参与桃果实发育过程,探讨其分布与表达特点,为进一步研究桃果实发育机制奠定理论基础。【方法】以‘24号’桃果实为研究对象,测定其生长曲线以确定果实发育的3个典型时期。分离不同发育时期的中果皮、内果皮和种子,切块后,一部分样品放入EDAC溶液抽真空后进行戊二醛和多聚甲醛固定,固定后的样品经脱水和浸蜡处理后用于石蜡切片;另一部分样品液氮速冻后-80℃保存提取蛋白。制备效价较高的ABP1兔源多克隆抗体,应用免疫组织化学定位技术对自然发育状态下不同发育时期桃果实种子和中果皮中ABP1进行定位分析;应用Western blot技术分析桃果实中果皮、内果皮和种子中ABP1的表达情况。【结果】根据桃果实生长曲线,将发育时期分为3个时期,即第一次快速生长期、硬核期和第二次快速生长期。免疫组织化学定位结果表明,同一发育时期ABP1在种子的不同部位都有分布,且分布信号差异不明显。在种子发育的各时期,ABP1在种子的不同部位都有分布,主要分布在种子的内外种皮细胞以及种皮内维管组织周围的细胞中,且在观测的发育时期内,ABP1的信号强弱没有明显变化。在种子内、外种皮之间的细胞层中会出现零散的、呈带状分布的ABP1信号。而在中果皮发育的整个时期,ABP1只在硬核期维管组织周围的细胞中有明显分布。Western blot结果表明,中果皮中ABP1的表达在果实第一次快速生长期开始（盛花后41 d）及第二次快速生长期开始（盛花后76 d）时的表达量最高,在盛花后39 d的表达量最低。种子中ABP1的表达量要高于中果皮与内果皮。【结论】ABP1在果实内的分布与表达水平存在组织和发育时期的差异性,ABP1因子参与了生长素对桃果实发育的调控过程。     

雨花2号桃离体微繁殖技术研究

以桃品种雨花2号春季嫩梢茎段为外植体,通过外植体消毒方法的筛选,以及腋芽诱导、腋芽增殖和生根培养基的筛选,以建立该品种的快繁体系,并解决桃离体快繁过程中常见的玻璃化和黄化问题.研究结果表明:最佳的外植体消毒方法为先以75.00%酒精浸润20 s,再用0.10% HgCl2 0.01%吐温对外植体表面消毒8 min;LP 6-BA 0.80 mg/L IBA 0.30 mg/L最利于腋芽萌发;LP 6-BA 1.50 mg/L IBA 0.20 mg/L的继代增殖培养基上4周芽增殖倍数达3.5～4.0,且植株健壮;适宜生根培养基为MS IAA 1.50 mg/L.同时,研究发现,在继代培养基中添加0.20 mg/L GA3可使黄化苗转绿,培养基中Ca2 浓度增加至0.729 mmol/L可以有效地抑制和消除玻璃化现象,培养基中使用6.50 g/L琼脂粉也可抑制玻璃化苗的产生.     

桃SERK2 的克隆及其在不同状态愈伤组织中的表达分析

【目的】 分离克隆桃（Prunus persica L.）体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶（somatic embryogenesis receptor-like kinases,SERKs）基因SERK2 ,检测其在不同状态桃愈伤组织中的表达差异,分析SERK2 与胚性愈伤组织发生的关系,为揭示组织培养困难树种桃胚性愈伤组织产生的分子机理奠定基础。【方法】 采用同源克隆法获得PpSERK2 的cDNA全长序列,运用TMPred、DNAMAN和MEGA 5.0等生物信息学软件对序列进行分析;以‘秋蜜红’花药为外植体,接种至添加2.0 mg·L ^-1 6-BA和1.0 mg·L ^-1 2,4-D的NN69培养基诱导愈伤组织;将获得的不同状态愈伤组织制作石蜡切片并进行组织细胞学观察;通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）对PpSERK2 在4种不同状态愈伤组织中的表达进行分析。 【结果】 克隆获得‘秋蜜红’PpSERK2 的cDNA全长序列1 881 bp,编码626个氨基酸,其蛋白质理论分子量为68.99 kD,理论等电点为5.38,具有完整的SERK蛋白的保守结构域,与牡丹（Paeonia suffruticosa ）等物种的同源性为67.88%—92.71%,且与秘鲁番茄（Solanum peruvianu ）和温州蜜柑（Citrus unshiu ）的相似性最高。在与其他物种的SERK蛋白构建的系统进化树中,PpSERK2与SpSERK1、CitSERK1和PsSERK2等聚在一起,与同源性比对结果一致。以‘秋蜜红’花药为外植体诱导获得4种不同状态的愈伤组织,组织细胞学观察发现黄色疏松状（球形胚出现）、绿色紧实状（心形胚出现）和浅黄色透明状（尚未完全形成的鱼雷形胚结构出现）的3种状态的愈伤组织细胞小、排列紧密;而黄白色水渍状愈伤组织细胞体积大、排列不规则,细胞质稀且染色浅。根据形态学和组织学的鉴定结果,可知黄色疏松状、绿色紧实状和浅黄色透明状的3种状态的愈伤组织均为胚性愈伤组织,而黄白色水渍状愈伤组织为非胚性愈伤组织。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）结果表明,PpSERK2 在‘秋蜜红’3种状态的胚性愈伤组织中的表达量显著高于非胚性愈伤组织,且在3种胚性愈伤组织中的表达量有差异,其中在黄色疏松状愈伤组织中表达量最高,绿色紧实状次之,浅黄色透明状中最低。【结论】 克隆获得PpSERK2 的cDNA全长序列,其在3种状态的胚性愈伤组织中的表达量明显高于非胚性愈伤组织,且在黄色疏松状胚性愈伤组织中的表达量最高,PpSERK2 在桃体细胞胚发育的早期发挥作用。     

桃分子遗传图谱构建及红肉性状基因定位概述

红肉桃果肉颜色鲜艳,富含酚类物质和花色苷,抗氧化能力强,营养与保健价值高,成为目前研究热点之一。利用先进的分子标记技术辅助育种是加快红肉桃育种进程的重要手段,而构建高密度的遗传连锁图谱是红肉桃性状快速、定向改良的前提。对近年来国内外桃分子遗传图谱构建及红肉性状基因定位的研究进展进行了综述,并对今后的研究方向提出了建议,旨在为红肉桃品质改良和分子育种提供参考依据。     

果实迅速膨大期不同施肥量对中华寿桃产量与品质的影响

以中华寿桃为试材,研究了果实迅速膨大期不同施肥量对果实产量品质及土壤无机氮的影响。试验结果表明,适量追施氮磷钾（16：8：20）复合肥0．75、1．5ks／株能够提高果实产量,在此基础上再增加肥料用量,增产效果不明显。果实品质与施肥量在一定范围内（0～1．5ks／株）呈正相关,超过此范围会对果实品质产生负面影响。研究结果还表明,0—40cm土壤无机氮含量随施肥量的增加而增加,硝态氮含量为40-83mg,／kg或铵态氮含量12～20mg／kg范围内能保证果园产量。适量追肥能促进氮磷钾的吸收,提高叶绿索含量。