牛冷冻精液稀释液的研究进展

<正>精液的冷冻保存技术是随着人工授精(AI)的广泛应用而发展起来的,为了长时间地保存精液并能够扩大精液的量,在鲜精中加入一定的稀释液,目的是为了使精子有一个适于存活的环境,保证细胞膜的完整不被损害,要求能供给养分、耐低温、抗冻、维持渗透压和电解平衡、维持pH值、抑制细菌生长。精液冷冻保存始于Spallanzani用雪冷却精子的试验〔1〕,解冻后发现有极少数精子仍然存活。     

维生素B12、E和C在家畜精液保存中的应用

家畜精液保存时,向稀释液中添加一定量的维生素B12、E或C,在提高精液品质方面具有重要的作用。精液稀释液中添加维生素B12,具有维持精子顶体完整率,延长精子体外存活时间和提高解冻后的精子活力的作用。维生素E是重要的抗氧化剂,能通过抑制自由基的形成,阻止诱发的膜脂质发生过氧化,从而维持精子顶体膜的完整,提高精子顶体完整率和降低精子畸形率;维生素E还能防止精子发生冷休克,提高冻精解冻后的精子活力,从而提高受精率。维生素C作为抗氧化物质,能有效地防止冷冻精子磷脂发生过氧化,提高解冻后的精子活力,延长精子在体外存活的时间;维生素C的抗氧化作用还表现在能够保护精子细胞中的遗传基因DNA免受氧化破坏。     

家禽精液稀释液的发展

家禽精液是一种高度浓缩精子液,其容量小,为了增加精液的体积,提高单位体积中授精母禽数,常用稀释液对精液进行稀释。稀释后的精液,精子分布均匀,运输方便。在保存期间,稀释后的精液能维持和保护精子,最大     

“靓精”对稀释猪精液保存质量的影响

<正>种公猪精液在采集、稀释液配制和精液稀释过程中,会因外界环境或操作疏忽而使精液或稀释液受到某些病原微生物的污染,影响稀释精液的质量和保存时间。"靓精"为一种精液净化保护剂,含5%聚维酮碘,能抑制或杀灭病原微生物,减少病原微生物对精子质量的影响,提高精子活力,延长保存时间。本试验在公猪精液中加入靓精,通过检测稀释精液在保存期间的精子活力和精子畸形率,观察靓精对稀释精液保存质量的影响。     

马精液稀释液的研究与应用

为了解决新鲜精液中精子存活时间短、活率低、操作复杂等问题,本研究自行研制了一种QDDR188稀释液,并选取3种不同配方的稀释液按照国内AI标准技术对种公马的合格鲜精进行稀释保存,观察不同配方稀释液对公马鲜精保存时间长短、精子活力、顶体完整率、精子畸形率和受精率的影响,并与国际上应用的稀释液INRA96进行对比试验,分析不同马精液稀释液对精子的影响。     

保存温度和不同种类稀释液对猪精液品质的影响

猪精液在室温保存时,含庆大霉素的稀释液保存效果优于含青、链霉素的稀释液,两种稀释液在保存72h时,精子活率、顶体完整率、GOT和LDH活性以及存活指数差异极显著(P<0.01).低温保存时,含蜂蜜和卵黄的稀释液对防精子冷刺激、维持精子活率的效果比含葡萄糖、奶粉的稀释液理想.在冷冻保存条件下,以含2%甘油的稀释液保存效果最佳.液态保存(室温、低温)的猪精液,LDH活性随精子活率下降而下降;pH值则都呈先上升后下降的变化趋势.室温保存主要是引起精子顶体脊膨大和保存后期的顶体前端膨大;低温保存主要引起顶体前部膨大和保存后期的少数顶体脱落;冷冻保存主要是造成顶体的膨大程度加大和顶体脱落.3种保存条件都造成精子线粒体透性增强.液态保存和冷冻保存精液的精清GOT活性与顶体完整率无显著相关性(P>0.05).     

3种稀释液对鸡精液体外常温保存的影响

配制柠檬酸-Tris稀释液、磷酸盐稀释液和猪精液稀释液3种稀释液.测定3种稀释液对鸡鲜精常温(17℃)保存的影响.试验表明,添加磷酸盐稀释液的精液精子活力最强,精子存活时间最长,精子的存活指数最大,并且精子的畸形率最低.添加柠檬酸-Tris稀释液的顶体完整率较高,但是与添加磷酸盐稀释液的差异不显著,结果表明,磷酸盐稀释液更适合鸡精液体外常温保存.     

不同稀释液配方对牛冻精品质的影响

选用3种稀释液配方分别对6头种公牛精液进行稀释、封装、冷冻,并检查种公牛冻精解冻后的精子活力、畸形率、顶体完整率、冻后废弃率、存活时间及镜检感光度.结果表明：3种不同稀释液配方对种公牛精液冻后活力影响差异均显著（P＜0.05）,Ⅰ稀释液生产冻精的畸形率极显著高于Ⅱ稀释液和Ⅲ稀释液（P＜0.01）,3种稀释液冻精精子顶体完整率之间差异均极显著（P＜0.01）,Ⅲ稀释液与Ⅰ稀释液和Ⅱ稀释液间对牛精液所生产冻精的冻后废弃率影响均差异显著（P＜0.05）,Ⅰ稀释液与Ⅱ稀释液和Ⅲ稀释液间对牛精液所生产冻精的存活时间影响差异也显著（P＜0.05）,Ⅲ稀释液生产的冻精精子感光度优于Ⅰ稀释液和Ⅱ稀释液,其余各项指标差异均不显著（P＞0.05）.因此,可用自配Ⅱ稀释液替代进口专用Ⅲ稀释液.     

提高牛冷冻精液质量的技术研究

冻精生产的过程实质上是一个精液降温的过程,利用在稀释液中加入抗冻剂、营养物质,调整渗透压、pH值等方法,为精子提供一个适宜的生存环境,保证精子细胞膜完整、不被损害[1-2].     

五种糖类对犬精液冷冻保存效果的研究

选取8只身体健康、性欲旺盛的比格公犬,采集其精液,对鲜精进行质量检测,主要包括颜色、射精量、精子活率、活力和pH。选取精子活率达到70%以上犬精液用于后续精液冷冻试验。分别将含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖和海藻糖的精液稀释液与精液按照1∶2的比例进行稀释。经冷冻解冻后,进行活率、活力、质膜完整性和顶体完整性的精子质量检测。通过对新鲜精液进行品质检测,结果显示5只合格用犬的平均射精量为2.85 mL,密度为2.01×10~8个/mL,pH为6.56。含有果糖的冷冻稀释液中精子活率和活力最高,分别达59.90%和54.00%;其次是添加葡萄糖和乳糖的稀释液中活率较高,分别为59.21%和56.73%,且两组稀释液中精子解冻后活力均为52.00%。进一步评估精子解冻后质膜完整率,结果显示葡萄糖和果糖组显著高于其他组,分别达48.73%和49.52%;而蔗糖添加组精子质膜完整率最低,为42.21%。稀释液中添加果糖的精子解冻后顶体完整率显著高于其他组,而添加蔗糖组顶体完整率最低。在比格犬的精液冷冻保存中,添加果糖的冷冻稀释液能显著提高精子的活率和活力,从而达到提高冻精质量的效果。     

水蛭素对猪精液低温保存的影响

为了改善猪精液低温保存方法,通过在改进的猪精液低温稀释液中添加不同浓度(0,0.50,1.00,1.50,2.00 mg/mL)的水蛭素,研究在4℃低温保存条件下其对猪精液品质的影响。试验采用PI荧光染色检测精子活率,利用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活力,Diff-Quik染色检测精子畸形率,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整率及采用低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整率。猪精液保存7 d,每天检测上述指标,试验重复5次。结果表明:稀释液中添加一定浓度的水蛭素在一定时间内有利于维持精子的活率、活力,降低精子的畸形率,提高精子的顶体完整率和质膜完整率,并且水蛭素浓度越高,保存效果越好。因此,在本试验条件下,2.00 mg/mL是水蛭素在猪精液低温保存时的最佳添加浓度。     

维生素B12注射液作为绵羊精液保存液的试验

绵羊精液保存方法有冷冻保存和鲜精保存两种,其中以冷冻保存较为理想,其具有保存质量高,保存时间长的优点。但是其设备投资大的问题制约了它的广泛应用,特别是在我国的大部分贫困山区当前尚难全面推广。精液的液态保存目前仍有很大的实用价值。以前就有学者以适宜的稀释液配方为基础添加维生素B12做试验,在作为黄牛的鲜精稀释液时,证明在稀释液中添加维生素B12不仅可以提高精子的活力和精子完整率,还可以降低畸形比例和精清中GOT活性,延长精子存活时间,提高受胎率。     

山羊冷冻精液糖类保护剂试验的报告

家畜精液的冷冻保存，是人工授精的一项重大改革，在精液冷冻技术发展过程中，由于稀释液中加入甘油作为保护剂，而使精液保存技术取得重大突破，但不同畜种的精子对甘油的反应不同。牛冷冻精液稀释液中甘油浓度或高或低对精子活率及受胎率关系不大，对猪和羊来说，甘油浓度增加时，冷冻精液的精子活率虽高，但受胎率极不理想。现将采用最新研制的无甘油糖类保护剂，     

3种稀释液对乐至黑山羊精液品质的影响

旨在评价不同种类稀释液对乐至黑山羊精液品质的影响。配制柠檬酸-Tris（1号）、磷酸盐（2号）和OviXcell（3号）3种稀释液,采集8只乐至黑山羊新鲜精液,采用上述稀释液进行冷冻保存;测定并比较添加不同稀释液冷冻保存的山羊精液在采集后、平衡后以及解冻后的精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率。结果表明：在3种稀释液中,添加OviXcell稀释液（3号）的精液其解冻后精子活力和顶体完整率均最高,精子畸形率最低。提示OviXcell稀释液更适用于乐至黑山羊精液的体外冷冻保存。     

添加维生素B_（12）对西门塔尔牛冷冻精液品质影响的初步观察

为观察稀释液中添加VB12对西门塔尔牛精液品质的影响,进行了对比试验。结果表明：添加VB12的试验组冻精解冻后精子活力、顶体完整率比对照组有极显著提高（P〈0.01）,精子畸形率与GOT活性均明显下降,精子存活时间延长。说明VB12在牛精液冷冻中对牛精子形态结构具有一定保护作用。     

绵羊鲜精长效保存稀释液海藻糖浓度优化试验

为了筛选获得最优海藻糖浓度的绵羊鲜精稀释液,试验用TRIS专利基础稀释液分别配制5个海藻糖浓度,0(A组)、5 mmol/dm~3(B组)、10 mmol/dm~3(C组)、15 mmol/dm~3(D组)、20 mmol/dm~3(E组),采用假阴道法采集5只公羊的精液,用稀释液分别对精液进行4倍稀释,置于30℃水浴杯中,稀释精液在2 h水浴杯降温到0℃后,冰水混合物保存,第0,24,72,144,216,288小时时对精子活率、精子低渗膨胀率和精子顶体完整率进行检测。结果表明:在TRIS精液稀释液中添加低于20 mmol/dm~3浓度的海藻糖不会提高被保存精液的精子活率,但可以显著提高被保存精子顶体完整率,优化的海藻糖添加剂量是5 mmol/dm~3。     

绵羊冷冻精液稀释液成分的研究进展

绵羊精液的冷冻保存是人工授精技术的一项重大提升,稀释液是精子的保护剂,可以使精子寿命更长,提高受胎率。一般稀释液成分有:抗冻保护剂、抗氧化剂、维持渗透压物质、抗菌物质等。抗冻保护剂可以使精子在低温冷冻时起到保护作用,延长精子的存活时间;抗氧化剂具有抗氧化成分,可以保护精子在体外不被氧化;渗透压物质能平衡精子内外渗透压,以保护精子的正常形态;抗菌药物,可控制细菌的污染和生长,提高精子的活力。本文结合国内外相关文献对绵羊精液稀释液相关成分进行论述,以期为绵羊精液稀释液的研究提供一定的理论依据。     

传统稀释液配方中添加不同保护剂对藏羊精液冷冻效果的影响

为探索在传统稀释液配方中添加保护剂对藏羊精子的冷冻保存效果,在传统稀释液配方(果糖-蔗糖-柠檬酸钠-甘油)中,由Tris(三羟甲基氨基甲烷)代替柠檬酸钠,乙二醇代替甘油,在果糖-蔗糖-Tris-乙二醇基础上添加维生素B12、维生素E、维生素C、复合维生素B等,以增强精子缓冲力,减少毒性,提高精子活力、顶体完整率及受精力。结果表明:精液冷冻保存稀释液中添加Tris比添加柠檬酸钠有更好的冷冻保存效果,能有效改善冻后精子活力和顶体完整率;精液冷冻保存稀释液中添加维生素B12对精子有良好的保护作用;用等体积乙二醇代替甘油作为防冻剂,对精子冷冻时的保护作用不亚于甘油;藏羊细管冷冻精液的制作中,用果糖-蔗糖-Tris-乙二醇-维生素B12组合稀释液配方进行2次稀释,8 min冷冻,其冷冻效果最佳,顶体完整率最高。     

水苏糖对猪精液冷冻保存效果的影响

为了提高猪精液冷冻保存效果．试验采用在传统的ZO稀释液基础上分别添加1％、2％、4％、8％的水苏糖的方法．研究不同浓度水苏糖对猪精液冷冻后精子质量的影响。结果表明,水苏糖相对于ZO稀释液能够显著改善和提高猪精液的冷冻效果,其最佳添加浓度为4％,冷冻一解冻后猪精子活力、活率、质膜完整性以及顶体完整率均显著提高,水苏糖可以明显抑制精子获能,获能处理前精子获能率仅为32．4％,而获能处理后降为28．6％。有利于抑制精子获能,精液稀释液中甘油的适宜添加浓度为3％,说明水苏糖与甘油共同作用能在冷冻一解冻过程更加有效地保护精子。     

添加牛磺酸和黄芪多糖对羊精子低温保存的影响

为了研究羊精子低温保存时牛磺酸和黄芪多糖对精子质量的影响，本试验在BTS(Beltsville thawing solution)精液稀释液的基础上添加牛磺酸和黄芪多糖，随后对4℃低温保存条件下羊精子的精子活率、质膜完整率和顶体完整率进行考察，采用两因素五水平的中心设计法优化精子稀释液添加牛磺酸和黄芪多糖的浓度，并进一步验证经优化缓冲液的保护效果。结果显示，牛磺酸和黄芪多糖的最优添加浓度分别为27.83 mmol/L和346.91 mg/mL;采用该添加浓度能显著提高低温保存后羊精子的精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P<0.05)。结果表明，牛磺酸和黄芪多糖对低温保存羊精子具有显著的保护作用。