硬粒小麦中γ-45麦醇溶蛋白基因表达的丧失

硬粒小麦(MG 41392)种子蛋白质的电泳分析表明Υ-45麦醇溶蛋白缺失,然而,通常与其密切相关的ω-麦醇溶蛋白和低分子量(LMW)谷朊亚单位却存在.对这种基因型中DNA基因聚合酶连锁反应(PCR)的研究表明,45型硬粒小麦品种存在着典型扩增谱带.这个发现已由Southern印迹分析研究进一步证实,并显示所有存在于45型硬粒麦类作物中的α-麦醇溶蛋白的杂交带,即有Υ-45麦醇溶蛋白基因存在,但未能表达。     

小麦面粉蛋白质量评价模型构建及蛋白质量再评价

小麦面粉蛋白的含量和类型决定着小麦面粉的加工品质。为量化比较小麦面粉蛋白对品质影响的差异,以11个不同品质类型的品种为材料,分析了面粉蛋白巯基集团与面粉质量的相关性,发现自由巯基含量与面团稳定时间有极显著正相关性,与面筋指数有显著正相关性;基于面粉蛋白的自由巯基和分子内二硫键含量差异,建立了一个简单的品质贡献量化评价模型;依托蛋白质巯基预测结果,对90个不同类型的面粉蛋白的品质贡献进行了量化比较。结果表明,高分子量麦谷蛋白亚基中得分较高的是1Dy10、DX5和1Dy3;低分子量麦谷蛋白亚基中,位于 Glu-B3、 Glu-D3位点的蛋白得分达到7.2分,高于高分子量麦谷蛋白最高分的1Dy10(6.3分)。因为低分子量麦谷蛋白在面粉中的含量远超高分子量麦谷蛋白,推测面团强度的主要决定因素是低分子量麦谷蛋白,而不是传统观点认为的高分子量麦谷蛋白亚基。另外,一些燕麦类似蛋白和部分醇溶蛋白也对面团强度有一定贡献。     

簇毛麦新型低分子量谷蛋白亚基的分子克隆与序列分析

为发掘低分子量谷蛋白亚基（LMWGS）新的变异类型,通过设计引物和特异PCR扩增,从簇毛麦TA2127基因组DNA中得到14个LMWGS基因,GenBank登录号分别为HQ615147～HQ615160。序列分析表明,所有基因具有完整编码区,长度为831 bp和846 bp,可编码277和282个氨基酸残基,推导的氨基酸序列分析显示,14个基因编码的蛋白序列都缺少一段N端保守区,且N端序列是一种新的类型;在14个LMWGS基因中检测到19个SNPs和1个16 bp 的缺失。系统进化分析表明,簇毛麦LMWGS与ω醇溶蛋白和HMWGS亲缘关系相对较远,与普通小麦 Glu3的低分子谷蛋白基因进化关系相对较近。     

小麦品质性状与蛋白组份含量关系的研究

通过对黑龙江省大面积主栽小麦品种不同品质类型进行蛋白组份含量以及麦谷蛋白亚基组合的份析表明 ,小麦品质性状与麦谷蛋白 /醇溶蛋白比值显著相关 ,随麦谷蛋白含量的增加 ,面筋、沉降值、稳定时间都有明显增大 ,醇溶蛋白高于麦谷蛋白含量 ,其面团筋性弱、稳定时间短。     

不同硬粒小麦品种的单粒种子PCR分析鉴别法

用PCR(聚合酶链式反应)法扩增来源于几个硬粒小麦单粒萌发种子DNA提取液中的LMW(低分子量)谷蛋白基因序列.PCR反应的电泳分析表明,品质优劣不同的硬拉小麦品种具有不同的扩增产品.这种建立在PCR基础上的方法,比标准方法筛选优异品质基因型更有效、更安全.     

小麦品质性状与蛋白组份含量关系的研究

通过对黑龙江省大面积主栽小麦品种不同品质类型进行蛋白组份进行含量以及麦谷蛋白 基组合的份析表明,小麦品质性状与麦谷蛋白／醇溶蛋白比值显著相关,随麦谷蛋白含量的增加,面筋、沉降值、稳定时间都有明显增大,醇溶蛋白高于麦谷蛋白含量,其面团筋性弱,稳定时间短。     

低分子量麦谷蛋白在决定通心面蒸煮品质中的作用

硬粒小麦通心面(Pasta)的蒸煮品质和普通小麦的烘烤品质主要取决于面筋蛋白质(Feillet,1980;1984).在面筋蛋白质中,低分子量麦谷蛋白(LMWG)是巨大凝集物的亚单位,经巯基乙醇还原后,产生分子量为12,000-60,000的     

热处理对小麦籽粒蛋白质组分的影响

根据小麦籽粒蛋白质的溶解性不同，将3个不同面筋强度的小麦品种在不同温度下处理，分析了其籽粒中球清蛋白，醇溶蛋白，乙酸可溶性麦谷蛋白和乙酸不溶性谷蛋白的含量和比例。结果表明，高温（90℃和110℃）处理强筋和中强筋小麦，球清蛋白和乙酸可溶性麦谷蛋白的含量下降，醇溶蛋白的含量不变，乙酸不溶性蛋白的含量上升，高温处理弱筋小麦，球清蛋白，醇溶蛋白和乙酸可溶性麦谷蛋白的含量下降，乙酸不溶性蛋白的含量上升，讨论了高温处理使强面筋和中强面筋小麦品质劣化，使弱面筋小麦的品质改善的原因。     

小麦贮藏蛋白分析的改良SDS-PAGE法

本文提出了一种单向一步SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分析小麦贮藏蛋白(谷蛋白和醇溶蛋白)的方法,利用SDS-PAGE重新评价普通小麦品种间染色体代换系醇溶谷蛋白的组成.从小麦品种Cheyenne和Wichita的第1和第6组染色体的轮回代换系中提取谷蛋白和醇溶蛋白,估计每个品种特有蛋白质的分子量,第1组染色件编码的蛋白质,特别是醇溶蛋白和低分子谷蛋白亚基比第6组染色体编码的蛋白质变异大,高分子和低分子谷蛋白亚基都微溶于乙醇溶液.和四交品种相比,Cheyenne和Wichita的染色体代换系的醇溶谷蛋白多肽链都产生了变化.因而,只有在分析了两种醇溶谷蛋白组分后,才能确定品质改变(和代换染色体有关)和贮藏蛋白之间的相关性.     

不同硬粒小麦品种的单粒种子PCR分析鉴别法

用ＰＣＲ（聚合酶链反应）法扩增来源地几个硬粒小麦单粒萌发种子ＤＮＡ提以液中的ＬＭＷ（低分子量）谷蛋白基因序列，ＰＣＲ反应的电泳分析表明，品质优劣不同的硬粒小麦品种具有不同的扩增产品，这种建立在ＰＣＲ基础上的方法，比标准方法筛选优异品质基因型更有效，更安全。     

离子束介导大豆DNA转入普通小麦后代的麦谷蛋白和醇溶蛋白分析

为了研究离子束介导大豆DNA转入普通小麦的效果,应用SDS-PAGE和A-PAGE电泳分析了离子注入介导大豆DNA转入普通小麦后代中高蛋白含量植株的麦谷蛋白和醇溶蛋白。SDS-PAGE电泳结果表明,与对照相比有8个高蛋白含量植株的HMW-GS谱带数目发生了变化或着色增强。A-PAGE电泳结果表明,与对照相比有9个高蛋白含量植株的醇溶蛋白谱带数目及着色强度发生了变化。说明离子束介导大豆DNA转入普通小麦后代中的高蛋白含量植株在醇溶蛋白和麦谷蛋白基因位点上可能出现了变异。     

新消息

0218—缺少由Gli-Dl/Glu-D3位点的基因所控制的蛋白质对小麦面包制作品质的影响——S.Benedettelli等用面包小麦品种Cheyenne与一个由位于Gli-Dl和Glu-D3位点的连锁基因所控制的麦胶蛋白组分和低分子量麦谷蛋白的缺系杂交,取其F_4代的面粉进行了电泳分析,并用SDS沉降法检测了品质性状。结果表明,由于麦胶和麦谷蛋白组分的缺乏,使其面包     

青稞B组醇溶蛋白基因5′上游调控区的TAIL-PCR克隆及序列分析

为了阐明青稞种子中B组醇溶蛋白合成的遗传调控机制，为分子改良大麦和小麦籽粒品质奠定基础，以青稞品种Z09和Z26的基因组DNA为模板，根据已克隆的青稞B组醇溶蛋白（B-hordein）基因的5’端序列设计三个基因特异的反向引物，分别与随机简并引物配对，进行热不对称嵌套PCR（Thermal asymmetric interlaeed PCR，TAIL-PCR）扩增，从两份西藏青稞材料中分离克隆出2个B-hordein基因的上游调控序列。序列测定结果表明，两个扩增片段长度分别为395和396bp，加上已知B-hordein基因中的GSP2引物序列与翻译起始密码子之间198bp的长度，则可得到约600bp的B-hordein基因5’上游调控序列。将所得序列与Genbank中的三个贮藏蛋白基因的对应区段进行序列比对，所得序列与来自野生智利大麦（H．chil-ense）的B3-hordein基因（Genbank登录号：AY998010）、普通小麦（T.aestivum）的低分子量麦谷蛋白亚基基因（Genbank登录号：X07747）和栽培大麦（H．vulgare）的B-hordein基因（Genbank登录号：X03103）具有81％～95％的序列相似性。推测其TATAbox位于-80bp，CAAT-likebox位于-140bp处。另外，在-300bp处存在一个胚乳盒（EndospermBox，EB），包含EM基序和GCN4基序。EM基序高度保守，GCN4基序有一个核苷酸位点的突变。此外，在约-560bp处存在一个胚乳盒类似结构。     

青稞B组醇溶蛋白基因5''上游调控区的TAIL-PCR克隆及序列分析

为了阐明青稞种子中B组醇溶蛋白合成的遗传调控机制,为分子改良大麦和小麦籽粒品质奠定基础,以青稞品种Z09和Z26的基因组DNA为模板,根据已克隆的青稞B组醇溶蛋白(B-hordein)基因的5'端序列设计三个基因特异的反向引物,分别与随机简并引物配对,进行热不对称嵌套PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)扩增,从两份西藏青稞材料中分离克隆出2个B-hordein基因的上游调控序列.序列测定结果表明,两个扩增片段长度分别为395和396 bp,加上已知B-hordein基因中的GSP2引物序列与翻译起始密码子之间198 bp的长度,则可得到约600 bp的B-hordein基因5'上游调控序列.将所得序列与Genbank中的三个贮藏蛋白基因的对应区段进行序列比对,所得序列与来自野生智利大麦(H.chilense)的B3-hordein基因(Genbank登录号:AY998010)、普通小麦(T.aestivum)的低分子量麦谷蛋白亚基基因(Genbank登录号:X07747)和栽培大麦(H.vulgare)的B-hordein基因(Genbank登录号:X03103)具有81%～95%的序列相似性.推测其TATA box位于-80 bp,CAAT-like box位于-140 bp处.另外,在-300 bp处存在一个胚乳盒(Endosperm Box,EB),包含EM基序和GCN4基序.EM基序高度保守,GCN4基序有一个核苷酸位点的突变.此外,在约-560 bp处存在一个胚乳盒类似结构.     

小麦品质性状与面条煮熟品质的关系

本文就影响中国面条煮熟品质的小麦品质性状，包括蛋白质含量、麦谷蛋白与醇溶蛋白的比率、麦谷蛋白及醇溶蛋白的亚基构成、沉淀值、直链淀粉与支链淀粉的比率、脂类、纤维等进行了概述。     

小麦贮藏蛋白特性及其遗传转化

小麦籽粒贮藏蛋白由醇溶蛋白和谷蛋白组成。醇溶蛋白在组成上以单体形式存在 ,具有高度的异质性和复杂性。它决定小麦面筋的粘性。谷蛋白是由多个亚基组成的高分子聚合体 ,决定面筋的弹性。它可分为低分子量谷蛋白亚基和高分子量谷蛋白亚基 (HMW- GS)。HMW- GS具有相似的分子结构 ,即由中央重复序列、无重复的 N端和 C端组成。HMW- GS对小麦烘烤品质起着决定性作用 ,但因 HMW- GS类型不同而对加工品质的贡献大小各异。许多 HMW- GS基因已被揭示。实践证明 ,利用基因枪法 ,将 HMW- GS基因导入普通小麦的细胞核内 ,能够达到改良小麦烘焙品质的目的。随着分子生物学技术的不断发展 ,可望从营养和加工角度来改良小麦品质的特性     

普通小麦品种豫麦34和郑丰5号ω-醇溶蛋白基因的克隆与序列分析

ω-醇溶蛋白是影响小麦加工品质和诱发乳糜泻(celiac disease,CD)的面筋蛋白之一。为给小麦加工品质的分子改良和预防乳糜泻提供参考依据,利用3对特异引物,采用基因组PCR法,从优质小麦品种豫麦34和郑丰5号中克隆获得41个ω-醇溶蛋白序列。NCBI BLAST分析表明,克隆序列与已知序列的相似度均在91%~99%之间,推断其为ω-醇溶蛋白基因家族的基因。开放阅读框识别分析表明,11个序列(Y34W-1~Y34W-7,ZFW-1~ZFW-4)具有完整的开放阅读框,可编码203~377个氨基酸残基。ZFW-4和Y34W-1在重复区的插入片段中存在1个额外的半胱氨酸残基。CD免疫肽识别分析表明,11个基因中均分布有3种ω-醇溶蛋白的T细胞免疫肽,且肽段PQQPFPQQ存在多个拷贝。聚类分析显示,ω-醇溶蛋白具有一定的基因组特异性,11个克隆的基因与尾状山羊草(Aegilops markgrafii)和粗山羊草(Aegilops tauchii)的ω-醇溶蛋白基因序列具有相对较高的同源性。     

栽培一粒小麦α-，γ-，ω-醇溶蛋白基因的克隆与序列分析

为全面揭示栽培一粒小麦诱发乳糜泻（Celiac disease,CD) 的毒性和在小麦品质改良中的应用价值,根据已注册基因的保守序列分别设计2~3对特异引物,采用AS-PCR技术对栽培一粒小麦的醇溶蛋白新基因进行克隆、CD毒性肽识别和同源性分析。结果表明,从栽培一粒小麦中分别克隆得到26个具有独特编码区的α-（命名为：Gli-A-1~Gli-A-7,GenBank登陆号为JN831382-JN831385和JX828193~JX828195）、γ-（命名为：Gli-R-1~Gli-R-6,GenBank登陆号为HM120220,JX828376~JX828380）、ω-（命名为：Gli-w-1~ Gli-w-13）醇溶蛋白新基因和1个已知基因（Gli-R-7,ACJ03494）。CD毒性肽的识别分析表明,栽培一粒小麦具有较强的CD毒性,分布于醇溶蛋白的5种主要T细胞优势多肽和4种“毒性肽”除A基因组来源的α-醇溶蛋白中不含有的毒性肽Glia-α2和Glia-α外,其余多肽在克隆基因的编码蛋白中均有分布。克隆基因与已知基因的同源性分析表明,α-、γ-醇溶蛋白的推断氨基酸序列存在明显的基因组来源的差异性,而ω-醇溶蛋白基因的基因组来源差异不明显。此外,所克隆的7个α-醇溶蛋白变异相对广泛,而γ-、ω-醇溶蛋白基因的组成则相对单一,具有极高的相似度。     

小麦醇溶蛋白多肽和高分子与低分子麦谷蛋白亚基的两步电泳分析法

以往确定小麦醇溶蛋白和高分子及低分子麦谷蛋白的亚基组分,需要3个独立的单向电泳分离过程.本文所述及的方法只需要两个电泳步骤.用2-氯乙醇提取蛋白质之后,先在酸性条件下进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)分离,测定麦醇溶蛋白组分.然后,将位于A-PAGE凝胶板点样槽紧下面的几个毫米内的非还原聚合蛋白经过还原并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,这些蛋白质便可产生反映麦谷蛋白高分子和低分子亚基特性的多肽模式.     

小麦品质性状与面条煮熟品质的关系

本文就影响中国面条煮熟品质的小麦品质性状，包括蛋白质含量、麦谷蛋白与醇溶蛋白的比率、麦谷蛋白及醇溶蛋白的亚基构成、沉淀值、直链淀粉与支链淀粉的比率、脂类、纤维素等进行了概述。对面条煮熟品质的评价方法进行了分析，为促进我国面条工业生产及面条专用小麦良种的选育提供科学的依据。