减蛋综合症病毒的灭活试验研究

采用不同温度、浓度的甲醛处理病毒，在一定的条件下完全能够使病毒灭活而保持其红细胞凝集活性的特性。人而简易的灭活方法是加热至６５或７０℃，但是红细胞凝集活怀水平下降９７％，抗原材料损耗太多。较为理想的灭活方法是２０℃条件下，终浓度是０．１％的甲醛处理４８小时，不仅能使病毒完全灭活，而且病毒的红细胞凝集活性下降不超过５％。     

甲醛灭活猪流行性腹泻病毒条件的优化

为优化甲醛灭活猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的条件,检测了不同体积分数甲醛对PEDV作用不同时间的灭活效果。灭活条件优化实验结果显示：利用终体积分数为0.05%、0.10%、0.20%和0.30%的甲醛彻底灭活PEDV的作用时间依次为30 h、24 h、18 h和12 h;综合生物安全和病毒灭活效果,确定甲醛灭活PEDV的适宜体积分数和作用时间分别为0.20%和24 h;该优化条件下的灭活rPEDV-D375F病毒液中,病毒抗原质量浓度为1.05×10^-5 g/L,且无厌氧菌、需氧菌、真菌生长。利用由灭活rPEDV-D375F病毒液配制的疫苗免疫母猪,母猪产生了较高的中和抗体水平(平均中和抗体效价为1∶139.4)。     

四种不同灭活剂对新城疫病毒的灭活效果研究

为探索甲醛、β-丙内酯(BPL)、二乙烯亚胺(BEI)和盐酸聚六亚甲基胍(PHMG)对新城疫病毒(NDV)的最佳灭活条件,试验采用不同浓度梯度的甲醛、BPL、BEI和PHMG对NDV进行不同时间的灭活处理,通过血凝(HA)试验、无菌检验和灭活检验确定灭活效果。结果显示,37℃下,NDV的最佳灭活条件为0.1%～0.2%的甲醛灭活22～24h、0.02%～0.025%的BPL灭活9～10h、2%～3%的PHMG灭活16～20h,该研究为筛选规模化生产ND疫苗所需的理想灭活剂提供了依据。     

甲醛杀菌灭活病毒机理及沉淀后的解聚法浅议

一、甲醛杀菌和灭活病毒机理甲醛(HCHO)属中到高效化学消毒剂,低浓度为抑菌剂,高浓度可作为灭菌剂。杀菌谱广,对细菌繁殖体、芽胞以及病毒等均有杀灭作用,但作用时间较其它高效消毒剂为长,一般认为,革兰氏阴性菌比阳性菌对甲醛更为敏感,细菌芽胞对甲醛的抵抗力是非芽胞细菌的2—15倍。     

浓缩对禽流感（H9N1型）病毒液中灭活剂甲醛含量的影响

采用UV法测定了不同甲醛浓度灭活后禽流感（H9N1）病毒液浓缩前、中、后的甲醛含量。结果表明：浓缩对病毒液中甲醛含量影响不大。     

二乙烯亚胺和甲醛对猫杯状病毒灭活效果比较研究

为比较二乙烯亚胺(BEI)和甲醛对猫杯状病毒(FCV)的灭活条件,采用终浓度分别为0.05%、0.1%、0.2%和0.3%的甲醛和终浓度分别为0.5%、1%、2%和3%的BEI在37℃对FCV灭活6、12、24、36、48 h,通过微量滴定法检测灭活病毒滴度变化,于F81细胞盲传3代验证病毒灭活效果,采用巢式PCR和ELISA法检测病毒抗原完整性。结果显示:37℃下作用48 h,1%、2%、3%的BEI和0.05%、0.1%、0.2%、0.3%甲醛均可灭活FCV。本研究结果可为FCV灭活疫苗的灭活工艺研究提供参考。     

用动物模型检验消毒剂对对虾白斑综合征病毒的灭活效果

以克氏原螯虾为动物模型，检验消毒剂对虾白斑综合征病毒（WSSV）的灭活效果。将病毒液分别与不同浓度的消毒剂37℃作用2h，再感染螯虾，结果显示，40μg/ml和60μg/ml的特种双链季铵盐络合碘能有效灭活病毒，显著降低接种螯虾的死亡率，80μg/ml的该药能完全灭活病毒。相同浓度的该药与二溴海因，溴氯海因，有机氯类相比，所接种螯虾的平均死亡时间前者较后者长0．9－1．2d，显示了较好的消毒效果。     

甲醛灭活猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液的最佳条件研究

为探究甲醛对猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液最佳的灭活条件,本试验采用10％的甲醛溶液与猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液混匀,使甲醛终浓度分别达到0.05％、0.07％、0.10％、0.15％、0.20％,在4～8℃下经过不同时间的灭活,通过对灭活液不同时间点的无菌检验及灭活检验,综合判定灭活效果.结果显示...     

β-丙内酯对脑心肌炎病毒灭活效果的试验

通过研究β-丙内酯(BPL)对脑心肌炎病毒(EMCV)灭活效果以及优化灭活条件,为制备脑心肌炎诊断试剂和疫苗提供参考依据.用终浓度分别为1∶1 000、1∶2 000、1∶4 000等的β-丙内酯灭活103 TCID50滴度猪脑心肌炎病毒,采用4℃灭活4 h、8h、12h后37℃C 2h,并将灭活后的病毒接种敏感细胞VREO上观察细胞病变(CPE)情况,选择未出现CPE的细胞孔盲传3代后,采用ELISA和PCR的方法观察灭活效果.结果显示:BPL浓度和反应时间与灭活效果存在明显的线性关系,但BPL浓度越高抗原性下降幅度越大,RT-PCR未有扩增,说明BPL可以用于EMCV的灭活,且根据试验结果优选灭活条件为BPL浓度为1∶2 000,4℃灭活8h为最佳.结论表明:BPL完全可以用来灭活EMCV,为今后开发灭活疫苗或诊断试剂的生物安全性提供了保证.     

不同消毒剂对PRV、PPV和TGEV的灭活效果试验

为了确定癸甲溴铵-碘溶液消毒剂和癸甲溴铵消毒剂对猪主要疫病病原如猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的灭活效果,通过细胞观察法,用不同浓度的癸甲溴铵-碘溶液消毒剂和癸甲溴铵消毒剂对PRV、PPV和TGEV进行灭活来观察其灭活效果。结果表明,癸甲溴铵-碘溶液和癸甲溴铵溶液对细胞的最大无毒剂量分别为1∶80和1∶10。1∶320的癸甲溴铵-碘溶液消毒剂,1∶80的癸甲溴铵消毒剂与相应浓度的中和剂的反应产物已无毒副作用。癸甲溴铵-碘溶液消毒剂1∶800稀释时可使PRV TCID₅₀降低5个滴度,TGEV TCID₅₀降低4个滴度;癸甲溴铵消毒剂稀释到1∶400时,可使PRV和TGEV的TCID₅₀均降低约3个滴度。两种消毒剂对PPV的灭活效果均不理想。     

10种消毒剂对非洲猪瘟病毒的灭活效果

为探究常见消毒剂对非洲猪瘟病毒(ASFV)的灭活效果,本试验于体外检测了10种市售消毒剂对生长在猪肺泡巨噬细胞中ASFV的灭活效果。进而用3种消毒剂对曾经暴发非洲猪瘟(ASF)的废弃猪场进行环境消毒,并用荧光定量PCR方法验证其可靠性。结果显示,在各消毒剂对细胞的安全浓度下,次氯酸不具有灭活ASFV的作用;过硫酸氢钾复合物作1∶200稀释后,作用0.5 h能完全灭活ASFV;二氯异氰脲酸钠粉和苯扎溴铵稀释800倍后,能在0.5 h内有效灭活ASFV;其他消毒剂在其安全稀释度的浓度下,0.5 h内能完全灭活ASFV。本试验可为养殖场防控ASFV的感染提供消毒剂筛选的参考依据。     

鸡致病性大肠杆菌分离及甲醛灭活菌苗的研制

鸡大肠杆菌病为鸡的细菌传染病之一，尤其在集约化鸡场无所不在。对鸡大肠杆菌的防治方法很多，其中菌苗预防是较为有效的一种办法。但也出现由于大肠杆菌血清型繁杂而预防达不到理想的结果，鉴于大肠杆菌的这种特殊性，为探索自家菌苗的实际应用效果，笔者于1996年从三个典型发病鸡场分离了门株具高度致死性大肠杆菌，研制成自家菌苗，分别用于发病鸡场，对2000羽头10－2！日龄雏鸡进行免疫注射处理预防试验，结果免疫组的鸡大肠杆菌平均发病率为6．97％，比对照组（刀＊叽）降低匕个百分点，差异显著，且未再复发。现报告如下。三菌种分离…     

卵黄抗体中外源病毒的不同灭活方法比较

为防止提取的卵黄抗体混入外源病毒,确保提取卵黄抗体的安全性,比较了甲醛和二乙烯亚胺对卵黄抗体的灭活效果。在卵黄抗体中,人工混入鸡新城疫病毒、禽流感病毒（H9型）、禽传染性法氏囊病病毒、减蛋综合征病毒和禽脑脊髓炎病毒,分别加入终浓度为0.02％二乙烯亚胺;0.03％、0.05％和0.08％甲醛, 25℃放置24小时。结果显示,0.02％二乙烯亚胺和0.03％甲醛只能灭活部分病毒,而0.05％和0.08％甲醛能完全灭活上述病毒并且不降低抗体活性。因此,可使用0.05％甲醛灭活卵黄抗体中潜在病毒。     

两种消毒剂对流感病毒灭活效果的对比研究

采用Klein-Defors悬浮杀灭与感染试验方法，研究“卫可”、“卫康”两种消毒剂在不同浓度下，分别与流感H51N1和H9N2亚型病毒作用5min和10min，对流感病毒的灭活作用。结果表明：这两种消毒剂在相同或不同的浓度范围内。对病毒的杀灭率是有区别的。尽管每种消毒剂在本身稀释浓度范围内都有较好的杀毒效果，但在应用中也应考虑其他因素的影响。因此，我们推荐使用该消毒剂的工作浓度为100％杀灭病毒的稀释度。这将为其临床应用提供依据，对环境消毒和防止流感爆发具有参考价值。     

甲醛浓度对法氏囊油佐剂疫苗灭活效果的影响

目前，鸡传染性法氏囊病已成为危害养鸡业发展的主要疾病之一。为了更有效地防治法氏囊病的发生和蔓延，传染性法氏囊灭活油佐剂疫苗正被越来越广泛地应用于生产实践中，并取得了一定的效果。但有时效果不很理想，主要原因是灭活过程中甲醛溶液的含量不同，直接影响到疫苗的质量，特别是疫苗的安全检验和效力检验方面表现明显。现特进行以下比较测定。1材料与方法1．1材料1．1．1种蛋：本厂动物房提供。1．1．2甲醛：上海溶剂厂生产。1．1．3甲醛稀释液：本厂法氏囊灭活苗组配制。1．1，4试验鸡：本厂动物房所产经过法氏囊琼脂扩散试验结果…     

禽流感H9亚型灭活油乳剂疫苗不同剂量的免疫效果比较

将47只28日龄SPF鸡分为4组，第1～3组为试验组，每组12只，分别肌肉注射禽流感H9亚型灭活油乳剂疫苗0．1、0．3、0．5mL／只，第4组11只为对照组。各组鸡在免疫后1、2、3周采血，测定H9抗体水平；在免疫后3周用1：10稀释的AIV H9N2攻毒，0．2mL／只。攻毒后第2、3、4周继续测定H9抗体水平，观察了疫苗对鸡的保护效果。结果显示，0．5mL／只剂量的免疫效果比0．1mL／只和0．3mL／只剂量的免疫效果好；攻毒用的AIV H9N2的致病力低，对所有试验鸡均不致死。     

禽流感灭活油乳剂疫苗免疫监测的研究

通过HI试验,对雏鸡的禽流感灭活疫苗免疫效果进行监测,为更科学制定鸡免疫程序奠定基础。结果表明:(1)对照组鸡AI-H5与AI-H9两种母源抗体最高,达4log2,次日逐渐下降,于第10天降至较低水平。AI-H5、AI-H9两种母源抗体分别于22、32日龄降至为2log2以下。(2)试验组鸡于第5天进行首免,于第12天时,AI-H5、AI-H9的HI抗体水平开始上升,于32天AI-H5、AI-H9两种抗体水平呈缓慢下降趋势,但于第104天仍能检测到抗体,分     

两种灭活方法制备的猪肺炎支原体灭活疫苗的免疫效果比较

为对比使用甲醛、二乙烯亚胺（BEI）两种灭活方法制备的猪肺炎支原体灭活疫苗对猪的呼吸道发病率、肺部病变记分、饲料转化率、日增重、以及猪血清抗体水平等指标的影响,将120头健康仔猪随机分成三个试验组和一个对照组,于7、21日龄对试验组的仔猪进行疫苗接种,所有猪于20、50、80及140日龄采血分离血清,检测血清中猪肺炎支原体抗体水平。结果显示,用BEI灭活的疫苗在呼吸道发病率、肺部病变记分、饲料转化率、日增重、以及猪血清抗体水平等各项指标均好于甲醛灭活的疫苗（P<0.05）,与进口疫苗无显著差异。试验表明,使用BEI灭活方法制备的猪肺炎支原体灭活疫苗的免疫效果好。     

静水压技术新城疫病毒灭活工艺制备油乳剂疫苗的研究

病毒在静水压力50、200、250、300、350MPa灭活时间分别为60、50、30、20、20min,结果表明静水压力处理病毒颗粒体积缩小,免疫原性没有破坏;压力越高病毒失活越快,低压力长时间与高压力短时间灭活病毒的效果相同,以传统灭活制备的疫苗为对照,研究静水压技术新城疫病毒灭活工艺制备油乳剂疫苗的免疫原性。