蛹虫草液体培养基的优化试验研究

本试验对蛹虫草液体培养基进行优化研究。通过碳源、氮源单因素对比试验,筛选出蛹虫草液体培养基最佳碳源为蔗糖,其次为麦芽糖;最佳氮源为酵母膏,其次为蛋白胨。通过正交试验筛选出蛹虫革液体培养基最佳配方为：蔗糖3％、酵母膏3％、KH2PO40．1％、MgSO40．15％。该研究为蛹虫草液体培养提供理论依据。     

高寒地区蛹虫草摇瓶液体培养基优化

[目的]筛选出高寒地区蛹虫草摇瓶液体培养基的最佳配方.[方法]以菌丝体干质量浓度为指标,首先采用单因素试验方法筛选出液体培养基中的最优碳源和氮源,然后运用方差分析得出最佳碳氮肥比(C/N).[结果]辽宁某企业提供的蛹虫草菌株液体培养基的最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为蛋白胨,碳氮肥比为2∶1和1∶1时均可使菌丝达到较大的生物量.[结论]该研究为高寒地区蛹虫草的液体发酵培养提供理论依据.     

蛹虫草菌丝液体培养基中适宜碳源和氮源的研究

以蛹虫草斜面固体菌种为试验材料,研究了5种碳源（葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖和可溶性淀粉）和4种氮源（蛋白胨、牛肉膏、酵母浸膏和柠檬酸氢二铵）对蛹虫草菌丝产量的影响,以确定培养基的最佳碳源和氮源种类;同时分别研究了不同浓度的最佳碳源和氮源对蛹虫草菌丝产量的影响。结果表明：最适宜碳源为可溶性淀粉,适宜浓度为20 g/L;最佳氮源为酵母膏,适宜浓度为5 g/L。     

蛹虫草菌深层发酵培养基正交试验

通过选择碳、氮、无机盐的三因素三水平正交试验 ,对蛹虫草 2 0 0 1-A深层发酵培养基进行优化。经过对菌丝体干重的测量及分析得出最适培养基组成为玉米粉 2 %、蛹粉 0 5 %、Mg SO4 0 0 5 %。菌丝体干重可达 0 812g/ 5 0ml (4天 )。     

蛹虫草摇瓶菌种培养基的优化

[目的]优化蛹虫草摇瓶菌种培养基。[方法]以菌丝体干质量为指标,首先采用单因素试验筛选适于菌丝体生长的最佳碳氮源,再以正交试验优化碳源与氮源以及无机盐与VB1的最佳配比。[结果]蛹虫草优化的摇瓶培养基配方为红薯50 g/L、可溶性淀粉10 g/L、牛肉膏10 g/L、酵母膏10 g/L、KH2PO41.5 g/L、Mg SO4·7H2O 1.0 g/L、VB10.10 g/L,p H自然,利用该配方菌丝干质量可达36.33 g/L。[结论]优化的摇瓶培养基可为后续研究和生产提供基础数据。     

液体菌种栽培蛹虫草的技术研究

通过菌种的选取、分离纯化、定期复壮得到性状稳定的优质菌种,采用单级液体发酵装置、摇瓶法、无菌水刮洗斜面菌种、稀疏大米培养基原种等方法制备蛹虫草液体菌种。以大米、玉米等复合培养基和蚕蛹为培养基或寄主,采用液体菌种接种,经过菌丝培养、转色催蕾、除草管理等程序栽培蚕蛹虫草。     

蛹虫草废弃培养基二次应用于蛹虫草栽培的探索

以不添加废弃培养基的普通栽培的蛹虫草为对照,研究蛹虫草废弃培养基二次应用于蛹虫草栽培对于蛹虫草子实体鲜质量、虫草素及腺苷含量的影响。结果表明:与对照组相比,废弃培养基添加量为10%、20%、30%时,蛹虫草子实体鲜质量高于对照组,但无显著差异;废弃培养基添加量大于30%时,蛹虫草子实体鲜质量则低于对照组,差异显著;虫草素含量则随废弃培养基添加量的增加而逐渐提高,腺苷含量与对照组相比也有所升高,当废弃培养基添加量为100%时达到最高;虫草素含量比对照组提高2.10倍,腺苷含量比对照组提高1.75倍。     

蛹虫草小麦培养基中虫草素提取工艺研究

通过对比提取溶剂、料液比、温度、pH值及时间对提取蛹虫草小麦培养基中虫草素的影响,以确定虫草素提取最佳工艺参数.结果表明:最佳提取参数为水提取、pH值5,料液比1:50、温度70℃、时间3h.该方法从蛹虫草小麦培养基中提取虫草素,提取率可达94.87％.     

北虫草液体发酵培养基的筛选

对北虫草液体发酵培养基进行筛选,结果表明在以红糖为碳源,黄豆粉和酵母粉为混合氮源的配方（5）中菌丝体细小致密,萌发快,干重最大,所以确定配方（5）为最佳培养基。     

蛹虫草培养基碳源和氮源对菌丝生长量的影响

采用菌丝重量法研究了蛹虫草培养基的碳源与氮源,比较了不同碳、氮源品种间的差异,筛选出较佳的碳源与氮源,并对二者的含量进行了研究。结果表明在0~5%之间,菌丝生长量随碳、氮源含量的增加而增加;同时碳氮比的研究也从另一侧面证实了以上结论。     

山西省北冬虫夏草优良菌株与母种培养基的筛选

从引进的北冬虫夏草菌株中筛选出适合山西省栽培的优良菌株,并且对北冬虫夏草的母种培养基进行了研究。结果表明:在供试的4个北冬虫夏草菌株中,C1菌株的栽培性状明显优于其余菌株;筛选的最适母种培养基配方为马铃薯20%,蔗糖2%,蛋白胨2%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.05%,琼脂2%。     

培养基营养成分对蛹虫草生长的影响

为了深入了解培养基有效成分对蛹虫草生长的影响,配制2种液体培养基和5种大米、玉米配比的栽培料,通过菌种培养和栽培比较表明,添加奶粉的培养液培养的液体菌种有利于蛹虫草的生长,不同大米和玉米配比的栽培料对蛹虫草的生长没有显著差异。     

蛹虫草深层发酵富集微量元素锌的研究

以蛹虫草为材料,在温度为22℃,摇瓶转速为120r/min条件下,研究了锌浓度对菌丝体生长的影响;并通过锌浓度、培养时间、pH值、培养基等4因素正交试验组合,研究了菌丝体生长量、菌体产胞内外多糖量、有机锌转化率的最佳条件。结果表明,低浓度的锌可以促进虫草菌丝体生长,而高浓度的锌则抑制菌丝体生长,虫草菌丝体生长的最适锌浓度为100～150μg/ml;虫草菌丝体生长的最佳条件组合为锌浓度100μg/ml,培养6d,pH值7,培养基选用麸皮培养基;产胞外糖最佳条件组合为锌浓度100μg/ml,培养4d,pH值8,培养基选用马铃薯培养基;产胞内糖及锌转化率最佳条件组合为锌浓度100μg/ml,培养时间为6d,pH值7,培养基选用马铃薯培养基,该条件下产胞内糖达24.264mg/100ml,有机锌率转化最高为18.4%。     

不出草的蛹虫草固体培养基中虫草素含量分析

确定不出草的蛹虫草(Cordyceps militaris)固体培养基中虫草素含量,可为合理利用不出草的蛹虫草固体培养基提供理论依据。以虫草素含量为检测指标,利用优化后的虫草素超声提取条件以及高效液相色谱定量分析条件,分别对5个不同批次不出草蛹虫草固体培养基中的虫草含量进行了测定。结果表明:5个批次的不出草蛹虫草固体培养基中均含有一定数量的虫草素,虫草素含量为347.2~735.5μg/g,平均548.5μg/g。不出草的蛹虫草固体培养基中虫草素含量较高,具有开发利用价值。本研究结果为今后从不出草的废弃固体培养基中提取虫草素提供了依据,有利于减少虫草资源的浪费。     

生物磁效应对蛹虫草液体发酵培养的影响

[目的]研究生物磁效应对蛹虫草（Cordyceps militaris）液体发酵培养的影响.[方法]利用场强为0.10T、0.25 T、0.40T恒定磁场,以流速为1 m/s,分别对普通水进行9次处理,串联（SC）磁场处理3次的磁处理水,用于液体培养蛹虫草,研究了生物磁效应对蛹虫草胞外蛋白酶、淀粉酶、多酚氧化酶、虫草素、虫草酸、多糖含量及菌丝干重的影响,并且对胞外酶活性与以上指标相关性进行了分析.[结果]0.40 T处理能显著促进蛹虫草胞外蛋白酶和多酚氧化酶活性,提高菌丝干重及虫草酸含量,相比对照组,其酶活高峰分别提高了38.98％和16.75％,菌丝干重和虫草酸分别提高了27.12％和22.93％;0.10 T处理可显著提高胞外淀粉酶活性和多糖含量,相比对照组,酶活高峰提高了34.94％,多糖含量提高了18.32％;0.25 T处理有利于虫草素的积累,比对照组提高了16.49％.相关性分析结果表明,胞外蛋白酶活性与菌丝干重、虫草酸含量在0.05水平呈显著正相关,为关键酶.[结论]不同场强处理的磁化水均能显著提高蛹虫草液体培养胞外酶活性、菌丝干重及主要药用成分含量,但影响规律存在一定的差异性,可为发酵生产蛹虫草药用成分提供理论依据和参考.     

蛹虫草菌丝固体法培养初探

试验采用点接法进行了蛹虫草菌丝适宜C、N源的筛选。结果表明,蛹草拟青霉可以利用的C、N源种类较多,常规饲料原料均可利用;根据C、N源筛选结果,设计了固体培养基配方;试验所设计的豆粕、麸皮、玉米面等固体配方可以满足蛹虫草菌丝生长的要求,蛹虫草菌丝的固体培养切实可行。     

蛹虫草母种培养基配方优化研究

采用6种不同配方的固体培养基对蛹虫草菌株的菌丝体进行培养,以菌种初萌发时间、菌丝长速、菌丝长势、菌丝长满斜面所需时间为指标,筛选出蛹虫草母种最佳培养基。结果表明:母种培养基的最佳配方为:20%马铃薯提取液中加入1%葡萄糖、1%蛋白胨、2%琼脂、0.5%KH2PO4、0.3%MgSO4、VB1(10 mg·L-1),pH值5.8。在该培养基上,菌种的初萌发时间最短,为2 d;菌丝长速最快,为6.3 mm·d-1;长势最强;菌丝满管时间最短,为10 d。     

北冬虫夏草人工栽培条件的优化

通过单因素试验和主要因素的正交试验对北冬虫夏草人工栽培条件进行优化,结果表明:北冬虫夏草栽培的最适培养基为大米培养基,最佳接种量为20 ml,菌丝和子实体生长的最佳温度均为21℃,最佳光照时间为14 h/d。     

家蚕蛹虫草子实体及大米培养基多糖的提取和纯化

[目的]为家蚕蛹虫草大米培养基的应用和提高养蚕业的综合经济效益提供基础数据。[方法]分别对家蚕蛹虫草子实体及其大米培养基残基进行脱脂、热水浸提、脱蛋白、醇沉、干燥后得到粗多糖,用同种方法提取、纯化,并比较提取、纯化结果。[结果]家蚕蛹虫草子实体提取粗多糖得率为25.75%,培养基为12.85%。家蚕蛹虫草子实体和培养基粗多糖经DEAE-纤维素柱纯化,得到相似单一峰;家蚕蛹虫草子实体多糖的洗脱峰部分多糖含量占上样多糖总量的82%;培养基多糖的洗脱峰部分多糖含量占上样多糖总量的74%。两者所含多糖类似,大米培养基粗多糖得率较低,可不提取,有直接作为添加剂等生产应用价值。[结论]家蚕蛹虫草大米培养基可以作为一种新型添加剂加入饲料或调味品酿制原料中。