猪瘟和蓝耳病疫苗中BVDV和PCV污染情况调查

为了解四川地区规模化猪场所用蓝耳病和猪瘟疫苗中BVDV和PCV的污染情况,笔者选取了几种市售蓝耳病疫苗和猪瘟疫苗进行PCR检测。检测结果为：10份猪瘟活疫苗样品和9份蓝耳病活疫苗样品中,BVDV污染率为10．53％;PCV2污染率也为10．53％,所有样品中未检出PCVl。     

猪用疫苗中牛病毒性腹泻病毒污染的检测与分析

为调查我国猪用疫苗中牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的污染情况,本文用巢式RT-PCR方法检测了部分蓝耳病弱毒疫苗和猪瘟细胞苗中的牛病毒性腹泻病毒,并分析其核酸序列的遗传特性,结果共检测出9份BVDV阳性样品,分子遗传分析表明污染的牛病毒性腹泻病毒分别属于BVDV的1a型和1b型。     

一步法RT-PCR快速检测猪瘟活疫苗中BVDV外源病毒方法的建立

为检测商品化猪瘟细胞毒活疫苗中牛病毒性腹泻病毒污染,根据牛病毒性腹泻病毒5′端非编码区基因保守序列设计引物,建立了检测牛病毒性腹泻病毒一步法反转录—聚合酶链(RT-PCR)方法,并对其特异性、敏感性进行了研究。该一步法RT-PCR对牛病毒性腹泻病毒扩增结果为阳性,对照毒株扩增结果均为阴性,对牛病毒性腹泻病毒检测的灵敏性为1pg总RNA量,应用该方法,检测了32批猪瘟细胞毒活疫苗样品,以上结果表明该一步法RT-PCR方法检测速度快、特异性强、敏感性高,可用于猪瘟细胞毒活疫苗中污染的牛病毒性腹泻病毒外源病毒检测。     

2016年山东省猪病毒性疫病的病原学检测

为了解2016年山东省几种主要猪病毒性疫病的流行情况,采用荧光定量RT-PCR或PCR方法,对山东省部分猪场送检的730份病料进行了病原学检测。结果检出248份阳性病料,样品个体阳性检出率由高到低的病原依次为猪圆环病毒2型（13.02%）、猪蓝耳病病毒（10.41%）、古典猪瘟病毒（8.08%）、猪流行性腹泻病毒（7.26%）、猪伪狂犬病毒（3.84%）、猪轮状病毒（1.65%）、猪传染性胃肠炎病毒（0.14%）;样品混合感染阳性率为8.08%,以猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒2型混合感染最为常见（3.02%）。本次病原学检测为山东省猪场病毒性疾病的综合防控提供了数据参考。     

动物用疫苗中牛病毒性腹泻病毒污染检测

为掌握动物用疫苗中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的污染情况,抽取16份市售动物用疫苗,分别采用ELISA和荧光定量RT-PCR检测病毒抗原和核酸。结果显示,ELISA检测中有2份(猪瘟疫苗)为阳性,荧光定量RT-PCR检测均为阴性。结果表明,我国兽用疫苗中的BVDV污染水平较低,但不容忽视。     

猪源牛病毒性腹泻病毒一步法RT-PCR快速检测方法的建立及应用

为检测猪源牛病毒性腹泻病毒,根据牛病毒性腹泻病毒5′端非编码区基因保守序列设计引物,建立了检测牛病毒性腹泻病毒一步法反转录-聚合酶链(RT-PCR)方法,并对其特异性、敏感性进行了研究。该一步法RT-PCR对牛病毒性腹泻病毒扩增结果为阳性,对照毒株扩增结果均为阴性,对牛病毒性腹泻病毒检测的灵敏性为1 pg总RNA量,应用该方法检测临床病料和猪瘟细胞毒活疫苗样品结果显示,该一步法RT-PCR方法检测速度快、特异性强、敏感性高,可用于猪瘟细胞毒活疫苗中污染的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)外源病毒检测。     

对生猪感染BVDV的实验检测

牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和猪瘟病毒（HCV）同属黄病毒科瘟病毒属成员。牛病毒性腹泻病毒除了引起牛发生黏膜性腹泻外,还可引起羊、鹿、猪及许多野生动物感染。一般情况下,猪感染BVDV不表现牛病毒性腹泻的临床症状而呈现亚临床感染,其症状和病理变化类似温和型猪瘟。本实验对2007～2008年本区各猪场送检病料各随机抽取92份,不同厂家不同批次的猪瘟弱毒疫苗23份,进行BVDV抗原检测。     

猪瘟疫苗中BVDV污染一步法RT-PCR检测方法的建立与应用

为建立一种快速检测猪瘟(CSF)疫苗中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)污染的方法,试验根据GenBank上登录的BVDV 5'端非编码区基因组序列设计1对引物,经一步法RT-PCR反应条件的优化,建立了检测猪瘟疫苗中BVDV污染的一步法RT-PCR。结果表明:该方法对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、牛副流感病毒3型、牛传染性鼻气管炎病毒的扩增结果均为阴性,对BVDV基因组RNA的检测灵敏度达0.1 ng,与细胞培养法的符合率达100%。应用该方法对猪瘟疫苗、牛血清等138份样品进行BVDV污染的检测,阳性污染率达11.59%。该一步法RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、准确性和适用性,可用于猪瘟疫苗生产中血清、细胞、毒种、半成品等的质量控制及猪瘟疫苗临床应用中的质量检验。     

猪瘟病毒荧光RT-PCR快速检测方法的建立

以猪瘟病毒5＇端非编码区为靶核酸序列设计引物和探针，建立了一步法荧光RT-PCR检测猪瘟病毒。荧光RT-PCR仅检测出猪瘟C株、T株，未能检测出牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、猪呼吸系统冠状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒、伪狂犬病病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒、PK-15细胞和牛睾丸原代细胞；对猪瘟病毒T株的扩增反应产物进行了测序分析，与预期序列相符。荧光RT-PCR的检测极限可达到1 TCID50／mL，整个试验流程只需2h。采用荧光RT-PCR和抗原捕获ELISA同时检测临床病料、猪副产品共207份样本，两种方法的检出率分别为17．4％和13．5％，两者符合率为95．7％（198／207）；荧光RT-PCR的检出率高于ELISA，两者差异显著。结果表明，建立的荧光RT-PCR可用于猪产品、临床病料中猪瘟病毒的快速检测。     

猪瘟病毒和猪圆环病毒2型混合感染的PCR诊断

为确诊承德市某规模猪场主要发病原因,对采集病料进行病毒核酸检测。方法：采用PCR方法共检测样品19份。结果：非洲猪瘟病毒核酸和猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型经典株和高致病性变异株核酸均为阴性;猪瘟病毒感染阳性13份,阳性率为68.42%,圆环病毒2型感染阳性8份,阳性率为42.10%,猪瘟病毒和圆环病毒2型混合感染8份,混合感染率为42.10%。结论：本次规模猪场发病诊断为猪圆环病毒2型与猪瘟病毒混合感染,且混合感染情况较为严重。     

疑似牛病毒性腹泻──粘膜病病毒细胞培养及其抗体对猪瘟牛睾丸细胞苗生产影响的观察

1993年猪瘟牛睾丸细胞苗生产过程中出现细胞病变、毒价不高．猪瘟、牛病毒性腹泻─粘膜病病毒、猪细小病毒（HCV、BVD／MDV、PPV）三价荧光抗体及其他中间监测结果观察．初步认为，长沙市部分乳牛场已铁牛病毒性腹泻─粘膜病病毒感染．     

在猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒感染猪场利用猪瘟E2基因工程亚单位疫苗控制猪瘟的案例分析

在某个存在多种病毒性病原混合感染的规模猪场,通过使用猪瘟E2基因工程亚单位疫苗与猪瘟ST传代弱毒细胞苗进行免疫对比试验。免疫前该猪场猪瘟抗体水平比较低(平均ELISA阻断率低于40%),猪群表现为不稳定,存活率低,并且病原检测到猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒2型;与弱毒苗相比较,猪瘟E2亚单位疫苗免疫后,猪瘟抗体滴度显著升高,猪群成活率明显提升。临床应用结果表明E2亚单位疫苗可以突破免疫抑制的影响,在猪群存在猪蓝耳病和猪圆环病毒病等免疫抑制性疾病的情况下,仍可以稳定提高猪瘟抗体水平,提供有效保护,提升生产成绩。     

猪瘟病毒-猪圆环病毒2型疫苗联合免疫效果的评价

为建立一种既有效又简便的猪瘟和猪圆环病毒病疫苗联合免疫方法,通过细胞感染试验和动物免疫试验,评价了猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗和猪瘟病毒(CSFV)冻干活疫苗联合免疫的可行性.通过细胞感染试验证明了PCV2灭活疫苗稀释CSFV冻干活疫苗不影响CSFV疫苗的病毒活性;将PCV2灭活疫苗稀释的CSFV冻干活疫苗免疫试...     

猪细小病毒与圆环病毒2型感染情况血清学调查

为了解清浦区生猪细小病毒和圆环病毒2型感染情况,作者应用ELISA试验对该区15个规模猪场共计l50份血清样品进行抗体监测。结果显示被检猪细小病毒抗体阳性率为10％,圆环病毒2型抗体阳性率为32．67％,两种病毒抗体同时阳性为7．33％;26．67茗的猪场细小病毒抗体阳性,86．67％的猪场圆环病毒2型抗体阳性,26．67％的猪场两种病毒抗体同时阳性（细小病毒抗体阳性的猪场圜环病毒2型抗体也同时检出阳性）。     

部分猪场猪繁殖与呼吸综合征、圆环病毒-2、猪流感、猪瘟的病原检测和初步分析

随着猪场规模化、集约化程度的不断提高,猪病的种类也在不断增加,特别是近年来的猪蓝耳病、猪圆环病毒2型等严重制约生猪产业的发展。从2008年8月以来,有不少猪场陆续出现以发热、咳嗽、呼吸困难、皮肤、耳朵发绀等主要临床症状的病猪,以小猪发病为主,发病率20%-80%,病死率达20%-50%,使养猪受到巨大损失。为了查明此猪病的主要发病种类,2008年9月至2009年7月在8个乡镇39个猪场采集53份病料进行检测,结果猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）阳性30份,阳性率56.60%（30/53）;圆环病毒（PCV2）阳性25份,阳性率47.17%（25/53）;猪流感病毒（SIV）阳性21份,阳性率39.62%（21/53）;猪瘟病毒（HCV）未检出阳性;其中有26份病料检出两种以上病原存在,占48.06%（26/53）。通过检测结果的分析,说明蓝耳病毒（PRRSV）、圆环2型病毒（PCV2）和猪流感（SIV）等引起的疾病严重地危害着大部分猪场,而且蓝耳病毒、圆环2型病毒和流感病毒经常混合感染,并且协同破坏病猪的免疫力,疫病更难控制。     

广西猪圆环病毒2型感染的流行病学调查

结合流行病学、临床症状、病理变化，采用PCR技术，对2004年1月至2005年5月采自广西14个市97个疑似猪圆环病毒2型（PCV2）感染发病猪场的197份组织病料（脾、肺、淋巴结）进行了PCV2检测；同时，对鉴定为PCV2阳性的组织病料和猪场进行了猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪流感病毒（SIV）和猪伪狂犬病病毒（PRV）的检测，另外，对6个地（市）11个生猪屠宰场采集的外观健康屠宰猪的295份组织样品（脾、肺、淋巴结）进行了PCV2检测。结果显示，在197份组织样品中检出PCV2阳性病料108份，平均阳性率为54．82％（108／197），阳性猪场62个，平均阳性率为63．92％（62／97）。PCV2与PRRSV、CSFV、SIV、PRV混合感染的组织病料总阳性率为42．13％（83／197），混合感染的猪场总阳性率为57．73%（56／97）。从21头外观健康屠宰猪的组织样品中检测到PCV2，阳性率为7．10％。由此可见，PCV2感染在广西猪群中已普遍存在，混合感染和健康带毒现象使病情更加复杂。     

猪圆环病毒病的八大危害

2003年，第四届国际新出现与再出现猪病大会在意大利罗马举行，此届猪病大会的主题是猪繁殖与呼吸障碍综合征（PRRS）、仔猪断奶多系统衰竭综合征（PMWS）和猪流感（SIV），表明猪圆环病毒病已成为世界猪病热点。南京农业大学吴增坚教授等（2006）对2004年6～12月间华东地区送检的猪呼吸道疾病综合征的病料进行PCR基因测序。病毒病检出率由高到低排列为：蓝耳病病毒：82％（68／83）；圆环病毒：80％（52／65）；猪瘟病毒：76％（19／25）；细小病毒：42％（15/36）；伪狂犬病病毒：33％（4／12）。     

规模猪场主要疫病抗体水平检测及分析

2010年10月,笔者在宁海县某规模化猪场对种猪、肉猪群随机抽检血清样品179份,进行了猪瘟（HC）、口蹄疫（FMD）、蓝耳病（PRRS）和猪圆环病毒2型（PCV2）等疫病的抗体检测,现将检测结果报告如下。 1材料和方法 1．1检测试剂盒猪瘟正向血凝诊断试剂、猪口蹄疫0型正向血凝诊断试剂均购自中国农科院兰州兽医研究所;蓝耳病抗体检测试剂盒为法国LSI公司生产;猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒为武汉科前动物生物制品有限责任公司生产。     

上海地区规模化猪场牛病毒性腹泻病毒感染状况的血清学调查

为调查猪瘟疫苗是否会引起牛病毒性腹泻的发生及上海地区规模化猪场该病的流行情况,本试验采用酶联免疫吸附试验方法,对分别免疫接种3种猪瘟疫苗的57头试验猪以及上海地区2005年-2009年10个区(县)共740份血清进行了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原和抗体的检测.经检测,所有样品抗原和抗体均为阴性.结果表明,免疫猪瘟脾...     

鹿感染牛病毒性腹泻—粘膜病病毒的调查

应用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ对吉林省某地区育成梅花鹿育成马鹿及马鹿感染牛病毒性腹泻－粘膜病病毒进行了调查，结果育成梅花鹿的带毒率为３４．１％（２８／８２）；育成马鹿的带毒辣率为１９．６％（１８／９２）；马鹿带毒率为４４．４％（８／１８）。