猪伪狂犬病病毒gE基因缺失苗免疫试验

为了掌握猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗免疫效果,并制定合理的免疫程序,选用国产和进口的猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗,用4种不同的免疫程序,对250头母猪和1000头仔猪进行了免疫试验。试验期间,按比例定时采集免疫猪的血液,用ELISA试剂盒进行抗体检测,证明猪伪狂犬gE基因缺失疫苗,无论国产苗或进口苗都可以产生良好的免疫效果;无论跟胎免疫、1年2次普免,每隔4个月定时免疫,效果均良好。种猪免疫抗体合格率达100%,仔猪49日龄前抗体合格率达100%,75日龄后抗体逐渐降低,120日龄后基本消失。为了使猪体免疫力更强,不给野毒入侵的机会,建议仔猪在首免后,适当时间进行二次加强免疫。而只给公猪、母猪春秋两季免疫,不给仔猪免疫组,仔猪在35日龄后抗体降为阴性,不能抵抗野毒的侵袭,这种免疫方法不宜推广。     

猪伪狂犬病病毒gE基因缺失苗免疫试验

为了掌握猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗免疫效果,并制定合理的免疫程序,选用国产和进口的猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗,用4种不同的免疫程序,对250头母猪和1000头仔猪进行了免疫试验。试验期间,按比例定时采集免疫猪的血液,用ELISA试剂盒进行抗体检测,证明猪伪狂犬gE基因缺失疫苗,无论国产苗或进口苗都可以产生良好的免疫效果;无论跟胎免疫、1年2次普免,每隔4个月定时免疫,效果均良好。种猪免疫抗体合格率达100%,仔猪49日龄前抗体合格率达100%,75日龄后抗体逐渐降低,120日龄后基本消失。为了使猪体免疫力更强,不给野毒入侵的机会,建议仔猪在首免后,适当时间进行二次加强免疫。而只给公猪、母猪春秋两季免疫,不给仔猪免疫组,仔猪在35日龄后抗体降为阴性,不能抵抗野毒的侵袭,这种免疫方法不宜推广。     

伪狂犬病免疫净化方案的评价

从一伪狂犬病阴性场选肉仔猪77头,均在2日龄鼻内接种伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗1头份,免疫前采血,以后每间隔两周采血1次直至18周龄,检测并分析每份血样中的gE和gB抗体。另从一伪狂犬病阴性场选后备母猪50头,于77、147、175日龄肌注伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗,于40、60、76、91、114、143、161、173、191、226日龄采血,检测并分析每份血样中gB抗体。结果表明,肉仔猪各周龄伪狂犬病野毒抗体(gE)均为阴性,疫苗母源抗体(gB)随日龄的增加而下降,但在114日龄有5头猪gB抗体阳转;免疫伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗的后备母猪,首免后抗体上升,二免后抗体明显上升、并保持高水平,第3次免疫后抗体较二免后上升不明显。     

猪伪狂犬病流行病学的调查

猪伪狂犬病是导致母猪流产,产死胎、木乃伊胎或弱胎的重要疫病之一,尤其会导致新生仔猪出现大量死亡,15日龄内的仔猪死亡率达100%,少数耐过的猪也因为发育不良而成为僵猪,因此,该病一直是制约养猪业发展的重要疫病之一.笔者通过对部分规模猪场猪伪狂犬病的流行病学调查发现,伪狂犬病gE基因缺失疫苗(Bartha-K61株)已免猪场的gB免疫抗体平均合格率可达90.16%,而在已免猪场中还存在gE抗体阳性,平均阳性率为11.76%;通过对已免猪场与未免猪场以及免疫前后的对比和分析,提出单纯依靠疫苗注射并不能完全实现猪伪狂犬病野毒感染率的降低,建立科学的免疫程序,加强防疫管理,实施科学净化才是有效防控猪伪狂犬病野毒感染的重要措施.     

猪伪狂犬病母源抗体衰减规律及适时首免试验

试验采用伪狂犬病gB抗体ELISA试剂盒,分别检测3日龄和1、2、3、4、5、6、7、8、9、10周龄未免疫猪伪狂犬病母源抗体和相应日龄免疫后3周的伪狂犬病gB抗体,以gB抗体阳性率和S/N值分析猪伪狂犬病母源抗体衰减规律和最佳首免时间。结果表明,母猪分娩前1个月免疫伪狂犬病gE基因缺失弱毒苗,所产仔猪能获得高水平的母源抗体;随着仔猪日龄增加,抗体水平逐渐降低,能维持到10周龄。仔猪在5周龄前免疫伪狂犬病疫苗,母源抗体干扰主动免疫,5周龄后免疫抗体水平均有上升;该场仔猪伪狂犬病最佳首免时间为35~42日龄。     

福州市某猪场不同日龄猪伪狂犬病血清学检测与评价

[目的]调查福州市某规模化猪场经常出现伪狂犬病例的原因。[方法]采集血样133份,其中公猪8份、经产母猪25份、后备母猪20份、10~30日龄仔猪20份、40~60日龄小猪20份、80~100日龄肉猪20份、120日龄以上肉猪20份,进行伪狂犬病gB和gE抗体检测。[结果]7组猪伪狂犬病gB抗体阳性率分别为100%、100%、95%、100%、70%、90%和40%;伪狂犬病gE抗体阳性率分别为37.5%、56%、25%、45%、30%、5%和15%。[评价]该猪场种猪伪狂犬病疫苗免疫抗体正常,免疫程序合理;但肉猪的伪狂犬病疫苗免疫抗体不均匀,免疫程序不合理;同时,该猪场存在较严重的伪狂犬病野毒感染,需通过调整伪狂犬病疫苗免疫程序以及淘汰gE抗体阳性种猪来净化猪场的伪狂犬病。     

某规模场仔猪伪狂犬病免疫抗体消长规律初探

为给规模猪场猪伪狂犬病(PR)免疫程序制定提供参考,在贵州省某规模猪场选取3组不同母源抗体背景仔猪群,按照不同的免疫程序进行PR疫苗免疫,然后设置不同的检测时间点,采集猪血清采用ELISA方法进行gE和gB抗体跟踪检测,初步探索仔猪群免疫抗体消长规律。结果显示:在母源gE和gB抗体均为阴性背景下,1日龄初生仔猪活疫苗滴鼻免疫对免疫抗体水平没有影响,15日龄基因缺失疫苗注射免疫后,免疫抗体水平逐渐升高,45日龄基因缺失疫苗加强免疫1个月后,免疫抗体水平达到顶峰,此后逐渐下降,到120日龄时,仍有50%的有效保护率;在gE母源抗体阴性背景下,产前40 d免疫母猪,55日龄进行基因缺失疫苗注射免疫后,仔猪免疫抗体水平持续升高,90日龄时再用基因缺失疫苗加强注射免疫1次,至120日龄免疫抗体水平达到顶峰,150日龄后开始下降,到185日龄时,仍有50%的有效保护率;在母源gE抗体阳性背景下,疫苗免疫不能使仔猪产生有效的免疫保护抗体。结果表明,仔猪母源抗体背景对于仔猪免疫程序的制定具有较大影响,合理的免疫程序要结合母源抗体和免疫抗体检测结果合理制定,并要及时淘汰gE阳性种猪。     

两种猪伪狂犬病毒基因缺失疫苗产前免疫母猪对仔猪抗体水平的影响

试验选择广东某规模化猪场怀孕母猪30头及其所产仔猪30头用进口猪伪狂犬病病毒基因缺失疫苗(B苗)和国产猪伪狂犬病病毒基因缺失疫苗(A苗)进行免疫试验.结果表明:各组母猪产前10 天免疫接种后20～30 d的母猪抗体水平接近或达到峰值,其所产仔猪10～60 d获得的母体抗体恰巧达到最佳.根据母猪产仔时抗体水平及其后代母源抗体维持时间的关系,建议母猪产前20～30 d为猪伪狂犬病病毒加强免疫接种的适宜时间,仔猪60日龄为适宜的首免时间;使用B苗和A苗免疫对母猪产前免疫是必要的,有利于控制带毒母猪猪伪狂犬病病毒野毒的排放,降低感染其他猪只的机会,提高仔猪保护率.     

猪伪狂犬病阳性场gE与gB抗体监测及风险评估

采集衡阳某猪场119份血清样品进行伪狂犬病gE-ELISA（酶联免疫吸附试验）与gBELISA抗体检测。gE抗体检测结果表明,该猪场所检测猪群除公猪外都有伪狂犬病野毒阳性,是伪狂犬病阳性场,总阳性率为47%。公猪伪狂犬病野毒抗体阳性率为0,说明公猪暂时还没有感染伪狂犬病野毒,属于阴性猪;母猪群伪狂犬病野毒（gE）阳性率达50%~60%;30~40日龄及60日龄阶段猪群gE抗体阳性率分别为30%和55%,加上可疑的数量达到40%~65%,这阶段野毒抗体阳性估计主要受母源gE抗体的影响,且与母猪阳性背景基本一致,但也不能排除个别仔猪阳性抗体来自病毒感染;90~120日龄阶段gE阳性率不降反升,达到100%,说明90~120日龄阶段猪群是在保育转至肥育舍后被伪狂犬病野毒再次感染,gE抗体S/N值显著下降,抗体水平较高。gB抗体结果表明,该猪场伪狂犬病gB抗体阳性率为98%,公猪伪狂犬病gB抗体阳性率为100%,且公猪的gE抗体阴性,说明公猪gB抗体来源于疫苗免疫;母猪群伪狂犬病gB抗体水平高且整齐,可能是野毒感染和疫苗免疫综合作用的结果;30~40日龄阶段gB抗体水平整齐,这是由于母猪群gB抗体水平高且均匀整齐,其仔猪母源抗体相应较好;60日龄阶段gB抗体水平不整齐,这与母源抗体消退有关;90~120日龄阶段gB抗体水平显著提升,这可能是后期野毒感染所致,因为其gE抗体不降反升。综合该猪场gE和gB抗体检测结果分析表明,该猪场伪狂犬病在种猪群得到了有效控制,生产比较稳定,但种猪带毒且散毒,肥育猪的感染压力加大,造成病毒不断循环,肥育猪伪狂犬病野毒感染的控制成了稳定伪狂犬病阳性场的关键。目前,猪伪狂犬病阳性场应定时监测gE和gB抗体,根据猪场血清学检测结果,结合临床实际情况实时调整免疫程序,以便稳定生产和预防伪狂犬病的暴发。     

3个种猪场猪伪狂犬病净化监测与分析

为摸清猪伪狂犬病状况,对3个已使用gE基因缺失疫苗的种猪场2758份猪血清样品,应用ELISA方法分别检测猪伪狂犬病gE、gB抗体.结果gE抗体阳性率为13.92%,gB免疫抗体合格率为98.74%,结果表明,该病在不同种猪场感染情况存在差异,gE基因缺失疫苗的效果确实,适合猪伪狂犬病净化.     

种猪场伪狂犬病净化技术探讨与应用

选择徐州六马种猪科技有限公司种猪场作为伪狂犬病净化创建场,通过开展对种公猪、生产母猪、后备种猪、待售种猪伪狂犬病野毒感染抗体(gE抗体)和疫苗免疫抗体(gB抗体)检测,进行猪伪狂犬病野毒感染情况的本底调查,了解各阶段猪群健康状态、免疫情况、免疫抗体水平和野毒感染状况。根据猪伪狂犬病毒野毒感染状况,采用不同的净化方案,进行猪伪狂犬病净化。通过净化,该场种公猪、生产母猪、后备种猪及待售种猪连续2次以上抽检结果均为伪狂犬病gE抗体阴性且gB抗体合格率70%以上,达到猪伪狂犬病净化创建场标准;同时,猪群的健康状况、母猪生产性能和仔猪成活率均有明显提高,为今后猪场伪狂犬病净化工作的开展提供技术参考。     

猪病毒性腹泻弱毒疫苗与灭活疫苗联合使用的免疫效果评价

为研究猪病毒性腹泻弱毒疫苗与灭活疫苗联合使用的免疫效果,本实验应用"猪流行性腹泻病毒(PEDV)-猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)-猪轮状病毒(PoRV)三联弱毒疫苗"和"PEDV-TGEV二联灭活疫苗"对100头妊娠母猪和所产140头仔猪进行不同免疫,在不同日龄对仔猪前腔静脉采血并离心取上清,利用直接ELISA方法测定其免疫抗体滴度。结果表明,妊娠母猪于产前40 d首次免疫和产前20 d二次免疫,所产仔猪3日龄滴鼻接种三联弱毒疫苗,28日龄二次免疫和65日龄三次免疫后14 d,抗体滴度开始上升。通过本实验基本分析猪病毒性腹泻疫苗母源抗体和免疫抗体水平的消长规律,为猪病毒性腹泻疫苗免疫程序提供理论参考。     

规模化猪场猪伪狂犬病的防控

选取被免临产母猪5头测免疫抗体,从该5头母猪所产的仔猪中每窝选取4头,共20头分成2组,第1组于不同日龄监测母源抗体;第2组(每日龄组2头)分别于不同日龄免疫接种1头份/头,7 d后进行抗体监测。结果仔猪均获得高水平母源抗体,仔猪猪伪狂犬病基因缺失活疫苗(K-61)首免日龄为30日龄。第一扩繁场实行免疫、检测、淘汰、补充猪伪狂犬病阴性后备母猪的净化方案,结果不达标;腾飞猪场采用全场清群方案,结果猪伪狂犬病得到净化。伪狂犬阴性猪群与阳性猪群生产水平比较表明阴性猪群优于阳性猪群;猪伪狂犬病免疫抑制作用对其他病免疫抗体有一定的影响。全场清群方案可能是控制净化猪伪狂犬病比较有效的方法。     

猪伪狂犬病净化技术的研究

在某600头母猪的伪狂犬病阳性猪场,应用猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒苗对全场所有猪只严格按免疫程序进行强化免疫,8个月后对本场种猪群猪伪狂犬病开展流行病学调查,当抽样检测gE抗体阳性率低于5%时,对全群种猪进行检测并淘汰gE阳性猪只,对免疫后的后备母猪进行逐头检测,gE阴性猪只并入生产群。通过反复检测、淘汰,3年后,该场猪伪狂犬病野毒阳性率由2008年的11.53%下降为0,达到净化标准。     

河北省沧州地区猪场伪狂犬病毒感染情况调查与分析

为了解沧州地区猪场伪狂犬病疫苗免疫后伪狂犬病毒的感染情况,对本市13个注射过猪伪狂犬病gE基因缺失苗的猪场进行了猪伪狂犬病的血清学ELISA检测。结果表明,不同地区阳性率相差较大,沧县、盐山县、黄骅市、肃宁县血清阳性率较高,泊头市、河间市猪伪狂犬病阳性率较低;300头母猪以上的猪场阳性率(54.05%)低于平均阳性率(63.34%),100头母猪以下猪场阳性率最高达72.53%(66/91);1胎阳性率低于平均阳性率,而4胎以上的母猪高于平均阳性率;每年免疫2次的母猪阳性率明显高于每年免疫3次的母猪;30日龄内与31~60日龄的商品猪伪狂犬病阳性率相差不明显,60日龄以上的仔猪阳性率最小,低于平均值;未免疫疫苗的仔猪阳性率最高28.57%(12/42),而免疫2次的商品猪阳性率最低14.58%(7/48)。     

实验室检测在规模化猪场伪狂犬病免疫程序调整中的应用

为了对福建宁德某规模化猪场伪狂犬病免疫程序进行调整,应用ELISA法对待配后备母猪、繁殖母猪(怀孕40d母猪、怀孕70d母猪和哺乳母猪)、公猪以及60日龄、90日龄、120日龄和160日龄商品猪血清同时进行猪伪狂犬病gE和gB抗体检测,以掌握不同阶段猪伪狂犬病野毒的感染情况并制定适合本场的猪伪狂犬病免疫程序。免疫程序调整以后的检测结果显示:通过对不同猪群伪狂犬病疫苗程序的调整,商品猪后期和待配后备母猪伪狂犬病野毒感染为阴性,说明目前场内采用实验室检测调整伪狂犬病免疫程序的方法是科学的。     

藏猪伪狂犬病弱毒疫苗和灭活疫苗的免疫效果比较研究

为研究猪伪狂犬病弱毒疫苗和灭活疫苗对藏猪免疫效果的差异,笔者于2016年5月份在西藏林芝某养猪散养户进行两种疫苗免疫效果比较试验,随机抽取29日龄100头体重相近的健康藏猪仔猪(不存在母源抗体),分成对照组(灭活疫苗组,n=50)和试验组(弱毒疫苗组,n=50),试验组肌肉注射猪伪狂犬病弱毒疫苗,对照组肌肉注射猪伪狂犬病灭活疫苗;分别于免疫前1天,免疫后第20,40,60天检测两组仔猪的抗体水平,记录生长和发病情况。结果表明:免疫后第20,40,60天,试验组藏猪仔猪的伪狂犬病毒抗体阳性率由90%降到82%,对照组的抗体阳性率则由74%降至52%;两组仔猪在90日龄时的体重差距较小。可见藏猪仔猪使用伪狂犬病弱毒疫苗的效果显著优于灭活疫苗。     

不同类型猪蓝耳病疫苗的体液免疫效果比较

为科学评价不同猪蓝耳病疫苗对生产母猪和仔猪免疫效果,选取11个规模猪场,分别使用猪蓝耳病进口弱毒疫苗、国产弱毒疫苗、普通灭活疫苗、猪高致病性蓝耳病灭活疫苗对生产母猪和仔猪进行免疫,二免28d后,采集免疫猪群的血清,进行免疫抗体检测,结果表明:生产母猪使用不同类型的蓝耳病疫苗免疫后所产生的抗体阳性率均高于仔猪免疫后所产生的抗体阳性率。     

山西猪伪狂犬病免疫与野毒感染情况调研

山西2013年以来,即使使用gE基因缺失活疫苗免疫的猪场,也有母猪发生流产、仔猪疑似伪狂犬病病死情况,给养猪生产造成一定的经济损失。2016年、2017年、2018年项目组对山西不同地市的11个规模型种猪场调研证实它们使用的是正规厂家生产的猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗,大部分猪场母猪采取普免,仔猪采取3次免疫;共检测11个猪场母猪血样388头份,野毒感染阳性率为57.94%,最高阳性率为83.33%;仔猪血样727头份,阳性率为34.66%,最高为70.00%,只有一个猪场仔猪没有检出野毒感染抗体。另外,从疑似伪狂犬病病死猪病料检测出猪伪狂犬病病毒阳性19份。初步掌握了山西猪伪狂犬病免疫与感染情况,为有效控制该病流行提供依据。     

规模猪场四种主要病毒性疾病的抗体检测

采用进口ELISA试剂盒检测规模猪场母猪、保育猪血清中猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病和猪圆环病毒病等的抗体水平.结果表明,被检测规模猪场的猪瘟抗体合格率为65.2%,特别是保育阶段仔猪抗体水平比较低,只有55.3%.伪狂犬病野毒抗体阳性率达19.01%,母猪与保育猪之间差异不大;而伪狂犬病gB抗体阳性率母猪可达92.6%,保育仔猪只有80%.PRRS抗体水平母猪与仔猪之间差异不显著,分别为88.4%和85.9%,这些场都有注射PRRS弱毒苗,说明该疫苗免疫后抗体转阳率比较高.圆环病毒2型的抗体检测阳性率达91.2%.