栗疫病菌低毒力菌株的生物学特性研究

本文研究了栗疫病菌低毒力菌株的培养性状及其低毒力的转化,结果表明低毒力菌株培养性状与强毒力菌株有所不同,而且单孢后代发生分化。光照不能提高低毒力的转化率,但能提高识别转化是否发生的能力;基质对不同营养体亲和组(VCG)菌株间的转化有影响,对相同CCG菌株间的转化无作用。     

栗疫病菌RAN/GSP1基因的克隆与分析

用酿酒酵母(Saccharyomyces cerevisae)ScGSP1蛋白基因从COGEME植物病原菌EST库中BLAST得到栗疫病菌的GSP1蛋白EST,设计引物从栗疫病菌cDNA中克隆到该基因并测序,得到在进化上高度保守的基因,该基因开放阅读框为651 bp,编码216个氨基酸残基组成的GSP1蛋白前体;由cDNA序列推定的氨基酸序列分析表明,GSP1蛋白前体包括GTPase结合结构域和碳端细胞核定位序列,与21个物种比较的结果表明,栗疫病菌与真菌GSP1蛋白氨基酸序列相似度较高,具有高度的保守性.     

营养体不亲和性诱导栗疫病菌菌株间程序性细胞死亡

为了验证营养体不亲和性导致细胞凋亡的假说,对栗疫病菌融合细胞基因组DNA的降解物进行了琼脂糖凝胶电泳检测,观察了融合细胞的细胞核变化,测定了融合细胞的活性氧产生、脂肪粒积累以及进行了融合细胞死活鉴定。结果表明:不同亲和群菌株的孢子混合涂板,孵育后经历萌发、细胞融合,融合细胞基因组DNA经琼脂糖凝胶电泳可以检测到DNA梯状条带,这一特征为营养体不亲和性诱导的程序性细胞死亡提供了新的证据;细胞学上可观察到不亲和性菌株融合细胞细胞核降解、活性氧产生减少、脂肪粒积累增多及融合细胞死亡,这些特征与细胞凋亡的特征相似。     

苏皖地区栗疫病菌营养体亲和性研究

对江苏、安徽两省9个县市的栗疫病病原菌菌株进行了营养体亲和性(VC)研究,结果表明,不素和类型可分为3种:Ⅰ型为强不亲和,抗衡区两侧形成明显分生孢子器带;Ⅱ型为弱不亲和,抗衡区内不形成分生孢子器;Ⅲ型为中等不亲和,只在抗衡区的某一侧形成分生孢子器带。可将219个菌株划分为131个营养体亲和组(VCG_s),从而推算出至少有8个VC基因控制菌株的营养体亲和性。根据两省、田间小区以及大病斑上菌株的VCG_s分析,我国板栗疫病菌的VCG_s比其他国家的复杂。本文还探讨了复杂的原因及利用低毒力菌株进行生物防治的可能性。     

板栗栗疫病抗性QTL定位

[目的]研究板栗栗疫病抗病基因的QTL位点.[方法]应用区间作图法,以'燕山早丰'×'燕晶'正反交子代为作图群体,鉴定175个子代接种栗疫病菌后的抗性,进行板栗栗疫病抗病数量性状位点的初定位.[结果]在LG1、LG5、LG6、LG7和LG11连锁群上鉴定到13个栗疫病抗性数量性状位点,其中,np1010、lm1157和hk52位点贡献率较高,分别为12.0％、8.3％、8.1％.[结论]鉴定到3个可能与板栗栗疫病抗性相关的数量性状位点.     

栗疫菌生物学特性研究

对栗疫菌菌体生长与营养条件、温度、湿度以及光照等生态因子的相关性进行研究,结果显示：栗疫菌菌体生长的最佳培养基为PDA培养基;最适温度为30℃;最适相对湿度为90％～100％;光照与否无明显影响．上述生态因子中,温度和湿度为关键因子．     

栗疫病菌菌株间营养体不亲和性影响对病毒传递的效率

为明确板栗疫病菌Cryphonectria parasitica菌株间营养体不亲和性(vegetative incompatibility,vic)基因差异对低毒力病毒传递的影响,将具有不同vic基因的毒力菌株(受体)和低毒力菌株(供体)进行配对培养,并对病毒的传染率进行统计分析和回归模型分析.研究结果表明,栗疫病菌的营养体不亲和性是低毒力病毒传递的重要障碍,但不是绝对障碍;不同vic基因位点对病毒传递的影响程度差异显著;相同vic基因型菌株间的病毒传递率为100%,相差的vic基因位点数越多,病毒的传递率越低.病毒的传递率具有vic基因位点的非对称性,同时还受到菌株的遗传背景、vic基因上位效应等因素的影响.     

栗疫病研究进展

栗疫病(ChestnutBlight)是世界上最著名的森林病害之一,19世纪末20世纪初,该病使美洲板栗遭到全面灭种的威胁,成为植物病害摧毁自然物种的唯一例子。因此,近百年来,栗疫病受到了植物育种学家和植物病理学家的高度重视。以下综述了栗疫病的起源、发生分布、侵染循环、毒力分化及综合防制等。     

板栗疫病与主要生境和经营因素的定量分析

应用数量化理论I模型分析板栗疫病与生境和经营因素的关系。复相关检验结果表明,板栗疫病发病率和感病指数两个数学模型均达到极显著水平;偏相关t检验表明,发病率同A层厚度、土层厚度、经营水平有紧密的相关性,与土壤质地有较紧密相关;感病指数同A层厚度、土层厚度、土壤质地有紧密的相关,与经营水平有或较紧密的相关。     

大豆种子几丁质酶的诱导及对壳聚糖降解的研究

大豆种子经甲壳低聚糖处理后发芽，其体内的几丁质酶活力比发芽前提高了46倍，比发芽的大豆提高了1．3倍。大豆种子经甲壳低聚糖处理后发芽的提取物作用于DD值为71．1％的壳聚糖15min，可使其乙酸盐溶液的VDP值达60％以上。初步纯化的大豆几丁质酶可降解壳聚糖释放还原糖且较适合降解DD值低的壳聚糖，其作用于DD值71．1％的壳聚糖37．5h可得到平均聚合度为4—5的水溶性甲壳低聚糖，得率为40％左右。     

大豆种子几丁质酶的诱导及对壳聚糖降解的研究

大豆种子经甲壳低聚糖处理后发芽，其体内的几丁质酶活力比发芽前提高了46倍，比发芽的大豆提高了1．3倍。大豆种子经甲壳低聚糖处理后发芽的提取物作用于DD值为71．1％的壳聚糖15min，可使其乙酸盐溶液的VDP值达60％以上。初步纯化的大豆几丁质酶可降解壳聚糖释放还原糖且较适合降解DD值低的壳聚糖，其作用于DD值71．1％的壳聚糖37．5h可得到平均聚合度为4—5的水溶性甲壳低聚糖，得率为40％左右。     

利用弱毒菌系防治栗疫病的探讨

自 2 0世纪 6 0年代发现栗疫病 (干枯病 )弱毒菌系以来 ,关于弱毒菌系的研究不断深入。本文阐述了弱毒因子的传递方式、机理 ,强、弱毒菌系混合体系 ,两类菌丝的超微结构以及生理特性。栗疫菌弱毒菌系在自然界的传播受诸多因素的影响 ,弱毒菌株菌丝生长较慢 ,产孢能力较低 ,因而同强毒力菌系竞争的能力较弱     

不同来源的板栗栗疫病菌致病性差异研究

为了探索我国板栗疫病发生区域病原菌之间的致病力差异,收集46株来源于我国6省18个县（市）的板栗疫病菌株,通过毒力比较和对同一株板栗枝条的接种试验,测定不同地域菌株间的致病性差异。结果表明,不同地域来源的栗疫病病原菌的致病性具有显著差异,其中,北京怀柔、四川眉山等地来源的栗疫菌致病性最强,属于强毒力菌株,而陕西镇安来源的栗疫菌致病性最弱,湖北武汉和宜昌的栗疫菌致病性居中。     

油菜几丁质酶的纯化及其在抗菌核病中的作用

油菜叶片经油菜菌核病菌 （ Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ ） 或水溶性壳聚糖处理后, 几丁质酶活性明显提高, 分别在处理后 １ ｄ 和 ２ ｄ 达活性高峰, 比对照分别高５ 倍和２ 倍左右。被激发提高的几丁质酶表现为内切酶活性, 细胞间的几丁质酶比活力显著高于细胞内的酶比活力。菌核病菌侵染后的油菜叶片提取液经６０％ 饱和度的硫酸铵沉淀,再通过再生几丁质柱亲和层析得到了纯化的几丁质酶, 经 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 显示单一的谱带, 其相对分子质量为 ３２ ０００。纯化的油菜叶片几丁质酶能降解油菜菌核病菌菌丝细胞壁, 在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上可抑制菌丝生长。     

栗疫菌(Endothia parasitica)致病毒素的初步研究

栗疫菌(Endothia parasitica)引起的板栗疫病是森林植物检疫对象之一。病原菌在侵染植物的过程中产生的毒素一向被认为是致病的重要因子。本实验以PD液体培养基为基础,通过震荡和静止两种培养方式,采用浸渍法和针刺法对板栗叶片和小枝进行了生物测定。研究显示板栗小枝和叶片可产生典型的症状,证明栗疫菌能产生具生物活性的毒性物质(毒素),PD培养液适于菌株的生长和毒素的产生。震荡培养比静止条件更利于产毒,浸渍法处理后第二天板栗小枝和叶片都表现典型的病斑和萎蔫症状,针刺法处理后第一天便表现出典型症状,说明针刺法比浸渍法效果更明显、叶片比小枝更敏感。     

板栗自然居群疫病发生研究

通过田间实地调查,进一步确认我国栗疫病的发病率由北向南逐渐减轻,栗疫病的各级发病症状在各被调查地均有不同程度的发生.结合调查进行取样,采用超薄平板聚丙烯酰胺等电聚焦技术对发病群体与无病群体进行遗传多样性分析,发现除等位基因平均数(A)二群体相等外,无病群体的多态位点比率(P)、平均观察杂合度(Ho )、平均期望基因杂合度(He)均高于有病群体,固定指数(F)前者大于后者且均为负值(分别为:-0.216和-0.241).     

菜病清对辣椒疫霉病菌的室内毒力测定

采用生长速率法对陕西省农业科学院新农药研究开发中心最新研制的高效、低毒防治蔬菜病害杀菌剂菜病清进行了室内毒力测定试验。结果表明,菜病清对辣椒疫霉病菌的增效系数为１７２．２１,明显大于１００,说明菜病清对辣椒疫霉病菌的毒效明显大于其有效成分单独使用时的毒效,增效作用显著。     

杀鲑气单胞菌杀藻作用的初步研究

为了研究几丁质酶对硅藻杀灭作用,以杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)和其几丁质酶敲除菌为研究对象对牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)进行共培养并探究其作用差异。结果表明:杀鲑气单胞菌野生株和缺失株分别与牟氏角毛藻共培养48 h后,野生株对牟氏角毛藻的杀藻率达到9.18%,而缺失株无明显杀藻活性;通过扫描电镜进一步发现野生株细菌能够裂解牟氏角毛藻的细胞壁,而缺失株不能。结果证实杀鲑气单胞菌因具有几丁质酶而对藻类具有杀灭作用。