基于高通量测序技术分析麝香草酚处理禾谷镰孢菌后转录组学的变化

植物源化合物麝香草酚能够破坏禾谷镰孢菌细胞膜的完整性来抑制病原菌的生长,但其具体的作用靶标尚不明确。为发掘禾谷镰孢菌中麝香草酚潜在作用靶标,本研究以禾谷镰孢菌标准菌株(PH-1)为材料,采用新一代高通量测序技术Illumina Hiseq 2000对麝香草酚处理及未处理的禾谷镰孢菌进行转录组测序分析,利用生物信息学方法对差异表达基因的功能进行研究,同时利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对部分关键基因进行验证。结果表明,禾谷镰孢菌经过50μg/ml麝香草酚处理12 h后,共检测到1 477个基因的表达量发生了变化,其中下调基因数目为772个,上调基因数目为705个。这些差异表达基因参与多种代谢途径,表明麝香草酚对禾谷镰孢菌的作用是一个多基因参与的协同调控过程。qRT-PCR验证部分基因上调下调结果与转录组分析结果一致。本研究通过二代高通量转录组测序技术分析麝香草酚处理后禾谷镰孢菌的差异表达基因,为进一步揭示麝香草酚作用的分子机制,挖掘作用靶标提供基础资料。     

麝香草酚对13种植物病原微生物的抑制作用

[目的]探讨石香薷主要成分麝香草酚对植物病原菌的影响。[方法]采用管碟法研究麝香草酚对13种致病微生物的抑制作用。[结果]麝香草酚对13种受试菌均有不同程度的抑制作用,其中对水稻恶苗病菌、黄瓜枯萎病菌、黄瓜炭疽病菌、油菜菌核病菌4种植物病害真菌的抑制效果极显著,抑菌效果与麝香草酚浓度呈正相关,对这4种真菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.125、0.063、0.063、0.250 mg/mL,最低杀菌浓度(MBC)分别为0.125、0.125、0.063、3.000 mg/mL。[结论]试验结果可为麝香草酚的进一步研究提供理论依据。     

麝香草酚对单增李斯特菌的抑制作用

为开发以麝香草酚为主要成分的新型抑菌剂。采用微量肉汤稀释法测定麝香草酚对单增李斯特菌的最小抑制浓度和最小致死浓度分别为156.25μg/ml和312.50μg/ml。通过扫描电镜观察发现,经过麝香草酚处理后单增李斯特菌细胞出现穿孔式膜损伤。进一步研究结果表明,麝香草酚分别处理1 h、2 h和3 h后,单增李斯特菌胞外的碱性磷酸酶、葡萄糖和核酸含量显著高于对照。SDS-PAGE电泳分析结果显示,麝香草酚处理6 h后单增李斯特菌胞内蛋白含量降低,说明麝香草酚处理使得单增李斯特菌细胞通透性增加,导致细胞内的物质流失到细胞外。碘化丙啶(PI)染色结合倒置荧光显微镜观察结果显示,麝香草酚处理造成了单增李斯特菌细胞膜的破损,并最终导致菌体细胞死亡。     

几种抗生素替代产品对肉鸡生长性能及消化酶活性的影响

研究了止痢草提取物、茶树油提取物、麝香草酚和香芹酚制剂、肉桂醛和辣椒素制剂对肉鸡的消化酶活性及生产性能的影响.对照组饲喂基础日粮,试验组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)将基础日粮中的抗生素分别用止痢草提取物、茶树油提取物、麝香草酚和香芹酚制剂、肉桂醛和辣椒素制剂替换.试验从1日龄开始,试验期为42 d.结果表明,21日龄时,茶树油提取物组的十二指肠胰蛋白酶活性显著高于抗生素组和其他试验组(P＜0.05),淀粉酶和脂肪酶活性各组无显著差异;42日龄时,麝香草酚和香芹酚制剂组的十二指肠淀粉酶活性显著高于抗生素组(P＜0.05),胰蛋白酶、脂肪酶活性各组无显著差异.各组胰脏消化酶活性和生长性能指标无显著差异.一定水平的止痢草提取物、茶树油提取物、麝香草酚和香芹酚制剂、肉桂醛和辣椒素制剂可以替代常规抗生素应用于肉鸡生产.     

麝香草酚对猪链球菌2型感染小鼠的抗炎作用

为筛选有效防治链球菌感染的药物,试验研究了麝香草酚对猪链球菌2型(SS2)感染小鼠的抗炎作用:用猪链球菌2型CCVC606菌株亚致死剂量感染小鼠,连续3 d腹腔注射麝香草酚水溶液,观察小鼠临床症状,分析血细胞,采用ELISA方法检测炎性细胞因子,HE染色评价脑、肾及肺组织的病理学变化。结果表明:猪链球菌感染组出现体温升高、精神沉郁、被毛杂乱、体重下降,部分小鼠眼部出现脓性分泌物;而麝香草酚给药组小鼠仅感染初期出现轻微体温升高、精神沉郁,并且麝香草酚能够显著降低链球菌感染小鼠炎性细胞因子IL-6的产生,显著减轻脑、肾及肺组织的病理学损伤,能够缓解机体炎症发展。这说明麝香草酚能够有效抵抗猪链球菌2型感染引起的炎症,具有良好的应用前景。     

牛至油在饲料中的作用及应用

牛至是唇形科多年生草本植物,有特殊及浓烈的气味,原产于地中海沿岸,现我国西部四川、云南及贵州等省也盛产牛至,牛至油是从植物牛至中提取的一种挥发油,其主要成分有香芹酚、麝香草酚、百里酚、石里醌、双戊烯、伽罗木醇以及香荆芥酚等。国内外科学试验已证实香芹酚、百里酚以及麝香草酚等是牛至油的有     

CotA漆酶的固定化及其对溴麝香草酚蓝脱色的效果

将林地土壤中分离的枯草芽孢杆菌中克隆的CotA漆酶基因,在毕赤酵母菌中进行表达;以海藻酸钙为载体,采用包埋法固定毕赤酵母菌表达的CotA漆酶,固定化效率为32.2%,正交试验优化后的固定化效率比优化前提高了30.1%。优化了游离CotA漆酶及固定化CotA漆酶对溴麝香草酚蓝的脱色条件,在30min内,固定化CotA漆酶在70℃、pH为8.0时,游离CotA漆酶在60℃、pH为7.6时,对溴麝香草酚蓝溶液的脱色率最高,分别达到76.81%和67.12%,说明固定化CotA漆酶比游离CotA漆酶在较高温度和碱性条件下活性更高。     

麝香草酚体外抗真菌活性研究

白色念珠菌等真菌是人类及动物重要致病菌。测定麝香草酚(THY)对临床分离红色毛癣BMU01672株、酿酒酵母标准株和24株临床分离耐氟康唑(FLC)白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC),采用96孔平板微量法测定了THY/FLC,THY/AMB(两性霉素B)联合用药的分级抑制浓度指数(ractional inhibitory concentrationindex,FICI)值。结果表明,THY有较好的抗真菌活性,THY与FLC和AMB联合应用具有协同抗真菌作用,这为麝香草酚抗真菌活性的进一步研究和开发打下了基础。     

复配植物源杀菌剂的开发研究

研究了植物源化合物肉桂醛、丁香酚、麝香草酚和单宁酸对5种常见致病菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、肠炎沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏菌)的抑制作用。采用肉汤稀释法测定各成分对5种致病菌的最小抑菌浓度(M IC),在浓度范围19.53~2500μg/mL内,各成分对各致病菌均表现出了抑制活性。对化合物之间的相互作用也进行了研究,肉桂醛、丁香酚、麝香草酚和单宁酸两两复配后各成分的最小抑菌浓度都有所降低,采用部分抑菌浓度(FIC)判定表明它们之间存在协同增效的作用。     

牛至油的研究与应用

新型植物性抗生素——牛至油，是一种从自然界植物“牛至”中提取的挥发油，是一种新型动物保健药物。其主要成分有香芹酚、麝香草酚、百里酚、石里醌、双戊烯、伽罗木醇以及香荆芥酚等。牛至油是我国农业部(农牧发[2001]20号)批准的可长期在饲料中添加使用的一种药物饲料添加剂。牛至油中的香芹酚等酚类化合物有较强的抗菌活性，     

百里香酚体外抗伪狂犬病毒活性评价及其作用方式

采用细胞体外培养技术,以BHK-21细胞为研究模型,探讨不同质量浓度的百里香酚在体外抗伪狂犬病毒(PRV)的活性及其作用方式。使用CCK-8法检测百里香酚对BHK-21细胞的最大无害浓度(MNTC),计算得出其半数抑制浓度(IC₅₀)为(212.789±1.652)μg·mL^-1,对PRV的半数有效浓度(EC₅₀)为(30.710±0.303)μg·mL^-1,对PRV的治疗指数(TI)为6.929,说明百里香酚属于高效低毒类抗PRV药物。使用CPE观察法检测百里香酚对PRV病毒滴度和病毒一步生长曲线的影响,结果显示,百里香酚能够剂量依赖性显著降低PRV的病毒滴度,并降低PRV在BHK-21中增殖后的毒力。采用荧光定量PCR方法检测不同处理下PRV感染的BHK-21细胞的PRV-gE基因的拷贝量,研究百里香酚体外抗PRV的作用方式,结果显示,百里香酚主要是通过抑制PRV在BHK-21细胞中的增殖来发挥抗病毒活性的,同时能够直接杀灭部分PRV病毒粒子。     

百里香酚纳米乳的制备及其稳定性

通过绘制伪三元相图筛选百里香酚纳米乳处方,采用透射电子显微镜(TEM)、激光粒度测定仪分别考察其形态和粒径,利用染色法鉴别纳米乳的类型,通过光照试验、高速离心试验、加速试验以及长期试验考察百里香酚纳米乳的稳定性.结果表明,百里香酚纳米乳的最佳制备工艺是百里香酚和乙酸乙酯(质量比1∶1)为油相,蒸馏水为水相,混合表面活性...     

百里香酚对鱼源耐药性维氏气单胞菌的体外抑菌效果及其机制研究

为探究百里香酚对鱼源耐药性维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的抑菌效果和作用机制,从患病黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)体内分离得到一株维氏气单胞菌,药敏试验结果显示,其对氟苯尼考、环丙沙星和恩诺沙星耐药。通过测定最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)和生长曲线来评价百里香酚对耐药性维氏气单胞菌的抑菌活性;通过测定百里香酚对其细胞膜通透性、可溶性蛋白、乳酸脱氢酶活性和DNA的影响,结合电镜观察细菌超微结构的变化研究其作用机制。结果显示,百里香酚对耐药性维氏气单胞菌的抑菌效果明显,MIC为256μg·mL^-1,MBC为512μg·mL^-1。经512μg·mL^-1的百里香酚作用1 h后,维氏气单胞菌液电导率极显著(P<0.01)上升,DNA外渗量迅速上升至(115.6±0.5)mg·L^-1。经512μg·mL^-1的百里香酚作用后,维氏气单胞菌的可溶性蛋白明显变少,细菌乳酸脱氢酶活性在2、4、6、8 h分别极显著(P<0.0...     

百里香酚对不同时期秀丽线虫杀虫效果探究

多年来,防治植物寄生性线虫的合成农药严重污染生态环境,开发天然生物型农药迫在眉睫。基于线虫动物门所有物种都表现出相似性,且寄生性线虫与模式动物秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)之间的差异小于不同种类寄生性线虫之间的差异,以模式生物秀丽线虫为研究对象,探究植物天然产物百里香酚对生长发育期(L4时期)和生殖时期(有卵时期)秀丽线虫的寿命、运动能力、成活子代数目表型指标的影响。结果表明,百里香酚处理L4时期的秀丽线虫4 h,其半数致死浓度为50 mg/L,最低致死浓度为125 mg/L。百里香酚处理有卵时期的秀丽线虫4 h,其半数致死浓度为50 mg/L,最低致死浓度为100 mg/L。同时,百里香酚能显著性降低上述两个时期秀丽线虫的运动能力以及有卵时期秀丽线虫的成活子代数目。综合以上结果,选取125 mg/L的百里香酚处理线虫4 h,其杀虫效果最佳,能达到低成本、高效、环保的防治植物寄生性线虫的目的。     

黑头草石油醚提取物的化学成分

采用GC/MS联用法对唇形科植物黑头草石油醚提取物的化学成分进行了分析鉴定。出峰89个,鉴定出68个化合物,占总含量的96.43 %,主要成分是百里香酚(48.05 %),香荆芥酚(2.01 %),乙酸百里香酚酯(6.77 %),角鲨烯(2.61 %)及碳十八-9,12,15-三烯酸乙酯(5.91 %)等化合物。     

3种植物提取液对蒜薹货架期品质的影响

为了研究一种新型安全的蒜薹防腐保鲜方法,控制蒜薹的采后病害,延长蒜薹的货架期并保持其品质。以苍山大田薹为试材,用1.5%百里酚、1.5%柠檬醛、0.4%香叶醇3种植物提取液浸蘸蒜薹薹梢,25℃下放置,定期测定指标。结果表明,1.5%百里酚,1.5%柠檬醛,0.4%香叶醇浸蘸处理均能够有效地抑制蒜薹薹梢霉变和薹条老化,减缓其水分、可溶性固形物、维生素C、总叶绿素的损失,进而保持了较好色泽,减少了营养成分的损失。其中,1.5%柠檬醛浸蘸处理的效果最好,1.5%百里酚、0.4%香叶醇处理效果次之。研究表明,百里酚、柠檬醛、香叶醇3种植物提取液均能保持蒜薹的品质,延长其货架期。     

百里香酚抑菌活性初探

本研究采用抑制菌丝生长速率法、抑制孢子萌发法、组织测定法和盆栽试验法系统测定了百里香酚对植物病原真菌的抑制作用。结果表明,在离体条件下百里香酚对供试的10种植物病原真菌菌丝生长均有一定的抑制作用,其中,对番茄灰霉病菌的抑制作用最强,EC50为0.012 g?L-1;对番茄灰霉病菌、烟草赤星病菌和玉米大斑病菌孢子萌发有较强的抑制作用,EC50分别为0.028、0.032和0.064 g?L-1;盆栽试验结果表明百里香酚对番茄灰霉病菌具有很好的保护和治疗作用,在供试浓度为0.75 g?L-1时,对番茄灰霉病的保护和治疗作用分别为72.01%和60.28%,与对照药剂速克灵无显著性差异。     

百里香芳香油及其主要成分抗氧化试验

利用百里香芳香油及其主要成分进行大豆油和磷脂的抗氧化试验。结果表明，百里香芳香油对大豆油和磷脂有较强的抗氧化作用，同时不影响大豆油的颜色和气味。