哺乳动物颗粒细胞凋亡研究进展

细胞凋亡是雌性生殖系发育过程中的一个重要组成部分,在哺乳动物中,超过99%的雌性生殖细胞都会在卵子发生的不同阶段发生凋亡.目前,在颗粒细胞凋亡过程中至少发现5个配体受体系统:TNFa和TNF受体系统,Fas配体受体系统,TRAIL和TRAIL受体系统,APO-3配体受体系统,PFG-5配体受体系统,而且发现颗粒细胞凋亡属于依赖于线粒体凋亡信号传导凋亡途径.     

哺乳动物卵泡闭锁的研究

哺乳动物的卵泡闭锁是一种正常的繁殖生理过程，也是一种选择性的生理性细胞死亡过程。研究卵泡发育和闭锁对于提高动物繁殖力和胚胎工程发展有着相当重要的意义。本文主要在哺乳动物的卵泡闭锁与细胞凋亡、卵泡闭锁的调控因子、卵泡闭锁的相关基因以及卵泡闭锁的相关生殖激素等方面进行了综述。     

发情间期注射PMSG对猪卵泡发育及颗粒细胞凋亡影响的研究

为探讨孕马血清促性腺激素 (PMSG)对猪卵泡发育和闭锁及颗粒细胞凋亡的影响 ,实验采用性成熟肥育母猪为实验材料 ,对在情期第 11d(发情当日为 0 d)注射 PMSG后 2 4 ,4 8,72和 96 h的猪卵巢表面各类卵泡数量、颗粒细胞凋亡比例以及外周血浆中类固醇激素浓度等进行了研究。结果表明 ,注射 PMSG后 2 4 h卵巢表面卵泡总数、小卵泡 (直径 <3mm)数和中等卵泡 (直径 3～ 5 m m)数分别为 :5 9,32和 2 5 .5个 /卵巢 ,明显多于同期对照组 (情期第 12 d)猪的数量 ;注射 PMSG72和 96 h卵巢表面大卵泡 (直径≥ 5 m m)数量分别为 7和 6个 /卵巢 ,明显多于对照组 (情期第 14和第 15 d) ,而此时卵汇总数却明显低于对照组。大卵泡颗粒细胞的凋亡比例在注射 PMSG后与对照组相比无显著差异 ,而小卵泡和中等卵泡的颗粒细胞的凋亡比例在注射 PMSG后 2 4 h(6 .4 %和 7.8% )显著 (P<0 .0 5 )降低 ;中等卵泡颗粒细胞凋亡比例到 PMSG后 72 h回升至与对照组无显著差异 ,小卵泡颗粒细胞凋亡比例于 PMSG后 96 h回升至与对照组无显著差异。血清中雌二醇浓度在 PMSG注射后明显升高 ,在 PMSG注射后72 h时达最高值 (72 .3pg· m L- 1 ) ,显著高于对照组 (10 .8pg· m L- 1 )。孕酮的浓度在 PMSG注射后无明显变化。以上结果表明 ,在体内条     

猪卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡和Fas/FasL变化

为了揭示猪卵巢卵泡选择性闭锁机制,采用Real time PCR和HE染色方法,检测猪各阶段卵泡颗粒细胞中Fas和FasLmRNA表达和形态学变化;分析比较不同发育阶段卵泡中颗粒细胞Fas和FasLmRNA表达差异及细胞凋亡程度。结果表明,健康的大(5 mm)、中(3～5 mm)、小(3 mm)卵泡,早期闭锁的大、中、小卵泡以及晚期闭锁的大、中、小卵泡壁层颗粒细胞都有Fas和FasLmRNA表达。早期闭锁卵泡颗粒细胞Fas和FasLmRNA相对表达量高于健康卵泡与晚期闭锁卵泡。早期闭锁小卵泡FasLmRNA相对表达量与大、中、小健康卵泡相比均有显著差异(P0.05);状态相同的大、中、小卵泡间Fas与FasLmRNA相对表达量均无显著差异(P0.05);表明Fas/FasL系统在猪卵巢卵泡选择性闭锁过程中,对颗粒细胞凋亡具有重要的调节作用。     

猪卵泡闭锁过程中circINHBB的鉴定及其对颗粒细胞凋亡的影响

[背景]卵泡的发育状况和成熟排卵数量是哺乳动物的繁殖力和生产性能的重要决定因素.卵泡闭锁是卵泡停止发育并发生退化的过程,可能发生在卵泡发育的各个阶段,而闭锁的发生与卵泡颗粒细胞的增殖和凋亡情况密切相关,而颗粒细胞的凋亡过程十分复杂并且受到各种细胞因子的调控作用.环状RNA(circRNA)是近年来在生物体内发现的一种环...     

细胞凋亡及其在昆虫生理学研究中的意义

从细胞凋亡的概念、发生特点、形态学、生化特征和生物学意义方面进行了综述,并在近年昆虫细胞凋亡研究的基础上,阐述了细胞凋亡在其生理学研究上的重要意义。     

弥散性神经内分泌细胞标志物在不同生殖周期小鼠卵巢中的表达

【目的】研究卵巢内弥散性神经内分泌系统细胞的分布情况。【方法】采用间接免疫荧光染色法检测弥散性神经内分泌细胞广谱、共同的标志物S100蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)在不同生殖周期小鼠卵巢中的表达情况。【结果】S100蛋白和NSE在动情周期次级卵泡和囊状卵泡外膜细胞、妊娠期囊状卵泡外膜细胞和部分黄体细胞中表达,阳性细胞散在或成簇分布,一些细胞具有明显的突起,细胞核不着色。【结论】小鼠卵巢中存在弥散性神经内分泌细胞;弥散性神经内分泌物质在卵泡不同发育阶段发挥着不同的调控作用;在卵巢的发育过程中伴随着部分细胞神经内分泌化。     

热应激对鸡脾脏和法氏囊细胞凋亡的影响及其调节

 18只 AA肉鸡于22℃饲养。30日龄时，随机分成3组，分别进行0 、5和10h的41℃高温应激处理。用流式细胞仪检测应激后不同时间脾脏和法氏囊细胞 DNA含量、细胞凋亡率以及Caspase-3和Bcl-2的表达。结果表明，应激处理0、5和10 h时，脾脏DNA合成期（S期）细胞比例分别是4.67%、5.11%、4.78%，法氏囊S期细胞分别是30.52%、24.71%、24.04%；脾脏和法氏囊细胞凋亡率分别是0.22%、0.42%、0.32%和0.32%、0.62%、0.41%；脾脏和法氏囊 caspase-3表达阳性细胞率分别为5.49%、10.36%、9.80%和8.60%、10.51%、9.41%； Bcl-2表达阳性细胞率脾脏分别是31.32%、24.01%和29.26%，法氏囊则是30.24%、27.10%、31.54%；脾脏细胞凋亡率，应激后5 h 与 0 和10 h有显著差异（P＜0.05）；在高温应激过程中，脾脏和法氏囊的细胞凋亡率与Caspase-3表达阳性细胞率呈方向一致的变化关系，均是从0 h到5 h逐渐升高，以后又逐渐下降；而与Bcl-2表达阳性细胞率呈反向变化关系。据此说明高温应激能明显影响脾脏和法氏囊细胞凋亡，而这种细胞凋亡的变化受Caspase-3和Bcl-2表达的调节。     

家蚕细胞色素C基因的克隆及其蛋白在家蚕凋亡细胞中的释放

 【目的】细胞色素C是线粒体凋亡路径上的关键因子,通过家蚕细胞色素C基因的克隆和其蛋白在家蚕凋亡细胞中的释放研究,为家蚕细胞凋亡的研究奠定基础。【方法】利用生物信息学和分子生物学方法克隆家蚕细胞色素C基因,通过紫外线照射诱导家蚕细胞凋亡,应用流式细胞仪和Western-blotting检测家蚕凋亡细胞的线粒体膜电位变化和细胞色素C的释放。【结果】在家蚕中克隆了一个含有细胞色素C保守结构域的同源基因,该基因cDNA长570 bp,有3个外显子,开放阅读框（open reading frame,ORF）长324 bp,编码108个氨基酸,存在参与细胞凋亡时与下游凋亡蛋白酶激活因子（Apaf－1）相互作用的保守关键位点;紫外线诱导家蚕胚胎细胞BmE-SWU1凋亡后12 h,细胞线粒体跨膜电位明显下降,同时检测到了细胞色素C由线粒体向细胞质释放。【结论】在家蚕细胞凋亡中可能存在细胞色素C由线粒体释放的路径。     

Morphological and Hormonal Identification of Porcine Atretic Follicles and Relationship Analysis of Hormone Receptor Levels During Granulosa Cell Apoptosis In vivo

Recent reports have demonstrated that follicular atresia is initiated or caused by granulosa cell apoptosis followed by theca cell degeneration in mammalian ovaries, but the mechanism of follicular atresia is still to be elucidated. Therefore, our present study was designed to examine our hypothesis that the changes of follicular microenvironment induce the granulosa cell apoptosis during pocrine follicular atresia in vivo. We firstly isolated intact porcine antral follicles and identified them into three groups, healthy follicles （HF）, early atretic follicles （EAF） and progressed atretic follicles （PAF） through morphology and histology. To further confirm their status, we detected hormone levels in follicular fluids and the expression level of apoptosis gene Bax in granulosa cells. The rate of progesterone （P） and estradiol （E2） was increased with the expression of Bax, indicating hormone can be used as a marker of granulosa cell apoptosis or follicular atresia. Finally, we analyzed the expression level of hormone receptor genes in granulosa cells and their relationship with follicular atresia. In PAF, the expression of Progesterone receptor （PGR） was increased significantly while estradiol receptor （ER） had no notable changes, which suggesting the increased-PGR accelerated the effect of P-stimulated granulosa cell apoptosis. The dramatic increasing of androgen receptor （AR） expression in PAF and the obvious increase of tumor necrosis factor-u receptor （TNFR） in EAF indicated that there are different pathways regulating granulosa cell apoptosis during follicular atresia. Together, our results suggested that different pathways of granulosa cell apoptosis was induced by changing the follicular microenvironment during follicular atresia.     

猪卵泡期中等卵泡发育和闭锁的相关基因表达及激素水平分析

研究猪卵泡期内有腔卵泡发育和闭锁中颗粒细胞自噬与凋亡、卵泡内调控因子、类固醇激素及相关酶类的变化,为提高排卵前卵泡发育数量提供理论依据。从猪卵泡期卵巢中分离3~5 mm有腔卵泡,根据发育变化分为健康卵泡、早期闭锁和晚期闭锁3类,应用HE染色观察内部形态结构变化,应用酶免法检测卵泡液中雌二醇(E2)和孕酮(P4)的浓度变化,采用Real-time PCR方法检测自噬相关基因(Becline、LC3B、ATG3、ATG5、ATG7)、凋亡相关基因(Caspase-3、Bim、Bcl-2和Bax)、类固醇合成酶基因(CYP11A1、3βHSD、CYP17A1、CYP19A3)、激素受体和卵泡内关键调控基因(FSHR、ERα、CART、SMAD4)在不同类型卵泡中的表达变化。结果表明,健康卵泡中颗粒细胞层完整,有少量凋亡细胞,早期和晚期闭锁卵泡中颗粒细胞层分散,且凋亡细胞明显增多。早期和晚期闭锁卵泡中P4/E2显著高于健康卵泡,自噬和凋亡相关基因的表达水平在早期和晚期闭锁的卵泡中显著高于健康卵泡,类固醇合成酶基因CYP11A1和3βHSD的表达量在早期和晚期闭锁卵泡中显著高于健康卵泡,CYP17A1、CYP19A3、FSHR、ERα和SMAD4的表达量在早期和晚期闭锁卵泡中显著低于健康卵泡,而CART的表达量则呈现相反的趋势。由此可见,颗粒细胞自噬和凋亡是卵泡闭锁的主要诱因,而类固醇合成酶基因CYP11A1和3βHSD通过提高卵泡液中孕酮的水平加速了卵泡闭锁的进程。     

鹅卵泡颗粒细胞凋亡与卵黄E2和P4水平关系的研究

以产蛋期扬州鹅为试验素材,取排卵前F1-F4卵泡、最小排卵前卵泡(SPF)、小黄卵泡(SYF)和闭锁卵泡,利用HE染色、透射电镜和流式细胞术分析鹅卵泡颗粒细胞凋亡,采用放射免疫分析法检测各级卵泡的卵黄雌激素(E2)和孕激素(P4)水平,探讨鹅卵泡颗粒细胞凋亡与卵黄E2和P4水平的关系.结果表明:①闭锁卵泡的颗粒细胞表现出明显的凋亡特征;②在卵泡选择过程中,E2水平显著上升,P4水平略有上升;③卵泡从排卵前阶段逐渐发育至F1卵泡的过程中,E2水平逐渐降低,而P4水平急剧升高;④闭锁卵泡的卵黄E2水平极显著低于各级正常卵泡,而P4水平极显著高于除F1卵泡外的其他各级卵泡;⑤正常卵泡的颗粒细胞凋亡指数与E2水平呈正相关(r=0.514),与P4水平呈负相关(r=-0.744).     

脱落酸与植物发育过程中的细胞凋亡

综述脱落酸对植物胚乳和雄核发育过程中细胞凋亡的调控作用以及脱落酸作用的分子基础,并提出脱落酸调控细胞凋亡的可能机制。     

凋亡与自噬性死亡

细胞凋亡是一种由基因控制的自主性死亡过程,而自噬也被认为是非凋亡形式的程序性细胞死亡的方式。本文综述了凋亡、自噬的特征、机制及其联系。     

DAPI检测卵泡期绵羊生殖器官中细胞凋亡的比较研究

为探讨在卵泡期绵羊生殖器官中细胞凋亡的作用机制,本试验以小尾寒羊和萨福克羊为研究对象,采用DAPI(4′,6′-联脒-2-苯基吲哚)原位荧光标记技术,对高繁殖力品种小尾寒羊和低繁殖力品种萨福克羊成年母羊卵泡期主要生殖器官(卵巢、输卵管、子宫)进行细胞凋亡的确认与定位。结果显示:小尾寒羊和萨福克羊卵巢中卵泡上皮细胞、颗粒细胞、膜细胞均有凋亡现象。在三级卵泡和成熟卵泡的颗粒细胞和膜细胞中,萨福克羊比小尾寒羊表达出较多数量的凋亡细胞,两品种羊在卵泡期输卵管各部,子宫内膜腺体中几乎均未检测到凋亡细胞,子宫内膜基质中检测到少量细胞发生凋亡。因此,研究表明细胞凋亡是母羊生殖器官变化的重要调节机制,可能与造成两者繁殖力高低差异有关。     

反刍家畜黄体溶解机理

本文从前列腺素Ｆ＿（２α）（ＰＧＦ＿（２α））及催产素（ＯＴ）在黄体溶解过程中的作用，ＯＴ与ＰＧＦ＿（２α）之间的正反馈调节，ＰＧＦ＿（２α）分泌的起始和终止，Ｐ＿４和Ｅ＿２对ＰＧＦ＿（２α）分泌的调节，对反刍家畜黄体溶解机理等方面进行了综述。特别介绍了近年来黄体溶解机理在山羊上的研究进展。