微波辅助提取葡萄皮中花色苷的动力学和热力学特性

为拓展微波辅助提取技术在食品工业领域的应用,研究了微波辅助技术对提取葡萄皮中花色苷的作用,并对其动力学和热力学进行了评价。结果表明：柠檬酸浓度、液料比、提取时间和微波功率可以显著影响总花色苷提取率。采用高浓度柠檬酸水溶液（1.00?mol/L）提取的总花色苷含量（172.99?mg/100?g）是低浓度柠檬酸水溶液（0.02?mol/L）提取的总花色苷含量（43.48?mg/100?g）的4倍。此外,在实验选取的动力学模型中,指数衰减模型可以更好的拟合提取动力学数据（R2＞0.9875）。微波辅助提取葡萄皮中花色苷的有效扩散系数（2.12～4.87×10-11?m2/s）随着微波功率的增加而增大。微波辅助提取过程的热力学参数表明微波提取方式有利于传质过程。所得研究结果将为微波辅助提取技术的工业化应用提供理论依据。     

红叶葡萄品种叶片花色苷种类的鉴定与分析

为解决葡萄园中由葡萄修剪产生的大量叶片残留问题,提高修剪产生的叶片的利用价值,本试验以8612、玫瑰香、红鸡心3个红叶葡萄品种和葡萄园皇后、玫瑰露、秋红3个绿叶葡萄品种不同发育时期的叶片为研究对象,利用MATLAB软件对整张叶片的图像数据进行提取,计算色差值;利用超高效液相-质谱法(LC-MS)检测花色苷的成分和含量,探讨不同发育时期叶片中花色苷不同组分的变化规律。结果表明,不同发育时期的红色和绿色叶片色差指数L^*、a^*、b^*变化趋势明显不同,共检测到18种花色苷组分,包括花青素类(4种)、甲基花青素类(4种)、花翠素类(4种)、甲基花翠素类(2种)和二甲基花翠素类(4种)。以上5类花色苷在红色叶片中均被检测到,绿叶品种中未发现花翠素类和甲基花翠素类花色苷。花色苷定量结果显示,红色叶片不同发育时期花色苷含量为123.468~855.001 mg·100g^-1,绿色叶片花色苷含量为4.407~44.517 mg·100g^-1。甲基化类花色苷占比随叶片发育均逐渐增大。花色苷酰化修饰类型分析结果发现,香豆酰化类型花色苷含量高于其他酰化类型花色苷,在花色苷总含量中所占比例较高,而阿魏酰化和糖酰化类花色苷含量非常少。色差和不同类型花色苷成分的相关性分析结果表明,红色叶片的色差指数与更多类型的花色苷含量存在相关关系。红色葡萄叶片中花色苷种类丰富、含量较高,是花色苷类化合物的潜在来源,具有很大的利用价值。本研究通过对叶片中花色苷成分和含量进行了详细调查,为今后葡萄园中叶片的加工再利用提供了依据。     

黑大豆种皮花色苷的提取及其抗氧化作用研究

以黑大豆皮为材料,采用二次回归正交旋转组合设计对其花色苷的提取工艺进行了优化研究。结果表明,最佳提取参数为温度60℃、时间1 h、乙醇浓度60％、料液比1∶40。对黑大豆种皮花色苷含量与总抗氧化能力之间的相关性分析表明,二者之间存在极显著的线性关系(P<0.01),且黑大豆种皮花色苷提取物表现出较强的清除OH·、O^{-₂·及有机自由基DPPH·的体外抗氧化作用,其清除能力是维生素C的1.6倍、2.2倍、1.4倍。}     

有机基质栽培对巨峰葡萄花色苷合成基因表达的影响

为明确有机基质栽培对葡萄花色苷合成的影响,以巨峰葡萄为材料,分别采用液相色谱(HPLC)技术和RT-PCR技术,研究有机基质栽培对葡萄果皮花色苷含量及其生物合成相关基因表达的影响。结果表明,有机基质组的花色苷总含量明显高于对照组;有机基质栽培使巨峰葡萄果实整个发育期或部分着色期果皮花色苷生物合成途径中PAL、4CL、CHS、CHI、F3Hs等结构基因和Vlmyb A1-1、Vvmyb A1等调节基因的转录表达上调。本研究结果为巨峰葡萄有机基质栽培技术的应用与推广提供了理论依据。     

鸡胸软骨硫酸软骨素的提取及分离纯化

为优化硫酸软骨素的提取工艺和初步分析其结构,采用中心组合设计和响应面分析优化鸡胸软骨硫酸软骨素的酶法提取工艺,三氯乙酸除蛋白质、乙醇沉淀以及柱色谱精细纯化得到高纯度硫酸软骨素,并采用高效凝胶过滤色谱判定其纯度,红外光谱和核磁共振初步分析其结构。结果表明,硫酸软骨素的最佳提取工艺参数为温度55.68℃,pH值为6.40,时间为3.85 h,葡萄糖醛酸和硫酸软骨素提取率分别达到9.82%和28.05%。高效凝胶过滤色谱分析其纯度为99.01%。红外光谱和核磁共振显示硫酸软骨素主要是4硫酸化软骨素。     

黄芩中黄芩甙和黄芩素提取、分离纯化的研究进展

黄芩甙和黄芩素是中药黄芩的主要有效成分,其具有广泛的药理活性.除传统意义上的抗炎、抗病毒及解热和保肝作用外,近年来对其抗氧化、抗HIV-1病毒的研究日趋深入.本文综述了黄芩甙和黄芩素的提取、分离纯化的研究进展,并对各种方法进行了分析和评述,指出了以往工艺的不足和存在的问题,提出了今后的设想及展望.     

基于酸化甘油的草莓花色苷提取与储存工艺优化

为提高草莓花色苷的提取效率和储存稳定性,该研究通过酸化甘油体系与探针脉冲超声相结合,优化草莓花色苷的提取工艺。采用UPLC-Triple-TOF/MS鉴定花色苷;在高温和光照条件下探究花色苷的稳定性;并利用分子动力学研究酸化甘油提取和储存草莓花色苷的内在机制。结果表明,在最佳条件：甘油浓度为26%（v/v）,温度为67 ℃,液料比为34 mL/g,超声时间为53 min下,花色苷得率为902.41 ± 0.84 μg/g ;酸化甘油提取液中含有飞燕草素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-葡萄糖苷、天竺葵素-3-葡萄糖苷和锦葵色素-3-葡萄糖苷4种花色苷。酸化甘油体系能够显著提高花色苷在高温和光照条件下的稳定性。酸化甘油体系具有较大的扩散系数（0.57 m²/s）、平均氢键数量（406个）以及较小的非共价相互作用能（-1798.85 kcal/mol）。综上所述,通过酸化绿色溶剂甘油可以更高效地从草莓中提取并储存花色苷。     

杨梅澄清汁及浓缩汁中花色苷热降解动力学的研究

杨梅花色苷易受温度、pH值等因素的影响而发生降解,是导致产品外观品质变劣的主要原因。本文研究了杨梅澄清汁及浓缩汁内花色苷在不同pH值和不同加热温度下的热稳定性。花色苷降解动力学数据的分析结果表明：杨梅花色苷热降解属动力学一级反应,随着pH值和温度的升高,杨梅花色苷降解的半衰期(t_1/2)和热降解活化能(Ea)显著下降,即花色苷的降解速度增大;同一处理条件下,浓缩果汁的t_1/2明显低于澄清汁。而反应速率常数k和Ea值大于澄清果汁,说明澄清汁花色苷的热稳定性优于浓缩汁。     

荔枝低分子量多糖的分离纯化及抗氧化吸湿保湿性能分析

为进一步开发和利用荔枝中的多糖成分,该文对荔枝低分子量多糖组分进行分离纯化,并对其理化性质、抗氧化和吸湿保湿性进行研究。采用超声波辅助提取、分级醇沉、DEAE-cellulose 52和Sephadex G-100柱分离纯化荔枝多糖;紫外-可见光谱扫描法、比旋光度法、渗透凝胶色谱法3种方法验证纯度;高效凝胶渗透色谱法测定相对分子量,高效阴离子交换色谱测定单糖组成;清除DPPH自由基和羟基自由基评价体外抗氧化活性;体外法测定吸湿保湿性。结果表明:荔枝多糖经分离纯化后获得组分荔枝多糖PLC-1,经3种方法验证PLC-1为精多糖,相对分子量为2.35×104 Da,是由半乳糖、鼠李糖、葡萄糖组成,摩尔比为:1.00∶3.52∶5.89。抗氧化活性研究结果表明PLC-1对DPPH和羟基自由基呈良好的量效关系,半数清除浓度IC50分别为0.41和0.31 mg/m L。吸湿保湿性的结果表明,PLC-1具有良好的吸湿和保湿性,在32 h时的吸湿率为58.3%,32 h时的失水率为45.3%,荔枝多糖PLC-1为具抗氧化和吸湿保湿活性的多糖,研究结果可为荔枝的深加工和进一步研究开发提供一定的理论基础。     

鸡胚血液原始生殖细胞的分离纯化及鉴定

家禽的原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)是形成精子和卵子的前体细胞,可在性成熟的家禽体内生成精子和卵子,因此家禽PGCs可应用于以PGCs为基础的现代保种技术、转基因技术以及家禽的发育生物学等研究领域,具有重要的科研与应用价值。本研究使用Nycodenz密度梯度离心法在孵化至13~15期的鸡(Gallus gallus)胚血液中分离纯化鸡胚的PGCs,经显微注射针分拣后,PGCs的纯度可达99%以上,细胞直径主要集中于13~15μm;将所分离纯化的PGCs分别通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)染色、高碘酸希夫氏(periodic acid-schiff,PAS)染色及阶段特异性胚胎表面抗原-1(stagespecific embryonic antigens-1,SSEA-1)免疫化学染色进行鉴定,染色结果均出现PGCs所特有的反应;使用活细胞荧光染料PKH26对分离纯化的PGCs进行标记,成功标记的PGCs在荧光显微镜下可观测到红色荧光,将约200个标记后的PGCs,通过腹主动脉注入孵化至14~16期的受体鸡胚中,在孵化至第8天的鸡胚性腺冷冻切片中,可检测到供体PGCs的存在,这一结果表明,所分离纯化的PGCs可定植于受体鸡胚的性腺中。本研究为以PGCs为基础的种质资源保存研究以及转基因技术研究提供了基础资料。     

刺葡萄愈伤组织UFGT基因克隆及表达分析

为从细胞水平上揭示刺葡萄3-O-类黄酮葡萄糖基转移酶(UFGT)基因调控花青素合成的功能,以刺葡萄愈伤组织为试验材料,根据刺葡萄愈伤组织转录组UFGT序列片段,利用RT-PCR结合RACE技术克隆得到VdUFGT基因,并对其进行生物信息学和表达特性分析。结果表明,VdUFGT基因cDNA和DNA开放阅读框(ORF)分别为1 371 bp和1 448 bp,包含2个外显子和1个内含子,编码456个氨基酸,为带负电荷的不稳定的亲水性蛋白,具有一个UDPGT结构域,是UDPGT超家族成员,包含UDP-黄酮糖基转移酶特征区域。由UFGT同源基因编码蛋白所构建的系统发育树,与植物进化的关系相一致,6个葡萄属植物聚为一支。RT-qPCR分析表明,刺葡萄红色愈伤组织VdUFGT转录水平极显著高于白色愈伤组织,培养25 d的2个细胞培养物差异可达79倍;在刺葡萄愈伤组织连续培养过程中,红色愈伤组织中VdUFGT转录水平变化幅度较大,在愈伤组织快速生长中期和衰老初期分别出现峰值,而刺葡萄白色愈伤组织VdUFGT转录水平与红色愈伤组织相比变化幅度不大,且始终维持在一个较低的水平。说明VdUFGT对刺葡萄红色愈伤组织细胞培养物中的花青素生物合成有重要的调控作用,这种调控作用主要发生在刺葡萄愈伤组织细胞快速生长中期和细胞衰老初期。本研究结果为进一步阐明VdUFGT调控刺葡萄细胞花青素合成的机制奠定了理论基础。     

树脂法精制沙棘籽原花色素的研究

为纯化沙棘原花色素,本文对16种不同类型树脂进行沙棘原花色素静态吸附试验、动态吸附和解吸性能的比较,筛选出对沙棘原花色素有较好分离纯化效果的4种树脂,比较不同洗脱级分中原花色素的含量,最后筛选出D3520大孔树脂为符合提纯要求的最适合的树脂;采用该树脂,用30%乙醇洗脱,原花色素产品纯度达96.5%,得率为30.4%。     

牛骨蛋白与多糖的逐级提取及分离方法研究

为确定牛骨中蛋白质和多糖的提取及分离方法，该文在分析骨胶原蛋白和多糖存在状态的基础上，分别利用不同溶剂探讨了牛骨中蛋白质与多糖的逐级提取方法。首先碱性蛋白、酸性蛋白分别被0.6 mol/L KCl和0.5 mol/L K-P(K₂HPO₄/KH₂PO₄)溶液提取出来；0.1 mol/L HCl脱钙时溶解出酸性、中性及碱性蛋白，再经过NaOH中和后，酸性蛋白随羟基磷灰石沉淀、中性及碱性蛋白存留在上清液中；其他在胶原纤维上的有机物被0.5 mol/L NaCl和1% Na₂CO₃分别提取出来。各级提取有机物用SDS-PAGE电泳以及Stains All染色法、阿里新兰染色和CBB染色进行检测。利用DEAE-葡聚糖凝胶离子交换树脂有效地将碱性蛋白、酸性蛋白和多糖分离精制。     

养殖污水中蛋白核小球藻的分离鉴定及其污水处理效果

利用BG-11培养基从养殖污水中分离和筛选到小球藻,采用相差显微镜对其外部形态进行观察、傅里叶红外光谱分析球藻组成、X-ray方法分析其晶体组成、凯氏定氮以及有机溶剂萃取方法分别测定其蛋白质以及脂质含量、丙酮萃取法测定其叶绿素a以及国标法测定其处理污水效果。结果表明:根据相差显微镜对球藻外部观察,初步判断该小球藻为蛋白核小球藻;红外光谱测定结果表明,在波数1 080和1 240 cm~(-1)处均有明显的吸收峰,证明了该研究分离的小球藻含有大量蛋白质以及糖类和脂类成分;X-衍射分析结果显示在32°和20°两处均有明显的吸收峰,证明了本研究分离的小球藻含有蛋白质和脂类成分;定量成分测定表明该蛋白核小球藻蛋白质量分数为45.6%,脂质质量分数为8.1%;污水处理结果为化学需氧量去除率为70.9%;总氮、总磷去除率分别为23%和34.7%。该研究对蛋白核小球藻蛋白含量、脂肪含量的测定以及提取进行了分析,证明了蛋白核小球藻对养殖场污水的处理具有很好的效果,为生物新资源的开发以及水环境治理提供了一定的参考。     

小叶女贞果实花青素组分鉴定及色谱纯化技术

为提高小叶女贞果实的食用、药用价值,该文系统研究了果实中花青素种类构成及提取物的制备技术。试验采用紫外可见光谱法、高效液相色谱-质谱串联法、酸水解制备苷元等技术对小叶女贞果实花青素含量、单体种类进行了测定,并借助提取、萃取、柱层析等技术研究了花青素提取物的分离纯化过程。研究结果如下:测得每100 g小叶女贞果实中含花青素总量为(499±18.42)mg,从中鉴定出2种花青素单体,分别为矢车菊素-3-O-葡萄糖苷和牵牛花色素-3-O-葡萄糖苷,并以后者为主要存在形式;获得了纯天然、简单易行的花青素提取物制备技术,主要包括酸化乙醇提取、乙酸乙脂萃取、Amberlite XAD-7HP大孔树脂层析分离步骤,最终制得的花青素提取物纯度为35%、得率为0.6%。该研究为后期制备高纯度牵牛花素-3-O-葡萄糖苷单体提供了良好原料基础,为深入研究小叶女贞果实花青素功能活性及其在食品、药品领域潜在应用提供了参考。     

裙带菜中褐藻糖胶的提取纯化及其组成的研究

该实验优化了裙带菜褐藻糖胶的提取工艺,对粗多糖进行了分离纯化,并研究了各组分的单糖组成和硫酸根含量。利用响应面优化法,依据二次回归分析确定裙带菜褐藻糖胶的最佳提取工艺为：提取温度76℃,提取时间2.5 h,料液比1︰6.5。在此条件下提取2次,粗多糖的提取率可达到7.53%。提取的粗多糖用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析分离纯化,共得到5个峰,干燥后得到5个组分。用硫酸钡比浊法测定5个组分的硫酸根含量分别为8.3%、19.2%、30.1%、38.4%和33.0%。糖腈乙酸酯衍生物气相色谱测得各组分的单糖组成分别为：组分1主要含有甘露糖和半乳糖;组分2主要含有鼠李糖,岩藻糖,木糖,甘露糖,葡萄糖和半乳糖;组分3主要含有鼠李糖,岩藻糖和甘露糖;组分4主要含有岩藻糖和半乳糖;组分5主要含有岩藻糖,甘露糖和半乳糖。     

葡萄籽中水溶性钙结合蛋白的分离和鉴定

为了开发植物源葡萄籽补钙制剂,该研究通过亚细胞定位试验表明,葡萄籽的胚乳中含有大量的钙元素。通过电泳分析发现,葡萄籽的水溶性蛋白包括2种主要成分,其中一种是11 S球蛋白(蛋白质B),也是最主要的钙结合蛋白,另一种是表观分子量为670 k Da的蛋白质A。在蛋白质组成相同的情况下,用传统的碱溶酸沉法来分离葡萄籽蛋白会导致大量的钙流失。但用30%~50%硫酸铵沉淀法得到的蛋白质得率是(22.5±0.02)g/kg,蛋白质中钙质量分数(3.47%)是碱溶酸沉法(1.11%)的3倍。该研究结果为食品工业中矿物结合蛋白质的分离纯化提供参考。     

大孔树脂分离纯化柚皮黄酮的研究

该文以总黄酮含量和总黄酮回收率为考察指标，研究了大孔树脂分离纯化柚皮黄酮的工艺。结果表明：AB-8型树脂对柚皮总黄酮有较好的吸附分离性能，是分离纯化柚皮黄酮的适宜大孔树脂；AB-8型大孔树脂分离纯化柚皮黄酮的最佳工艺条件为：柱体积为160 mL，柚皮提取物上样量为62.5 mg/mL(以湿树脂体积计)，先用pH 4的水淋洗，再用30%的乙醇洗脱，洗脱剂用量为2.5～3倍湿树脂体积。AB-8大孔树脂按上述确定的吸附洗脱条件可重复使用3次。柚皮黄酮经上述工艺纯化后总黄酮含量达到39.67%，总黄酮回收率为62.48%。对经AB-8大孔树脂纯化后的柚皮黄酮进行高效液相色谱(HPLC)分析发现，柚皮黄酮主要为黄酮甙类。