大蒜未受精子房离体诱导单倍体的研究

 以苍山大蒜品种‘糙蒜’为试材,通过花茎离体培养获得发育健壮的花器官。以其未受精子房为外植体进行离体培养,研究不同培养基（MS、B5、N6）及外源植物生长调节剂对单倍体诱导的影响,以建立大蒜单倍体诱导体系。结果表明,诱导未受精子房产生愈伤组织的适宜培养基为B5 + 2 mg · L^-1 6-BA + 1 mg · L^-1 NAA,愈伤组织及雌核发育胚总诱导率可达12.24%;诱导愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为B5 + 3 mg · L^-1 6-BA + 1 mg · L^-1 NAA,不定芽分化频率可达46.15%;将不定芽转移至B5 + 0.05 mg · L^-1 NAA培养基中可诱导生根,发育成完整植株。以再生植株叶片为材料,采用流式细胞仪进行倍性鉴定,所得18株再生植株中有16株为单倍体植株。     

西瓜未受精胚珠的离体培养

以‘西农9号’和‘蜜桂’为供试材料进行了西瓜未受精胚珠的离体培养,研究了供体植株的黑暗热激处理、基因型、不同取样时间、2,4-D浓度和不同激素浓度组合等因素对其芽点诱导率的影响。结果表明:西瓜未受精离体培养以33℃的条件下黑暗热激4 d时效果最佳;CPPU处理3 d的胚珠诱导率最高;‘西农9号’在2.0 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA的条件下芽点率最高为13.3%,‘蜜桂’在3.5 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+0.2/0.5 mg·L-1NAA,3.0 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA的条件下芽点诱导率最高均为6.7%。     

甜瓜未受精子房或胚珠离体培养研究进展

该研究综述了影响甜瓜未受精子房或胚珠离体培养获得再生植株的若干因素,以及再生苗的倍性鉴定方法,对甜瓜未受精子房或胚珠离体培养上亟待解决的问题做了初步的阐述分析,以期为进一步的探究提供参考。     

离体雌核发育诱导洋葱单倍体与植株再生

 以来自日本的3个中日照型洋葱（Allium cepa L.）杂交种的未开放花蕾为外植体材料,研究了2,4-D和6-BA浓度及配比对单倍体诱导培养的影响,以建立洋葱单倍体诱导技术体系。研究结果表明,含有1.5 mg · L^-1 2,4-D + 1.5 mg · L^-1 6-BA和2.0 mg · L^-1 2,4-D + 2.0 mg · L^-1 6-BA的B5培养基适于洋葱单倍体的诱导,诱导率最高达到4.00%。共获得了43枚雌核发育胚,雌核发育胚转移至不含激素的B5基本培养基中即可发育成完整植株,再生植株驯化移栽成活率达到100%。利用根尖染色体计数和流式细胞仪鉴定有42株是单倍体。     

西瓜未受精胚珠离体培养若干影响因素的研究

为探讨适宜的西瓜未受精胚珠离体培养方法,以‘大果黑美人’、‘早春翠玉’、‘中科6号’等为试材,研究了供体植株的基因型、4℃预处理时间、35℃高温预培养时间及植物生长调节剂对未受精胚珠的反应率和愈伤诱导率的影响。结果表明:不同材料(基因型)的胚珠反应率和愈伤诱导率都有显著性差异,愈伤诱导率最高的是‘中科6号’(92.3%),最低的是野生西瓜‘09005’(57.2%);4℃低温预处理没有显著提高胚珠反应率和愈伤诱导率,对于胚珠反应率和愈伤诱导率的影响因培养基不同而不同;35℃高温预培养可以提高胚珠反应率和愈伤诱导率,预培养3 d可以得到较高的愈伤诱导率和质量较好的愈伤组织;在诱导培养基MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 3 mg·L-1+TDZ0.05 mg·L-1上,愈伤诱导率最高为84.64%;植物生长调节剂TDZ相对于2,4-D和KT对西瓜未受精胚珠愈伤诱导的效果较好。     

西瓜未受精子房离体培养技术

西瓜未受精子房离体培养作为单倍体育种的有效方法,可极大提高育种效率。以西瓜‘早佳’未受精子房为试材,对西瓜未受精子房出胚率的影响因素进行了研究,并鉴定了再生植株倍性。试验结果表明,栽培季节对西瓜未受精子房离体培养有很重要的影响,在相同的培养条件下,秋季栽培出胚率可达21.33%,高出春季栽培约6%;取材当天的日最低、最高气温对西瓜未受精子房离体培养出胚率也有一定的影响,在21～35℃范围内日平均出胚率均可达10%,显著高于过低或过高气温下统计的出胚率;4℃低温预处理并不能提高西瓜胚状体诱导效率。利用染色体计数法与流式细胞仪鉴定36棵再生植株倍性,单倍体率为97%、二倍体率为3%。     

黄瓜未授粉子房离体培养条件的优化及植株再生

为优化黄瓜未授粉子房培养高频胚诱导体系,以9个不同黄瓜基因型为试材,对影响未授粉子房培养胚发生和植株再生的因素进行研究,并对再生植株的倍性和同质性进行检测。结果表明,不同基因型之间出胚率差异显著,其中SG033出胚率最高,达95.93%,SG035出胚率最低,为8.15%;杂交种的胚胎发生能力显著高于产胚能力弱的亲本。在不同因素组合的处理中,处理11(秋季播种,定植于塑料大棚,盛花期取样,以开花前1 d的未授粉子房为外植体,4℃预冷处理4 d,接种于诱导培养基MS+0.08 mg·L^-1TDZ+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂,35℃热激暗处理2 d)的出胚率最高,比处理6、14、3分别提高了12.96%、30.00%、30.74%。采用形态学观察、流式细胞检测和SSR验证再生植株,分别获得了单倍体、二倍体、双单倍体及三倍体。综上所述,将产胚困难的黄瓜材料与产胚能力强的材料杂交后,用处理11进行子房培养能明显提高低出胚材料的诱导率。     

蝴蝶兰未受精胚珠离体培养的研究

 以蝴蝶兰大孢子母细胞时期的胚珠为外植体进行了离体培养的研究。结果表明, 在VW +BA0.2 mg·L ^{- 1} +NAA 0.2 mg·L ^{- 1} +蔗糖2.0% +植物凝胶0.3%中蝴蝶兰的大孢子母细胞可以发育至二核胚囊; 在VW +BA 0.2 mg·L ^{- 1} +NAA 0.2 mg·L ^{- 1} +蔗糖2.0% +植物凝胶0.3% +椰子汁10%中大孢子母细胞可以发育至四核胚囊或形成胚性细胞团, 这些胚性细胞团有可能发育成单倍体植株。     

黄瓜未授粉子房离体培养获得胚囊再生植株

以7种F1代黄瓜(Cucumis sativus L.)未授粉子房为试材进行再生植株培养,通过石蜡切片观察、激素含量测定探究胚囊再生植株形成过程及相关生理变化。结果表明:在MS+0.06 mg·L^-1 TDZ培养基中有3个供体黄瓜材料未授粉子房获得再生植株,经流式细胞检测、染色体计数、SSR验证分别为单倍体、双单倍体和同源四倍体。MS+0.04 mg·L^-1 TDZ+1.0 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA+12mg·L^-1 AgNO₃培养基中子房产生大量胚状结构,但分化培养后没有获得再生植株。石蜡切片观察到在MS和MS+0.06 mg·L^-1 TDZ培养基中培养5 d和17 d时胚囊已经发育。供体黄瓜子房切片中GA、IAA含量随培养天数增加呈现先降低后升高的趋势,在培养8 d时最低,17 d时GA含量比2 d时更高,IAA含量无明显变化。     

培养基中添加物浓度对西葫芦单倍体诱导的影响

以2种基因型的西葫芦一代杂交品种为试材,进行未受精子房切片和胚珠的诱导培养,以期建立西葫芦单倍体诱导体系。研究结果表明:添加物的浓度对胚状体诱导率存在显著影响,并找到最适的浓度。     

黄瓜未授粉子房离体培养的研究进展

根据近年来国内外黄瓜未授粉子房离体培养的最新研究进展,主要对离体培养至成苗过程中的主要影响因素进行了全面总结、对比和分析,讨论了目前该技术在黄瓜育种应用上存在的问题及展望,以期对黄瓜分子育种技术提供丰富的理论支持。     

桔梗胚珠培养初报

通过把从4种不同长度桔梗花蕾中取出的未受精胚珠接种在4种不同组合的培养基上诱导愈伤组织,并把诱导的愈伤组织转接到分化培养基上,试图得出单倍体植株。结果表明:诱导率最高(82.9%)的培养基组合是N6+2,4-D1mg/L+6-BA0.2mg/L;从长度为1.8cm花蕾中取出的胚珠诱导率最高(82.4%);在N6+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L分化培养基上最高分化率可达74.5%;经根尖压片检查染色体数目的结果,分化的绿苗中细弱的植株是单倍体植株。     

番茄雌核发育诱导及胚珠植株再生研究初报

番茄单倍体培养技术的建立对于番茄育种、分子标记、遗传图谱构建、基因定位、基因克隆等均有极其重要的意义。目前诱导番茄雄核发育——花药和小孢子培养是获得单倍体的主流技术,但未获得理想的结果。作者探索另一条获得番茄单倍体的途径——诱导雌核发育,目前已从离体胚珠获得大量愈伤组织,并获得一再生植株,其来源有待鉴定,现将方法报道如下。     

草莓未受精子房离体雌核发育的研究

 将凤梨草莓（Fragaria × ananassa Duch.）品种‘明旭’未受精子房在适宜离体条件下培养,诱导其雌核发育。在雌核发育的不同时期采用爱氏苏木精整体染色—石蜡切片法、整体染色—冬青油透明—石蜡切片法、解剖—整体透明法观察研究,结果表明雌核发育有3种不同的现象：①卵细胞启动分裂形成原胚,即卵细胞孤雌生殖;②偶尔有反足细胞启动分裂形成细胞团,但进一步发育的方向不清楚,很难形成胚体,未发现助细胞的无配子生殖;③个别极核分裂形成少数类胚乳游离核、游离核集团或胚乳状细胞结构等自发胚乳。胚的形态表现多样,可划分为典型胚、具畸形细胞胚和愈伤组织化胚。但无论哪种胚均是卵细胞孤雌生殖的结果;典型胚的发育和体内正常胚胎发育途径相似;胚囊植株主要经典型胚发育而成。具畸形细胞胚和愈伤组织化的胚很难形成胚囊植株。     

黄瓜游离小孢子培养诱导成胚和植株再生

 以10个不同基因型黄瓜为试材进行游离小孢子培养,通过对成胚条件的系统研究,从‘7447’和‘Poinsett97’中获得了子叶形胚和再生植株。研究结果表明：基因型和小孢子发育时期是限制黄瓜游离小孢子成胚的关键因子。不同品种间胚状体产量差异显著,每皿产胚1.5～33.4个。单核靠边期是进行黄瓜游离小孢子培养的最佳时期。低温预处理有利于胚状体的诱导,4 ℃预处理2～4 d为宜,以处理2 d时胚状体产量最高。外源激素在诱导胚状体时并非必需,但低浓度的外源激素（0.5 mg·L^-1 2,4－D、0.2 mg·L^-1 6－BA）更能促进小孢子成胚。NLN和B5两种基础培养基在诱导胚状体上无显著差异。子叶形胚易分化成苗,而其它类型的胚状体不能获得再生植株。     

叶籽银杏叶生胚珠的发育组织化学研究

 采用树脂半薄切片技术对叶籽银杏叶生胚珠生长发育各阶段进行观察及组织化学分析。结果表明：（1）叶生胚珠发端期在叶片上表现为“突起”状态,其结构主要为维管束、薄壁细胞和分泌腔;其内中央淀粉粒少,与叶缘结合处淀粉粒多,淀粉粒小且沿细胞壁分布。（2）叶生胚珠雌配子体的发育经历了游离核阶段和细胞化阶段;游离核阶段雌配子体呈液体状态;细胞化初期,雌配子体内是大的薄壁细胞,无淀粉粒、脂肪和蛋白质的分布;随后淀粉粒渐多;细胞化后期淀粉粒进一步增多,变大,且有黑色脂滴在细胞壁附近。（3）胚乳发育阶段,细胞中积累淀粉粒,蛋白质增多,营养物质中心密集,边缘稀疏。（4）雌配子体游离核阶段开始有外珠被和中珠被的分化;7月上旬叶生胚珠出现明显的内珠被。（5）中珠被与内珠被间中隐线上方有一“锥状”结构,外珠被和中珠被间有较多的淀粉粒。     

黄瓜未授粉子房诱导出胚和再生植株的研究

以7个不同黄瓜基因型为材料进行黄瓜未授粉子房的培养研究,结果表明,不同基因型出胚率差异显著,其中密刺型黄瓜北京102出胚率最高,达25.3%,鄂黄3号出胚率最低,为0.7%。以北京102、中农26号和津优1号为试材进一步研究热激诱导、外源激素、植株不同生长阶段对胚状体诱导产量的影响,发现35℃热激处理2d胚状体产量最高,分化培养基中NAA为0.20mg·L-1、6-BA为0.8mg·L-1时最易分化出胚,在植株第21~30节位采收的子房出胚量最高。再生培养基中GA浓度达到0.4~0.8mg·L-1时,可有效打破再生植株"花打顶"现象从而提高植株再生率。再生植株中二倍体植株比率为70.0%,二倍体植株中DH株比率为84%。     

葫芦科蔬菜作物单倍体材料创制的研究进展

葫芦科作物单倍体诱导有离体雄核发育和雌核发育两种途径。其中离体雄核发育途径(即花药或花粉培养)创制单倍体较为困难,雌核发育途径中的离体未授粉子房或胚珠培养及辐射花粉授粉技术诱导单倍体有较多成功的报道。本文综述了葫芦科蔬菜作物单倍体创制的研究进展,并简要地展望了应用前景。