中药防风对胃癌SGC-7901细胞生长及基因表达的研究

目的研究中药防风对胃癌SGC-7901细胞生长及基因表达的影响．方法应用集落形成实验、MTT实验及电子显微镜技术观察了防风对SGC-7901细胞生长的影响;应用免疫组织化学染色技术研究防风对SGC-7901细胞基因表达的影响．结果防风对SGC-7901细胞的生长曲线、集落形成有明显的抑制作用,其抑制作用与防风的浓度和时间呈正相关关系,其IC50值为24g／mL．防风能使SGC-7901细胞p16和p21编码基因的蛋白表达上调,PCNA,C—Met编码基因的蛋白表达下调．结论防风能抑制SGC-7901细胞生长;防风可使SGC-7901细胞的p16,p21,PCNA,C—Met表达改变．这些结果为防风在临床上的进一步应用提供了理论依据．     

蜂王浆蛋白体外消化产物对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响及其可能机制

通过研究蜂王浆蛋白体外消化产物对胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制,为蜂王浆蛋白辅助治疗胃癌奠定实验基础。采用碱提酸沉法提取蜂王浆蛋白,并通过体外模拟消化实验得到蜂王浆蛋白体外消化产物,然后用不同质量浓度的蜂王浆蛋白体外消化物诱导体外培养的胃癌细胞SGC-7901,通过倒置显微镜观察其对胃癌细胞形态的影响,并通过集落形成实验检测诱导后胃癌细胞的集落形成能力;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测其对胃癌细胞增殖的抑制作用,通过流式细胞术检测细胞周期及凋亡,并通过蛋白质印迹法检测其诱导后胃癌细胞中p53和PARP-1蛋白的表达情况。结果表明:蜂王浆蛋白体外消化产物使胃癌细胞形态发生皱缩,细胞密度降低,集落形成能力降低(P0.05),对胃癌细胞SGC-7901的增殖具有抑制作用。0.2 mg/mL体外消化产物经24 h和48 h培养后对胃癌细胞抑制率分别达到(57.58±3.48)%和(62.84±1.98)%(P0.05)。与空白对照组相比,蜂王浆蛋白体外消化产物对SGC-7901细胞增殖的抑制作用呈剂量依赖性,S期细胞减少,从而引起细胞凋亡;且经蜂王浆蛋白体外消化产物诱导后,胃癌细胞中p53蛋白表达量增加(P0.05),PARP-1蛋白表达量减少(P0.05)。说明蜂王浆蛋白体外消化产物能抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖并诱导其发生凋亡,其机制可能与p53表达上调和PARP-1表达下调有关。     

SIRT1在5-FU耐药胃癌细胞中的表达及其对细胞化疗耐药的影响

目的探讨沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)在5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)耐药胃癌细胞(SGC-7901/5-FU)中的表达情况及其对细胞化疗耐药的影响。方法通过定量RT-PCR和Western blot方法检测SIRT1 mRNA与蛋白在5-FU敏感的SGC-7901亲本细胞、SGC-7901/5-FU细胞及在SIRT1-siRNA转染后的SGC-7901/5-FU细胞中的表达;选择高干扰效率的SIRT1-siRNA转染SGC-7901/5-FU细胞,CCK8法检测5-FU对转染细胞的活性影响,流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响,Western blot法检测其对细胞p-Akt、Bax、Bcl-2和P-pg表达的影响。结果 SGC-7901/5-FU细胞中的SIRT1 mRNA与蛋白表达水平均显著高于SGC-7901亲本细胞(P0.001);SIRT1-siRNA转染SGC-7901/5-FU细胞后,SIRT1的mRNA与蛋白表达均显著降低(P0.001);5-FU作用后,SIRT1-siRNA转染组的SGC-7901/5-FU细胞增殖活性明显下降(P0.001),细胞凋亡明显增加(P0.001),且细胞中的p-Akt、Bcl-2和P-pg含量明显下降(P0.001),Bax含量明显上升(P0.001)。结论 SIRT1在5-FU耐药胃癌细胞中高表达,干扰SIRT1表达后可通过抑制细胞增殖与促进细胞凋亡来提高耐药胃癌细胞对5-FU的敏感性,这可能与细胞增殖通路相关蛋白、凋亡以及细胞多药耐药性相关蛋白变化相关。提示抑制SIRT1可作为降低胃癌多药耐药性及提高胃癌对化疗药物敏感性研究的一个新思路。     

花椒提取物对人胃癌细胞增殖及凋亡作用的研究

[目的]观察花椒提取物影响人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的作用。[方法]体外培养胃癌SGC-7901细胞,并用M1T法检测花椒提取物对肿瘤细胞生长的抑制作用;用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态改变,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。[结果]花椒提取物能显著地抑制胃癌SGC-7901细胞的生长,并且具有浓度、时间依赖性,且细胞有明显凋亡特征性改变。[结论]花椒提取物具有抗肿瘤细胞增殖和诱导其凋亡的作用,有潜在的抗肿瘤价值,值得进一步研究。     

吴茱萸碱与紫杉醇协同抑制胃癌细胞SGC-7901的研究

采用MTT法检测吴茱萸碱、紫杉醇单独作用和联合作用对胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制效果;用流式细胞术评价吴茱萸碱与紫杉醇联合作用于SGC-7901细胞后对其细胞周期分布和诱导凋亡的影响。结果表明:吴茱萸碱与紫杉醇对SGC-7901细胞具有明显的协同抑制作用,且均呈现良好的量效关系;吴茱萸碱明显的降低了紫杉醇的作用浓度,并提升了紫杉醇的G1期周期阻滞和细胞凋亡效果;Western-blot结果表明,二者联合激活了Casapse 3、8、9,进而诱导细胞凋亡。     

MTT法检测灰直纹螟-青钱柳虫茶对肿瘤细胞体外增殖抑制作用

为了获得优质的灰直纹螟-青钱柳虫茶以及明确其对人乳腺癌细胞MCF-7、胃癌细胞SGC-7901增殖抑制作用。用青钱柳叶片饲养灰直纹螟后,将其幼虫所排出的代谢物经过不同规格筛网筛选分离和紫外杀菌后获得优质虫茶,将获得的虫茶制备成不同浓度去处理体外培养的MCF-7和SGC-7901癌细胞,采用MTT法检测虫茶体外对MCF-7和SGC-7901癌细胞的增殖抑制作用。结果表明,灰直纹螟-青钱柳虫茶对人乳腺癌细胞MCF-7和胃癌细胞SGC-7901具有明显的抑制作用,但抑制效果并不完全相同,处理24 h后虫茶对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制效果更好。虫茶对人乳腺癌细胞MCF-7、胃癌细胞SGC-7901具有明显的抑制作用,其抑制率与浓度及处理时间呈正相关。     

12种竹笋蛋白对肿瘤细胞体外增殖的抑制作用

[目的]探讨不同种类竹笋蛋白的抗癌活性。[方法]采用植物活性蛋白提取试剂盒提取竹笋蛋白,CCK-8法检测不同浓度竹笋蛋白对胃癌细胞SGC-7901和结肠癌细胞HCT-116的增殖抑制作用,72 h后显微拍照记录细胞生长情况,并计算IC_(50)值。[结果]12种竹笋蛋白在体外均可强效抑制胃癌细胞SGC-7901和结肠癌细胞HCT-116的增殖,但抑制效果并不完全相同,在一定范围内,其抑制率与浓度呈正相关,呈现一定的剂量-效应关系。[结论]12种竹笋蛋白对肿瘤细胞,如胃癌细胞SGC-7901和结肠癌细胞HCT-116的增殖均有显著的抑制作用,为今后进一步研发竹笋源的低毒、高效的抗肿瘤药物奠定基础。     

九香虫及其伪品小皱蝽对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制比较

小皱蝽为九香虫的伪品,市场上常被作为九香虫销售。本实验旨在用MTT法检测九香虫和小皱蝽血淋巴对人胃癌SGC-7901细胞的增长抑制作用,比较二者对人胃癌SGC-7901细胞的体外增殖抑制作用。用九香虫和小皱蝽血淋巴分别作用于体外培养的SGC-7901细胞,测定其抑制率。结果表明,九香虫和小皱蝽对SGC-7901细胞皆有抑制作用,且抑制率随时间和浓度的增加而增加;相同浓度不同时间(24 h、48 h、72 h)和相同时间不同浓度(100 mg/L、200 mg/L、300 mg/L、400 mg/L)小皱蝽对SGC-7901细胞的抑制率皆高于九香虫。     

植物甾醇抑制SGC-7901胃癌细胞生长和诱导DNA损伤的研究

为确定和评价植物甾醇对胃癌细胞SGC-7901生长的影响,采用MTT法检测植物甾醇对SGC-7901细胞生长的抑制作用,AO/EB和DAPI染色观察细胞形态的变化,单细胞凝胶电泳检测植物甾醇对SGC-7901细胞DNA的损伤.试验结果表明,植物甾醇对SGC-7901细胞生长具有抑制作用,并呈现时间-效应关系,不呈现剂量-效应关系;植物甾醇处理5d后,细胞出现皱缩、密度变小等变化;AO/EB荧光染色后,细胞核成固缩状,出现凋亡小体等凋亡细胞形态;DAPI染色后,可见细胞核边缘不整等凋亡细胞形态;单细胞凝胶电泳实验结果表明,植物甾醇混合物处理5 d的细胞出现了彗星现象.植物甾醇对SGC-7901细胞生长具有抑制作用,诱导SGC-7901细胞DNA的损伤.     

MiR-133a-3p抑制人胃癌细胞的增殖、迁移及侵袭研究

实时定量PCR检测miR-133a-3p在正常胃黏膜细胞GES1和不同恶性程度的胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、AGS、HGC-27、BGC-823、MKN-45的表达。miR-133a-3p稳定转染人胃癌细胞系SGC-7901,MTT检测细胞增殖情况,划痕试验观察细胞迁移能力的改变,transwell试验比较细胞侵袭能力的改变。结果表明:正常胃黏膜细胞系中miR-133a-3p的表达显著高于6种胃癌细胞(P0.05),但其表达高低与分化程度差异不明显(P0.05)。miR-133a-3p转染SCC-7901细胞后,细胞增殖、迁移和侵袭能力明显降低(P0.05)。结果说明胃癌的发生发展与miR-133a-3p相关,miR-133a-3p可以作为潜在的胃癌诊断标志。     

三物白散对Survivin-RNA基因沉默转染胃癌SGC-7901细胞凋亡、迁移的影响

目的 探讨三物白散对Survivin-RNA基因沉默转染胃癌SGC-7901细胞凋亡、迁移的影响。方法 将实验分成6组：空白对照组、LV-RNAi 组、Survivin-RNAi-LV组、空白对照+中药组、LV-RNAi+中药组、Survivin-RNAi-LV+中药组;采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡,划痕实验检测各组细胞的迁移能力。结果 细胞凋亡率：Survivin-RNAi-LV组明显高于空白对照组和LV-RNAi组（P<0.05）;Survivin-RNAi-LV+中药组与空白对照+中药组、LV-RNAi+中药组比较明显较高（P<0.05）;Survivin-RNAi-LV+中药组高于Survivin-RNAi-LV组,差异具有统计学意义（P<0.05）。胃癌细胞的24 h迁移率：Survivin-RNAi-LV组明显低于空白对照组和LV-RNAi组（P<0.05）;Survivin-RNAi-LV+中药组与空白对照+中药组、LV-RNAi+中药组比较,其结果明显低于后两组（P<0.05）;Survivin-RNAi -LV+中药组与Survivin-RNAi-LV组比较,细胞迁移率明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 Survivin基因沉默转染,增强了三物白散诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡和抑制其迁移的作用。     

九香虫血淋巴对胃癌SGC-7901细胞体外增殖的抑制作用

为探究九香虫血淋巴对胃癌细胞SGC-7901体外增殖的抑制作用,本文以体外培养人胃癌细胞SGC-7901为材料,经九香虫血淋巴处理后,采用台盼蓝染色法检测细胞死亡率,并用倒置显微镜观察细胞形态学变化。结果表明:九香虫血淋巴能显著抑制胃癌细胞SGC-7901生长,且在浓度为5、10、20、30、40 mg/L时呈时间和剂量依赖性。     

九香虫血淋巴三种生物分子对胃癌SGC-7901细胞增殖影响

现代医学证明九香虫具有良好的抑癌抗癌作用。为了明确九香虫抑癌抗癌活性组份大类,采用超滤技术分离九香虫血淋巴小分子物质、60%丙酮沉淀蛋白质、醇提法提取多糖成分,通过MTT法检测三种生物分子对SGC-7901细胞的增殖影响。结果表明,在较高的作用浓度条件下,蛋白质提取物的增殖抑制活性显著高于小分子物质(P0.05),多糖提取物各作用浓度与无药对照相比均无明显的抑制活性,说明九香虫蛋白质组份是其抑癌抗癌的主要功能分子。     

FBXO31对肺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力的影响

目的 探讨FBXO31基因对肺腺癌细胞系A549增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力的影响.方法 通过脂质体转染法将FBXO31表达质粒及FBXO31 siRNA序列分别转染肺癌A549细胞,用Western blot、MTT、平板克隆、划痕和Transwell实验分别检测A549细胞中FBXO31蛋白表达、细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力.结果Western blot显示FBXO31表达质粒转染上调A549细胞中FBXO31蛋白表达,而转染siRNA下调FBXO31蛋白表达.FBXO31基因过表达增强A549细胞增殖、克隆形成、侵袭及迁移能力,而FBXO31基因沉默抑制细胞增殖、克隆形成、侵袭及迁移能力(P＜0.01).结论FBXO31基因可促进肺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力.     

接头蛋白LNK抑制胃癌细胞增殖和侵袭能力的研究

为分析人接头蛋白LNK(hLNK)对胃癌发生发展的影响,克隆并包装含hiLNK基因的重组慢病毒并感染人胃癌细胞株SGC-7901以建立稳定过表达hLNK的细胞系SGC-7901-hLNK(7901-hLNK);Western blot验证该稳转细胞系中hLNK的表达水平,平板克隆试验分析hLNK过表达对其增殖的影响;T...     

中和血小板源性生长因子对A549人肺癌细胞生长及迁移的影响

目的 探讨中和血小板源性生长因子(platelet-derived growth factors,PDGFs)对A549人肺癌细胞生长和迁移的影响.方法 PDGF中和性抗体作用A549细胞后,MTT法及乳酸脱氢酶释放试验检测细胞增殖;丹单酰磺尸胺及吖啶橙染色检测细胞自噬;DAPI染色及caspase 3活性试验检测细胞凋亡;划痕试验及Transwell试验分析细胞迁移;免疫印迹及酶联免疫吸附试验检测整合素αv和基质金属蛋白酶9的表达.结果 PDGFs抗体明显抑制A549细胞体外增殖,诱导细胞发生自噬和凋亡,但同时增强肿瘤细胞迁移能力及整合素αv和MMP9的表达水平,整合素抑制剂西仑吉肽可部分逆转该现象.结论 中和PDGFs可抑制A549肿瘤细胞体外生长但促进其迁移.     

番茄红素通过下调异柠檬酸脱氢酶1诱导胃癌细胞凋亡

目的 探究番茄红素对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制.方法 不同剂量番茄红素处理胃癌细胞株SGC-7901、MGC-803,用MTT法检测细胞增殖,Hoechst 33258染色、流式细胞仪检测细胞凋亡、线粒体膜电位(MMP)、活性氧(ROS),免疫印迹检测异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)、IDH2蛋白表达.结果 番茄红素呈剂量依赖性抑制SGC-7901、MGC-803细胞增殖.大于25 μmol/L番茄红素诱导SGC-7901细胞凋亡,增加ROS水平;50 μmol/L番茄红素降低MMP,下调IDH1蛋白表达(P＜0.01或0.05).结论 番茄红素可抑制胃癌细胞增殖、诱导凋亡;促凋亡机制可能是通过下调IDH1,阻断细胞ATP生成和提高细胞内ROS.     

大花君子兰总生物碱抗肿瘤作用的研究

采用MTT法观察大花君子兰总生物碱(简写为TACMR)对体外培养的人肺癌细胞NCI-H446、人胃癌细胞SGC-7901、人乳腺癌细胞MCF-7和人肝癌细胞SMMC-7721 4种细胞株的增殖抑制作用;用小鼠移植性肿瘤法检测TACMR对小鼠H22肝癌的生长抑制作用,并通过脾指数和胸腺指数等指标综合考察TACMR对肿瘤小...     

实时荧光定量PCR检测九香虫血淋巴液对肿瘤细胞凋亡相关基因表达的影响

为了检测九香虫血淋巴液对肿瘤细胞凋亡的影响,本试验制取2.45mg·L~(-1)、12.26mg·L~(-1)浓度的血淋巴液,将其分别作用至人乳腺癌MCF-7及人胃癌SGC-7901细胞,并采用实时荧光定量PCR方法对作用前后的肿瘤细胞凋亡相关基因表达进行检测。结果显示,经血淋巴液处理后的2种肿瘤细胞Caspase-9、Bax及Caspase-3基因表达和对照组细胞相比有明显上升,Bcl-2基因表达明显下降。     

血红铆钉菇子实体化学成分GC-MS分析及 石油醚萃取物抗肿瘤活性组分筛选

为了分析血红铆钉菇子实体的化学成分并对其石油醚萃取物进行抗肿瘤活性筛选。试验采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS),通过硅胶柱层析对石油醚萃取物进行组分分离,采用CCK-8法测定各组分对人肺癌细胞(NCI-H460)和人胃癌细胞(SGC-7901)的增殖抑制作用。结果表明,从血红铆钉菇子实体中共鉴定出60个化合物,占提取物总量的96.074%。主要以烷烃类、醛酮类、酯类、脂肪酸类为主,分别占13.503%、17.317%、17.777%、25.738%。石油醚萃取物经硅胶柱层析分离共得8个组分(A、B、C、D、E、F、G、H),其中组分(A、B、C、H)对人肺癌细胞(NCI-H460)有增殖抑制作用,组分(A、B、C、F、H)对人胃癌细胞(SGC-7901)有增殖抑制作用,并均呈浓度依赖性。组分(A、B、C、H)对人肺癌细胞(NCI-H460)的IC_(50)分别为790.46、842.05、876.12、1 479.55μg/mL,组分(A、B、C、F、H)对人胃癌细胞(SGC-7901)的IC_(50)分别为619.29、465.45、1 137.88、1 096.11、754.48μg/mL。说明通过对血红铆钉菇子实体GC-MS分析及抗肿瘤活性筛选,石油醚萃取物组分(A、B、C、F、H)具有一定的抗肿瘤活性,可能含有抗肿瘤活性的单体化合物。