籼粳杂交F1高效花药培养技术体系的建立

以黑壳子粳/苏御糯、铁杆青/苏御糯和薄稻/苏御糯3个籼粳杂交F1及其亲本和粳稻品种武运粳8号为试验材料,在M8基本培养基中,加入不同浓度的植物激素类物质和有机营养物,建立籼粳杂交F1高效花药培养技术体系.结果表明M8+2 mg·L-12,4-D+1 mg·L-1 NAA+0.2 mg·L-1 KT为最佳诱导培养基,籼粳杂交F1花药愈伤组织诱导率达4.1%～4.5%;在该培养基中添加水解酪蛋白或酵母提取物,能明显提高诱导率,增幅达20.5%～27.3%;M8+2.5mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 KT为最佳分化培养基,籼粳杂交F1的愈伤组织绿苗分化率达14.3%～25.0%.     

‘扎西玛’与‘南粳46’籼粳杂交F_1花药培养及再生体系的建立

为探索籼粳杂交水稻花药培养再生体系,以籼稻‘扎西玛’和粳稻‘南粳46’籼粳杂交F1花药为外植体,分别从低温预处理时间、基本诱导培养基种类、蔗糖质量浓度及不同激素配比方面研究花药愈伤组织诱导,并将诱导出的愈伤组织进行分化成苗,以期构建籼粳地理远源杂交水稻花药培养再生体系。结果表明,4℃处理2~5d的花药,其愈伤组织诱导率较高,与未处理和低温处理6~10d相比达到显著水平;添加蔗糖质量浓度为60g·L-1,以N6或M8为基本培养基均可以获得较高的诱导率;以M8为基本培养基,添加2,4-D 2mg·L-1和KT 0.3mg·L-1诱导水稻愈伤组织出愈率可高达32.14%;以MS为基本培养基,激素组合为KT 2mg·L-1和ABA 3mg·L-1分化培养基,其愈伤组织成苗率可达50%,其中绿苗分化率达4.55%。     

黄金络石的离体快繁体系的建立

以黄金络石（Trachelospermum asiaticum cv. Ougonnishiki）一年生茎段为外植体,研究了不同生长调节剂对黄金络石初代培养、增殖培养以及生根阶段的影响。结果表明,腋芽诱导最佳培养基为MS+06 mg·L-1 NAA +10 mg·L-16 BA+02 mg·L-1TDZ,腋芽诱导率达100%;愈伤组织诱导最佳培养基为MS+04 mg·L-1 NAA+10 mg·L-1 6 BA+10 mg·L-1 TDZ,愈伤组织诱导率达100%;最佳增殖培养基为MS+01 mg·L-1 NAA +25 mg·L-1 6 BA,增殖系数达67;最佳生根培养基为1/2 MS+01 mg·L-1 IBA +3%AC,生根率达95%。     

不同穗型籼粳杂交稻F1代花药培养条件的优化

以直立穗型沈农265粳稻与泸恢99籼稻杂交F1为材料,通过筛选与优化基本培养基种类、低温处理时间及激素成分等培养条件来建立高效花药培养体系。结果表明:经过7~11d的10℃低温处理的花药组织愈伤诱导显著高于未低温处理或其他处理时间的材料;以SK3或M8为基本培养基都可以获得较好的诱导率;以SK3为基本培养基,采用复合激素水平为2 mg.L-1 2,4-D+1 mg.L-1 NAA+0.2 mg.L-1 6-BA的愈伤组织诱导培养基获得最高23.22%的诱导率;以MS为基本培养基,复合激素水平为4 mg.L-1 KT+1 mg.L-1 NAA+0.5 mg.L-1 6-BA的分化培养基上获得最高70.66%的分化率。     

稻瘟病抗性品种云引籼粳交花药培养体系的建立

【目的】花药培养在不同培养基成分构成的条件下,诱导率和成苗率等都存在显著差异。通过优化培养基成分以及其他培养条件,提高云引籼粳杂交后代花药培养效率,为稻瘟病抗性品种云引的挖掘和利用奠定基础。【方法】以稻瘟病抗性粳稻品种云引作为母本,与常规籼稻品种粤晶丝苗进行杂交,F1代幼穗经过消毒后接种。根据不同基础培养基,碳源以及2,4-D质量设置了12种诱导培养基,经过比较出愈率、绿苗率、得苗率和花药培养力,进而确定最佳的培养条件。【结果】NB培养基的最高培养力仅为0.52%,而M8培养基的培养力0.90%～1.92%;以蔗糖为碳源的M8培养基早期出愈率可达到11.32%,添加1.0 mg·L-1 2,4-D和2.0 mg·L-1 2,4-D花药培养力相当,分别为1.89%和1.92%;而0.2 cm大小的愈伤组织进行分化时绿苗率最高,达到18.3%。【结论】云引籼粳交材料的最佳花药培养条件为:M8基础培养基,添加50 g·L-1蔗糖作为碳源和1.0～2.0 mg·L-1 2,4-D,当花药愈伤组织长至0.2 cm时转移至分化培养基分化。     

高留胚率水稻辽粳294成熟胚组织培养条件的优化

以高留胚率水稻辽粳294成熟胚为外植体,对影响高留胚率水稻愈伤组织诱导、分化的接种方式、培养基中激素水平进行研究。结果表明,用解剖刀在胚上纵切1刀后再将种子接在培养基上,种子灭菌彻底,愈伤组织诱导率高且质量较好。诱导培养基中激素6-BA和KT的浓度对愈伤组织的诱导率有极显著的影响,诱导培养基为N6+2 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT时,诱导率较高,可达90.0%;分化培养基为MS+0.8 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA时,绿苗分化效果好,分化率为73.0%。     

虎杖(Polygonum cuspidatum)茎尖愈伤组织诱导及高频植株再生

    以虎杖(Polygonum cuspidatum)茎尖为外植体进行离体再生研究,探讨苗龄、接种方式、不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖等对虎杖茎尖愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响.结果表明:愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+蔗糖28 g·L-1+琼脂5.5g·L-1+2,4-D 1.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1,诱导率为100%;3～7 d苗龄的虎杖茎尖愈伤组织诱导能力无显著差异,诱导率均达到95%以上,此后随着苗龄的增加,愈伤组织诱导能力快速下降,苗龄为12 d时愈伤组织诱导率只有55.6%;以正插(形态学下端插入培养基)方式接种的外植体愈伤组织诱导率显著大于反插(形态学上端插入培养基)和平放;不定芽分化最佳培养基为MS+AgNO3 4.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂6.0 g·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+TDZ0.8 mg·L-1,分化率为83.9%,增殖系数为7.63;生根培养基选用1/2 MS+蔗糖26 g·L-1+琼脂6.5 g·L-1+活性碳3%+IBA 0.2 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1,生根率为89.6%.用聚氟乙烯(PVF)透气膜封口比用聚乙烯(POLY)菌膜生根率明显提高(达到100%),生根明显提前.     

多叶苜蓿花药培养技术体系的建立

【目的】建立多叶苜蓿高效花药培养体系,获得再生植株,为苜蓿倍性、基因组学及分子生物学的研究提供基础材料。【方法】以淮阴苜蓿与多叶苜蓿品种飞马（Grandeur）杂交F1的花药为外植体,使用NB+2,4-D（0.5 mg•L-1）+NAA（0.3 mg•L-1）+6-BA（0.5 mg•L-1）+KT（3.0 mg•L-1）研究苜蓿现蕾后花药愈伤组织的诱导能力;利用正交设计L16（45）筛选适宜苜蓿花药愈伤组织分化的培养基;并用1/2B5和1/2MS添加不同浓度的NAA研究适宜的生根培养基。【结果】苜蓿现蕾后15—28 d愈伤组织诱导率达到最高,最高为82.79%。适宜苜蓿花药愈伤组织分化的培养基组合为BⅠ+ CH（200 mg•L-1）+2-IP（0.5 mg•L-1）+ NAA（0.2 mg•L-1）+ KT（1.0 mg•L-1）,分化率可达54.05%。不定芽在1/2 B5+NAA（0.3 mg•L-1）培养基上生根效果最好,生根率可达88.46%。【结论】成功建立了苜蓿高效花药培养体系,并获得再生植株。     

刺楸组培快繁及试管苗保存培养基的筛选

    以刺楸嫩叶柄为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基.结果表明,刺楸组织培养的不同阶段需要不同的培养基.最适的愈伤组织诱导培养基为C2D+6-BA(6-苄氨基腺嘌呤) 0.50 mg·L-1+NAA(萘乙酸)1.00 mg·L-1;愈伤组织增殖培养基为C2D+6-BA 0.50 mg·L-1+NAA 0.50～1.00 mg·L-1;愈伤组织诱导再分化培养基为C2D+6-BA 2.50 mg·L-1+KT(激动素) 4.50 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1;生根培养基为1/2 MS + IBA(吲哚丁酸) 0.10 mg·L-1+IAA(吲哚乙酸) 0.10 mg·L-1;试管苗保存培养基为1/5 MS+ABA(脱落酸) 2.50 mg·L-1.常温条件下,利用低营养促成休眠的方法在试管内保存刺楸种质可达44个月.     

籼稻材料特性和激素配比对花药培养效率的影响

以5个籼稻杂交组合F。的花药为材料,探讨诱导培养基和分化培养基中不同植物激素配比等因素对花药培养效果的影响。结果表明,诱导培养基中,激素浓度处理对籼稻花药的愈伤诱导率的影响有显著差异,最佳的诱导培养基激素组合为：2,4-D2．0＋KT1．0＋NAA3．0;愈伤诱导率达21．21％;分化培养基中,激素6-BA浓度为0．5mg·L^-1KT浓度为2．0mg·L^-1时,籼稻花药的愈伤平均绿苗分化率达到最大,为28．80％;不同的材料其愈伤诱导率和绿苗分化率存在显著差异。     

生根粉及植物激素在粳籼稻杂交花药培养中的应用研究

以典型粳籼交组合 (巴利拉×南京 1 1 ) F1 为试验材料 ,研究不同诱导培养基、分化培养基以及 ABT生根粉与其他植物激素配合使用对该组合进行花药培养的效应。结果表明 :源于含 2 ,4 -二氯苯氧乙酸 (2 ,4 -D)、α-萘乙酸 (NAA)、激动素 (KT)诱导培养基的愈伤组织 ,其绿苗分化率高于仅含 2 ,4 -D诱导培养基的愈伤组织 ;以 2 mg/L的 6-苄基氨基嘌呤 (6-BA)代替 KT组成的分化培养基可提高该组合的绿苗分化率 ;在 MS分化培养基中添加 5mg/L ABT生根粉可促进绿苗的分化。在 MS壮苗培养基中添加 5.0～ 7.5mg/L ABT生根粉可使再生植株生长矮壮繁茂 ,不定芽及次生根数目显著增加 ,并可提高再生植株移栽成活率。ABT生根粉、多效唑 (MET)、衣康酸衍生物 I(NCAI)以不同浓度配合使用 ,可用于调节试管苗根芽生长速度 ,以适应组织培养中不同时期对试管苗的不同要求     

山杏初代培养影响因素研究

以山杏幼嫩茎尖为外植体,研究在75%的酒精及75%酒精和升汞不同处理时间下,茎尖的污染率和成活率,以及不同植物生长调节剂配比下的诱导率和生长情况。结果表明,使用75%酒精(20 s)+01%HgCl2(3 min)处理山杏外植体成活率最高;6 BA可有效促进外植体的萌发,12 mg·L-1时萌发率最高。6 BA 12 mg·L-1与不同浓度的生长素IBA和NAA组合,可促进外植体的萌发生长,萌发率最高为9416%。山杏茎尖外植体初代培养最适宜的培养基为MS+6 BA 12 mg·L-1+IBA 10 mg·L-1。     

不同培养基和激素对辣椒花药培养的影响

选用试验前期筛选出的易产生愈伤组织和胚状体的8个不同基因型辣椒进行花药培养,对基本培养基成分、激素种类和浓度、材料基因型等影响花药培养的因素进行研究.结果表明:1)NTH培养基为适宜于辣椒花药培养的最佳培养基,MS和B5培养基次之.2)以NTH为基本培养基培养红艳花药,0.5 mg/L NAA +1.0 mg/L KT + 0.3 mg/L BA +1.0 mg/L 2,4-D是花药愈伤组织诱导培养最适宜的激素组合;0.3 mg/L NAA +1.0 mg/L KT + 0.1 mg/L BA是花药胚状体诱导培养最适宜的激素组合.3)在相同条件下,不同基因型辣椒花药培养后的愈伤组织诱导率和产胚率均不同,愈伤组织诱导率为8.0% ~ 23.5%,胚状体诱导率最高为2%,最低为零.     

不同激素及培养基对紫花苜蓿下胚轴愈伤组织诱导及植株再生的影响

以紫花苜蓿无菌苗下胚轴,在附加不同激素配比的改良MS和改良的SH培养基上诱导出愈伤组织并获得再生植株,建立了紫花苜蓿下胚轴离体快速繁殖体系。实验结果表明:适宜下胚轴愈伤组织诱导的培养基为改良的MS+KT0.5 mg·L-1+NAA 1 mg·L-1,出愈率高达100%;适宜愈伤组织再分化的培养基为改良的MS+KT1 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1,出苗率40.3%;适宜生根的培养基为1/2MS,生根率达63.4%。     

几个水稻粳型亲籼系成熟胚离体培养研究初报

对4个粳型亲籼系成熟胚离体培养特性研究的结果表明,种子贮存150d后的愈伤组织平均诱导率为82.02%,显著高于种子贮存20d后的诱导率(51.04%)。愈伤组织诱导率、愈伤组织质地结构、以及绿苗再生率在材料间表现出差异,其中材料间愈伤组织平均诱导率从高到低的顺序为G3004-4>G2605>G2417-2-1>G2416-3,材料之间绿苗再生率的顺序为G3004-4>G2416-3>G2605>G2417-2-1,表明供试的粳型亲籼系在S-b座位携带中性基因Sn比Si基因易于提高愈伤组织诱导率、改善愈伤组织质地结构,但S-b座位的基因型对绿苗再生率的影响不明显。不同培养基对各材料愈伤组织诱导率的影响不同,表现为在诱导培养基上添加1g·L-1水解乳蛋白和0.5g·L-1脯氨酸均能够显著提高G2417-2-1和G3004-4的诱导率;分化培养基上不同激素配比也影响其绿苗再生率。4个粳型亲籼系成熟胚离体培养特性类似于粳稻的培养特性。     

蟆叶秋海棠离体培养的研究

以蟆叶秋海棠(Begonia rex)的幼嫩叶片为外植体,采用L25(55)正交设计,研究了不同生长调节剂和培养基对愈伤组织诱导的影响.结果表明,培养基的类型对愈伤组织诱导的影响极大,生长调节荆对愈伤组织诱导有一定的影响,愈伤组织在不添加任何生长调节剂的培养基上即可进行分化.蟆叶秋海棠最佳愈伤组织诱导培养基组合为1/2 MS+0.5～1.5 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-16-BA+0.5～2.0 mg·L-1α-NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖,愈伤组织诱导率可高达100%.生根培养基为1/2 MS+0.2 mg·L-1α-NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖,生根率高达100%.     

紫花苜蓿愈伤成苗高频再生体系的建立及其影响因子的研究

 对秘鲁苜蓿等品种的子叶和下胚轴愈伤再生植株过程进行了系统研究。经筛选获得了以改良的SH大量元素 +MS微量元素及铁盐 +水解酪蛋白 +VB19.9mg·L-1+VB69.5mg·L-1+尼克酸 4 .5mg·L-1+琼脂 8g·L-1为基本成分的愈伤成苗高频再生体系。其中 ,诱导愈伤和保持愈伤的培养基加 2 .0mg·L-12 ,4 -D +0 .0 2 5mg·L-1KT ;诱导再生植株分化的培养基加 0 .4mg·L-1KT +2 0g·L-1的蔗糖 ;诱导生根的培养基为 1/ 2MS ,其中蔗糖浓度为 10 g·L-1。秘鲁苜蓿子叶愈伤组织分化率达 10 0 % ,下胚轴愈伤组织分化率达 92 %以上。以该体系完成苜蓿愈伤植株再生具有高效、快速的特点 ,完成植株再生仅需 6 0～ 70d。     

羊角槭愈伤组织诱导、增殖与分化

以羊角槭Acer yangjuechi幼嫩茎段和叶片为外植体,研究基本培养基和植物生长调节剂6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）,萘乙酸（NAA）,激动素（KT）和N-苯基-N'-1,2,3-噻二唑-5-脲（TDZ）对愈伤组织诱导、增殖与分化的影响。试验通过植物组织培养技术诱导外植体产生愈伤组织,并对愈伤组织进行增殖与分化。结果表明:最适宜愈伤组织诱导的外植体为茎段,基本培养基和适当的植物生长调节剂配比均能促进愈伤组织的诱导增殖与分化;诱导效果最好的基本培养基为木本植物培养基（WPM培养基）。在诱导中,6-BA的效果显著高于NAA和KT。羊角槭愈伤组织诱导最佳培养基为WPM+0.3 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-1 6-BA,诱导率达62.9%;愈伤组织增殖最佳培养基为WPM+1.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA,增殖倍数达2.4倍。TDZ对分化有重要作用,WPM+1.0 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1 NAA+1.5 mg·L-1 TDZ能促进愈伤组织产生最多不定芽芽点。     

小果型番茄花药愈伤组织诱导因素的研究

以5个小果型番茄F1代为材料,研究了不同基因型、低温预处理时间、蔗糖浓度、激素配比以及培养条件对花药愈伤组织诱导的影响.结果表明:5个基因型的花药愈伤诱导能力有明显的差异,以XF98-7×奇斯曼尼的出愈率最高,达到33.46%;4 ℃低温预处理2 d对愈伤组织的诱导有显著的促进作用;最适愈伤诱导培养基是MS + 0.5 mg·L-1 NAA +1 mg·L-1 KT+40 g·L-1蔗糖;在黑暗条件下培养有利于愈伤组织的诱导.     

紫花亚菊(Ajania purpurea)愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

以紫花亚菊(Ajania purpurea)组培苗茎段、叶片为外植体,在附加不同浓度植物生长调节剂6 BA和NAA的MS培养基上诱导培养,获得再生植株。对试验结果进行观察分析筛选出合适的配方: 愈伤组织诱导培养基为MS+10 mg·L-1 6 BA+01 mg·L-1 NAA,诱导率达956%;芽诱导培养基为: MS+10 mg·L-1 6 BA+02 mg·L-1 NAA,诱导率达82%;不定根最适诱导培养基为: 1/2 MS+015 mg·L-1 IBA,生根率达90%以上,再生植株移栽成活率达90%。