富贵竹炭疽病菌生物学特性及抑菌力研究

研究了温度、pH值、培养基对富贵竹炭疽病菌生长、产孢和孢子萌发率的影响,并测定了3种药剂对富贵竹炭.疽病菌的室内抑菌力.经测定该菌菌丝在10-35℃均能生长,其中28℃为最适;产生分生孢子的温度范围为15-35%,30～35℃产生较多:分生孢子萌发的温度范围为10-35℃.15-30℃萌发较好.在pH3.0~10.0的范围内该菌均能生长和产孢,菌丝生长最适pH值为5.0～7.0;产生分生孢子最适pH值为9.0-10.0.分生孢子萌发最适pH值为6.0-7.0.在供试的3种培养基中.PDA是最适合该菌生长的培养基,用燕麦片琼脂培养基培养菌丝生长速度减缓.但产孢量更高.药剂抑菌力测定试验显示,72%疽仙试剂对富贵竹的炭疽病菌抑菌力和药效的保持能力较好,推荐使用浓度为800~1000倍.     

杂交竹枯萎病原生物学特性的研究

分离纯化了广西杂交竹枯萎病原镰刀属尖孢镰刀菌,并研究了该病原菌的生物学特性。该尖孢镰刀菌对杂交竹有很强的致病力,在5~35℃、pH值2.5~10.0均能够生长。在20~27℃有利于分生孢子的萌发,其致死温度为50℃。分生孢子在pH值2.5~11.0、湿度90%~100%和水滴中均能萌发。菌丝生长及产孢的最适碳源为麦芽糖,最适氮源为酵母膏,光暗交替有利于菌丝的生长。该结果为进一步研究防治杂交竹枯萎病奠定了基础。     

鸡枞菌分离及生长条件研究

为解决鸡枞菌分离较难的问题,对采自秦岭地区的一株野生鸡枞菌,采用组织分离法对标本菌株进行分离纯化,通过平皿观察法和ITS序列分析确定其菌属,以菌丝生长速率为指标、探索其最优生长碳源、氮源、KH_2PO_4浓度、MgSO_4浓度、温度及酸碱度等培养条件。结果表明:经形态特征及ITS序列分析确定此菌株为鸡枞菌,该菌营养菌丝生长最适碳源是玉米粉;最适氮源是硝酸铵;鸡枞菌生长较快的KH_2PO_4浓度在0.10%~0.20%时,最适浓度是0.15%;MgSO_4浓度在0.025%~0.075%时,最适浓度是0.050%;生长温度范围在25~27℃时,最适温度是26℃;pH范围5.0~6.0,最适pH是5.0。     

枯草芽孢杆菌W-QX-1碱性蛋白酶的性质及其抗烟草花叶病毒活性初步研究

为发现新的天然源抗植物病毒活性物质,从枯草芽孢杆菌W-QX-1的发酵液中粗提了碱性蛋白酶,并初步测定了其抗TMV活性及其酶学性质。结果表明,W-QX-1碱性蛋白酶作用最适温度为50℃;在硼酸-硼砂缓冲液中的作用最适pH为7.8;在Tris-HCl缓冲液中的作用最适pH为8.0;在pH6~10范围内,45℃以下酶的性质稳定;对干酪素、明胶、牛血清白蛋白和精炼丝素均具有一定的降解能力,其中对干酪素的降解力最强。采用半叶法测定了其抗烟草花叶病毒TMV的活性,发现该酶对TMV的体外钝化作用明显,在酶液浓度为50 mg/L时,其钝化效果即可达到53.40%;而该酶对TMV的初侵染和体内复制增殖也具有一定的抑制能力。试验结果表明,在TMV侵染前24 h施用浓度为200 mg/L碱性蛋白酶液抑制其侵染力的效果达到50.35%,而在TMV侵染后抑制其复制增殖的作用并不明显。可见,该酶是一种性质稳定的广谱性蛋白水解酶,并具有一定的抗TMV活性。     

转绿色荧光蛋白基因的青枯雷尔氏菌生物学特性

【目的】采用电击法对青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）进行gfp/luxAB基因双标记,研究标记前后菌株的生长差异、以及侵染性和致病性的变化。【方法】通过电击法进行青枯雷尔氏菌的遗传转化,采用番茄组培苗对标记菌株的侵染条件和侵染过程进行初步研究。【结果】成功地采用gfp/luxAB基因标记了青枯雷尔氏菌。标记后的菌体细胞形状与亲本菌株形状相同,均为长椭圆形,近杆状,整个细胞呈现绿色荧光,PCR结果表明,从标记青枯雷尔氏菌菌株的基因组DNA中扩增出约3.0 kb的gfp基因片段。标记菌在对数生长期,荧光素酶活性快速增加,到稳定期,荧光素酶活性降低。在无选择压力条件下连续移植20次,仍然保持均匀而且强烈的绿色荧光,荧光稳定性保持在100%。gfp基因标记前后的菌株在培养的最适温度、最佳pH值及生长曲线上基本一致,在番茄组培苗内的侵染路线相同,致病力均达到90%以上。【结论】将gfp和luxAB融合基因成功转入青枯雷尔氏菌,融合基因在标记菌株中的表达高效稳定。导入的gfp基因对宿主的生长特性及致病性没有影响。     

北冬虫夏草C-58菌株的生物学特性

研究了不同C/N、培养基pH、光照和温度对北冬虫夏草C 58菌株菌丝体生长量的影响.结果表明:C 58菌株的菌丝生长最适C/N为 30∶1,最适温度为 22-24℃,最适pH为 6. 5,暗培养对菌丝生长有明显的促进作用.菌丝转色与菌代数有关.     

链格孢菌SC-018培养工艺优化及其致病性研究

链格孢菌是一种丝状真菌,可以通过其菌丝产生的多种致病性毒素侵染植物组织,能够有效的用于防除水田杂草野慈姑。通过单因素试验对链格孢菌SC-018培养基中的碳源及氮源进行了筛选,得到其最适碳源为D-半乳糖,最适氮源为硝酸钠。通过单因素试验确定该菌培养温度及培养基初始pH值的最适范围。对D-半乳糖、硝酸钠、培养温度及初始pH值4因素进行响应面Box-Behnken实验,对链格孢菌SC-018的培养基中D-半乳糖、硝酸钠的含量及培养条件进行了优化。结果表明,优化后的培养基为马铃薯浸出液1000mL,D-半乳糖21.50g·L-1,硝酸钠3.15g·L-1,初始pH值7.81;培养温度25.94℃;通过对链格孢菌SC-018侵染水田杂草野慈姑的最适接种浓度、最佳作用时间的筛选,可得链格孢菌SC-018的孢子浓度每毫升大于1.00×105个时,便会对野慈姑植株表现出明显的致病性,且孢子浓度每毫升为2.0×106个时,作用效果最佳;接种1～2叶期的野慈姑作用效果明显优于其他时期;通过考察环境因子对链格孢菌SC-018致病性的影响可知,该菌成功侵染野慈姑并致其发病的最佳温度为25～28℃,光照条件为10h光照/14h黑暗交替,结露时间大于48h则可引起90%以上的接种野慈姑死亡。     

茄子层出镰孢菌花腐病病原鉴定及其生物学特性研究

2016年7月在辽宁省北镇市的茄子大棚内发现了一种茄子花腐病,该病害发病初期表现为花瓣上产生水渍状病斑,病斑逐渐扩大,变褐,进而侵染茄子幼果。湿度较大时,发病的花瓣和幼果均产生白色霉层,果实干瘪。为了鉴定自茄子花腐病斑上首次分离出的疑似镰孢菌Fp01,利用柯赫氏法则验证了其致病性,并且对菌落的形态、色素颜色、菌落生长速率、分生孢子的形态进行观察,初步将病原菌鉴定为层出镰孢菌;采用真菌rDNA ITS区的通用引物ITS4和ITS5对DNA进行PCR扩增,PCR产物经过测序后,测序的结果在Gen Bank中进行BLAST分析,分子鉴定结果表明茄子花腐病的病原菌是层出镰孢菌(Fusarium proliferatum),其序列在Gen Bank中的登录号为KY237800。结合不同的培养基、温度、酸碱度、碳氮源等生理指标研究该病原菌的生物学特性。对茄子层出镰孢病菌花腐病病原菌的生物学特性的初步研究结果表明:该菌株生长最适培养基为PSA培养基,最适温度为25℃,最适pH值为7,最适碳源为麦芽糖,最适氮源为硫酸铵,菌落致死温度为55℃10min;分生孢子萌发最适温度为25℃,最适pH值为7,最适碳源为1%葡聚糖溶液,最适氮源为1%氯化铵溶液,致死温度为54℃10min。     

芝麻叶斑病病原菌生物学特性的研究

从芝麻叶斑病病叶及种子上分离得到一真菌,经鉴定为芝麻链格孢〔Alternaria sesami(Kawamura)Mohanty & Behera〕。通过接种试验,确认该菌为致病菌,并对其进行了生物学特性测定。研究结果表明;该菌菌丝生长及孢子萌发最适温度为25℃菌丝生长对 pH 的适应范围较广;在相对湿度近100%时,孢子萌发快,萌发率高。     

葱灰霉病病原菌的培养特性及其对油菜的致病性研究

通过对从陕西渭南大荔采集到的葱灰霉病菌核进行单菌核分离、培养、纯化,研究其病原菌在PDA培养基上的培养特性及对油菜的致病性。结果表明：引起葱灰霉病的病原菌为灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea Pers.exFr.),其菌丝体在4-28℃下均能生长,32℃以上不能生长,最适生长温度为24℃,该菌可生长的pH值范围为3-11,最适pH值5;在pH值为3的PDA液体培养基中生长,所得菌丝体的生物产量最高,该病原菌对油菜的致病性经室内离体叶和病圃田间接种鉴定均表明不侵染油菜,表明在本区该菌对油菜种植暂不构成威胁。     

香椿叶总黄酮提取工艺的研究

[目的]研究香椿叶中黄酮类化合物的提取技术,以期为香椿叶在食品和医药领域的进一步开发提供理论依据。[方法]试验以芦丁为标准品,采用分光光度法测定了香椿叶中的总黄酮含量。通过单因素试验分析了乙醇浓度、料液比、浸取温度与浸取时间4个主要因素对香椿叶总黄酮提取率的影响,并在单因素试验的基础上通过正交设计法优化了香椿叶总黄酮提取工艺条件。[结果]香椿叶总黄酮的最佳提取工艺条件为：浓度为70%乙醇作为提取溶剂,料液比1∶50,浸提温度70℃,浸提时间2.0h,此条件下香椿叶总黄酮的提取率可达5.84%。[结论]在最佳提取工艺条件下重复5次试验,总黄酮的平均得率为5.84%,故该方法稳定可靠。     

活性酵素对中华倒刺鲃肝胰脏淀粉酶活性的影响

研究了不同pH值下,在饲料中添加不同浓度的活性酵素饲养中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis Bleeker)29 d,测定中华倒刺鲃外部生长指标以及与鱼生长有密切相关的淀粉酶活性、活力指标。结果表明,活性酵素能够很好地促进中华倒刺鲃的生长,并对其肝胰脏淀粉酶的最适pH值有较大的影响。随着pH值的变化,淀粉酶活性也随之变化。正常情况下其最适pH为6.8~7.7,酶活力为10.97μg/min;在饲料中添加0.2%、0.4%活性酵素时,其最适pH值下,酶活力分别从10.97升为12.38和12.15μg/min;在饲料中添加0.6%活性酵素时,其最适pH值下,酶活力从10.97升为13.87μg/min。     

香椿组织培养与快速繁殖技术的研究

以香椿的当年生嫩枝茎段为外植体进行组织培养与快速繁殖试验。结果表明:香椿外植体在0.1%升汞中消毒8min条件下成活率最高,香椿的最佳诱导培养基为MS+BA 0.6 mg/L+NAA 0.2 mg/L,最佳增殖培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,最佳生根培养基为1/2MS+IAA 1.0 mg/L,最佳移栽混合基质为蛭石+珍珠岩+泥炭(1:1:1,v/v/v),移栽成活率平均为90%。     

绞股蓝内生真菌产胞外多糖发酵条件的优化

药用植物绞股蓝内生真菌JY25胞外多糖具有抗癌、抗氧化等多种活性作用,对其发酵条件进行优化,以期达到高产胞外多糖的效果。以胞外多糖产量为检验指标,采用单因素和正交试验对培养时间、接种量、碳源、氮源进行优化。单因素试验结果表明,绞股蓝内生真菌JY25产胞外多糖的最佳培养周期为8 d,最佳接种量为7%,最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为酵母粉;正交试验优化后发现,产胞外多糖的最佳发酵条件为培养时间8 d、接种量5%、葡萄糖添加量40 g/L、酵母粉添加量5 g/L,在此条件下胞外多糖的产量达到271.40 mg/L。     

中华补血草EMS突变体创制的初步研究

[目的]为深入研究中华补血草的有关泌盐基因及其泌盐机理奠定基础。[方法]分别用不同浓度(0、0.4%、0.5%、0.6%)的EMS溶液对中华补血草种子进行不同时间的处理,通过盆栽试验,研究获得中华补血草EMS突变体的最佳条件,并对突变体进行筛选。[结果]EMS诱变中华补血草种子的最佳条件为:0.5%EMS溶液处理种子10 h。此时中华补血草种子的萌发率为51%,符合作为突变体的半致死要求。[结论]利用该方法获得了37株表型突变体,说明采用EMS诱变生产中华补血草突变体是可行的。     

酶解法提取地鳖虫多糖工艺的优化

采用酶解法对地鳖虫多糖进行提取试验,优化提取工艺.通过单因素和正交试验方法,筛选提取条件,测定多糖含量,摸索地鳖虫多糖提取的最佳酶用量、提取时间和温度.结果表明:地鳖虫多糖提取的最佳酶用量为300μg?g‐1,提取温度50℃,提取时间3 h ,多糖含量为14.326%.     

黄蘑菇深层发酵条件研究

为科学开发黄蘑菇资源,采用单因素试验和正交试验研究黄蘑菇的深层发酵条件.结果表明,黄蘑菇发酵的适宜碳源为蔗糖,适宜氮源为牛肉浸膏;黄蘑菇深层发酵的最适培养基为4%蔗糖、0.1%牛肉浸膏、0.10%KH2PO4、0.10%MgSO4;适宜接种的种龄为4d,接种量(移入液体菌种的体积与接种后培养液体积的比)为15%,发酵时间为8d,在此条件下,黄蘑菇菌丝体生物量(每1mL发酵液中收集的菌丝体干重)达1.137mg/mL.     

皂角表面活性物质的提取及其对农药的增效作用研究

以皂角为原材料提取植物源表面活性剂TZR,并研究不同用量对药物的增效作用,结果表明,皂角粗提物的最佳提取溶剂为85％乙醇,产出率高达38％。植物源表面活性剂TZR的配方为皂角提取物浸膏20％＋75％乙醇76％＋甲醛2％＋乙二醇2％。田间试验表明,添加TZR3ml／L时,20％杀虫双水剂300倍液药后1－10d对桃蚜防效...     

温度·湿度·孵化介质对中华鳖孵化率的影响

[目的]探索中华鳖的适宜生态环境条件。[方法]通过正交试验,研究不同温度、相对湿度和孵化介质对中华鳖孵化率的影响。[结果]中华鳖胚胎发育的最优条件为:温度30℃,相对湿度为75%～85%,孵化介质粗砂、中砂、细砂的比例为1∶4∶1。此条件下,中华鳖的孵化率最高,为98.0%。根据其胚胎发育情况,将中华鳖的胚胎发育过程分为9期。[结论]该研究为中华鳖的人工孵化提供了理论基础与借鉴依据。     

Culture of Eriocheir sinensis Larvae in Ponds in Greenhouse

A total of 15 pools were selected from a greenhouse, and they were randomly and evenly divided into three groups. In each group, one stocking density of Eriocheir sinensis was arranged. The results showed that after 45-d culture, the crab number per kilogram reached about 300 with survival rate of about 20%; the initial stocking density had significantly effect on the body size of E. sinensis on sel , instead on the survival rate of E. sinensis larvae. Therefore, it is feasible to conduct the culture of E. sinensis larvae in a pool in greenhouse.