Ghrelin重组质粒的表达及其对大鼠生长性能和胃重的影响

旨在研究Ghrelin重组表达质粒对大鼠生长性能和胃重的影响。从断奶仔猪胃底黏膜中扩增得到了Ghrelin,将其克隆到pcDNA3表达载体中,获得了重组质粒pcDNA3-Ghrelin。选取12只断乳大鼠随机分成2组,每组6只。试验组每只大鼠腿肌注射100μg重组质粒pcDNA3-Ghrelin,对照组注射空质粒。分别在注射后7 d、14 d和29 d称重、记录采食量。试验结束后处死,分离并称量胃重,测定胃液pH值。结果显示:与对照组相比,注射重组质粒大鼠在注射后7 d和29 d时日增重显著增高;采食量无显著差异;料肉比显著降低;胃重和相对质量无显著差异;胃液pH值显著降低。以上结果表明,Ghrelin通过肌肉组织转染表达后对大鼠的生长发育具有重要的调节作用。     

Ghrelin对雌性大鼠促性腺激素分泌及其mRNA表达的影响

【目的】探明Ghrelin在中枢水平上对雌性大鼠促性腺激素分泌及其mRNA表达的影响。【方法】用1 nmol Ghrelin对不同发情周期(发情前期、发情期、发情后期、间情期)雌性大鼠及用不同剂量(0.3,1和3 nmol)Gh-relin对发情后期雌性大鼠分别进行侧脑室注射,15 min后断头采血,离心血清,同时采集脑垂体,采用酶免法测定血清促黄体素(LH)、促卵泡素(FSH)的质量浓度,用实时荧光定量PCR法检测LH mRNA、FSH mRNA在垂体中的表达。【结果】①在发情前期和间情期,Ghrelin可显著抑制雌性大鼠LH的分泌和LH mRNA的表达(P0.05);Ghre-lin对整个发情周期中FSH的分泌不产生影响,仅在发情期抑制FSH mRNA的表达(P0.05)。②在发情后期,0.3和1 nmol的Ghrelin对大鼠促性腺激素分泌和mRNA表达均无影响,但3 nmol的Ghrelin可显著抑制LH、FSH的分泌和LH mRNA的表达(P0.05)。【结论】Ghrelin在中枢水平上对FSH、LH的释放及FSH mRNA和LH mR-NA的表达均有抑制作用,但存在一定的剂量差异,并受发情周期的调节。     

鸭胸腺内Ghrelin免疫组织化学的定位分布及发育性变化

【目的】研究Ghrelin在鸭胸腺发育过程中的定位分布及变化规律,以期为进一步探讨Ghrelin对胸腺生理功能的影响提供形态学资料.【方法】选用不同发育阶段的天府肉鸭,胚胎期分7个组,即:14、16、18、20、22、24和26 d胚龄组;胚后期分12个组,即:新生雏、1、3、5、8、11、14、17、20、26、29和32周龄组.运用免疫组织化学技术及形态计量方法研究Ghrelin在鸭胸腺发育过程中的定位分布及变化规律.【结果和结论】Ghrelin免疫阳性细胞弥散分布于20 d胚龄至胚后32周龄的胸腺小叶皮质和髓质;阳性细胞呈圆形、卵圆形、星形或不规则形,主要为胸腺上皮细胞和巨噬细胞.阳性细胞数量在胚胎期无明显差异,在胚后胸腺继续发育期(新生雏~8周龄)和成熟期(11~17周龄)呈波浪状变化,在退化期(20~32周龄)呈下降趋势.说明在天府肉鸭胸腺个体发育中存在Ghrelin免疫阳性细胞,其数量表现出明显增龄变化特性,与胸腺退化密切相关.     

小鼠胸腺Ghrelin阳性细胞的定位分布

以小鼠胸腺组织和原代培养的胸腺上皮细胞为研究材料,采用免疫组织化学和免疫荧光组织化学技术对Ghrelin阳性细胞在小鼠胸腺中的定位分布进行了研究。结果显示,小鼠胸腺中存在大量的Ghrelin免疫反应阳性细胞,主要分布在髓质,而皮质中只有少量呈零星分布的阳性细胞;这些阳性细胞为胸腺上皮细胞和巨噬细胞,其中不同表型的胸腺上皮细胞着色程度存在差异,表明Ghrelin是胸腺微环境的组成部分。     

宽叶独行菜提取物对大鼠胃肠动力及SP和Ghrelin的影响

为研究宽叶独行菜(Lepidium latifolium L.)提取物对胃肠动力障碍大鼠的影响,并初步探讨其作用机制,选取24只SPF级SD大鼠,体重180～200 g,随机分成空白组、模型组和受试药物组,每组8只,雌雄各半,各组大鼠灌胃给予相应的药物,受试药物组每只大鼠灌胃2 mL宽叶独行菜提取物溶液(0.36 g/mL),空白组和模型组每只大鼠灌胃等体积去离子水。每天1次,连续灌胃6 d后禁食不禁水24 h,第7天正常给药1 h后,模型组和受试药物组大鼠腹腔注射硫酸阿托品2 mg/kg,空白组大鼠腹腔注射等体积的生理盐水。20 min后,所有大鼠均灌胃0.4 mL 2%蓝色葡聚糖-2000溶液,30 min后腹腔注射4 mL/kg的10%水合氯醛溶液麻醉大鼠,取材测定胃排空率和小肠推进率,ELISA法测定胃和十二指肠匀浆中P物质(SP)和饥饿素(Ghrelin)浓度。结果表明,与空白组比较,模型组大鼠胃排空率和小肠推进率极显著降低(P<0.01),胃、十二指肠中SP浓度和胃中Ghrelin浓度无明显变化(P>0.05),十二指肠中Ghrelin浓度极显著降低(P<...     

鸵鸟小肠中IFN-γ的随龄性表达

为探讨γ-干扰素(IFN-γ)与鸵鸟小肠发育及小肠黏膜免疫的关系,运用免疫组织化学SP法分别对3日龄、3周龄和11月龄鸵鸟小肠中IFN-γ的表达进行研究。结果表明,IFN-γ免疫阳性细胞主要分布于肠上皮间淋巴细胞,在绒毛和肠腺的上皮细胞及杯状细胞内也有阳性产物表达,黏膜固有层的IFN-γ阳性细胞集群分布或沿血管周围密集排布,肌层和肌间存在大量梭形的阳性细胞和串珠状的阳性纤维;IFN-γ阳性产物的相对表达量随着年龄的增长而增加,3日龄和3周龄表达差异不显著(P0.05),11月龄与3周龄鸵鸟表达差异显著(P0.05);不同肠段IFN-γ阳性产物的相对表达量均表现为自十二指肠至空肠的递减趋势,其中3日龄、3周龄鸵鸟各段小肠中差异不显著(P0.05),11月龄鸵鸟空肠中IFN-γ阳性产物的相对表达量较十二指肠显著降低(P0.05),回肠与空肠相比亦显著降低(P0.05)。表明IFN-γ通过多种途径参与鸵鸟小肠的发育和黏膜免疫。     

IFN—γ在大鼠胸段脊髓内的分布

为进一步探讨免疫－神经－内分泌三大系统之间的关系，用免疫组织化学SP法，对大鼠胸段脊髓内IFN－γ样免疫反应产物的分布进行了研究，结果表明，IFN－γ样免疫反应产物广泛分布于胸段脊髓各板层，其中背角Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ层，胸髓中间带外侧核，腹角Ⅺ层内可见珐较高密度的阳性胞体和树突，中间带和腹角内的阳性胞体的树突还伸负外侧索和腹索，有时可达脊髓边缘。     

IFN-γ在大鼠胸段脊髓内的分布

为进一步探讨免疫 -神经 -内分泌三大系统之间的关系 ,用免疫组织化学 SP法 ,对大鼠胸段脊髓内 IFN-γ样免疫反应产物的分布进行了研究。结果表明 ,IFN-γ样免疫反应产物广泛分布于胸段脊髓各板层。其中背角 、 、 层 ,胸髓中间带外侧核 ,腹角 层内可见到较高密度的阳性胞体和树突。中间带和腹角内的阳性胞体的树突还伸向外侧索和腹索 ,有时可达脊髓边缘     

神经肽Y在动情周期大鼠子宫中的分布

【目的】研究神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)免疫反应阳性物质在大鼠动情周期子宫中的分布情况及其变化规律。【方法】采用阴道涂片法鉴定发情周期,选取情期正常的20只雌性大鼠,均分为动情前期、动情期、动情后期和动情间期4组,处死各组大鼠,取子宫制作石蜡切片,经免疫组织化学SP法染色后,观察NPY在大鼠动情周期子宫中的分布及变化规律。【结果】在内膜层,大多数NPY免疫阳性产物位于细胞中,小部分位于点状和细丝状纤维中。在肌层,NPY免疫阳性产物主要位于NPY纤维中。NPY免疫阳性产物相对表达量的t检验结果表明,子宫内膜NPY在动情期和动情间期的表达较动情前期显著减少(P0.05),较动情后期极显著减少(P0.01);子宫肌层NPY在动情后期的表达较动情期显著回升(P0.05),在动情间期的表达较动情后期极显著减少(P0.01)。【结论】NPY在不同生理时期大鼠子宫中的表达分布存在一定规律性,可能与其生理调节功能有关。     

IFN-Y在大鼠海马内的免疫组化定位

应用免疫组织化学SP法结合葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍铵呈色法研究IFN-Y免疫反应性产物在大鼠海马内的分布。结果表明,IFN-Y免疫反应主要分布于海马CAl、CA2、CA3区,有少量分布于灰被,齿状回。这为海马具有免疫调节功能的观点提供了新的证据。结合文献,推断IFN-Y在海马-下丘脑-垂体-肾上腺的免疫调控中起主要作用。     

双歧杆菌与人体胃肠道微生态

根据国内外近期研究成果 ,介绍了胃肠道微生态与人体健康的关系 ;阐述了人体肠道中双歧杆菌的功能及其微生态调节机制 ;探讨了影响肠道菌群演替及双歧杆菌定植数量的因素 ;提出了保持肠道双歧杆菌正常数量与微生态平衡的建议     

不同精粗比颗粒饲料对肥育羔羊消化道容积及内容物分布的影响

从采食3种营养水平全饲粮颗粒料的27只育肥公绵羊羔中，选择期末活体重近组均值的12只（每处理组4只），禁食24h后屠宰，测定其消化道各部位容积和内容物重；选择12只（每处理组4只），饱饲后屠宰，测定其消化道内容物重。结果表明，试羊全消化道与发酵部位相对容积(%活体重)、大肠与发酵部位相对容积（%胃肠总容积）、消化道内容物量（g/kg活体重或g/kg空体重）随饲料中粗料比例上升显著增大（P<0.05）或有增大的趋势。试羊饱饲后胃肠道内容物量约为禁食24h的1.55倍。     

动态调节人工乳粘稠度和营养成分饲喂无菌大鼠效果研究

根据无菌大鼠乳鼠吮吸乳汁的规律,建立一套新的人工哺乳(AR)无菌乳鼠的方法.设计并配制6种适合不同日龄乳鼠的人工乳(LWF),并测定人工乳主要的营养成分含量和粘稠度等.无菌剖腹产术得到30只无菌乳鼠,采用吮吸法饲喂乳鼠至21日龄断乳,以30只代乳母鼠哺乳(MR)的乳鼠为对照,每日称量乳鼠体重,观察生长发育情况,计算离乳时乳鼠的生存率,检查8对100日龄以上AR无菌大鼠的生育能力.6种人工乳除LWF-6外,其余人工乳的蛋白质、脂肪、糖类、灰分、钙、钾、钠、氯、磷的含量、总能量和pH与大鼠乳相似,但这些人工乳的粘稠度不同.从LWF-1至LWF-5,蛋白质、脂肪、糖类的含量、能量和粘稠度不断增加.虽然AR乳鼠的体重增长不如MR乳鼠(2日龄时,P＜0.05;3日龄时,P＜0.01),但其生长发育正常.AR乳鼠的离乳率为73.3%,MR鼠为100%.8对AR无菌大鼠都有生育力.说明采用动态调节人工乳粘稠度和营养成分含量的方法可以用于饲喂无菌乳鼠,并且存活率较高.     

中华鳖胃肠道5-羟色胺和胃泌素内分泌细胞的免疫细胞化学研究

采用ABC免疫细胞化学法，对中华鳖（Trionyx sinensis）胃肠道5-羟色胺（5-HT）细胞和胃泌素（Gas）细胞的分布和形态进行了观测，并比较了冬眠期和活跃期的分布差异。结果显示，5-HT细胞在胃和肠道各段均有分布，在胃分布于胃腺，在肠则分布于黏膜卜皮。在胃的前部和中部，5-HT细胞位于胃腺各部，而在胃的后部，5-HT细胞则主要集中于胃腺的上部和胃小凹底部。在肠道中，由前向后5-HT细胞的分布呈递减趋势，且大部分细胞呈上窄下宽的锥体形、梨形等，顶端伸达肠腔，为开放型内分泌细胞，少数细胞为封闭型。前、中部胃腺中，Gas细胞的分布数量较多，且位于腺细胞之间，一般为开放型。后部胃腺中Gas细胞数量减少。胃黏膜上皮和肠道中未见Gas细胞的分布。与活跃期相比，冬眠期Gas细胞的分布情况变化不大，但5-HT细胞的分布数量显著减少。     

5-羟色胺在动情周期大鼠子宫中的分布

【目的】研究5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)在不同动情周期SD大鼠子宫中的分布情况和变化规律,探讨5-HT在雌性生殖系统中的作用。【方法】采用阴道涂片法鉴定动情周期,选取均为正常动情周期的20只雌性SD大鼠,将其分为动情前期、动情期、动情后期和动情间期4组,处死各组大鼠,取子宫制作石蜡切片,经免疫组织化学超敏SP法染色后,观察5-HT在不同动情周期大鼠子宫中的分布及变化规律。【结果】5-HT免疫阳性产物在子宫各层中均有不同程度的分布,其中主要存在于子宫内膜上皮细胞、子宫腺上皮细胞、血管内皮细胞、基质细胞以及子宫内膜固有层中的胚性结缔组织细胞中。子宫内膜固有层以椭圆形状和圆形的5-HT阳性细胞为主。此外,还有一些呈细丝状、串珠状的5-HT阳性神经纤维分布于子宫内膜固有层。环行肌层多为细丝状和串珠状且粗细不等的5-HT阳性神经纤维。纵行肌层5-HT阳性产物呈点状、细丝状、椭圆形状和串珠状分布。子宫内膜和肌层5-HT阳性产物在动情期和动情间期均呈强阳性表达,而在动情前期和动情后期均呈弱阳性表达。【结论】5-HT在不同生理时期大鼠子宫中的表达分布存在一定规律性,可能与其生理调节功能有关。     

铜鱼肌肉营养组成与评价

对采自长江宜昌江段铜鱼肌肉的营养组成进行了分析与评价,以期为其人工养殖的开展和综合利用提供基础数据。结果表明：铜鱼含肉率为68．13％;肌肉中水分含量为69．58％;肌肉干物质中粗蛋白、粗脂肪、灰分、钙、磷的含量分别为72．98％、17．10％、5．14％、0．64％、1．14％;氨基酸含量为62．27g／100g干物质;必需氨基酸与总氨基酸的比值为42．90％,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值为75．12％,鲜味氨基酸与总氨基酸的比值为44．05％;必需氨基酸指数为71．32。     

铜鱼肌肉营养组成与评价

对采自长江宜昌江段铜鱼肌肉的营养组成进行了分析与评价，以期为其人工养殖的开展和综合利用提供基础数据。结果表明：铜鱼含肉率为68．13％；肌肉中水分含量为69．58％；肌肉干物质中粗蛋白、粗脂肪、灰分、钙、磷的含量分别为72．98％、17．10％、5．14％、0．64％、1．14％；氨基酸含量为62．27g／100g干物质；必需氨基酸与总氨基酸的比值为42．90％，必需氨基酸与非必需氨基酸的比值为75．12％，鲜味氨基酸与总氨基酸的比值为44．05％；必需氨基酸指数为71．32。     

不同喂养条件和营养强化对大型Sou总脂及脂肪酸组成的影响

大型Sou的总脂和脂肪酸组成随食物的变化及营养强化的实施而发生显著变化。酵母组总脂为2．5％，明显高于海水小球藻组（1．65％）和有机肥组（1．5％）。经鱼油强化或海水小球藻二次培养后脂类含量明显升高。三组中酵母组的MUFA含量是高为55％。主要是C16：1ω9（23％），而PUFA最低（16．6％），其中EPA（2．7％）、DHA（0．8％）等ω3HUFA含量均很低；与酵母组相比，海水小球藻组和有机肥组的MUFA含量显著下降，PUFA含量显著升高，均为30％－33％左右，三组中海水小球藻组EPA含量最高（14％），其次是有机肥组（5．9％）和酵母组（2．7％）；有机肥组DHA含量最高，达11．7％，而酵母组和海水小球藻组DHA含量均低，仅为0．7％－0．8％。经鱼油强化后，酵母组的MUFA含量显著下降，PUFA显著升高，EPA由2．7％提高到10％左右，DHA由0．8％以7％；酵母组经海水小球藻二次培养后MUFA显著降低，PUFA相应升高，EPA由2．7％提高到9．7％，而DHA含量无变化。     

不同喂养条件和营养强化对大型Sou总脂及脂肪酸组成的影响

大型Sou的总脂和脂肪酸组成随食物的变化及营养强化的实施而发生显著变化。酵母组总脂为2．5％，明显高于海水小球藻组（1．65％）和有机肥组（1．5％）。经鱼油强化或海水小球藻二次培养后脂类含量明显升高。三组中酵母组的MUFA含量是高为55％。主要是C16：1ω9（23％），而PUFA最低（16．6％），其中EPA（2．7％）、DHA（0．8％）等ω3HUFA含量均很低；与酵母组相比，海水小球藻组和有机肥组的MUFA含量显著下降，PUFA含量显著升高，均为30％－33％左右，三组中海水小球藻组EPA含量最高（14％），其次是有机肥组（5．9％）和酵母组（2．7％）；有机肥组DHA含量最高，达11．7％，而酵母组和海水小球藻组DHA含量均低，仅为0．7％－0．8％。经鱼油强化后，酵母组的MUFA含量显著下降，PUFA显著升高，EPA由2．7％提高到10％左右，DHA由0．8％以7％；酵母组经海水小球藻二次培养后MUFA显著降低，PUFA相应升高，EPA由2．7％提高到9．7％，而DHA含量无变化。