金针菇多酚氧化酶动力学特性的研究

以金针菇为原料,研究了温度、pH以及底物浓度对多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性的影响。建立了金针菇酶促褐变反应的动力学方程,结果表明:金针菇PPO最适温度为50℃,最适pH5.0。采用Michaelis—Menten机理描述得金针菇PPO相应的动力学参数KM=0.075mol/L,Vmax=5.744U/min。同时,考察金针菇不同部位PPO活性,结果表明:菌柄上PPO活性>菌盖>菌柄中>菌柄下。     

桑叶多酚氧化酶活性研究

以新鲜桑叶为材料,考察不同温度、p H值、底物浓度、激活剂、抑制剂对桑叶PPO活性的影响。结果表明:桑叶PPO酶活性的最适温度为40℃,最适p H值为6.0,最适底物浓度为0.02mo L/L的焦性没食子酸;高温(70℃)短时间(2min)处理能明显抑制酶的活性;蔗糖、硫酸铝和硼酸溶液对桑叶PPO活性有一定激活作用,在0.1mo L/L时激活率分别达到75%、73%、88%;抗坏血酸、柠檬酸、亚硫酸钠对桑叶PPO活性有一定抑制作用,亚硫酸钠、柠檬酸在0.1mo L/L时抑制率分别达到80%、87%,抗坏血酸的浓度在0.6mo L/L时抑制率达到了86%。为深入研究桑叶PPO的酶学特性及应用研究奠定了基础。     

蜜柚多酚氧化酶的酶学特性与活性测定研究

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法在420nm处测定蜜柚多酚氧化酶(PPO)的活性,研究底物浓度、pH、温度及酶液浓度对PPO活性的影响,并建立了酶促褐变反应动力学方程。结果表明:蜜柚多酚氧化酶的酶促反应符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,以邻苯二酚为底物的最大反应速度为:Vmax=22.452U/min,Km=128.2mmol/L。蜜柚多酚氧化酶作用的最适pH6.4,最适温度为10℃。不同时间的蜜柚多酚氧化酶的平均活性呈逐渐下降的趋势。     

丝瓜多酚氧化酶的酶学特性初步研究

以邻苯二酚为底物,应用分光光度法对丝瓜多酚氧化酶（PPO）的酶学特性进行研究。结果表明,丝瓜多酚氧化酶的最适反应温度是20 ℃,最适pH值是6.8。反应体系在15～25 ℃、pH值6.4～7.2之间有较高的活性。丝瓜多酚氧化酶的热稳定性试验表明,在沸水中处理3 min,残留的酶活性仅为处理前的4.81 %,而在60 ℃处理3 min,残留的酶活性还有38.08 %。动力学研究结果表明,以邻苯二酚为底物时,米氏方程K_m=0.067 56 mol·L^-1,V_max=0.238 5 A₄₁₀·min^-1。单一的抑制剂VC和硫代硫酸钠对丝瓜多酚氧化酶活性有抑制作用,但有效抑制浓度不同,VC的有效抑制浓度最低,为50.0 mg·L^-1,其次是硫代硫酸钠,为100 mg·L^-1,柠檬酸的抑制效果最弱。     

雪莲果多酚氧化酶性质及其抑制方法研究

从雪莲果块根中提取多酚氧化酶(PPO),对其最适反应pH、最适反应温度、热稳定性进行研究,同时研究了VC、氯化钠、柠檬酸、蔗糖、柠檬汁和橘子汁对PPO活性的影响。结果表明:雪莲果PPO的最适反应pH为6.4,最适反应温度为30℃,在80、90、100℃分别处理300、240、220 s时完全失活。NaCl和蔗糖对雪莲果PPO活力没有影响,VC、柠檬酸、柠檬汁和橘子汁对其有很好的抑制作用,柠檬汁和橘子汁可作为天然抑制剂应用于雪莲果加工中。VC、柠檬酸对PPO的抑制作用高度显著,橘子汁、VC与柠檬酸的交互作用对PPO活性有显著影响。     

紫甘薯多酚氧化酶性质探讨

甘薯是世界上一种重要的粮食和能源作物,由于加工过程中其组织中的多酚氧化酶易催化多酚类物质氧化成黑色素,严重影响了其加工品质.以济薯18为材料,研究了pH值、温度、底物浓度等对其多酚氧化酶(PPO)活性的影响.结果表明:紫甘薯济薯18中PPO活性在360 am处最大,其最适反应时间为11 min,最适pH值6.5,最适温...     

丝瓜过氧化氢酶(Catalase,CAT)酶学特性的研究

为研究丝瓜过氧化氢酶(Catalase,CAT)酶学特性,本研究应用分光光度计开展温度、pH、酶体积、反应底物浓度等对酶反应的影响,为丝瓜酶促褐变的研究提供基础。结果表明,CAT最适反应体系:以H_2O_2为底物,最适底物浓度为0.33 mol/L H_2O_2,Km值为0.1818 mol/L,最适温度为40℃,最适pH值为7.8,最适酶液体积为0.1 ml。     

茉莉酸甲酯对鲜切马铃薯生理生化品质的影响

为研究不同浓度的茉莉酸甲酯在常温条件下对鲜切马铃薯生理生化品质的影响,选用了20μmol/L和50μmol/L 2种浓度的茉莉酸甲酯浸泡鲜切马铃薯。在贮藏期内,每天测定鲜切马铃薯的硬度、Vc含量、多酚含量、MDA含量以及PPO、POD活性六个指标。结果表明,与对照相比,20μmol/L茉莉酸甲酯处理有效保持了果实硬度,抑制了酚类物质消耗和多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)活性并且减少丙二醛(MDA)含量,可以延缓鲜切马铃薯的衰老,保持较好的贮藏品质。     

生姜玻璃化法超低温保存技术

以生姜的脱病毒试管苗在繁殖培养基上培养25d获得的丛生芽为试材,探讨生姜超低温玻璃化法保存的最优程序。结果表明:采用继代培养45d的丛生芽,切取2~3mm,于0.5mol/L蔗糖浓度的MS培养基内预培养2d,60%PVS2室温处理5min,100%PVS2 0℃下处理30min,迅速投入液氮,48h后,37~40℃水浴快速化冻2min,1.2mol/L蔗糖的MS培养液洗涤20min,在MS+0.5mg/L BA+0.1mg/L NAA+0.3mg/L GA3+30g/L蔗糖+7g/L琼脂的培养基上恢复培养的成活率最高,为57.7%。     

氯化钠处理对鲜切马铃薯褐变的影响研究

为探究NaCl溶液盐胁迫作用引起的抗氧化特性，明确其对鲜切果蔬褐变的影响，本研究以马铃薯为试验原料，通过单因素试验结合响应面法考察NaCl处理对鲜切马铃薯抗氧化特性的影响，并与未经NaCl处理的鲜切马铃薯片进行对比，以多酚氧化酶（PPO）为指标筛选出最佳处理条件组合。结果显示，当NaCl浓度0.28 mol/L，处理时间20min，处理温度10℃时，PPO的活性最低，为125.41 U/g。由此可见，适当浓度的NaCl处理可以显著降低鲜切马铃薯PPO的活性，在提高鲜切马铃薯防褐变方面有明显的效果。     

茄子微卫星标记(SSR)反应体系的优化研究

以茄子品种"哈农杂茄4号"DNA为试材,利用单因素试验方法,研究了茄子SSR技术中PCR体系的主要成分对SSR扩增结果的影响,并比较了聚丙烯酰胺凝胶和琼脂糖电泳检测扩增产物多态性的差异。结果表明:反应体系中,模板DNA的适宜浓度为20~40ng,适宜的引物浓度为0.3μmol/L,dNTP的适宜浓度为200μmol/L,Mg2+的最适浓度范围为2.0~2.5mmol/L,Taq聚合酶在20μL反应体系中宜加入1U。茄子SSR的最佳反应程序为94℃预变性5min;94℃变性1min,52~56℃复性1min,72℃延伸2min,35个循环;最后72℃延伸8min。PCR产物检测时6%的聚丙烯酰胺凝胶的分辨率显著高于1.8%的琼脂糖电泳。     

板栗采后次氯酸钠水浴处理时间对冷藏期间几种酶活性的影响

 以‘燕昌’板栗为试材,研究了采后NaOCl（500 mg·L-1）水浴处理时间（2 d、3 d、4 d和5 d）对其在0℃冷藏期间几种酶活性的影响。结果表明：水浴2 d处理的淀粉酶活性与对照差异不显著,而水浴4d和5 d处理可显著抑制淀粉酶活性。不同时间NaOCl水浴处理对PPO活性均有一定的抑制作用,但以水浴4 d和5 d处理效果较好。4 d和5 d水浴处理有利于保持POD的活性。水浴处理有效保持了板栗在贮藏期间的SOD活性,水浴3 d、4 d和5 d处理贮藏60 d时表现出活性高峰,且在贮藏期间与其他处理和对照差异显著。NaOCl水浴处理有利于保持CAT在板栗贮藏过程中活性, 4 d和5 d水浴处理的ADH活性总体高于其他处理和对照。总体来说,水浴4 d 和5 d处理对抑制板栗的淀粉酶、PPO活性和提高POD、CAT、SOD和ADH活性有一定效果,从而有利于延缓板栗在贮藏期间的衰老。     

超高压处理对鲜切甜瓜储藏特性的影响

以鲜切甜瓜为试材,在25℃下采用0.1、100、200、300、400、500、600MPa处理10min后测定甜瓜菌落数;将500MPa超高压处理后的鲜切甜瓜在4℃条件下贮藏9d,分析了储藏期间超高压处理对鲜切甜瓜多酚氧化酶(PPO)活性、过氧化物酶(POD)活性、维生素C含量和亮度L*的影响。结果表明:500MPaX加压处理10min可抑制鲜切甜瓜中微生物,产品在4℃条件下贮藏9d后,鲜切甜瓜PPO和POD活性、维生素C含量、亮度L*与对照组相比,差异显著(P0.05)。     

大蒜茎尖玻璃化法超低温保存技术研究

 用山东‘苍山大蒜’进行了茎尖玻璃化法超低温保存技术的研究。5～8 mm大蒜茎尖在MS +0.7 mol/L蔗糖的固体培养基上预培养7 d, 切取3.0～3.5 mm的茎尖, 在20℃下经60% PVS2 处理60 min,再于0℃下用PVS2 处理5～60 min后, 换适量新鲜PVS2 , 浸入液氮。保存2 d或1个月后取出, 在37℃水浴中解冻2 min, 用MS + 1.2 mol/L蔗糖液体培养基洗涤2次, 每次10 min, 经过恢复培养, 茎尖成活率最高可达到100%。     

1-MCP处理对鲜切生菜在贮藏期间理化性质的影响

为研究1-MCP对鲜切生菜在贮藏期间的生理生化及货架期的影响,以新鲜生菜(Lactuca sativa)为原料,用不同浓度的1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)(0.5、1.0、2.0μL/L)熏蒸纯净水清洗的切块生菜12h,处理后贮藏于4℃的条件下,然后对其在12天贮藏期内的失重率、相对电导率、叶绿素含量、PPO活性、POD活性进行测定。结果表明:2.0μL/L 1-MCP处理可以有效控制鲜切生菜贮藏期间重量的减少,抑制了PPO和POD的活性,使鲜切生菜的货架期延长5d。     

一氧化氮熏蒸处理对双孢蘑菇采后褐变及衰老的影响

以双孢蘑菇为试材,研究了在(10±0.5)℃条件下,不同浓度一氧化氮(NO) (30、60、90 μL/L)气体熏蒸处理对双孢蘑菇贮藏过程中感官品质、褐变度、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性的影响.结果表明:外源NO熏蒸处理显著抑制了PPO活性的升高(8.90％～33.13％),减轻贮藏期的褐变程度.提高了贮藏后期POD活性(12.28％～76.27％),延缓了双孢蘑菇的衰老,有效延长了货架期(2 d).其中,NO浓度为60 μL/L时效果最好.     

香蕉茎尖的玻璃化法超低温保存及其植株再生

 以香蕉(Musa spp. ) 为试材, 对其离体培养茎尖玻璃化法超低温保存影响因素进行研究。结果表明, 不定芽在MS + 3.0～5.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA的培养基上分化较好。香蕉茎尖超低温保存较佳体系是: 2.0～3.0 cm的茎尖在含0.4 mol/L蔗糖培养基上预培养2 d, 剥取带1～2个叶原基的茎尖(长1.0～1.5 mm) , 室温(25℃) 下装载液(MS + 2 mol/L甘油+ 0.4 mol/L蔗糖) 装载20～30 min, 然后用玻璃化溶液( PVS2 ) 于0℃下处理40 min, 换1次PVS2后迅速投入液氮。保存至少1 h后, 在40℃水浴中化冻90 s, 用1.2 mol/L蔗糖培养液洗涤2次, 每次10 min, 然后转入含0.3 mol /L蔗糖的MS培养基上,暗培养10～15 h后转移到含0.5 mg/L 62BA的MS培养基中, 暗培养1周后转移到正常光下, 3个香蕉品种(巴西蕉、广东香蕉2 号、广东粉蕉1 号) 的成活率分别为75.9%、40.0%和69.6% , 再生率分别为63.4%、35.0%和63.4%。再生植株生长和分化正常, 生根后可移栽成活。     

激素处理对桂花插条生根及PPO、POD活性的影响

研究了400 mg/L的NAA和IBA处理桂花插穗后,其生根进程中过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性的变化及生根效果.结果表明:400 mg/L的NAA对插穗的POD和PPO活性影响大于IBA处理,生根效果也优于IBA处理.     

栗属植物cpSSR标记技术的建立与体系优化

叶绿体微卫星标记是一种新的分子标记技术。用1对来源于拟南芥的cpSSR引物研究栗属资源,对栗属植物cpSSR反应体系的主要影响因子进行了优化筛选。结果表明,20μL反应体系各组分的最适浓度分别为:2.5mmol/LMg2+,0.5U Taq DNA聚合酶,0.25mmol/L dNTP,10mg/L的DNA模板,正向引物和反向引物都为0.1μmol/L,NTCP40最适退火温度为56℃。该体系已成功应用于栗属资源的遗传多样性研究中。     

桑叶总黄酮提取工艺优化及体外抗氧化研究

研究超声波处理时间、乙醇浓度、液料比、水浴温度、水浴时间5个因素对桑叶总黄酮提取率的影响。用响应面优化提取工艺,并研究桑叶总黄酮的抗氧化能力。结果表明:提取桑叶总黄酮最佳工艺,为乙醇浓度80.69%、水浴时间86.13min、水浴温度88.10℃时,提取率最高可达37.58mg/g。该优选提取工艺稳定可行,桑叶总黄酮具有较强的抗氧化活性,为桑叶的开发应用提供了依据,在清除羟自由基时更是达到了86.14%的清除率。