不同产地及不同药用部位延龄草中3种皂苷的含量测定

[目的]建立HPLC法测定不同产地及不同药用部位延龄草中延龄草皂苷B2、B1、B3的含量。[方法]以UItimateXB-C18(4.6mm×150 mm,3μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水(10%～100%梯度,0～50 min),检测波长为203 nm,流速为1.0 ml/min,柱温30℃。[结果]延龄草皂苷B2、B1、B3分别在0.1～2.0 mg/ml(R=0.999 6)、0.05～2.0 mg/ml(R=0.999 4)、0.05～3.5 mg/ml(R=0.998 9)范围内与峰面积的线性关系良好,平均加样回收率分别为97.8%(RSD=1.19%)、102.6%(RSD=1.62%)和101.5%(RSD=2.38%)。不同产地及不同药用部位中延龄草皂苷B2、B1和B3的含量差异较大。[结论]该测定方法简便、准确、重现性好,可有效地评价不同产地及不同药用部位延龄草药材的质量。     

利用皂苷元特征显色测定苜蓿皂苷含量的快速检测方法

本文以紫花苜蓿(Medicago sativaL.)为主要对象,建立了利用皂苷元特征显色测定苜蓿总皂苷含量的定量方法。以香草醛-高氯酸为显色剂,冰醋酸为溶剂,使皂苷元显色,用分光光度法在波长为560nm处测定苜蓿皂苷元的含量。以3-O-[β-D-glucopyranosyl]-28-O-[β-D-xylopyranosyl(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranoside]medicagenate酸水解后的苷元为标准品建立的回归曲线高度显著,线性和稳定性可靠。     

苜蓿皂苷研究概述

综合近年来国内外有关苜蓿皂苷的研究,从苜蓿皂苷特征、分离提取、生理功能、应用前景等方面对其进行了详细介绍,为今后苜蓿皂苷资源的深入研究和开发利用提供一定的参考和借鉴作用。     

云南省南苜蓿和天蓝苜蓿根瘤菌BOX-PCR分析

[目的]进行南苜蓿和天蓝苜蓿根瘤菌的BOX-PCR分析,为苜蓿高效固氮根瘤菌的筛选和接种剂的研究提供理论依据。[方法]采用boxAlR单引物对90株根瘤菌供试菌株及5株标准菌株进行BOX-PCR分析,并进行聚类分析。[结果]经过扩增得到了较多的条带,90株供试菌株共有31种BOX图谱类型。聚类分析结果显示,所有菌株在40％相似性水平上聚为一群;而在69％的相似性水平上,供试菌株可细分为7个遗传群,群1的菌株全部分离自云南省江川县路居镇天蓝苜蓿的根瘤,群3内的菌株都分离自德宏州盈江县的南苜蓿根瘤,并与标准菌株Enisfermeliloti USDA 1002^T聚在一群,在群4、5、6中,除SWF67340的宿主为南苜蓿外,其他菌株的宿主都为天蓝苜蓿,群7中,除SWF66320、SWF67343、SWF65116和SWF673704株菌的宿主为天蓝苜蓿外,其余菌株的宿主都为南苜蓿。[结论】供试菌株具有丰富的遗传多样性,BOX-PCR能够区分它们之间的差异;大多数菌株按宿主及采集地聚群,但也有交叉。     

四种悬钩子属植物不同部位总皂苷含量的比较

[目的]比较4种悬钩子属药用植物茅莓、蓬蘽、高粱泡和红腺悬钩子不同部位总皂苷含量。[方法]采用比色法测得4种药用植物不同部位总皂苷的含量。[结果]茅莓不同部位总皂苷平均含量分别为：根为8.71%,叶为1.65%,茎为1.58%;高粱泡不同部位总皂苷平均含量分别为：根为3.33%,叶为1.23%,茎为0.86%;蓬蘽不同部位总皂苷平均含量分别为：根为1.59%,叶为1.41%,茎为1.01%;红腺悬钩子不同部位总皂苷平均含量分别为：根为1.64%,叶为1.18%,茎为0.86%。[结论]不同植物其总皂苷含量依次为茅莓〉高粱泡〉蓬蘽〉红腺悬钩子;4种植物不同部位总皂苷含量依次为根〉叶〉茎。     

葛花中总皂苷的含量测定

目的 研究葛花总皂苷的含量测定方法.方法 利用乙醇提取,乙醚脱脂,正丁醇萃取的方法提取纯化总皂苷,香草醛-硫酸分光光度法测定总皂苷.结果 以人参皂苷Re为对照品作校正曲线,C=40.955A 0.782 5,r=0.997 2,在2.84～30.12μg/ml范围内线性关系良好,回收率为97.81%,测得葛花中总皂昔含量为(2.36±0.15)%(a=0.05).结论 测定方法简便、快速、灵敏、准确,可作为葛花中总皂苷的含量测定方法.     

不同品种百合中多糖和皂苷含量的测定

采用分光光度法,多糖采用苯酚-硫酸法,皂苷以浓硫酸为显色剂,测定不同品种百合中多糖和皂苷的含量.结果表明,薯蓣皂苷元浓度(x)在10.75～53.75 μg/mL范围内与吸光度(y)呈良好的线性关系,线性方程为y=20.893x -0.123 6,r=0.999 1;葡萄糖的线性方程为y=0.045 7x +0.221 9,r=0.999 2.该方法准确、快速,重复性好,适于百合中多糖和皂苷含量的测定.     

二醇型人参皂苷HPLC含量测定研究

本文利用HPLC法测定人参中二醇型人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd的含量.采用HPLC法,在检测波长为203nm、柱温40℃时进行检测,得到4种人参皂苷的标准曲线,进行方法学考察包括线性关系、稳定性试验、精密度试验、回收率试验、重复性试验,根据峰面积计算4种人参皂苷的浓度和含量.结果表明:得到4种人参皂苷的标准曲线及...     

太子参总皂苷含量测定方法研究

通过对太子参总皂苷提取溶剂、药材颗粒度、料液比、提取时间、显色系统5个单因素考察,初步建立供试液的制备方法及检测时的显色条件,并利用正交设计试验优化供试液的制备工艺。结果表明:太子参粉末(过药典7号筛)以乙醇为提取溶剂,料液比为0.1 g∶20 mL,超声提取120 min所得供试液,用5%香草醛-冰醋酸溶液和60%硫酸溶液于560 nm处进行显色测定时,总皂苷的含量测定结果最优。该测定方法经精密度、稳定性、重复性、加样回收率试验考察后RSD<3%,稳定可靠,可用于太子参皂苷含量的测定。     

HPLC法同时测定8种三七样品中5种皂苷成分的含量

[目的]建立同时测定8种不同三七样品中三七皂苷R₁、人参皂苷R_g1、R_e、R_b1、R_d这5种单体皂苷的HPLC方法。[方法]采用Welchrom C₁₈色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长203 nm。[结果]三七皂苷R₁、人参皂苷R_g1、R_e、R_b1、R_d线性关系良好(R²>0.999 1),方法重复性及回收率均符合要求。[结论]不同三七样品的皂苷含量具有差异显著性,此法可为三七药材质量优劣的判断提供一定的理论依据。     

假蒟不同部位5种次生代谢产物含量测定

[目的]建立假蒟不同部位总黄酮、总生物碱、总皂苷、总酚和总鞣质含量的测定方法。[方法]通过Na NO2-Al(NO3)3-Na OH法测定总黄酮含量;通过溴甲酚绿酸性染料比色法测定总生物碱含量;通过香草醛-冰醋酸酸性染料比色法测定总皂苷含量;通过FolinCiocalteu比色法测定总酚含量;通过磷钼钨酸-干酪素比色法测定总鞣质含量。[结果]芦丁平均加样回收率为98.11%,RSD=0.59%,假蒟叶、茎、根中总黄酮含量分别为1.18%、0.33%、0.25%;盐酸小檗碱平均加样回收率为99.62%,RSD=1.52%,假蒟叶、茎、根中总生物碱含量分别为0.19%、0.03%、0.01%;人参皂苷Re平均加样回收率为99.21%,RSD=1.06%,假蒟叶、茎、根中总皂苷含量分别为4.33%、1.71%、4.13%;没食子酸平均加样回收率为97.95%,RSD=0.88%,假蒟叶、茎、根中总酚含量分别为2.42%、1.08%、0.68%;没食子酸平均加样回收率为97.92%,RSD=3.14%,假蒟叶、茎、根中总鞣质含量分别为1.69%、1.21%、0.72%。[结论]这5种方法准确性强、精密度高、重复性好,可以用作假蒟中总黄酮、总生物碱、总皂苷、总酚和总鞣质含量的测定。     

不同品种紫花苜蓿中总皂苷含量的比较研究

采用比色法测定了北京地区栽培不同年限的45个紫花苜蓿品种茎、叶中总皂苷的含量。结果表明,各品种苜蓿叶片中的皂苷含量均高于茎,在不同品种之间存在明显差异。4年生植株中皂苷含量最高的品种“Vernal”为1.174%,最低的品种“Empress”为0.606%;3年生植株中最高的品种“WL442”为1.141%,最低的品种“农保”为0.788%;2年生植株中最高的品种“胜利者”为1.293%,最低的品种“全能”为0.722%。综合比较,含量最低品种与最高的品种相差2.13倍。栽培年限对紫花苜蓿皂苷含量具有一定影响。     

不同产地火炭母总黄酮含量测定

采用紫外-可见分光光度法测定不同产地火炭母中的总黄酮含量。结果表明,火炭母总黄酮的标准曲线方程为y=13.65x-0.0045,在0.008 64~0.06912 mg/m l浓度范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为100.3%,RSD为2.01%,样品中总黄酮含量为1.60%~3.74%。     

紫苏不同部位总黄酮含量测定

[目的]测定紫苏（Apocynum venetum L.）不同部位总黄酮含量。[方法]选取紫苏果实、花、根、茎和叶,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量。[结果]紫苏不同部位中总黄酮含量有很大的差异,其含量大小为：叶〉根〉果实〉花〉茎。[结论]该研究可为有效开发利用紫苏提供参考价值;紫苏根中总黄酮含量比花、果实中高是一大发现,可为紫苏根的利用提供理论基础。     

紫花苜蓿MsSQE1的克隆及对皂甙合成的功能分析

【目的】鲨烯环氧酶(squalene epoxidases,SQE)是苜蓿皂甙合成途径中的一种限速酶,与苜蓿皂甙的合成密切相关。通过对苜蓿鲨烯环氧酶(MsSQE1)基因的克隆及在苜蓿中过表达,探究鲨烯环氧酶对皂甙合成的作用机制。【方法】以模式植物蒺藜苜蓿鲨烯环氧酶基因序列设计引物,同源克隆苜蓿MsSQE1。对MsSQE1进行生物信息学分析;通过基因枪轰击技术,使MsSQE1在洋葱表皮瞬时表达,进行亚细胞定位。利用qRT-PCR方法分析该基因在根、茎、叶中的表达水平,以及在紫外辐射、ABA和GA3条件下的表达模式。在茉莉酸甲酯(MeJA)的诱导下,分析MsSQE1的转录水平,及对苜蓿皂甙含量的影响。利用根癌农杆菌转化体系,获得过表达MsSQE1的阳性转基因植株,并测定转基因植株的皂甙含量。【结果】克隆了MsSQE1的cDNA序列,开放阅读框1 578 bp,编码525个氨基酸,等电点为8.59。同源性比对分析,其氨基酸序列与蒺藜苜蓿中SQE1氨基酸序列同源性为98.6%,与拟南芥的同源性为80%。亚细胞定位显示,MsSQE1可能定位于细胞膜。组织特异性表达分析显示,MsSQE1在叶中的表...     

瞿麦中大黄素的含量测定

[目的]建立高效液相色谱法测定瞿麦中大黄素的含量。[方法]色谱条件为:色谱柱为Hypersil ODS2(4.6 mm×200 mm,5μm);流动相为无水甲醇-浓度0.1%磷酸溶液(76∶24,V/V);检测波长为254 nm;流速为1 ml/min;柱温为室温;进样量为20μl。[结果]大黄素在0.1～0.5μg/ml浓度范围内线性关系良好(R=0.999 8),平均回收率为98.70%,RSD为0.78%;测得6批样品中瞿麦大黄素的平均含量为3.44 mg/g。[结论]该方法快速、简单、准确,可用于瞿麦中大黄素的含量测定。     

Preliminary Study on the Mutagenic Effects of Space Flight on Alfalfa Seeds

[Objective] The study aimed to understand the mutagenic effects of space flight on alfalfa seeds.[Method] Seeds of three lines of alfalfa were carried into orbit by the satellite 'Shijian-8' for space fight,the indices including seed germination rate,plant height and growth rate,were measured after the seeds been retrieved.[Result] Remarkable mutagenic effects occurred on the flight seeds,which were mainly presented by abnormal cotyledon,extended variation range of plant height and growth rate.Nineteen plants with increased plant height were preliminarily screened from the T0 progenies,but whether the mutated trait could inherit should be confirmed in further study.Three flight lines of alfalfa are different in the percentages of abnormal cotyledon(10%-18%),variation range of plant height(increased 30%-150% compared to control),selected plant number with increased plant height(5-7 plants),suggesting that differences exits between the three lines in mutation efficiency.[Conclusion] Valuable mutated materials could be obtained by space flight and applied in modern agriculture.     

苜蓿种子空间诱变生物学效应研究初报

[目的]了解苜蓿种子空间诱变的生物学效应。[方法]3个品系的苜蓿种子搭载"实践八号"育种卫星飞行,返地后,对其种子出苗率、株高及生长速度等指标进行测试。[结果]卫星搭载对苜蓿种子有显著的诱变效应,主要表现在子叶畸变、株高变异范围和生长速度等方面。通过初步筛选,在搭载当代获得了高株变异,但该变异是否可遗传还需进一步研究确认。搭载的3个品系在子叶畸变率(10%~18%)、株高变异范围(比对照增加30%~150%)、入选变异高株数(5~7株)等方面不同,说明3个品系的搭载效率存在差异。[结论]通过空间诱变可获得有价值的变异材料,服务于现代农业。