三江白猪氟烷基因频率分析

本试验随机抽取216头30日龄左右的三江白猪,从外周血液中提取基因组DNA,经纯化后应用所设计的引物进行PCR扩增,酶切鉴定后分析三江白猪氟烷基因(RYR1)的基因与基因型频率.结果表明PCR反应条件优化后,扩增出659 bp的特异性基因片段,经Hha Ⅰ和HgiAⅠ两种内切酶消化后,发现三江白猪T/T(Haln/Hal)基因型频率为4.16%;C/C(HalN/HalN)型为88.43%;C/T(HalN/Haln)型为7.41%.HalN基因频率为92.13%,Haln基因频率为7.87%.此结果表明,三江白猪中氟烷敏感基因频率和基因型频率均较低,可以通过标记辅助选择方法很快予以剔除.     

不同猪种肉质相关基因Hal、RN和FTO的多态性研究

为了明确肉质相关基因氟烷基因(Hal)、酸肉基因(RN)和脂肪肥胖相关基因(FTO)在国内外不同猪种群体间的遗传变异特性,本研究以大约克、长白、杜洛克和金华猪等猪种群体为研究对象,应用PCR-RFLP技术分别检测了Hal、RN和FTO基因的多态性,并分析了FTO基因上2个多态位点g.276G＞T和c.594C＞G的遗传变异情况.结果表明:(1)在杜洛克猪中发现了Hal的基因型HalN Haln,其频率为0.166,但未发现基因型Haln Haln,其它猪种群体中仅检测到了基因型HalN HalN;(2)在已检测的所有猪种群体中只检测到RN基因的rn/rn基因型,未发现rn/RN和RN/RN基因型;(3)在FTO的g.276G＞T位点上,金华猪呈现单态,其它猪种群体均呈现多态.在FTO的c.594C＞G位点上,4个猪种群体均呈现多态,3个外来猪种群体均以CC基因型频率较高,而金华猪则以GG基因型频率较高.研究结果提示,由于Hal基因在养猪生产中的利弊双重性,因此在某些猪种群体中仍然存在较高频率的HalN Haln基因型.此外,结合FTO基因的生理功能和已有的研究结果,可在特定的猪群中将其作为影响猪肉质性状的候选基因.本研究发现FTO的基因型分布在我国优良地方猪种金华猪与国外3个种猪群间存在较大差异,为深入研究不同品种猪的肉质形成机理提供了基础数据.     

不同品种猪抑肌素基因启动区的RFLP分析

瘦肉率是猪育种中重要的目标性状之一 ,其大小与骨骼肌的量密切相关。猪抑肌素基因是与瘦肉率有关的基因之一 ,本研究以大白、长白、杜洛克、民猪、三江白猪和军牧Ⅰ号为研究对象 ,采用限制性酶切片段生长度多态性 (RFLP)分子标记法对抑肌素基因的启动区进行了酶切多态性分析。结果表明 :大白、长白、杜洛克以等位基因T为主 :三江白猪和军牧Ⅰ号全部是TT型 ;民猪 3种基因型均有且频率近乎相等     

杜洛克猪氟烷基因PCR-RFLP分析

应用PCR方法,体外扩增了47头杜洛克猪的氟烷基因片段(659 bp),采用HhaⅠ内切酶对扩增产物进行了酶切多态性分析。结果表明,在试验猪群中都呈现氟烷基因阳性,氟烷显性基因频率Hal N频率和隐性基因Haln频率分别为1和0,该群体已实现氟烷隐性基因淘汰,可大面积供种。     

三江白猪OB基因多态性及其与繁殖性能的相关性分析

试验利用PCR-RFLP法研究了三江白猪OB基因3 469位点的多态性及其与繁殖性能的相关性。结果表明:OB基因经HinfⅠ酶切后出现3个条带,表现为3种基因型(AA型、AB型和BB型)和2个等位基因(A和B),A等位基因为优势基因,基因频率为67.6%;头胎产活仔数BB型极显著高于AA型(P<0.01),BB型高于AB型,AB型高于AA型,但差异都不显著(P>0.05),BB基因型比AB型和AA型的头胎产活仔数分别高出1.65头、2.19头;不同的基因型对前5胎最高产仔数的影响差异不显著(P>0.05)。     

巴克夏猪氟烷基因PCR-RFLP分析

为选育抗应激巴克夏猪群新品系,采用PCR-RFLP技术检测了156头巴克夏猪氟烷基因的基因型分布情况。结果表明,在试验猪群中氟烷显性基因HalN频率和隐性基因Haln频率分别为1.00和0,该猪群已实现氟烷隐性基因的剔除。猪氟烷基因PCR-RFLP分析技术为优质猪的培育提供了理论依据。     

ActRⅡB基因单核苷酸多态性与小尾寒羊多脊椎变异的关联研究

本研究旨在检测ActRⅡB基因多态性与河北小尾寒羊脊椎数变异的关系。利用单核苷酸多态性(SNP)分析技术,设计特异性引物扩增小尾寒羊ActRⅡB基因片段,选取不同胸腰椎数表型个体进行PCR扩增产物测序。在扩增片段的85位点发现C/T的单核苷酸突变,该突变引起MspⅠ酶切位点消失。经限制性内切酶MspⅠ酶切,在群体中得到3种基因型,即AA、AB和BB型,其中BB基因型为纯合型突变。经过卡方检验,不同表型个体基因型频率差异显著(P0.05)。纯合突变型仅分布在表型为13胸椎6腰椎(T13L6)和T14L5个体中,在T14L5表型个体中频率最高。由结果推断该突变可能对于小尾寒羊第1腰椎变异为第14胸椎起到一定的作用,同时还发现了绵羊该基因内含子4上的一个点突变对小尾寒羊脊椎的发育有影响。     

互助猪合成母系氟烷基因的鉴别

通过对互助猪合成母系白系的36头猪采血样、DNA提取、PCR扩增、产物电泳及产物酶基因型进行判定.结果表明,采用PCR酶切技术能快速、准确地从DNA水平上鉴别氟烷基因型,并且鉴别互助猪母系的氟烷基因型基本上属于氟烷敏感基因隐型.     

三江白猪DNA的提取及PCR反应条件的优化

猪应激综合征(Porcine Stress Syndrome，PSS)由一对氟烷基因(Hahn、Haln)控制。试验采取组织DNA和血液DNA的提取，并对氟烷基因的PCR反应条件进行优化，为三江白猪的氟烷基因从分子角度上进行检测提供科学的理论依据。     

互助猪合成母系氟烷基因的鉴别

通过对互助猪合成母系白系的36头猪采血样，DNA提取，PCR扩增，产物电泳及产物酶基因型进行判定。结果表明，采用PCR酶切技术能快速，准确地从DNA水平上鉴别氟烷基因型，并且鉴别互助猪母系的氟烷基因型基本上属于氟烷敏感基因隐型。     

三个猪种生长激素基因的多态性分析

采用PCR-RFLPs技术,对大约克夏猪、上海白猪、巴马香猪生长激素基因-146～ 2 049区域共2 195 bp片段进行了扩增,并用Taq Ⅰ、HaeⅡ两种限制性内切酶分别进行酶切,检测其酶切突变位点的多态性.结果显示,Taq Ⅰ酶切时,大约克夏猪和上海白猪分别产生了AA(1 436 bp、759 bp)和AB(2 195 bp、1 436 bp、759 bp)两种基因型,而巴马香猪只有AA(1 436 bp、759 bp)一种基因型,大约克夏猪、上海白猪和巴马香猪的AA基因型频率依次为66.7%、83.3%和100%;HaeⅡ酶切时,3个品种的猪均未呈现酶切位点的多态性.结论:AA基因型的频率以巴马香猪为最高,它可能是小型猪的有利基因型;大约克夏猪、上海白猪、巴马香猪的生长激素基因都缺乏HaeⅡ酶切位点的多态性.     

金华猪促黑激素皮质素受体4基因多态性分析

应用PCR—RFLP方法对金华猪Ⅰ系(154头)、金华猪Ⅱ系(41头)和金华猪Ⅲ系(53头)的MC4R基因的1269∽1494bp区段进行扩增，并用TaqⅠ酶进行酶切，比较了MC4R酶切后基因型频率分布情况。结果表明，AA基因型频率在金华猪上较高达到0．9194，在Ⅱ系中最高达到0．9512，Ⅲ系次之达到0．9434，Ⅰ系最低达到0．9026，而金华猪的AB基因型和BB基因型频率都较低分别为0．0565和0．0242。     

军牧1号白猪、杜洛克猪和藏猪的氟烷基因和酸肉基因多态性分布

为了研究军牧1号白猪、杜洛克猪和藏猪氟烷基因和酸肉基因的多态性分布情况,试验采用PCR-RFLP方法对61头军牧1号白猪、51头杜洛克猪和51头藏猪的氟烷基因和酸肉基因多态性进行了检测。结果表明:军牧1号白猪的氟烷基因表现为单一的NN型;杜洛克猪的氟烷基因表现为多态性,等位基因N的频率为0.196 1,基因型分布符合哈代-温伯格平衡(χ2=3.033 9,P=0.081 5);藏猪的氟烷基因表现为单一的nn型。3个猪种的酸肉基因均表现为单一的rn/rn型。     

宁夏肉牛杂交改良群体肌肉生长抑制素基因多态性分析

试验旨在对宁夏六盘山区肉牛杂交改良群体肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因的多态性进行研究,为宁夏肉牛杂交改良选育提供理论基础。采用PCR-RFLP对该群体110头个体MSTN基因多态性进行检测。结果扩增出1346 bp的目的片段,其PCR产物被限制性内切酶DraⅠ消化后表现出多态性,共检测到2种基因型:AT和TT,其中AT基因型频率为0.0545,TT基因型频率为0.9455;T为优势等位基因,TT基因型为优势等位基因。因此,宁夏六盘山区的肉牛杂交改良群体MSTN基因具有多态性。     

圩猪及其二元杂交品种猪氟烷基因的基因频率分析

试验采用PCR-RFLP分子标记技术检测了圩猪(62头)、长白(64头)、杜洛克(61头)、英系大约克(60头)以及长圩零世代(65头)、一世代(121头)、二世代(243头)共676头猪的Hal基因基因型的分布情况.结果表明,在检测的各猪种中,Hal基因显性纯合子频率分别为:1.013,0.71,0.80,0.62,0.91,0.88,0.82; 杂合子频率分别为:0,0.29,0.20,0.37,0.09,0.12,0.18.由此说明,虽然氟烷敏感基因频率和基因型频率在长圩3个世代猪种中分布均较低,但Haln基因频率和HalnHaln"基因型频率在长圩3个世代中仍呈上升趋势.应进一步采用标记辅助选择方法降低Haln基因频率,直至完全剔除Haln基因.     

肉羊CYP19基因C242T位点多态性研究

试验旨在研究芳香化酶(CYP19)基因C242T位点多态性,对4个肉羊品种CYP19基因多态位点等位基因频率和基因型频率进行分析。试验选取巴西马林加的4个绵羊品种(杜泊羊、圣伊内斯羊、特克塞尔羊、白杜泊羊)187只,采集血样,采用碱性裂解法提取基因组DNA,并用特异性引物对CYP19基因片段进行扩增,PCR扩增产物经Dpn Ⅱ内切酶酶切后进行10%聚丙烯酰胺凝胶电泳,硝酸银染色。分型结果显示,CYP19基因C242T位点存在3种基因型:CC、CT、TT。用POPGENE软件对所得数据进行分析,P<0.05为差异显著性判断标准。4个肉羊品种CYP19基因C242T位点的基因型频率分别为:特克赛尔羊(CC,0.426;CT,0.511;TT,0.064)、杜泊羊(CC,0.073;CT,0.732;TT,0.439)、白杜泊羊(CC,0.021;CT,0.255;TT,0.723)和圣伊内斯羊(CC,0.115;CT,0.462;TT,0.423)。     

西南矮马肌肉生长抑制素基因启动子区PCR-RFLP 多态性检测

利用PCR-RFLP技术对贵州矮马、德保矮马和宁强矮马3个品种的45个个体的肌肉生长抑制素(myostatin, MSTN)基因的启动子区进行多态性分析。结果表明,大小为204 bp的扩增片段经限制性内切酶SspⅠ酶切后,不同基因型经过测序发现156T→C突变,产生AA和AB两种基因型,没有发现BB基因型。贵州矮马和宁强矮马中AB基因型频率大于AA基因型,德保矮马中AA基因型占优势,在3种矮马品种A等位基因频率均大于B等位基因。卡方检测结果发现,贵州和德保矮马在该酶切位点处于平衡状态(P＞0.05),而宁强矮马在该位点分布差异显著(P＜0.05)。     

南江黄羊LHβ基因部分序列SphⅠ酶切分析

利用牛、绵羊等动物LHβ亚基基因序列设计引物,首次扩增并采用Sph Ⅰ酶切分析南江黄羊247个个体该基因部分序列的多态性.结果表明,采用Sph Ⅰ酶切LHβ亚基基因出现三种基因型,其中BB基因型占绝对优势(57.49%),其次为AB型(38.87%),AA型出现的比例非常小(3.64%),即南江黄羊群体中B等位基因频率76.925%远远高于A(23.075%).     

氟烷基因在三江自猪猪群、迪卡配套系猪B系、亚洲野猪中的分布及其对肉质的影响

试验随机选取138头迪卡配套系猪B系、216头三江白猪和192头亚洲野猪提取基因组DNA进行聚合酶链式反应,得到RYR_1基因特异片段,经过双酶切鉴定,测得Hal~N基因频率分别为87．31%、92．13%、92．97%；Hal~n的基因频率分别为12．69%、7．87%、7．03%。然后对3种氟烷基因型的猪进行肉质鉴定。     

宁乡猪肉质性状相关基因SLC13A5多态性研究

为探究宁乡猪肉质性状相关基因SLC13A5多态性,利用PCR—RFLP技术检测SLC13A5基因。结果表明,第251 bp处有一个T/C的碱基突变,导致PCR—RFLP—Bsu36 I多态性。在宁乡猪中,CC基因型频率为0.830 8,C基因频率为0.876 9;在大白猪中,TT基因型频率为0.484 8,T基因频率为0.706 9。本研究为对宁乡猪肉质性状相关基因SLC13A5的进一步研究打下了基础。