草鱼和青鱼消化酶的分布特性

选择草鱼(C tenopharyngodon idellus)和青鱼(Mylopharyngodon piceus)作试验鱼,对它们消化道的酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、淀粉酶以及三酰基甘油脂酶沿消化道及肝脏和胰腺中的活性分布进行了比较研究。研究表明:这些酶在消化道中呈现不同的分布规律,在肝脏和胰腺中酶的活性高于在消化道中相应酶的活性;同种鱼不同消化酶的分布有所差别;两种鱼消化组织中的各种酶活性分布规律也有差别;青鱼和草鱼的主要消化酶在不同消化器官中的分布有较大差别。     

草鱼洄游适宜流速条件与适应阈值

洄游通道的连通性及其水文条件,是制约鱼类正常洄游和产卵繁殖的关键因素,现有的生态流量相关研究更多侧重于产卵场栖息地模拟,忽略了鱼类洄游水流条件的重要性。为了探究流速条件对鱼类洄游上溯的影响,选取体长(55±5)cm的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)为实验对象,通过搭建鱼类洄游仿真河道,营造不同的流速工况,观察不同情景方案下实验鱼群上溯洄游情况,并利用模糊逻辑法对鱼类上溯洄游率、平均上溯时间及上溯持续性等实验参数进行综合分析,探索草鱼洄游的适宜流速条件与适应阈值。结果显示,在流速0.20m/s以下时,草鱼基本无上溯行为;流速0.25～0.80m/s,70%样本在15min内完成上溯,但0.25～0.30m/s时,鱼群上溯缺乏明显的持续性;0.90～1.00m/s时,80%以上样本在5min快速完成上溯;流速超过1.1m/s时,上溯成功率明显降低。研究表明,实验草鱼洄游的适宜流速范围是0.40～1.00m/s,而刺激草鱼洄游的最小流速阈值是0.20m/s。相关结果可为河流生态水力学模拟和河流生态修复以及水利工程生态调度提供技术支撑。     

多次口灌呋喃唑酮在草鱼体内残留研究

报道了多次口灌呋喃唑酮(60 mg/kg,连续3 d,每天1次)在草鱼体内血浆、肌肉、肝脏和肾脏中的消除与残留研究。采用高效液相色谱法(HPLC)检测用药后不同时间各组织中药物浓度,M ILLEMNIUM32工作站处理原始数据,MCPKP药代动力学软件处理药时数据。结果表明:多次口灌呋喃唑酮在草鱼体内的药时数据符合一级速率吸收一室开放模型,其主要药动学参数为:AUC 2.3182μg.h/m l,Cmax 0.850μg/m l,Ka 0.5515 h-1,K 0.0936 h-1,T1/2ka1.2565h,T1/2k7.4308h,Tp 2.8732 h,药物在血浆、肌肉、肝脏、肾脏中消除时间分别为:72 h、15 d、20 d、20 d。     

The Effects of Chitosan Coating on Biogenic Amines Inhibition and Microbial Succession of Refrigerated Grass Carp (Ctenopharyngodon idellus) Fillets

Chitosan coating and plastic wrap coating were investigated for their effects on the quality of grass carp fillets stored at 4 ± 1ºC for a period of 20 days. The fillets were divided into groups of untreated (Control), wrapped with sterile preservative film (PE), and chitosan-treated (1, 2, and 2.5% w/v corresponding to CH1, CH2, and CH2.5, respectively). The final result demonstrated that chitosan coating has positive effects on the microbial inhibition of total volatile count (TVC), lactic acid bacteria (LAB), Enterobacteriaceae, Pseudomonas, H₂S-producing bacteria (including Shewanella putrefaciens), and Staphylococcus. With regard to the results of biogenic amines (BAs), putrescine (PUT) and histamine (HIS) were the major amines, and their concentration was significantly (p < 0.05) higher in Control and PE than in chitosan-coated fillets at the end of storage. The final concentration in Control, PE, CH1, CH2, and CH2.5 was 143.7, 160.1, 83.0, 59.4, and 44.2 mg/kg for PUT and 228.0, 57.1, 4.1 3.2, and 2.9 for HIS, respectively. Chitosan coating was found to inhibit the increase of total volatile base nitrogen (TVB-N), microbial population, and total BAs and prolong the shelf life of grass carp fillets. However, sterile plastic wrap coating had little positive effect on maintaining the quality of grass carp fillets during refrigerated storage.     

硫丹对草鱼鱼种的急性毒性效应

以草鱼为受试生物,研究了硫丹对鱼类的急性毒性效应影响。研究结果表明,水中硫丹对草鱼鱼种的24、48、72、96h半致死质量浓度分别为3.82、2.52、1.86、1.42μg/L;安全质量浓度为0.33μg/L;试验鱼的死亡率随硫丹暴露质量浓度的升高而增大,表现出明显的剂量-效应关系。根据化学物质对鱼类毒性分级标准,硫丹对草鱼为剧毒。     

微生态制剂对草鱼生产性能和肠道菌群的影响

在水温25～30℃下,将体质量为(110.23±0.43) g的草鱼饲养在3.0 m×2.0 m×1.2 m的加盖网箱中,分别投喂添加0%(对照组)、0.5%和2%的由芽孢杆菌、乳酸菌以及酵母菌复配且以麸皮为载体制成的微生态制剂(8.0×10⁹ cfu/g)的膨化饲料饲养60 d,探究微生态制剂对草鱼生产性能和肠结构、菌群及酶活性的影响。试验结果显示,饲料中添加2%微生态制剂显著提高草鱼质量增加率、特定生长率(P<0.05),显著降低饲料系数、脏体比(P<0.05);饲料中添加2%微生态制显著提高肠伸展率、中肠肌层厚度和绒毛高度(P<0.05),提高中肠淀粉酶和脂肪酶活性(P<0.05)。饲料中添加微生态制剂增加草鱼肠道菌群α多样性、丰富度;改变草鱼肠道微生物组成,门水平上,对照组的草鱼肠道微生物中梭杆菌门和厚壁菌门含量最高(63.56%、32.52%)。0.5%添加组的草鱼肠道微生物中梭杆菌门和厚壁菌门含量最高(61.82%、20.27%)。2%添加组的草鱼肠道微生物中厚壁菌门含量最高(64.20%)。属水平上,2%添加组草鱼肠道优势菌属...     

Preparation of Chitosan/Rosemary Extract Nanoparticles and their Application for Inhibiting Lipid Oxidation in Grass Carp (Ctenopharyngodon idellus) during Cold Storage

This study investigated a preparation of chitosan/rosemary extract nanoparticles (CS/RE-NPs) based on the principle of ionic gelation and their application for inhibiting grass carp lipid oxidation. CS/RE-NPs were found to have a rosemary extract (RE) encapsulation efficacy of 40.33%, average particle size of 199.90 nm, and zeta-potential of 35.60 mV. Structural analysis using UV–vis spectroscopy, Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), differential scanning calorimetry (DSC), and transmission electron microscopy (TEM) indicated that the RE s were well incorporated into the CS-NPs. Treatment of the CS/RE-NPs inhibited lipid oxidation of the grass carp during cold storage, and the peroxide value (PV), thiobarbituric acid-reactive substance (TBARS) value, and lipoxygenase (LOX) activity of the CS/RE-NP-treated samples were lower than those of RE and CS-NP-treated samples, respectively. CS/RE-NP-treated samples also slowed the growth of bacteria, enhanced the organoleptic quality, and prolonged the shelf life of grass carp. This study suggested that CS/RE-NPs can be used as an antioxidant delivery system to inhibit lipid oxidation and improve food quality.     

Physical-Chemical Properties of Collagens from Skin,Scale, and Bone of Grass Carp (Ctenopharyngodon idellus)

In order to study the similarities and differences of physical-chemical properties of collagens from different parts of the fish body, acid-soluble collagens and pepsin-soluble collagens were isolated from skin, scale, and bone of grass carp (Ctenopharyngodon idellus), with yields ranging from 0.7 to 25.5% on the basis of dry weight. The content of acid-soluble collagen in skin and scale was much higher than that in bone according to the data of extraction yield. Collagens from grass carp have similar amino acid composition, protein patterns, and sequences of primary structure. Thermal transition temperatures of collagens from different parts of grass carp body decreased in the order of bone > skin > scale. The pepsin-soluble collagens showed more resistance to collagenase, compared to acid-soluble collagens extracted from the same part of the grass carp body. All grass carp collagens did not induce a significant cytotoxic effect according to the results of in vitro cytotoxicity test.     

草鱼幼鱼对饲料中泛酸需要量的研究

研究了饲料中泛酸钙添加量对平均体重(4.80±0.32)g的草鱼幼鱼生长和部分生理指标的影响。在相同基础配方中分别添加泛酸钙0、8、15、30、60、120、240 mg/kg饲料,进行为期8周的养殖试验,每个处理3个重复。结果表明:饲料中添加泛酸钙能提高草鱼幼鱼的增重率和特定生长率,降低饲料系数,对成活率无显著影响(P>0.05)。对照组的总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量显著低于添加组(P<0.05),各添加组无显著差异(P>0.05)。鱼体灰分含量不受饲料中泛酸钙含量的影响,但能提高鱼体水分、蛋白和脂肪含量(P<0.05)。基于特定生长率折线法分析,草鱼幼鱼获得最佳生长时的饲料泛酸钙最低需求量为25 mg/kg。     

维生素K3对草鱼生长、体成分和凝血时间的影响

以酪蛋白和脱脂豆粕为蛋白源,糊精为糖源,玉米油和豆油为脂肪源的半纯化饲料为试验饲料,研究了维生素K3对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)成活、生长、体成分、血清中钙磷含量及凝血时间的影响。试验饲料中的维生素K3共设7个添加梯度,分别为0,0.5,1.0,2.0,5,10,20mg/kg,每一梯度设3个重复,每个重复60尾初始体重3.5g左右的草鱼,在(25.0±3.0)℃的流水系统中养殖11周。结果表明:维生素K3对草鱼增重率、特定生长率、饲料系数、成活率和体成分均没有显著性影响(P>0.05);维生素K3对血清中的钙磷浓度也无显著性影响;凝血时间显著性受饲料中维生素K3含量影响,饲料中缺乏维生素K3会延迟凝血时间。对饲料中维生素K3含量和草鱼凝血时间进行折线回归分析表明:草鱼幼鱼饲料中维生素K3适宜的含量为1.9mg/kg。     

草鱼含信号肽分泌蛋白的预测分析

采用组合的信号肽分析软件SignalP 3.0,TMHMM 2.0,big-PI,TargetP 1.1和Lipop 1.0对已公布的522个草鱼ORF编码蛋白的N端氨基酸序列进行信号肽分析,同时系统分析了信号肽的类型及结构。结果表明,522个草鱼氨基酸序列中分泌蛋白有61个,占其基因组编码蛋白的11.7%。编码这些蛋白的可读框(ORF)最小值为127 bp,最大值为5032 bp,平均910 bp,引导它们的信号肽长度介于15～32个氨基酸之间,平均为21个氨基酸。通过对草鱼分泌蛋白切割位点信号肽类型分析发现具Ⅰ型信号肽的分泌蛋白有17个,Ⅱ型的有4个。草鱼分泌蛋白中,42个具可预测功能,19个为未知功能蛋白。已知功能的分泌蛋白主要集中于细胞代谢,细胞调控及转运,细胞膜结构,细胞的免疫等领域。     

Effect of Freeze-Chilled Treatment on Flavor of Grass Carp (Ctenopharyngodon idellus) Fillets and Soups During Short-Term Storage

ABSTRACT

In order to evaluate the effect of chilled (T1), frozen (T2), and freeze-chilled (T3) treatment on the flavor of grass carp fillets and soups, adenosine triphosphate (ATP)-related compounds, umami-taste amino acids (UTAA), thiobarbituric acid (TBA), peroxide value (PV), and soup sensory score were analyzed. Results showed that the sum of ATP, ADP, and AMP contents in T2 fillets were significantly higher (p < 0.05) than others, but the sum of hypoxanthine riboside (HxR) and hypoxanthine (Hx) contents for T2 fillets and soups were significantly lower (p < 0.05) than others during storage. The T3 fillets and soups had lower inosine 5-monophosphate (IMP) contents than T1 after Day 2, but higher UTAA contents than T1 during storage. The T3 fillets had the highest TBA and PV values among the three groups during storage. According to the total aerobic counts, K value, and sensory score, all the fillets and soups kept good quality during storage. Therefore, freeze-chilled treatment not only can extend fish shelf life but also retain excellent fish flavor.     

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)特性和对鲤春病毒的敏感性

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)是中国科学院水生生物研究所在20世纪70年代开展草鱼出血病研究时建立的一株细胞系,迄今已传至300多代,在中国鱼类病毒学研究领域发挥了重要作用.本研究采用形态学观察、细胞生长曲线测定、细胞周期测定、细胞核型分析、细胞凋亡检测、电镜观察等方法,对GCO的生长特性及鲤春病毒血症病毒(SvCv)在该细胞中的增殖特性等进行了研究.结果显示,GCO细胞的最适生长温度为25℃,在M199和MEM等细胞培养液中均能较好地生长,培养液中最适的胎牛血清浓度为10％.测定了GCO细胞系对SVCV病毒的敏感性,发现与鲤(Cyprinus carpio)上皮瘤细胞系(EPC)、肥头鲤(Pimephales promelas)细胞系(FHM)、大鳞大麻哈鱼(Oncorhynchus tshawytscha)胚胎细胞系(CHSE-214)等世界动物卫生组织(OIE)推荐和各检测实验室常用的鱼类细胞系相比,GCO细胞系对SVCV表现出非常高的敏感性.生长盐线、电镜观察和凋亡实验显示,SVCV能引起GCO细胞系出现明显而稳定的细胞病变,引起GCO细胞系出现凋亡,并在细胞质中大量增殖.结果表明,GCO细胞系适用于SVCV病毒的分离、检测以及病毒致病性的有关研究.GCO细胞的适宜生长温度为15-28℃,这一特点将使它可以广泛地用于多种水生动物病毒的分离.     

草鱼鱼鳞酶溶性胶原蛋白的提取及基本特性

利用胃蛋白酶从草鱼鱼鳞中提取酶溶性胶原蛋白(PSC)。并用氨基酸自动分析仪、SDS-PAGE电泳、DSC、FT-IR和圆二色谱对草鱼鱼鳞胶原蛋白的氨基酸组成、相对分子量、变性温度和结构进行了研究。试验结果表明:所提草鱼鱼鳞蛋白为典型的I型胶原蛋白;且至少含有2条α链,α1和α2链;DSC分析表明其变性温度为37.1℃。     

患病草鱼肠道病原菌的分离鉴定及毒力研究

自环洞庭湖区精养鱼池患病草鱼肠道中分离获得4种病原菌,进行16S rRNA基因和gyrB基因序列测定和在线比对,并对草鱼进行回归感染。随后进行4种病原菌的药敏特征、溶血活性试验,并利用PCR方法检测了6种毒力因子的携带情况。试验结果表明,病原菌分别为温和气单胞菌、异常嗜糖气单胞菌、类志贺邻单胞菌和格氏乳球菌;4种病原菌回归感染草鱼,均能使草鱼患病致死,自死亡的草鱼体内均能分离得到相应感染的病原菌;4种病原菌对多种抗生素具有耐药性,且在脱纤维绵羊血血平板上检测到了温和气单胞菌、异常嗜糖气单胞菌AaB007的溶血活性;PCR结果表明,4种病原菌携带多种毒力因子。研究结果可为环洞庭湖区草鱼精养鱼池健康养殖及病害防治提供科学依据。     

草鱼脆化过程中肌肉品质变化

为了研究草鱼(Ctenopharyngodon idellus)脆化过程中肌肉品质变化对脆肉鲩(C.idellusC.et V)脆性形成规律的影响,在草鱼脆化过程中定期采样,比较研究了肌肉基本化学成分、质构特性、鱼肉蛋白质组成、肌肉氨基酸组成及营养价值评价等的变化规律。结果显示：脆肉鲩的水分、粗脂肪质量分数均显著低于普通草鱼(P0.05),粗蛋白、粗灰分质量分数比普通草鱼高;与普通草鱼相比,脆化后肌肉的肌原纤维蛋白、肌浆蛋白和基质蛋白质量分数分别增加了10.88%、15.41%和80.53%;脆肉鲩的硬度、咀嚼性、弹性和粘着性显著高于普通草鱼(P0.05);脆肉鲩肌肉的TAA、EAA、UAA最高分别为203.5gL-1、85.6 gL-1、79.1 gL-1,均显著高于普通草鱼(P0.05)。研究表明在草鱼脆化过程中,肌肉品质指标均有不同程度的变化,且这些变化是导致脆肉鲩脆性改变的重要因素。     

草鱼Wap65基因的克隆和鉴定

经Poly I∶C诱导的草鱼肝肾cDNA文库中筛选并克隆了一个Wap65(HM629798)。草鱼Wap65全长cDNA为1510 bp,包括5’非编码区55 bp,3’非翻译区327 bp,最大开放阅读框为1128bp。草鱼Wap65是一个376 aa的蛋白质,其中,第56～95 aa、102～153 aa、155～199 aa、200～243 aa、262～305 aa和307～352 aa为重复血红素结合域。进化树显示,草鱼Wap65与斑点叉尾鱼回Wap65-2进化关系最近。定量PCR研究草鱼Wap65的表达特征,Wap65在肝中有较强的本底表达,而在脾、肾、脑和肠等组织中该基因表达非常微弱。34℃热激2 h后,在脾脏中,Wap65的表达量有一定的上调;在肝脏中的该基因的相对表达量大量增加,而在其他受检组织中Wap65的表达无明显变化。因此,草鱼Wap65主要在肝脏中表达。以上结果表明,本研究克隆的草鱼Wap65可能是Wap65-2。     

汞离子暴露下草鱼肝胰脏过氧化氢酶活性动态变化

研究了暴露在不同汞离子浓度下的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝胰脏过氧化氢酶(CAT)的活性变化。实验中汞离子浓度设5组,分别为0 mg/L、0.1 mg/L、0.3 mg/L、0.5 mg/L和0.7 mg/L,每组分别于1 d、5 d、12 d和21 d取样,测定肝胰脏过氧化氢酶活性。结果显示,0.1 mg/L组暴露1d时CAT活性显著低于对照组(P<0.01),然后增加,12 d显著高于对照组(P<0.01);在21 d时下降至正常水平。0.3 mg/L下暴露不同时间均显著高于对照组(P<0.01或P<0.05)。0.5 mg/L组和0.7 mg/L组在暴露1 d和21 d时酶活性显著高于对照组(P<0.01);5 d和12 d时与对照组之间未有显著差异。     

草鱼头肾发生组织学与免疫组织化学观察

为研究草鱼头肾的组织发生发育,应用组织学技术,对1 ～ 103 dph(day post hatching)的草鱼头肾进行观察分析,描述了头肾的组织结构变化及免疫球蛋白M(IgM)阳性细胞及过碘酸雪夫氏(PAS)阳性细胞的发生和分布.结果显示,6 dph,出现头肾原基,原基中原肾管分化形成的肾小管之间出现散在的干细胞.7 dph至16 dph,造血干细胞逐渐分化成不同类型的细胞,免疫细胞数量逐渐增加;17 dph至103 dph,肾小管逐渐退化至完全消失,网状内皮系统支持下的淋巴造血组织构成头肾的主要部分.40 dph肾上腺细胞团开始出现.65 dph与成鱼头肾的组织结构接近,作为淋巴-肾上腺组织存在.PAS阳性细胞最早在7 dph出现;IgM阳性细胞最早出现于17 dph;之后,IgM阳性细胞及PAS阳性细胞逐渐增多,分布于整个头肾组织.研究表明,65 dph草鱼头肾在组织上发育基本成熟;头肾作为草鱼免疫器官的早期发育可以分为3个阶段:无参与免疫反应的细胞、只具有参与非特异性免疫反应的细胞以及参与非特异性免疫反应及特异性免疫反应的细胞组织结构逐步发育完善.     

硫丹对草鱼溶菌酶及过氧化氢酶活性的影响

在测得硫丹对草鱼96h半致死质量浓度的基础上,研究对其血清、肝脏、肌肉溶菌酶及过氧化氢酶活性的影响。结果表明,经硫丹浸浴后,各试验组草鱼血清、肝脏溶菌酶活性均不同程度升高,在48h和72h后达到显著和极显著水平(P<0.05,P<0.01);但浸浴120h后,各试验组溶菌酶活性与96h时相比不再升高或略有下降。硫丹浸浴24h后显著影响草鱼肝脏及肌肉过氧化氢酶活性,随着暴露时间的延长先诱导后缓慢降低,120h后过氧化氢酶活性显著低于对照组水平,预示硫丹可能对草鱼机体造成了氧化损伤。硫丹能对草鱼溶菌酶及过氧化氢酶活性产生影响,其变化可作为生物标志物,评价化学污染物对水生动物的生物学效应。